基因工程流程图
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选修三流程图一、基因工程流程图1、转基因植物的培育流程:2、转基因动物的培育流程:1、基因工程的操作工具有:。
2、基因工程的操作流程是:(1);(2);(3);(4)。
其中核心步骤是:。
3、获取目的基因的方法有:;为了获得更多的目的基因,可以用技术使目的基因在生物体外大量扩增。
4、构建基因表达载体需要的工具酶有;构建基因表达载体的目的是:。
5、将目的基因导入植物细胞常用的方法是;导入动物细胞的常用的方法是。
一般选用受精卵作为目的基因的受体细胞,原因是。
6、基因表达载体的组成:。
其中启动子的作用是;标记基因的作用是。
7、检测目的基因是否成功表达的方法是:(1)分子水平的检测:用放射性同位素标记的片段做探针进行分子杂交,检测目的基因是否成功转录出mRNA或用技术检测目的基因是否翻译出相应的蛋白质。
(2)个体水平的检测:。
二、蛋白质工程流程图:1、工程是蛋白质工程的基础,从本质上看蛋白质工程是通过改造 , 从而达到改造 的目的。
三、植物组织培养流程图:1、植物组织培养的理论依据是: 。
2、植物细胞表现出全能性的条件: 。
3、植物组织培养的核心技术: 。
4、愈伤组织的结构特点是: 。
5、植物组织培养的培养基中除各种营养物质外,还需要添加 ,目的是 。
同时在培养过程中,除必要的温度、光照和氧气等外界条件外,操作过程中还必须保证 。
6、植物组织培养技术有哪些应用? (写出三种)7、若要制作人工种子,应进行到哪一阶段? 。
若用紫杉细胞生产治疗癌症的紫杉醇,应进行到哪一阶段? 。
四、植物体细胞杂交流程图: 1、如何去除细胞壁?2、诱导原生质体融合常用的方法有 。
植物细胞杂交的原理是: 。
3、植物原生质体融合完成的标志是 。
4、由杂种细胞培养成杂种植株的技术是: 。
5、植物体细胞杂交培育新品种的优点是 。
五、动物细胞培养流程图:1、依据的原理是: 。
2、常选用的材料: 原因是 。
3、在使用合成培养基进行胚胎干细胞培养时,通常需加入 等天然成分。
基因工程的基本过程基因工程主要包括几个过程:1、目的基因的制备;2、选择合适的载体,将目的基因与载体相连接生成重组DNA分子;3、将重组DNA片段导入受体;4、选择目的基因;5、目的基因的表达。
对于整个基因过程来讲,目的基因的获取是关键,它直接涉及到产物,而且还影响到产物的量。
很多在基因操作过程中,目的基因是很难获得的,所以通常采取先生成基因文库的方法,然后从基因文库中筛选。
如果目的基因的序列以及它的调控等信息很清楚,可以直接通过PCR或cDNA获取,这样就大大减少了选择目的基因的盲目性,可以将整个过程简化为以下步骤:图10-3-8 基因工程过程(1)目的基因的分离和制备目的基因是指准备导入受体细胞内的,以研究或应用为目的所需要的外源基因称目的基因。
获得目的基因的方法很多,但也是十分困难的一步。
目前获得目的基因有4条途径:1.从生物基因组群体中分离目的基因原核生物基因组较小,基因容易定位,用限制性内切酶将基因组切成若干段后,用带有标记的核酸探针,从中选出目的基因。
真核生物一般通过基因组文库的方法获得目的基因。
图10-3-1 限制性内切酶限制性内切酶(restrictive enzyme)是20世纪60年代末在细菌中发现的,能水解DNA分子骨架的磷酸二酯键,使一个完整的DNA分子切成若干段,每一种限制酶,都有自己特定的作用位点,而且切口或切下来的序列,往往是回文结构(palindromes)。
例如Eco RI把GAATTC在GA之间切开,形成粘性末端。
也有一些限制酶作用的结果产生不含粘性末端的平整末端,如HapI。
多在原核生物中存在,能识别4~6个特苷酸特定的碱基序列。
限制酶对细菌有保护作用,某些入侵的噬菌体可因DNA链被限制性酶切断而不能在细菌中繁殖,“限制”因此而得名。
限制酶不能切开细菌本身的DNA,这是因为细菌DNA的腺嘌呤和胞嘧啶甲基化(-CH3)而受到保护之故。
这样就可以用限制性内切酶把一个基因组DNA分成很多片段,对于原核生物比较小的基因组来说,可以直接用标记地探针来获取在通过特定的方法,对于比较大的基因组,可以先制作基因文库,然后钓取所需要的带有目的基因的片段。