人降钙素原(PCT)ELISA试剂盒说明书

2022年修订第一版（本试剂盒仅供体外研究使用，不用于临床诊断!）产品货号：E-EL-H1492c产品规格：96T/48T/24T/96T*5Elabscience 人降钙素原(PCT)酶联免疫吸附测定试剂盒使用说明书Human PCT(Procalcitonin) ELISA Kit使用前请仔细阅读说明书。

如果有任何问题，请通过以下方式联系我们：销售部电话技术部电话************电子邮箱（销售）********************电子邮箱（技术）**************************网址：具体保质期请见试剂盒外包装标签。

请在保质期内使用试剂盒。

联系时请提供产品批号(见试剂盒标签)，以便我们更高效地为您服务。

Copyright ©2021-2022 Elabscience Biotechnology Co.,Ltd. All Rights Reserved目录用途 (3)基本性能 (3)检测原理 (3)试剂盒组成及保存 (4)试验所需自备物品 (5)样品收集方法 (5)注意事项 (6)■ 试剂盒注意事项 (6)■ 样品注意事项 (6)样本稀释方案 (6)检测前准备工作 (7)操作步骤 (8)结果判断 (10)技术资源 (10)典型数据 (10)性能 (11)■ 精密度 (11)■ 回收率 (11)■ 线性 (11)声明 (12)Intended use (13)Character (13)Test principle (13)Kit components & Storage (14)Other supplies required (15)Sample collection (15)Note (16)■ Note for kit (16)■ Note for sample (16)Dilution Method (17)Reagent preparation (17)Assay procedure (18)Calculation of results (20)Technical resources (20)Typical data (20)Performance (21)■ Precision (21)■ Recovery (21)■ Linearity (21)Declaration (22)用途该试剂盒用于体外定量检测人 血清、血浆或其他相关生物液体中PCT浓度。

0 200 100测试主要用途用于体外定量检测人体血清或血浆中的PCT (procalcitonin)。

Elecsys BRAHMS PCT检测可辅助临床早期诊断相关的细菌感染。

Elecsys和cobas e 免疫分析仪的工作原理是电化学发光免疫分析“ECLIA”。

临床应用降钙素原（PCT）是由116个氨基酸组成的激素原，分子量大约为12.7kD。

PCT由神经内分泌细胞（包括甲状腺、肺和胰腺组织的C细胞）表达，经酶切分解为（未成熟）降钙素、羧基端肽和氨基端肽。

健康人血中仅含有少量的PCT1,2。

细菌感染后PCT会明显升高。

动物模型试验显示机体发生脓毒血症时，多组织均能表达PCT３。

脓毒血症患者体内的PCT 只含有114个氨基酸，缺少氨基末端的Ala-Pro4。

PCT水平升高见于细菌性脓毒血症，尤其是重症脓毒血症和感染性休克5,6,7,8,9,10。

PCT可作为脓毒血症的预后指标8,11,12,13，也是急性重症胰腺炎及其主要并发症的可靠指标14,15。

对于社区获得性呼吸道感染和空调诱导性肺炎患者，PCT可作为抗生素选择以及疗效判断的指标。

检测原理双抗体夹心法，总检测时间：18分钟●第一次孵育：30μl样本、生物素化的单克隆PCT抗体以及钌复合物标记a的单克隆PCT抗体一起孵育，形成抗原抗体夹心复合物。

●第二次孵育：添加包被链霉亲和素的磁珠微粒进行孵育，复合体与磁珠通过生物素和链霉素的作用结合。

●将反应液吸入测量池中，通过电磁作用将磁珠吸附在电极表面。

未与磁珠结合的物质通过ProCell被去除。

给电极加以一定的电压，使复合体化学发光，并通过光电倍增器测量发光强度。

●Elecsys软件自动通过定标曲线计算得到检测结果。

a)Tris(2,2’-bipyridyl)ruthenium(II)-complex (Ru(bpy){23}三联吡啶钌试剂－工作溶液M 包被链霉亲和素的磁珠微粒（透明瓶盖），每瓶 6.5ml；包被链霉亲和素的磁珠微粒，0.72mg/ml；防腐剂。

降钙素原SOP降钙素原( PCT )SOP（荧光免疫层析法）一、目的规范实验室人员的操作，以保证临床检验结果的准确性。

二、预期用途适用于体外定量检测人全血、血浆、血清中降钙素原(PCT )的浓度。

三、检验原理本试剂采用免疫荧光双抗体夹心法定量检测人全血、血浆、血清中的降钙素原(PCT );浓度。

将待测样本加入缓冲液中混匀，样本中的降钙素原抗原和缓冲液中的荧光标记降钙素原单克隆抗体结合形成反应复合物。

将混合样本滴加至测试卡的加样孔中，在层析作用下，反应复合物沿着确酸纤维膜向前移动，被固定在硝酸纤维膜检测线上包被的降钙素原单克隆抗体所铺获。

样本中的降钙素原越多，检测线上积聚的复合物越多，荧光抗体信号强度反应了被捕获的降钙素原数量。

经广州万乎生物技术股份有限公司生产的适用仪器，可检测出样本中降钙素原的浓度。

检测仪默认的降钙素原检测结果以ng/mL 为单位。

四、主要组成成分试剂由测试卡、缓冲液、ID芯片和使用说明书组成。

其中：1、测试卡由试纸条、塑料盒组成。

试纸条上的主要成分有：硝酸纤维素膜、吸水纸，PVC板及其他试纸条支持物；硝酸纤维素膜包被有降钙素原单克隆抗体和兔lgG.2、缓冲液含有荧光标记降钙素原单克隆抗体和荧光标记抗免IgG五、储存条件及有效期测试卡和缓冲液4℃~30℃保存，有效期24个月。

测试卡铝箔袋开封后，应在1小时内尽快使用。

生产日期、失效日期：见标签。

六、适用仪器广州万孚生物技术股份有限公司生产的免疫荧光检测仪( FS-112, FS-113)、干式荧光免疫分析仪( FS-205, FS-301).七、样本要求1、全血、血浆、血清样本均可用于测试。

2、全血的收集：采用抗凝管(建议使用EDTA-Na, EDIA-K,商品化真空抗凝管)采血，采血后提匀备用。

样本采集后应尽快进行测试，若采血后不能在2 个小时内测试的，应放在2℃---8℃保存，不得超过2天。

3、血清、血浆的收集：取血后应尽快以200opm的离心速度离心10分钟后分离血清、血浆，以免溶血。

降钙素原（PCT）测定试剂盒（荧光免疫层析法）
适用范围：用于体外定量测定人血清、血浆或全血中降钙素原(PCT)含量。

1.1包装规格
10人份/盒，25人份/盒，50人份/盒。

1.2主要组成成分
试剂盒由PCT荧光免疫层析检测卡、PCT样品稀释液（F）、PCT校准卡组成，各组分及数量见表1。

表1：试剂盒组成成分
2.1外观
外包装盒应完整，无破损；单包铝箔袋应完整，无破损，保持密封包装；液体组分应澄清透明，无沉淀、无渗漏。

2.2物理性状
2.2.1 试纸条的宽度：应不超于（
3.40±0.10）mm 。

2.2.2 液体移行速度：应不低于5mm/min。

2.3空白检出限
空白检出限浓度应不高于0.05ng/ml。

2.4线性范围
在[0.05，40]ng/ml范围内线性相关系数r≥0.990。

2.5精密度
2.5.1 重复性
变异系数CV不超于15%。

2.5.2 批间差
变异系数CV不超于20%。

2.6准确度
回收率应在85%～115%之间。

2.7分析特异性
测试按表2规定浓度范围的降钙素、白介素-6、C反应蛋白的样品，检测结果应不超过0.1ng/ml。

表2：交叉反应物及浓度列表
2.8效期稳定性试验
试剂盒2℃～30℃保存，铝箔袋密封状态下存放，取有效期满后两个月内的产品进行检测，结果应符合2.2、2.3、2.4、2.5.1、2.6项要求。

降钙素（PCT）定量检测标准操作规程降钙素原(PCT)定量测定(量子点免疫荧光层析法) 【检验原理】采用双抗夹心法原理,以两株高特异性、高敏感性PCT 单克隆抗体,其中PCT单克隆抗体固定在结合垫上,为量子点标记抗体,用于检测抗原:PCT单克隆抗体I包被在层析膜上形成检测线(T线),用于捕获抗体。

为监控试纸是否有效,设置控制线(C线),为包被有兔抗IgG抗体。

应用抗原抗体反应和荧光量子点免疫层析技术,检测人血中PCT的含量。

测试时,若样本中含有PCT,PCT首先与结合垫中标记有量子点的PCT单克隆抗体合,然后与硝酸纤维素膜T线处包被的PCT单克隆抗体I结合形成夹心”结构,T线处荧光显色强度与PCT含量呈正比,根据荧光强度定量测定PCT浓度。

原理:PCT与检测板上的捕获抗体和量子点标记抗体的结合产生颜色变化,显色的强度变化与PCT浓度有相关性,测量系统运用光电扫描标记物和P口结合区,获得光电信号,然后对光电信号的强弱进行测量处理,定量地分析出PC浓度。

【样本要求】1.用于人血清、血浆、静脉全血或末梢血样本,其他体波和样本可能得不到准确结果。

2.应在无菌情况下采集静脉血。

检测时,未经枸橼酸钠或肝素抗凝的血样须析出血清,经拘櫞酸钠或肝素抗凝的血样,可选用血浆、静脉全血或末梢血。

建议优先选用人血清检测,不建议使用EDTA作为抗凝剂3.临床血液样本采集后,在室温条件下,须在2小时内完成检测，血清样本于2-8℃保存,可保存2h;静脉全血样本和末梢血样本2-8℃保存,可保存2h;避免反复冻融样本、加热灭活样本; 溶血样本应弃用【拉验方法】在使用此试剂前必须仔细阅读试剂的说明书,需严格按照试剂说明书执行有关操作,否则无法保证可靠的结果。

1、准备检测前将检测卡、样本恢复至室温(15-30℃),并编号,建议将铝箔袋在恢复室温后再拆封,并在一小时内尽量使用,防止检测卡受潮2、质控确认质控二维码卡质控SD芯片与检测卡的批号相匹配,进行质控操作(详见仪器使用说明书)3、加样样本为血清、血浆,吸取100μ血清或血浆样本,垂直滴加至检测卡加样处,开始计时。

降钙素原( PCT )SOP（荧光免疫层析法）一、目的规范实验室人员的操作，以保证临床检验结果的准确性。

二、预期用途适用于体外定量检测人全血、血浆、血清中降钙素原(PCT )的浓度。

三、检验原理本试剂采用免疫荧光双抗体夹心法定量检测人全血、血浆、血清中的降钙素原(PCT );浓度。

将待测样本加入缓冲液中混匀，样本中的降钙素原抗原和缓冲液中的荧光标记降钙素原单克隆抗体结合形成反应复合物。

将混合样本滴加至测试卡的加样孔中，在层析作用下，反应复合物沿着确酸纤维膜向前移动，被固定在硝酸纤维膜检测线上包被的降钙素原单克隆抗体所铺获。

样本中的降钙素原越多，检测线上积聚的复合物越多，荧光抗体信号强度反应了被捕获的降钙素原数量。

经广州万乎生物技术股份有限公司生产的适用仪器，可检测出样本中降钙素原的浓度。

检测仪默认的降钙素原检测结果以ng/mL 为单位。

四、主要组成成分试剂由测试卡、缓冲液、ID芯片和使用说明书组成。

其中：1、测试卡由试纸条、塑料盒组成。

试纸条上的主要成分有：硝酸纤维素膜、吸水纸，PVC板及其他试纸条支持物；硝酸纤维素膜包被有降钙素原单克隆抗体和兔lgG.2、缓冲液含有荧光标记降钙素原单克隆抗体和荧光标记抗免IgG五、储存条件及有效期测试卡和缓冲液4℃~30℃保存，有效期24个月。

测试卡铝箔袋开封后，应在1小时内尽快使用。

生产日期、失效日期：见标签。

六、适用仪器广州万孚生物技术股份有限公司生产的免疫荧光检测仪( FS-112, FS-113)、干式荧光免疫分析仪( FS-205, FS-301).七、样本要求1、全血、血浆、血清样本均可用于测试。

2、全血的收集：采用抗凝管(建议使用EDTA-Na, EDIA-K,商品化真空抗凝管)采血，采血后提匀备用。

样本采集后应尽快进行测试，若采血后不能在2个小时内测试的，应放在2℃---8℃保存，不得超过2天。

3、血清、血浆的收集：取血后应尽快以200opm的离心速度离心10分钟后分离血清、血浆，以免溶血。

检验科免疫室
分析项目作业指导书降钙素原（PCT）第页，共页
版本：A/0
生效日期：2008-02-01 46
<2 ng/mL 88 18 106
≥2 ng/mL 7 99 106
共计95 117 212
根据以上数据，临床敏感性为85%，临床特异性为93%，阳性预期值为93%，阴性预期值为82%。

临床分类
Elecsy
BRAHMS PCT
SIRS 脓毒血症共计
<2 ng/mL 88 55 143
≥2 ng/mL 7 16 23
共计95 71 166
根据以上数据，临床敏感性为23%，临床特异性为93%，阳性预期值为70%，阴性预期值为62%。

9.分析性能
检测范围：0.02-100 ng/mL
精密度
根据NCCLS（全国临床实验室规范化操作委员会）制订的改良试验计划(EP5-A)，应用Elecsys试剂盒、人血液标本和质控液验证ElecsysTOTAL P1NP试剂盒检测重复性。

每日测6 次共10 日（n＝60）；在E170 分析仪上的组间精密度（n＝21），得结果如下：
10.干扰因素
检测结果不受黄疸（胆红素<428μmol/L或<25 mg/dl）, 溶血（血红蛋白<0.559mmol/L或< .900g/dl）, 脂血(脂肪乳剂< 1500mg/dl）和生物素<123nmol/L或<30ng/ml的影响。

回收率标准：回收率在初始值的±15％之内。

对于接受高剂量生物素治疗的患者（> 5mg/天），必须在末次生物素治疗8小时后采集样本。

浓度达150IU/ml的类风湿。

医疗器械产品技术要求编号：降钙素原（PCT）测定试剂盒（化学发光免疫分析法）2.性能指标2.1外观和性状试剂盒各组分齐全、内外包装应完整无破损，外观整洁，标识清晰，无液体渗漏。

2.2装量表 1 PCT试剂盒的装量2.3 空白限（LoB）试剂盒的空白限（LoB）≤0.01 ng/mL。

2.4 检出限（LoD）试剂盒的检出限（LoD）≤0.02 ng/mL。

2.5 准确度将已知浓度的降钙素原加入到样本中，其回收率应在100.0 %±10.0 %范围内。

2.6 线性测量浓度在0.03～100 ng/mL范围内的PCT样本，线性相关系数r≥0.990。

2.7 重复性测试（0.5±0.1）ng/mL和（10±1）ng/mL两个企业参考品，所得结果的变异系数（CV）应不大于8.0 %。

2.8 批间差用3个批号试剂盒，分别测试（0.5±0.1）ng/mL和（10±1）ng/mL两个企业参考品，3个批号试剂盒之间的批间变异系数（CV）应不大于10.0 %。

2.9 校准品外观和性状（1）校准品及复溶剂包装应完整无破损，外观整洁，标识清晰，无液体渗漏；（2）校准品C0及复溶剂应为清澈透明液体，无沉淀、无悬浮物、无絮状物；（3）校准品C1应为白色或者淡黄色冻干粉，无凹陷和未冻干痕迹；复溶后液体均匀、无肉眼可见颗粒、无沉淀。

2.10 校准品装量（1）校准品C0的装量不少于其标示体积；（2）复溶剂的装量应在其标示体积的±10.0 %范围内。

2.11赋值准确性用经高一级测量程序定值的工作校准品，对化学发光免疫分析系统定标后，再使用同一批次试剂盒测试校准品，测试值与校准品的标示值的偏差在±10.0 %范围内。

2.12 校准品均一性2.12.1 瓶内均一性校准品C0的瓶内均一性，以标准偏差（SD）为指标，满足SD≤0.02 ng/mL；校准品C1的瓶内均一性，以变异系数（CV）为指标，满足CV≤8.0 %。

1 目的依据标准化的降钙素原检测操作程序。

保证试验结果的准确性准确性，重复性，可比性。

2 适用范围实验室3 原理本试剂盒采用双抗体夹心法测定标本中人降钙素原(PCT)水平。

用纯化的人降钙素原(PCT)抗体包被反应板，加入待测标本孵育后，再加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的PCT抗体。

如果标本中含有PCT，则能与包被在反应板上的PCT抗体结合，并与HRP 标记的PCT抗体形成复合物，经洗涤后加入TMB底物，TMB在HRP酶的催化下产生蓝色，并在酸的作用下转化成黄色。

酶标仪在450nm波长下测定的吸光度（OD值）与标本中PCT含量呈线性关系。

通过绘制标准曲线可以计算出标本中PCT的含量。

4 标本采集要求a）受检者的准备检查对象生活饮食处于日常状态。

b）采集部位静脉采血c）抗凝剂惰性分离胶促凝d）要求①样本量1—2ml。

②样本应在采集后2小时内处理。

③溶血样本不能使用。

5 试剂：6 定标和质控6.1定标6.1.1每开启一批新的试剂，需在输入批数据进行校准，之后每隔28天需再进行一次校准，试剂盒中提供有两种校准品用来进行校准。

该操作能提供仪器特定的校准曲线，并能弥补试剂盒在有效期内分析信号可能出现的微小差异。

校准品，S1及S2，在同一次运行中必须重复测定两次（见用户手册）。

校准值必须在设定的RFV（“相对荧光度值”）范围内。

如果不在该范围内，使用S1和S2重新校准。

6. 2步骤6. 2.1.从冷藏处取出需要的试剂。

6.2.2.每份待测的样品、对照品或校准品都分别使用一条“PCT”SPR。

确保取出需要的SPR后重新仔细密封储物袋.6.2.3.仪器通过代码“PCT”来确认该项测试。

校准品需分别为“S1”和“S2”并且需要重复测定两次。

如果对照品需要检测，则将其分别标为“C1”和“C2”并各测定一次。

6.2.4.采用漩涡振荡混合器混合校准品和/或对照品。

6.2.5.该项测试，校准品、对照品和样品的上样量均为200µL。