094渗透压摩尔浓度检查中的一个特殊现象及原因分析

1. 理解渗透压的概念及其影响因素；2. 掌握渗透压实验的基本操作方法；3. 分析渗透压对细胞形态的影响。

二、实验原理渗透压是指溶液中溶质分子通过半透膜向浓度较低溶液一侧移动的压力。

半透膜只允许溶剂（通常是水）或部分溶质（一般为小分子物质）透过，而不允许其他溶质（一般为大分子物质）透过。

渗透压的大小与溶液中溶质的浓度成正比。

本实验通过观察不同浓度溶液对红细胞形态的影响，验证渗透压的存在及其对细胞形态的影响。

三、实验材料与仪器1. 材料：新鲜红细胞、生理盐水、高渗盐水、低渗盐水；2. 仪器：显微镜、载玻片、盖玻片、滴管、吸管、试管等。

四、实验步骤1. 将新鲜红细胞用生理盐水洗涤3次，以去除红细胞表面的血浆蛋白；2. 将洗涤后的红细胞分为三组，分别加入生理盐水、高渗盐水、低渗盐水；3. 每组红细胞用显微镜观察其形态变化，记录结果；4. 对比不同浓度溶液下红细胞形态的变化，分析渗透压对细胞形态的影响。

五、实验结果与分析1. 生理盐水组：红细胞形态正常，呈双凹圆碟形；2. 高渗盐水组：红细胞体积缩小，边缘开始皱缩，细胞膜出现皱褶；3. 低渗盐水组：红细胞体积膨胀，细胞膜破裂，血红蛋白逸出。

实验结果表明，渗透压对红细胞形态有显著影响。

高渗盐水溶液中，红细胞因失水而皱缩；低渗盐水溶液中，红细胞因吸水而膨胀直至破裂。

这说明渗透压的存在，以及渗透压对细胞形态的影响。

1. 渗透压是溶液中溶质分子通过半透膜向浓度较低溶液一侧移动的压力；2. 渗透压对细胞形态有显著影响，高渗溶液使细胞皱缩，低渗溶液使细胞膨胀直至破裂；3. 本实验成功验证了渗透压的存在及其对细胞形态的影响。

七、实验讨论1. 实验过程中，操作要轻柔，以免破坏红细胞；2. 实验结果可能与实验条件、试剂质量等因素有关；3. 在实际应用中，渗透压对生物体的影响具有重要意义，如维持细胞内环境稳定、调节血液流动等。

八、实验总结本次实验通过观察不同浓度溶液对红细胞形态的影响，成功验证了渗透压的存在及其对细胞形态的影响。

2024年高级卫生专业技术资格考试微生物检验技术(094)(正高级)模拟试卷(答案在后面)一、多项选择题（本大题有30小题，每小题1分，共30分）1、以下哪些属于微生物检验技术的基本步骤？（）A. 样品采集与处理B. 微生物分离纯化C. 微生物鉴定D. 药物敏感试验E. 报告撰写2、在微生物分离纯化的过程中，以下哪种方法常用于分离革兰氏阳性菌？（）A. 霍夫曼平板法B. 沙氏平板法C. 肉汤培养法D. 培养基稀释法E. 稀释涂布平板法3、下列关于细菌培养基的选择与配制的说法正确的是：A. 所有细菌的培养都使用相同的培养基B. 选择培养基时需要考虑目标菌株的营养需求和生长条件C. 培养基配制完成后无需灭菌即可使用D. 鉴定肠道致病菌常用SS琼脂作为选择性培养基E. 血平板常用于初次分离培养细菌4、关于抗生素敏感性试验，以下叙述正确的是：A. 抗生素敏感性试验仅对革兰氏阳性菌有意义B. MIC（最小抑菌浓度）法可以定量测定细菌对抗生素的敏感度C. 纸片扩散法适用于所有临床分离菌株的药敏测试D. 抗生素敏感性试验的结果可以直接指导临床用药E. 在进行药敏试验前，必须确保菌悬液浓度符合标准5、下列关于细菌形态学的描述中，正确的是（）A. 革兰氏染色法可以将细菌分为革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌B. 细菌的形态学观察主要用于细菌的鉴定C. 细菌的形态学观察包括细菌的大小、形状、排列等D. 细菌的形态学观察可以用于判断细菌的致病性6、以下关于细菌生理学的描述中，错误的是（）A. 细菌的生长繁殖需要营养物质、水分、适宜的温度和pH值B. 细菌的新陈代谢包括同化作用和异化作用C. 细菌的同化作用包括自养和异养D. 细菌的异化作用包括光合作用和化能作用7、关于细菌L型的描述，下列哪些是正确的？A. 细菌L型是指在某些条件下细菌细胞壁缺陷而形成的形态B. L型细菌可以通过常规培养基生长C. 它们通常在高渗透压培养基上生长D. L型细菌对青霉素类抗生素敏感E. 由于细胞壁的缺失，L型细菌可以在不利环境下存活8、关于真菌的基本特征，以下哪几项说法是准确的？A. 真菌属于原核生物界B. 大多数真菌通过产生孢子的方式繁殖C. 酵母菌是一种单细胞形式的真菌D. 所有真菌都是多细胞有机体E. 真菌能够进行光合作用9、以下哪些微生物属于革兰氏阴性菌？A. 肠杆菌属（如大肠杆菌）B. 铜绿假单胞菌C. 链球菌属（如肺炎链球菌）D. 霍乱弧菌 10、以下哪些指标可以用来判断细菌的耐药性？A. 最小抑菌浓度（MIC）B. 敏感性试验结果C. 药物敏感度指数D. 耐药基因检测11、下列关于细菌的细胞壁成分及其功能的说法，哪几项是正确的？A. 肽聚糖是所有细菌细胞壁的主要成分。

渗透压摩尔浓度测定法-----------2017 1 简述生物膜，例如人体的细胞膜或毛细血管壁，一般具有半透膜的性质，溶剂通过半透膜由低浓度溶液向高浓度溶液扩散的现象称为渗透，阻止渗透所需施加的压力，即为渗透压。

在涉及溶质的扩散或通过生物膜的液体转运各种生物过程中，渗透压都起着及其重要的作用。

因此，在制备注射剂、液体型眼用制剂等药物制剂时，必须关注其渗透压。

凡处方中添加了渗透压调节剂的制剂，均应控制其渗透压摩尔浓度。

静脉输液、营养液、电解质或渗透利尿药（如甘露醇注射液）等制剂，应在药品说明书上标明其渗透压摩尔浓度，以便临床医生根据实际需要对所用制剂进行适当的处置。

正常人体血液的渗透压摩尔浓度范围为285～310mOsmol/kg，0.9%氯化钠溶液或5%葡糖糖溶液的渗透压摩尔浓度与人体血液相当口虽然人体本身具有一定的渗透压调节能力，但静脉输液、眼用溶液应尽可能与血液等渗。

除另有规定外，等渗的范围一般为260～320mOsmol/kg；冰点下降0.48～0.59℃或渗透压比0.9～1.1。

甘露醇注射液、氨基酸注射液等高渗注射剂及注射用无菌粉末渗透压摩尔浓度的限值，可根据生产工艺及临床使用情况做出相应的规定。

2 渗透压与渗透压摩尔浓度溶液的渗透压，依赖于溶液中粒子的数量，是溶液的依数性之一，通常以渗透压摩尔浓度（Osmolality)来表示，它反映的是溶液中各种溶质对溶液渗透压贡献的总和。

渗透压摩尔浓度的单位，通常以每千克溶剂中溶质的毫渗透压摩尔来表示，可按下列公式计算毫渗透压摩尔浓度(mQsmol/kg)：毫渗透压摩尔浓度(mOsmol/kg) = (每千克溶剂中溶解的溶质克数/分子量)×π×1000式中，n为一个溶质分子溶解并解离时形成的粒子数。

在理想溶液中，例如葡萄糖n=1，氯化钠或硫酸镁n=2，氯化钙n=3，枸橼酸钠n=4。

在生理范围及稀溶液中，其渗透压摩尔浓度与理想状态下的计算值偏差较小;随着溶液浓度的增加，与计算值比较，实际渗透压摩尔浓度下降。

渗透压摩尔浓度测定方法生物膜，例如人体的细胞膜或毛细血管壁，一般具有半透膜的性质，溶剂通过半透膜由低浓度溶液向高浓度溶液扩散的现象称为渗透，阻止渗透所需施加的压力，即为渗透压。

在涉及溶质的扩散或通过生物膜的液体转运各种生物过程中，渗透压都起着极其重要的作用。

因此，在制备注射剂、眼用液体制剂等药物制剂时，必须关注其渗透压。

处方中添加了渗透压调节剂的制剂，均应控制其渗透压摩尔浓度。

静脉输液、营养液、电解质或渗透利尿药（如甘露醇注射液）等制剂，应在药品说明书上标明其渗透压摩尔浓度，以便临床医生根据实际需要对所用制剂进行适当的处置（如稀释）。

正常人体血液的渗透压摩尔浓度范围为285～310mOsmol/kg ，0.9％氯化钠溶液或5％葡萄糖溶液的渗透压摩尔浓度与人体血液相当。

溶液的渗透压，依赖于溶液中溶质粒子的数量，是溶液的依数性之一，通常以渗透压摩尔浓度（Osmolality ）来表示，它反映的是溶液中各种溶质对溶液渗透压贡献的总和。

渗透压摩尔浓度的单位，通常以每千克溶剂中溶质的毫渗透压摩尔来表示，可按下列公式计算毫渗透压摩尔浓度（mOsmol/kg ）：1000n m Osm ol/kg ⨯⨯=分子量的克数每千克溶剂中溶解溶质）毫渗透压摩尔浓度（式中，n 为一个溶质分子溶解或解离时形成的粒子数。

在理想溶液中，例如葡萄糖n=1，氯化钠或硫酸镁n=2，氯化钙n=3，枸橼酸钠n=4。

在生理范围及稀溶液中，其渗透压摩尔浓度与理想状态下的计算值偏差较小；随着溶液浓度的增加，与计算值比较，实际渗透压摩尔浓度下降。

例如0.9％氯化钠注射液，按上式计算，毫渗透压摩尔浓度是2×1000×9/58.4=308mOsmol/kg ，而实际上在此浓度时氯化钠溶液的n 稍小于2，其实际测得值是286mOsmol/kg ；复杂混合物，如水解蛋白注射液的理论渗透压摩尔浓度不容易计算，因此通常采用实际测定值表示。

SMC30C渗透压摩尔浓度测定仪标准操作程序1 目的建立渗透压摩尔浓度测定仪标准操作程序可药品、食品等各个领域水溶液渗透压摩尔浓度测定及科学研究。

2 适用范围大容量注射剂。

3 责任者化验分析员。

4 依据【中国药典】2010年版二部附录ⅣA5 正文5．1渗透压摩尔浓度测定仪原理5.1.1稀溶液的“依数特性”从物理、化学的论述得知，稀溶液中溶剂的蒸汽压降低、冰点下降、沸点升高（溶质不挥发）和产生渗透压（有半透膜条件下）的数值，仅与一定量溶液中溶质的质点（分子、离子）数有关，而与溶质的本性无关，这些性质称其为稀溶液的“依数特性”。

从理论上看，欲测某种溶液和生物体液中所含的溶质的分子、离子总数，可以利用上述任意一个依数特性,但在实践中，由于直接测量渗透压比较困难，而冰点下降的测量比较方便、易行，且检测精度高，样品量少，对生物无变性作用，适合各种生物体液和食品的测定。

故目前国内、外推出的各种渗透压摩尔浓度测定仪，多数都是按冰点下降法设计的。

5.1.1.1冰点下降的测量法冰点是指以水为溶剂的溶液从液态变为固态的温度。

也是该溶液冰水共存平衡状态下的温度。

对水溶液进行连续冷却过程中，当温度已达到该溶液的冰点，甚至低于冰点而不发生结冰的温度，称之为过冷温度。

当溶液达到过冷温度时是极为不稳定的，如果给其引入冰晶或扰动都会引起结冰现象发生。

其过程可见如下结冰示意图：从结冰过程示意曲线可以看出，当供试溶液从室温冷却到设定的过冷温度时，带冰晶探针自动插入供试溶液，立刻引起公式溶液结晶，在溶液由液态变为固态过程中，分子能量由高能态向低能态转化，多余的分子能量便以热的形式释放出来，即为“晶化热”，而使供试溶液温度暂短回升，并呈冰水共存平衡状态，短时间内温度相对保持不变，为测温系统提供准确测温的平台，此时测得的温度，即为供试溶液冰点温度。

渗透压摩尔浓度测定仪即是采用冰点下降法的原理设计的。

5.1.1.2渗透压重量摩尔浓度（Osmo lallity）的计算。

渗透压摩尔浓度测定法1范围本文件规定了XXXX生物技术股份有限公司渗透压摩尔浓度测定法的要求。

本文件适用于XXXX生物技术股份有限公司理化质控部所有产品的渗透压摩尔浓度的测定。

2规范性引用文件本文件没有规范性引用文件。

3术语和定义3.1渗透压摩尔浓度osmolality溶液的渗透压，依赖于溶液中溶质粒子的数量，是溶液的依数性之一，通常以渗透压摩尔浓度来表示，它反映的是溶液中各种溶质对溶液渗透压贡献的总和。

渗透压摩尔浓度的单位，通常以每千克溶剂中的毫渗透压摩尔(mOsmol/kg)来表示。

3.2N.A. not applicable表示不适用。

4设备与材料渗透压摩尔浓度所用的仪器信息如表 1 所示，所用材料信息如表 2 所示。

表1 仪器信息表表2 材料信息表15测定方法23通常采用测量溶液的冰点下降来间接测定其渗透压摩尔浓度。

在理想的稀溶液中，冰点下降符合ΔT f =K f ·m 的关系，而渗透压符合 P 0=K 0·m 的关系，由于两式中的浓度等同，故可以用冰点下降法测定溶液的渗透压摩尔浓度。

ΔT f 为冰点下降，K f 为冰点下降常数（当水为溶剂时为1.86）, m 为重量摩尔浓度。

P o 为渗透压，K o 为渗透压常数，m 为溶液的重量摩尔浓度。

6 测定仪器采用冰点下降的原理设计的渗透压摩尔浓度测定仪通常由制冷系统、用来测定电流或电位差的热敏 探头和振荡器（或金属探针）组成。

测定时将探头浸入供试溶液中心，并降至仪器的冷却槽中。

启动制 冷系统，当供试溶液的温度降至凝固点以下时，仪器采用振荡器（或金属探针）诱导溶液结冰，自动记 录冰点下降的温度。

仪器显示的测定值可以是冰点下降的温度，也可以是渗透压摩尔浓度。

7 供试品溶液除另有规定外，供试品应结合临床用法，直接测定或按各品种项下规定的具体溶解或稀释方法制备 供试品溶液。

例如注射用无菌粉末，可采用质量标准中的规定溶剂溶解后测定。