Chapter I Introduction
1)什么是基因？基因有哪些主要特点？
基因是一段可以编码具有某种生物学功能物质的核苷酸序列。
①不同基因具有相同的物质基础.②基因是可以切割的。③基因是可以转移的。④多肽与基因之间存在
对应关系。⑤遗传密码是通用的。⑥基因可以通过复制把遗传信息传递给下一代。
2)翻译并解释下列名词
genetic engineering遗传工程
gene engineering基因工程：通过基因操作，将目的基因或DNA片段与合适的载体连接转入目标生物获得新的遗传性状的操作。
gene manipulation基因操作：对基因进行分离、分析、改造、检测、表达、重组和转移等操作的总称。
recombinant DNA technique重组DNA技术
gene cloning基因克隆：是指对基因进行分离和扩大繁殖等操作过程，其目的在于获得大量的基因拷贝，在技术上主要包括载体构建、大肠杆菌遗传转化、重组子筛选和扩大繁殖等环节。
molecular cloning分子克隆
3)什么是基因工程？简述基因工程的基本过程？p2 p4
4)简述基因工程研究的主要内容？p5
5)简述基因工程诞生理论基础p2和技术准备有哪些p3？
6)基因表达的产物中，氨基酸序列相同时，基因密码子是否一定相同？为什么？
否，密码子简并性
7)举例说明基因工程技术在医学、农业、工业等领域的应用。
医学:人胰岛素和疫苗
农业:抗虫BT农药
工业:工程酿酒酵母
Chapter ⅡThe tools of trade
1)什么是限制性核酸内切酶？简述其主要类型和特点？
是一种核酸水解酶，主要从细菌中分离得到。类型特点p11
2)II型核酸内切酶的基本特点有哪些p12-14？简述影响核酸内切酶活性的因素有哪些
p14？
3)解释限制酶的信号活性？抑制星号活性的方法有哪些？
4)什么是DNA连接酶p15？有哪几类p16？有何不同p16？
5)什么叫同尾酶、同裂酶p12？在基因工程中有何应用价值？
同裂酶：识别位点、切割位点均相同，来源不同。在载体构建方面往往可以取得巧妙的应用。应用较多的同裂酶比如Sma1和Xma1，它们均识别CCCGGG，但前者切后产生钝末
同尾酶：来源各异，识别序列各不相同，但切割后产生相同的粘性末端。由同尾酶(isocaudomer)产生的DNA片段，是能够通过其粘性末端之间的互补作用彼此连接起来的。
6)什么是DNA聚合酶？根据DNA聚合酶使用的模板不同，可将其分为哪两类？各有什么活
性？p17-18
聚合酶：在引物和模板的存在下，把脱氧核苷酸连续地加到双链DNA分子引物链的3‘-OH 末端，催化核苷酸的聚合作用。
①依赖于DNA的DNA聚合酶
②依赖于RNA的DNA聚合酶
7)Taq DNA聚合酶：是一种从水生嗜热菌中分离得到的一种耐热的dna聚合酶，具有5-3聚
合酶活性和3-5外切酶活性，在分子中主要用于PCR。
逆转录酶：RNA指导的DNA聚合酶，
8)Klenow片段的特性和用途有哪些？举例说明。p17
9)名词解释：S1核酸酶、核酸外切酶、磷酸化酶激酶、
甲基化酶
10)什么是末端脱氧核苷酸转移酶？举例说明其应用之一。P19加p
11)什么是碱性磷酸酶？其在基因工程领域中有哪些用途？p19减p
12)质粒单酶切点的基因连接如何降低本底和防止自我环化和提高连接效率？
目的基因片段与载体由相同的单一限制性核酸内切酶消化酶切后，两者的两端均具有相同的黏性末端，成为单酶切位点的黏性末端。
①为了防止载体的自我环化，通常用碱性磷酸酶去除载体的粘性末端的5‘p以抑制
DNA的自我环化。
②若构建表达载体选用双酶切切割目的基因和载体，可使目的基因与载体的连接发生
定向连接重组，以便定向克隆。
13)gap缺口和nick裂口的区别？
14)用寡核苷酸和衔接物DNA的短片段连接时为使基因内部的切点保护，常用何种办法解
决？
15)哪些酶可用于DNA片段的末端标记？
KlenowDNA聚合酶和T4或T7DNA聚合酶在对DNA片段进行末端补平反应或末端的置换反应时可引入标记的核苷酸。
Chapter ⅢHost and vectors
1)根据来源和性质不同，可将基因工程载体分为哪些种类？
质粒载体、噬菌体载体、黏粒载体、噬菌粒载体、病毒载体、人工染色体
2)什么是克隆质粒载体？什么是表达质粒载体？什么是穿梭质粒载体？
克隆载体是指专用于基因或DNA片段无性繁殖的质粒载体。
表达质粒载体是指专用于在宿主细胞中高水平表达外源蛋白质的质粒载体。
穿梭质粒载体是指一类由人工构建的具有两种不同复制起点和选择标记，因而可以在两种不同的宿主细胞中存活和复制的质粒载体。
3)基因工程中对载体的基本要求?
①具有复制子，能在宿主细胞内进行独立和稳定的自我复制。②具有合适的限制性内
切酶位点。③具有合适的选择标基因。④具有较多的拷贝数，易于宿主细胞的染色
体DNA分开，便于分离提纯。⑤具有较小的相对分子质量，易于操作。
4)什么是质粒？质粒分哪几种？有哪两种复制类型，质粒的分子生物学特性有哪些？
质粒是染色体外能自我复制的小型DNA分子。严紧型和松弛型。①不亲和性②转移性
5)质粒存在的三种形式是什么？
①共价闭合环状DNA②开环DNA③线性DNA
6)解释质粒的不亲和性和转移性？
不亲和性：两种不同质粒不能够在同一宿主细胞系中稳定地共存。
转移性：质粒从一个细胞转移到另一个细胞的特性。接合型质粒和非接合型质粒。
7)接合性质粒和非接合性质粒有何区别？
接合型质粒：相对分子量大，除了携带自我复制遗传信息外，还带有一套控制细菌和质粒接合转移的基因，严紧型质粒。
非接合型质粒：相对分子量小，不能携带接合转移基因。
8)理想的质粒载体应具备哪些条件？
①具有较小的相对分子质量和较高的拷贝数。②具有多个单一限制性内切酶酶切位
点。③具有两种以上标记基因。④具有安全性。
9)简述pBR322质粒载体的主要特征？P25
10)构建λ噬菌体载体的主要内容有哪些？为什么野生型的噬菌体DNA不宜作为基因工
程载体?该如何改造？p28
插入型和取代型基因组大而复杂
11)何为α-互补，在载体构建中有何作用？
α-互补：指lacZ基因上缺失近操纵基因区段的突变体与带有完整的近操纵基因区段的β-半乳糖苷酶（β-galactosidase，由1024个氨基酸组成）阴性的突变体之间实现互补。
α-互补是基于在两个不同的缺陷β-半乳糖苷酶阴性的突变体之间可实现的功能互补而建立的。将缺失编码第11-41位氨基酸的β-半乳糖苷酶基因称为lacZ△M15基因而将半乳糖苷酶基因(lacZ) 的调控序列和编码β-半乳糖苷酶N端140个氨基酸的序列称为lacZ’.这两个基因的产物单独存在时都无酶学活性,但混合在一起时却有酶学活性.所以在载体上加lacZ’/(MSC),并在受体菌中引入lacZ △M15即可实现α-互补.IPTG是lac操
纵子的诱导物,底物X-gal被β-半乳糖苷酶分解后可以产生蓝色.如果质粒载体中插入了外源DNA, lacZ’的产物则不能与lacZ△M15基因的产物实现α-互补，在 IPTG诱导下不能产生有活性的β-半乳糖苷酶，菌落便不可能呈现蓝色。白色菌落便是含有插入了外源DNA的重组质粒。因此可利用菌落颜色变化来筛选插入外源DNA的重组质粒。这种方法是根据组织化学的原理来筛选重组体。主要是在λ载体的非必要区插入一个带有大肠杆菌β-半乳糖苷酶的基因片段，携带有lac基因片段的λ载体转入lacˉ的宿主菌后，在含有5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷（X-gal）平板上形成白色的噬菌斑，非重组的噬菌体则为蓝色噬菌斑。
12)将外源性DNA克隆到-半乳糖苷酶失活的插入型入噬菌体上后，如何筛选重组噬菌
体？
13)简述单链DNA噬菌体M13在基因工程中的主要用途？
14)什么是Cos质粒？简述其基本特点。
15)什么是酵母人工染色体、细菌人工染色体、哺乳动物人工染色体？
从哺乳动物中分离出复制起始区、端粒及着丝粒构建载体可以克隆大于1000Kb的DNA 16)什么叫插入失活，举例说明之。
名称来源特点用途
M13噬菌体载体M13mp1是构建的第
一个M13噬菌体载
体，随后构建的一系列
M13载体都是在此基
础上经改建派生出来
的。可用来克隆具有不
同限制末端的外源
DNA片段，而且克隆
片段插入方向是固
定的。
1.可以制备单链
DNA进行DNA序列
分析。2.可以制备只
与外源DNA的任意
一条链互补的DNA
探针。3.可以在寡核
苷酸介导的基因定
点突变来制备含有
目的基因的单链
DNA模板。
Chapter ⅣThe technical principle of genetic manipulation
1)简述提取基因组DNA的主要步骤和原理？
2)分离纯化质粒的方法有哪几种？简述CsCl密度梯度分离法、碱变性法的原理，如何选择
合适的分离方法？
3)简述提取RNA常用的两种方法和相关原理？
4)列举三种常用的核酸检测方法和基本原理？
5)简述琼脂糖-EB电泳法分离纯化DNA的基本原理？
6)名词解释：分子杂交、核酸杂交探针
7)切口平移标记探针的主要步骤有哪些？
8)简述Southern印迹杂交的基本原理及其主要步骤？
9)简述Northern印迹杂交的基本原理及其应用？
10)简述Western印迹的基本原理及其主要步骤？
11)简述Sanger碱基顺序分析法的基本原理？
12)简述酵母双杂交技术的基本原理和在基因工程中的应用？
13)简述酵母单杂交技术的基本原理和操作过程？
14)什么是噬菌体展示技术？简述其基本操作过程？
15)什么是DNA迁移率变动试验？简述其基本原理？
16)什么是DNase I足迹实验？简述其基本原理？
Chapter Ⅴ Polymerase Chain Reaction Technology and Application
1)什么是PCR技术？简述其基本原理？
2)简述PCR 反应体系的主要成分与反应流程？
3)简述PCR引物设计的目的和一般原则？
4)简述提高PCR反应特异性的因素和措施？
5)什么是巢式PCR、降落PCR、反转录PCR？它们分别有哪些应用？
6)简述荧光定量PCR的基本原理？为什么在定量PCR中要引入Ct值的概念？
Chapter Ⅵ RNAi and miRNA regulation
1)什么是RNA干扰技术？
2)简述利用RNA干扰技术沉默基因的基本原理和一般操作流程？
3)什么是siRNA？如何选择siRNA靶位点？
4)简述获得siRNA的途径有哪些？
Chapter Ⅶ Obtaining of target gene
1)目的基因克隆时常用哪些方法分离和获得基因？
2)什么是基因文库？简述构建基因文库常用的载体有哪些？
3)什么是基因组文库？简述构建基因组文库的一般步骤？
4)什么是cDNA文库？简述构建cDNA文库的主要步骤？
5)目的基因与载体的连接方法有哪些？各有哪些优点？基因重组时在两个酶切位点中其
中有一个不相匹配时，你如何解决连接问题？
6)如果目的基因的基因结构中有内含子存在，而且要采用原核表达系统，你应如何分离克
隆基因？
Chapter Ⅷ Recombination and gene transfer
1)cDNA克隆较之基因组克隆的优越性体现在哪里?
2)试述T-A克隆法的原理和用途？
3)基因工程宿主菌必需具备哪些特性？
4)名词解释：受体细胞、感受态细胞、转化、转染、转导
5)简述将重组DNA导入原核细胞的方法有哪些？
6)简述将重组DNA导入真核细胞导的方法有哪些？
7)外源基因导入植物的方法？
8)Ti 质粒的结构特点？Ti 质粒介导植物基因转移的过程？
Chapter Ⅸ Screening and identification of recombinant clones
1)如何从所克隆到的基因重组载体中鉴定目的基因的存在和正确性
2)重组子的筛选与鉴定主要有哪些方法？
3)重组子的遗传学检测法主要包括哪两类？
4)简述根据载体表型特征进行重组子筛选的常用方法及其基本原理？
5)如何利用抗性标记基因筛选阳性克隆？
6)名词解释：插入失活效应
7)LacZ 基因通常用于构建质粒载体的目的和原理？如何利用LacZ标记基因筛选阳性克
隆？
8)报告基因检测法筛选重组子对报告基因有哪些基本要求?举例说明重用的报告基因有哪
几种？
Chapter ⅩExpression of cloning gene
1)大肠杆菌作为基因工程受体菌有哪些优缺点？
2)实现真核基因在大肠杆菌表达系统的正确表达需要哪些基本条件？
3)名词解释：启动子、终止子、SD序列、包涵体
4)蛋白质包含体复性的方法有哪些？
5)可使外源基因在大肠杆菌中高水平表达的启动子应具备哪些条件？
6)常用大肠杆菌表达载体有哪些？简述λPL启动子表达载体和T7噬菌体RNA聚合酶/启动
子表达载体的主要特征？
7)原核表达系统常采用的启动子有哪些？Lac、Tac、trp启动子各自有何特点？
8)在大肠杆菌中表达外源基因的表达载体需具备哪些条件？
9)利用大肠杆菌进行外源蛋白质主要有哪几种表达部位？采用相应表达形式有何优缺
点？
10)名词解释：融合基因、融合蛋白
11)提高外源基因表达效率一般从那几个方面进行考虑？
12)从提高转录启动效率及翻译起始效率角度考虑，可通过哪些措施构建高效率表达载体，
提高外源基因表达效率？
13)避免外源基因表达蛋白被宿主细胞内源蛋白水解酶降解的主要措施有哪些？
14)简述大肠杆菌表达外源基因产物的检测方法有哪几种？
15)与原核细菌相比，酿酒酵母做为外源基因表达受体菌有哪些优点？
16)酵母表达系统有哪些优缺点？
17)酵母基因表达系统主要有哪些基本结构？常采用的选择标记基因有哪些？
18)简述酵母表达载体的种类和主要特征？
19)甲醇酵母表达系统的主要特点？
20)酵母DNA转化的方法有哪几种？
21)酵母菌的蛋白修饰分泌系统有哪些功能？对外源基因的蛋白表达有何作用？
根据课堂讨论题目扩增思考题目
1)基因芯片技术的概念、原理和主要的应用？
2)基因治疗的概念与策略？基因治疗的基本程序？
3)转基因动物的概念，显微注射法制备转基因动物的主要过程
4)何谓动物克隆技术？有何应用价值？
5)转基因植物有哪些应用价值？
1.反馈控制系统又称为（B ） A.开环控制系统 B ．闭环控制系统 B.扰动顺馈补尝 D ．输入顺馈补偿 2.位置随动系统的主反馈环节是（A ） A ．电压负反馈 B ．电流负反馈 C ．转速负反馈 D ．位置负反馈 3.如果典型二阶系统的单位阶跃响应为减幅振荡(又称阻尼振荡)，则其阻尼比（C ） Aξ<0 Bξ=0 C0<ξ<1 D ξ≥1 4.G(s)= 1/[(S+1)(S+2)(S+3)(S+4)]环 节的对数相频特性的高频渐近线斜率为（D ） A -20d B B-40dB C-60dB D-80dB 5.某自控系统的开环传递函数G(s)= 1/[(S+1)(S+2)] ，则此系统为（ A ） A ．稳定系统 B ．不稳定系统 C ．稳 定边界系统 D ．条件稳定系统 6．若一系统的特征方程式为(s+1)2(s －2)2+3＝0，则此系统是（C ） A 稳定的 B 临界稳定的 C 不稳定 D ．条件稳定的 7.下列性能指标中的(D )为系统的稳态指标。 A.σP B.t s C.N D.e ss 8.下列系统中属于开环控制的为( C) A.自动跟踪雷达 B.数控加工中心 C.普通车床 D.家用空调器 9.RLC 串联电路的系统应为(D)环节。 A 比例 B.惯性 C.积分 D.振荡 10.输出信号与输入信号的相位差随频率变化的关系是(B )。 A.幅频特性 B.相频特性 C.传递函数 D.频率响应函数 1.奈奎斯特图分析闭环控制系统的 （A ）A.稳态性能 B.动态性能 C.稳态和动态性能 D.抗扰性能 2.有一线性系统，其输入分别为u 1(t)和u 2(t)时，输出分别为y 1(t)和y 2(t)。 当输入为a 1u 1(t)+a 2u 2(t)时(a 1,a 2为常 数)，输出应为（B ） A.a 1y 1(t)+y 2(t) B.a 1y 1(t)+a 2y 2(t) C.a 1y 1(t)-a 2y 2(t) D.y 1(t)+a 2y 2(t) 3.某串联校正装置的传递函数为 G c (S)=K S S T 1T 1+β+(0<β<1)，则该装置 是（ A ） A.超前校正装置 B.滞后校正装置 C.滞后超前 D.超前滞后校正装置 4.1型系统开环对数幅频渐近特性的 低频段斜率为（ B ） A.-40(dB/dec) B.-20(dB/dec) C.0(dB/dec) D.+20(dB/dec) 5.开环传递函数G(s)H(s)=) p s )(p s () z s (K 211+++，其中p 2>z 1>p 1>0，则实轴上的根轨迹（A ） A.（-∞，-p 2],[-z 1,-p 1] B.(- ∞,-p 2] C.[-p 1,+ ∞] D.[-z 1,-p 1] 6.设系统的传递函数为 G(s)=1 s 5s 2512 ++，则系统的阻尼比为 C. 21 7.设单位负反馈控制系统的开环传递函数G o (s)=) a s (s K +，其中K>0,a>0，则闭环控制系统的稳定性与（ D ） A.K 值的大小有关 B .a 值的大小有关 C.a 和K 值的有关 D.a 和K 值的无关 8. 在伯德图中反映系统动态特性的是 B. 中频段 9. 设开环系统的频率特性G(j ω)=2 ) j 1(1 ω+，当ω=1rad/s 时，其频率特性幅值G(1)=(D ) A. 1 B. 2 C.21 D. 41 10. 开环传递函数为G(s)H(s)=) 3s (s K 3+,则实轴上的根轨迹为( D )。 A.［-3,∞］ B. ［0,∞］ C. (-∞,-3) D. ［-3,0］ 1.实验中可以从( D )获取频率特性。A.稳定的线性和非线性系统 B. 不稳定的线性和非线性系统 C.不 稳定的线性系统 D. 稳定的线性系统2.传递函数的概念适用于（D ）系统。 A ．线性、非线性 B. 线性 非时变 C ．非线性定常 D. 线性定常 3.系统的动态性能包括（ B ）。 A 稳定性平稳性 B.平稳性快速性 C 快速性稳定性 D.稳定性准确性 4. 确定系统根轨迹的充要条件是C A 根轨迹的模方程B.根轨迹的相方程 C 根轨迹增益 D 根轨迹方程的阶次 5 ．正弦信号作用于线性系统所产生的频率响应是（ A ） A ．输出响应的稳态分量 B. 输出响应的暂态分 量 C ．输出响应的零输入分量 D. 输出响应的零状态分量 6．系统的传递函数完全决定于系统 的 ( C )。A ．输入信号 B.输出信号C.结构和参数D.扰动信号7．控制系统的相位稳定裕量反咉 了系统的 ( B )。A ．稳定性 B.稳态性能C.快速性 D.动态性能8．一般来说，系统增加积分环节，系统的稳定性将（ B ）。 A ．变好 B.变坏 C.不变 D.可能9．系统开环对数幅频特性L(ω)中频段主要参数的大小对系统的 （ D ）性能无影响。A.动态 B. 稳态 C. 相对稳定性 D. 响应的快速性10．反馈控制系统又称为（ B ） A ．开环控制系统 B ．闭环控制系统 C 扰动顺馈补偿 D 输入顺馈补偿 1.单位斜坡函数f(t)=t 的拉氏变换式F(s)=（ D ） A.s B.1 C ．S 2 D ． 1/S 2 2．单位抛物线输入函数r(t)的数学表达式是r(t)＝（D ） A ．at 2 B ．1/2 Rt 2 C ．t 2 3．当二阶系统特征方程的根为具有负实部的复数根时，系统的阻尼比C A ζ<0 B ζ＝0 C0<ζ<1 D ζ≥1 4．已知单位反馈控制系统在阶跃函数作用下，稳态误差e ss 为常数，则此系统为B ．I 型系统 5．设某环节的传递函数为G(s)＝1 21 +s ，当ω＝0.5rad ／s 时，其频率特性相位移θ(0.5)=(A) A ．－ 4π B ．－6π C ．6π D 4 π 6超前校正装置的最大超前相角趋D ．90°
《工程技术哲学》课程 思考题 1、简述亚里士多德将关于知识的分类。 2、简述“哥白尼革命”。 3、简述近现代科学在现代工程技术中的作用。 4、简述第一次工业革命中的近代工程技术。 5、简述第二次工业革命中的近代工程技术。 6、简述第三次工业革命中的现代工程技术。 7、简述生态文明中工程技术的特征。 8、简述科学、技术、工程三元论视域下的工程观。 9、试论科学、技术、工程之间的区别与联系。 10、简述“荷兰学派”关于技术人工物“物理结构”与“意向功能”双重属性的分析。 11、试分析工程的行动结构。 12、试分析工程共同体的复杂构成。 13、简述分析技术知识的本质特征。 14、试分析工程知识的本质特征。 15、试论工程知识构成的科学技术维度与人文社会维度。 16、简述工程思维的特点。 17、试述工程活动的综合集成方法论。 18、简述工程活动的软系统方法论。 19、简述工程活动的硬系统方法论。 20、简述工程的系统方法论原则。 21、简述何为“技术创新”。 22、简述工程活动中的“非技术”创新。 23、简述何为“国家创新体系”。 24、简述技术伦理学、生态伦理学对人类中心主义的批判。 25、简述约纳斯的技术“责任伦理学”。 26、试论建筑师的伦理责任。 27、试论加强工程伦理学教学的重要性。 28、试论黑格尔美学的主要思想。 29、简述技术美学的兴起及特征。 30、试论现代主义建筑中的“机器美学”。 31、简述后现代主义建筑观的问题与贡献。 32、试论科学、技术、工程对社会发展的作用。 33、简述“唯科学主义”的文化观。 34、试论科技文化与人文文化在工程技术中的融合。 35、简述当代有关转基因生物工程安全性的公共政策。 36、试论科学、技术、工程的发展与生态文明建设。
分子生物学实验设计报告 绿色荧光蛋白的克隆表达 一、引言 荧光蛋白是海洋生物体内的一类发光蛋白，分为绿色荧光蛋白、蓝色荧光蛋白、黄色荧光蛋白和红色荧光蛋白。 绿色荧光蛋白是由日本学者下村修于1962年从多管水母中发现并分离得到的一种发光蛋白。它是由238个氨基酸构成的“β-桶”型三维立体结构，其中65至67位氨基酸（丝氨酸-酪氨酸-甘氨酸）形成发光团，为主要的发光位置。 通过生物化学的方法将基因做小小的改变，就可以改变GFP中的氨基酸，得到变异GFP。目前应用较多的GFP的突变体-增强型绿色荧光蛋白（简称EGFP） 传统的PCR产物克隆方法主要有两种：一种是PCR引物设计时引入载体上的酶切位点，PCR产物经双酶切后定向克隆到目的载体上；另一种是TA载体连接。这两种方法费时费力，过程繁冗。 而本实验采用的无缝克隆和组装技术是一种新的、快速、简洁的克隆方法，旨在克服上述缺陷，它可以在质粒的任何位点进行一个或多个目标DNA的片断的插入，而不需要任何限制性内切酶和连接酶。突破传统的双酶切再加上连接，只需要一步重组法，即可得到高效率克隆的重组载体，这个重组载体能够在一定的宿主细胞中进行扩增，形成大量的子代分子。 研究绿色荧光蛋白在大肠杆菌体内的基因克隆和表达。通过质粒重组形成所需要的重组质粒pET-28a-GFP，将重组质粒导入大肠杆菌体内，通过酶切、PCR及用IPTG诱导检测是否在大肠杆菌体内诱导表达成功。 < 菌液PCR是直接用菌液作为模板进行PCR的一种选取成功导入载体的菌落的方法，省
时，快捷，但容易出现假阳性。为了避免这种情况，我们需在设计引物时加上目的基因片段以及改进菌液处理方法。 三、实验步骤 1.质粒DNA的提取 实验原理： ~
基因工程原理复习题思考题 5、简单叙述同尾酶和同裂酶的差别。 同尾酶：来源不同，识别的序列不同，但能切出相同的粘性末端，连接后不能被相关的酶同时切割。 同裂酶：识别序列相同，切割位点有些相同，有些不同。分完全同裂酶和不完全同裂酶（PS：完全同裂酶：识别位点和切点完全相同。 不完全同裂酶：识别位点相同，但切点不同。） 6、连接酶主要有哪些类型？有何异同点？影响连接酶连接效果的因素主要有哪些？ 类型：DNA连接酶和RNA连接酶 异同点： 相同点：都能以DNA为模板，从5'向3'进行核苷酸或脱氧核苷酸的聚合反应。 不同点：DNA聚合酶识别脱氧核糖核苷酸，在DNA复制中起作用；而RNA聚合酶聚合的是核糖核苷酸，在转录中起作用。 7、试分析提高平端DNA连接效率的可能方法。（传说中的网上答案） 1、低温下长时间的连接效率比室温下短时间连接的好。 2、在体系中加一点切载体的酶，只要连接后原来的酶切位点消失。这样可避免载体自连，应该可以大大提高平端连接的效率。 3、足够多的载体和插入片段是最重要的。 4、平端的连接对于离子浓度很敏感 5、尽可能缩小连接反应的体积 6、建议放在四度冰箱连接两天效率更高比14度好 8、基因工程中常用的DNA聚合酶主要有哪些？ 1）大肠杆菌DNA聚合酶 2）Klenow fragment 3）T7 DNA聚合酶 4）T4 DNA聚合酶 5）修饰过的T7 DNA聚合酶 6）逆转录酶 7）Taq DNA聚合酶 第四章基因克隆的载体系统 1、作为基因工程载体，其应具备哪些条件？ 具有针对受体细胞的亲缘性或亲和性（可转移性）； 具有合适的筛选标记； 具有较高的外源DNA的载装能力； 具有多克隆位点（MCS）； 具有与特定受体细胞相适应的复制位点或整合位点。 3、载体的类型主要有哪些？在基因工程操作中如何选择载体？ 基因工程中常用的载体(vector)主要包括质粒(plasmid)、噬菌体(phage)和病毒(virus)三大类。这些载体均需经人工构建，除去致病基因，并赋予一些新的功能，如有利于进行筛选的标志基因、单一的限制酶切点等。 4、质粒转化原理，影响转化率的因素有哪些？
紧急通知 本资料由浙江大学控制科学与工程学院16届专业课129分学长，也就是我本人亲自整理编排而成。大家可以叫我学长，年龄比我大的辞职考的可以叫我小弟。资料不同于市面上那些看起来非常诱人实则是粗制烂造的资料，而是以一个考过845自控的过来人的经验，完全从学生的体验出发，做到资料最全，资料最好，资料最精致。全套资料包括葵花宝典一到葵花宝典九共九本资料，每本资料都是我精心编辑整理的，并做了精美的封面，一共650页完美打印发给大家，大家把这650从头到尾肯透了，再做下我推荐的几本资料书（16年有一道15分的大题就是上面的类似题，第三问很多高手都没做出来，注意不是周春晖那本哈），可以说完全没问题了。这是其它卖家不可能做到的。同时赠送845自控全套电子资料。葵花宝典一完全由我本人原创，里面包含了考浙大845自动控制原理的全部问题，比如考多少分比较保险，怎么复习，有哪些好的资料书，最近几年考题变化及应对策略，浙大常考题型，招生名额，复试资料，导师联系，公共课复习用书及方法以及845近年命题风格分析等一系列问题，全是我的心得和经验，方法，技巧等，说句心里话，我自己都觉得这些资料非常宝贵，能帮助学弟学妹们少走很多弯路。 注意：前面是一些关于我的故事，有些地方可能对你有用，如果不感兴趣，可以直接拉到后面去看，资料清单和图片都在后面。 学长自我介绍 学长姓邓，名某某，男，本科于14年毕业于四川大学电气信息学院自动化专业，考浙大控制考了3次，14年大三时第一次考浙大控制总分没过线。当时我们学校有三个同学征战浙大控制科学与工程，结果全军覆没，只有我一人过了300分，由此可见考浙大控制还是很有难度的，其中一个难点就是专业课的信息和专业课的命题走向的获取，当时我们都不是很清楚，蒙着头自己学，去图书馆借了很多自动控制原理的资料书来看，我自我感觉学得还不错，当时我一个同学考电子科大的自动化，经常跑来问我自控的问题，我基本都能给他解答出来，他说我好牛逼，觉对没有问题，然而最后的结果是他考电子科大自动控制原理137，而我只考了96分。后面我分析了一下，为什么会出现这样的情况？最重要的就是我们对浙大的出题风格不是很了解，不知道它的命题方向和爱考的地方，方向都错了，怎么可能得高分？虽然我把11年以前的真题都做了，但是浙大12年以后的命题风格和以前有所不同，所以还是无济于事。因此即使你的自控基础知识扎实，也未必能够得到高分，这里面有很多方法和技巧，都是我从后面的考试中慢慢总结出来的。 由于不甘心就这么与浙大失之交臂，所以决定二战，但是又不想向家里要钱了，因为学长家在贵州农村，经济条件不是很好。于是我选择平时晚上去给别人做家教，周末去给培训机构上课。这样的好处是我有大把的白天用来复习，只是晚上出去干干活。这个事就说到这里，不是主题。15年专业课考了113，一个中等的分数，本来可以考130，但是为什么没有考到，这些原因我都在葵花宝典一中给大家分析了，希望大家能我的身上汲取经验，别步我的后尘。但是15年死在英语不过线上，差3分，这是我怎么也没有想到的，学长英语虽然不能说特别好，但是最起码四六级大一就过了，高考英语还是我们小县城的单科第一名（山中无老虎），第一年也考了65分。这是我怎么也没有想到的，所以有的时候感觉
1、简述亚里士多德将关于知识的分类。 所有科学都称为广义的哲学，哲学又分类为：理论科学，包括物理学、数学和形而上学； 实践科学，包括伦理学、政治学；制作科学，包括制造工艺在内的一切艺术。三大学科中，理论之学最明确，制作之学最不完整，实践之学范围最不清楚。 A在《论题》篇中，亚里士多德以知识的目的为依据，将所有知识分成三类：为着自身而被追求的知识是“理论知识”；为着行动而被追求的知识是“实践知识”；为着创作和制造而被追求的知识是“制作知识”。在《形而上学》中，他又分别以知识的对象为和知识的性质为依据，将上述三类知识作了更具体的区分。 1）理论知识：以对象的不同再分为三种：研究运动而又可分离存在东西的是物理学；研究不运动但也不分离存在东西的是数学；研究不运动又可分离存在东西的是第一哲学，亦即我们所说的“形而上学”。 2）实践知识：包括伦理学、政治学等； 制作知识：包括生产技术、技艺；艺术品的制作等。 2简述“哥白尼革命”。 首先对“哥白尼革命”这一术语下一个定义。即使在描述的意义上说，这个术语的应用也是含糊不清的。人们经常把它解释为“一般公众”对于我们行星系的中心是太阳而非地球这一信念的接受，但无论哥白尼还是牛顿都不坚持这一信念。无论如何，由一种流行的信念转向它种信念，并不属于科学史本身的范围。让我们暂时不管各种信念及心理状态，而只考虑陈述及其客观的（即弗雷格和波普尔意义上的“第三世界”的）内容。尤其是，让我们把哥白尼革命看成这样一种假说，即地球绕太阳运转，而不是太阳绕地球运转，或更确切地说，行星运动的固定参考系是固定的恒星，而不是地球。这种解释主要被那些认为孤立的假说（而不是研究纲领或“范式”）是恰当的评价单位的人所持有。让我们依次看看这一方法的不同说法，并指出这些说法是如何失败的。 康德哲学是一个西方哲学从本体论到认识论的转向，以往的哲学都是关注外在于人
基因工程原理练习题及其答案 一、填空题 1．基因工程是_________年代发展起来的遗传学的一个分支学科。 2．基因工程的两个基本特点是：(1)____________，(2)___________。 3．基因克隆中三个基本要点是：___________；_________和__________。 4．通过比较用不同组合的限制性内切核酸酶处理某一特定基因区域所得到的不同大小的片段，可以构建显示该区域各限制性内切核酸酶切点相互位置的___________。 5．限制性内切核酸酶是按属名和种名相结合的原则命名的，第一个大写字母取自_______，第二、三两个字母取自_________，第四个字母则用___________表示。 6．部分酶切可采取的措施有：(1)____________(2)___________ (3)___________等。 7．第一个分离的限制性内切核酸酶是___________；而第一个用于构建重组体的限制性内切核酸酶是_____________。8．限制性内切核酸酶BsuRI和HaeⅢ的来源不同，但识别的序列都是_________，它们属于_____________。 9．DNA聚合酶I的Klenow大片段是用_____________切割DNA聚合酶I得到的分子量为76kDa的大片段，具有两种酶活性：(1)____________；(2)________________的活性。 10．为了防止DNA的自身环化，可用_____________去双链DNA__________________。 11．EDTA是____________离子螯合剂。 12．测序酶是修饰了的T7 DNA聚合酶，它只有_____________酶的活性，而没有_______酶的活性。 13．切口移位(nick translation)法标记DNA的基本原理在于利用_________的_______和______的作用。 14．欲将某一具有突出单链末端的双链DNA分子转变成平末端的双链形式，通常可采用_________或_______________。15．反转录酶除了催化DNA的合成外，还具有____________的作用，可以将DNA- RNA杂种双链中的___________水解掉。 16．基因工程中有3种主要类型的载体：_______________、_____________、______________。 17．就克隆一个基因(DNA片段)来说，最简单的质粒载体也必需包括三个部分：_______________、_____________、______________。另外，一个理想的质粒载体必须具有低分子量。 18．一个带有质粒的细菌在有EB的培养液中培养一段时间后，一部分细胞中已测 不出质粒，这种现象叫。 19．pBR322是一种改造型的质粒，它的复制子来源于，它的四环素抗性基因来自于，它的氨苄青霉素抗性基因来自于。 20．Y AC的最大容载能力是，BAC载体的最大容载能力是。 21．pSCl01是一种复制的质粒。 22．pUCl8质粒是目前使用较为广泛的载体。pUC系列的载体是通过 和两种质粒改造而来。它的复制子来自，Amp 抗性基因则是来自。 23．噬菌体之所以被选为基因工程载体，主要有两方面的原因：一是；二是。 24．野生型的M13不适合用作基因工程载体，主要原因是 和。 25．黏粒(cosmid)是质粒—噬菌体杂合载体，它的复制子来自、COS位点序列来自，最大的克隆片段达到kb。 26．野生型的λ噬菌体DNA不宜作为基因工程载体，原因是：(1) (2) (3) 。 27．噬菌粒是由质粒和噬菌体DNA共同构成的，其中来自质粒的主要结构是，而来自噬菌体的主要结构是。 28．λ噬菌体载体由于受到包装的限制，插入外源DNA片段后，总的长度应在噬菌体基 因组的的范围内。 29．在分离DNA时要使用金属离子螯合剂，如EDTA和柠檬酸钠等，其目的是 。 30．用乙醇沉淀DNA时，通常要在DNA溶液中加人单价的阳离子，如NaCl和NaAc， 其目的是。 31．引物在基因工程中至少有4个方面的用途：(1) (2) (3) (4) 。 32．Clark发现用Taq DNA聚合酶得到的PCR反应产物不是平末端，而是有一个突出 碱基末端的双链DNA分子。根据这一发现设计了克隆PCR产物的。 33．在cDNA的合成中要用到S1核酸酶，其作用是切除在 。 34．乙醇沉淀DNA的原理是。 35．假定克隆一个编码某种蛋白质的基因，必须考虑其表达的三个基本条件：
Chapter I Introduction 1)什么是基因？基因有哪些主要特点？ 基因是一段可以编码具有某种生物学功能物质的核苷酸序列。 ①不同基因具有相同的物质基础.②基因是可以切割的。③基因是可以转移的。④多肽与基因之间存在 对应关系。⑤遗传密码是通用的。⑥基因可以通过复制把遗传信息传递给下一代。 2)翻译并解释下列名词 genetic engineering遗传工程 gene engineering基因工程：通过基因操作，将目的基因或DNA片段与合适的载体连接转入目标生物获得新的遗传性状的操作。 gene manipulation基因操作：对基因进行分离、分析、改造、检测、表达、重组和转移等操作的总称。 recombinant DNA technique重组DNA技术 gene cloning基因克隆：是指对基因进行分离和扩大繁殖等操作过程，其目的在于获得大量的基因拷贝，在技术上主要包括载体构建、大肠杆菌遗传转化、重组子筛选和扩大繁殖等环节。 molecular cloning分子克隆 3)什么是基因工程？简述基因工程的基本过程？p2 p4 4)简述基因工程研究的主要内容？p5 5)简述基因工程诞生理论基础p2和技术准备有哪些p3？ 6)基因表达的产物中，氨基酸序列相同时，基因密码子是否一定相同？为什么？ 否，密码子简并性 7)举例说明基因工程技术在医学、农业、工业等领域的应用。 医学:人胰岛素和疫苗 农业:抗虫BT农药 工业:工程酿酒酵母
Chapter ⅡThe tools of trade 1)什么是限制性核酸内切酶？简述其主要类型和特点？ 是一种核酸水解酶，主要从细菌中分离得到。类型特点p11 2)II型核酸内切酶的基本特点有哪些p12-14？简述影响核酸内切酶活性的因素有哪些 p14？ 3)解释限制酶的信号活性？抑制星号活性的方法有哪些？ 4)什么是DNA连接酶p15？有哪几类p16？有何不同p16？ 5)什么叫同尾酶、同裂酶p12？在基因工程中有何应用价值？ 同裂酶：识别位点、切割位点均相同，来源不同。在载体构建方面往往可以取得巧妙的应用。应用较多的同裂酶比如Sma1和Xma1，它们均识别CCCGGG，但前者切后产生钝末 同尾酶：来源各异，识别序列各不相同，但切割后产生相同的粘性末端。由同尾酶(isocaudomer)产生的DNA片段，是能够通过其粘性末端之间的互补作用彼此连接起来的。 6)什么是DNA聚合酶？根据DNA聚合酶使用的模板不同，可将其分为哪两类？各有什么活 性？p17-18 聚合酶：在引物和模板的存在下，把脱氧核苷酸连续地加到双链DNA分子引物链的3‘-OH 末端，催化核苷酸的聚合作用。 ①依赖于DNA的DNA聚合酶 ②依赖于RNA的DNA聚合酶 7)Taq DNA聚合酶：是一种从水生嗜热菌中分离得到的一种耐热的dna聚合酶，具有5-3聚 合酶活性和3-5外切酶活性，在分子中主要用于PCR。 逆转录酶：RNA指导的DNA聚合酶， 8)Klenow片段的特性和用途有哪些？举例说明。p17 9)名词解释：S1核酸酶、核酸外切酶、磷酸化酶激酶、 甲基化酶
工程结构检测技术思考题答案
1、工程结构检测，是开展哪些研究和工程技术工作的重要手段？ ①分析工程质量，②进行科学研究，③出台相关规范,制定质量标准④质量事故调查。 2、工程结构检测意义与任务 意义：①了解和掌握结构的实际工作状况；②验证新理论、新结构、新设计的正确与合理性；③结构技术 状况评估。任务：①确定新建结构的承载能力和使用条件；②评价既有结构的使用性能与承载能力；③研究结构的 受力行为及一般规律；④进行生产鉴定和施工质量事故调查。 4、我国结构工程技术标准和规范分为哪四个层次？综合基础标准，专业基础标准，专业通用标准和专业专用标准 5、桥梁结构构件技术状况分为哪5级？良好，较好，较差，差的和危险状态 6、混凝土抗压强度试验标准试块的几何尺寸是多少？立方体：150×150×150mm；圆柱体：150×300 7、混凝土轴心抗压强度试验中，应选用什么样的试件？棱柱体：150×150×300mm；圆柱体：150×300 8、混凝土静力弹性模量性能试验中，应选用什么样的试件？棱柱体：150×150×300mm；圆柱体：150×300 9、试说明混凝土静力受压弹性模量试验中，为什么选用六个棱柱体试件？三个用于轴心抗压，三个用于弹性模量 10、试说明混凝土静力受压弹性模量试验中，为什么其荷载最大压应力约为1/3轴心抗压强度？线弹性 11、试描述混凝土试件抗压力学性能试验时，试块的破坏形态。并解释为什么？中间比两端竖向裂缝多，因两端 受到约束最强，中间混凝土在单向受压状态下发生横向达到极限拉应变而产生竖向裂缝。 12、如何测试混凝土材料的抗拉力学性能？并解释为什么。因轴向受拉试验不能保证试件处于轴心受拉状态而影响 轴心抗拉强度，故用较简便的圆柱体或立方体的劈裂试验来间接测试。 13、说明在非标准试块抗压强度值确定时，为什么小尺寸试块换算系数取为0.95,而大尺寸试块换算系数取为1.05？ 几何尺寸越大，几何缺陷越多，抗压能力越小，则需要修正系数。 14、在混凝土抗压强度试验中，如果有一个值与中间值的差值超过中间值的15％时，应如何确定其抗压强度值？ 把最大值及最小值一并舍去，取中间值作为该组试件的抗压强度值。 15、在混凝土静力弹性模量试验中，如果其中一个试件的轴心抗压强度值超过用以确定检验控制荷载的轴心抗压强 度值的20％时，应如何确定弹性模量值？取另两个试件测试值的算术平均值作为弹性模量值。 16、论述在混凝土抗压强度试验中，如何通过3个试验值来确定其抗压强度值？Ⅰ、一般情况下，取三个试件测试 值的算术平均值作为该组试件的强度值（精确至0.1MPa）；Ⅱ、三个测试值中的最大值或最小值中，有一个与中间值的差值超过中间值的15％时，则把最大值及最小值一并舍去，取中间值作为该组试件的抗压强度值；Ⅲ、若最大值和最小值与中间值的差值均超过中间值15％时，则该组试件试验结果无效。 17、论述在混凝土受压弹性模量试验中，如何通过3个试验值来确定其弹性模量值？ Ⅰ、一般情况下，取三个试件测试值的算术平均值作为该组试件的弹性模量值；Ⅱ、如果其中一个试件的轴心抗压强度值超过用以确定检验控制荷载的轴心抗压强度值的20％时，则取另两个试件测试值的算术平均值作为弹性模量值；Ⅲ、如果两个试件超过了上述规定时，则该组试件试验结果无效。 18、目前用于结构应变测试的常用方法有哪些（列举至少三种），分析其测试精度？ 电阻应变测试（1微应变），钢弦应变计和光纤光栅应变计（约为2.5微应变）。 19、在图示电阻应变仪工作原理电路中，工作电阻Ｒ1，Ｒ2，Ｒ3，Ｒ4组成了电路的四个桥臂，其电桥平衡的条件是 什么？BD中流过的电流为0。R1*R3-R2*R4=0 20、试扼要叙述电阻应变计粘贴工艺？ ①标记应变片粘贴区域；②该标记处结构表面打磨，除去表尘；③利用丙酮或无水酒精擦拭打磨处；④将打磨 处摸上薄薄一层粘结胶（502胶、AB胶）；⑤将应变片对准贴正，轻轻按压排除片下多余之胶；⑥连接接线端子，小心焊接应变片与接线端；⑦焊接信号输出导线；⑧将整个应变片及接线端子涂上防水胶（704硅胶）。 21、试扼要说明影响电阻应变测试结果长期稳定的主要因素有哪些？ a)传感器与基体的粘结程度(剪力传递）； b)导线接触电阻；c)测试系统零漂（传感器通电发热）。 22、应变测量电桥不同的接线方式，依赖于结构受力状态，不同接线方式的目的是什么？ ①有效实现温度补偿；②从复杂的组合应变中分离出感兴趣的应变；③有效提高测量精度。
《医用基因工程》复习思考题 第一章基因和基因组及基因工程的概念 一、名词概念 ①移动基因(插入序列；转位子)；②断裂基因；③RNA剪辑； ④内含子(间隔序列)与表达子；⑤重叠基因；⑥重复序列；⑦假基因；⑧启动子与终止子；⑨起始位点、终止位点。 二、讨论题 1.什么叫基因?何谓基因的新概念?基因的主要功能是什么? 2.一种基因一种酶的提法妥否？ 3.基因密码子三联体间是否存在着逗号？ 4.基因表达的产物中，氨基酸序列相同时，基因密码子是否一定相同？为什么？ 5.何谓转位子和转位作用?转位的后果如何? 6.基因中最小的突变单位和重组单位是什么？ 7.基因工程应包括哪些内容？何谓基因工程的四大里程碑和三大技术发明? 8.真核细胞基因组中常有内含子存在，能否在原核细胞获得表达？能，为什么？不能，为什么？ 第二章基因工程中常用的工具酶 1.什么是限制性核酸内切酶？ 2.什么是R/M现象？如何解释？ 3.II型核酸内切酶的基本特点有哪些？ 4.影响II型核酸内切酶活性的因素有哪些？如何克服和避免这
些不利因素？ 5.DNA连接酶有哪两类？有何不同？ 6.甲基化酶有哪两类？有何应用价值？ 7.什么叫同尾酶、同裂酶？在基因工程中有何应用价值？ 8.平末端连接的方法有哪些？(图示) 9.Klenow酶的特性和用途有哪些？举例说明。 10.反转录酶的特性有哪些？有何应用价值？ 11.列举碱性磷酸酶BAP/CAP的应用之一。 12.列举末端核苷酸序列转移酶的应用之一。 13.质粒单酶切点的基因连接如何降低本底和防止自我环化和提高连接效率？ 14.基因片段与载体的平末端连接的方法有哪些？ 15.用寡核苷酸和衔接物DNA的短片段连接时为使基因内部的切点保护，常用何种办法解决？ 第三章基因克隆载体 1.基因工程常用的载体有哪5种？其共同特性如何？ 2.什么是质粒？质粒分哪几种？有哪两种复制类型，质粒的分子生物学特性有哪些？ 3.质粒存在的三种形式是什么？ 4.分离质粒的基本步骤有哪些？ 5.分离纯化质粒的方法有哪几种？简述CsCl密度梯度(浮密度)分离法、碱变性法的原理，如何选择合适的分离方法？ 6.作为理想质粒载体的基本条件有哪些？ 7.什么叫插入失活，举例说明之。 8.构建pBR322质粒载体的亲本质粒有哪些？ 9.什么叫插入型和替换型噬菌体载体?插入型和替换型入噬菌体
1、工程结构检测，是开展哪些研究和工程技术工作的重要手段？ ①分析工程质量，②进行科学研究，③出台相关规范,制定质量标准④质量事故调查。 2、工程结构检测意义与任务 意义：①了解和掌握结构的实际工作状况；②验证新理论、新结构、新设计的正确与合理性；③结构技术状况评估。任务：①确定新建结构的承载能力和使用条件；②评价既有结构的使用性能与承载能力；③研究结构的受力行为及一般规律；④进行生产鉴定和施工质量事故调查。 4、我国结构工程技术标准和规范分为哪四个层次？综合基础标准，专业基础标准，专业通用标准和专业专用标准 5、桥梁结构构件技术状况分为哪5级？良好，较好，较差，差的和危险状态 6、混凝土抗压强度试验标准试块的几何尺寸是多少？立方体：150×150×150mm；圆柱体：150×300 7、混凝土轴心抗压强度试验中，应选用什么样的试件？棱柱体：150×150×300mm；圆柱体：150×300 8、混凝土静力弹性模量性能试验中，应选用什么样的试件？棱柱体：150×150×300mm；圆柱体：150×300 9、试说明混凝土静力受压弹性模量试验中，为什么选用六个棱柱体试件？三个用于轴心抗压，三个用于弹性模量 10、试说明混凝土静力受压弹性模量试验中，为什么其荷载最大压应力约为1/3 轴心抗压强度？线弹性
11、试描述混凝土试件抗压力学性能试验时，试块的破坏形态。并解释为什么？中 间比两端竖向裂缝多，因两端受到约束最强，中间混凝土在单向受压状态下发生横向达到极限拉应变而产生竖向裂缝。 12、如何测试混凝土材料的抗拉力学性能？并解释为什么。因轴向受拉试验不能 保证试件处于轴心受拉状态而影响轴心抗拉强度，故用较简便的圆柱体或立方体的劈裂试验来间接测试。 13、说明在非标准试块抗压强度值确定时，为什么小尺寸试块换算系数取为0.95, 而大尺寸试块换算系数取为1.05？ 几何尺寸越大，几何缺陷越多，抗压能力越小，则需要修正系数。 14、在混凝土抗压强度试验中，如果有一个值与中间值的差值超过中间值的15％ 时，应如何确定其抗压强度值？ 把最大值及最小值一并舍去，取中间值作为该组试件的抗压强度值。 15、在混凝土静力弹性模量试验中，如果其中一个试件的轴心抗压强度值超过用 以确定检验控制荷载的轴心抗压强度值的20％时，应如何确定弹性模量值？ 取另两个试件测试值的算术平均值作为弹性模量值。 16、论述在混凝土抗压强度试验中，如何通过3个试验值来确定其抗压强度值？ Ⅰ、一般情况下，取三个试件测试值的算术平均值作为该组试件的强度值（精确至0.1MPa）；Ⅱ、三个测试值中的最大值或最小值中，有一个与中间值的差值超过中间值的15％时，则把最大值及最小值一并舍去，取中间值作为该组试件的抗压强度值；Ⅲ、若最大值和最小值与中间值的差值均超过中间值15％时，则该组试件试验结果无效。
精品文档 《基因工程原理与技术》标准答案及评分标准 一、名词解释（本大题共5小题，每题2分，总计10分） 限制性内切酶的Star活性：限制性内切酶的识别和酶切活性一般在一定的温度、离子强度、pH 等条件下才表现最佳切割能力和位点的专一性。如果改变反应条件就会影响酶的专一性和切割效率，称为星号（*）活性。 受体细胞：又称为宿主细胞或寄主细胞等，从试验技术上讲是能摄取外源DNA并使其稳定维持的细胞；从试验目的讲是有应用价值和理论研究价值的细胞 T-DNA是农杆菌侵染植物细胞时，从Ti质粒上切割下来转移到植物细胞的一段DNA 该DNA片段上的基因与肿瘤的形成有关。 克隆基因的表达：指储存遗传信息的基因经过一系列步骤表现出其生物功能的整个过 程。典型的基因表达是基因经过转录、翻译，产生有生物活性的蛋白质的过程。 a -互补：3 -半乳糖苷酶（B -gal）是大肠杆菌lacZ基因的产物，当培养基中的一种色素元（X-gal ）被3 -gal切割后，即产生兰色。大肠杆菌的3一半乳糖苷酶由1021个氨基酸构成，只有在四聚体状态下才有活性。大肠杆菌lacZ基因由于a区域缺失，只能编码一种在氨基端截短的多肽，形成无活性的不完全酶，称为a受体；如果载体的lacZ 基因在相反方向缺失，产生在羧基端截短的多肽，这种部分3 -半乳乳糖苷酶也无活性。 但是这种蛋白质可作为a供体。受体一旦接受了供体（在体内或体外），即可恢复3 -半乳糖苷酶的活性，这种现象称为a互补. 由载体产生的a供体能够与寄主细胞产生 的无活性的a受体互作形成一种八聚体，从而恢复3 -半乳糖苷酶的活性。如果培养基 中含有X-gal的诱导物IPTG时，凡是包含有3 -半乳糖苷酶活性的细胞将转变为蓝色，反之不含有这种酶活性的细胞将保持白色。 、填空题（本大题共7小题，每空1分，总计20 分） 1、质粒按自我转移的能力可分为—接合型—质粒和—非接合型—质粒；按复制类型可分为松 弛性质粒和严紧型质粒。 2、为了防止DNA的自身环化，可用碱性磷酸酶除去双链DNA 5'—端的磷酸基团 。 3、人工感受态的大肠杆菌细胞在温度为_0匸—时吸附DNA在温度为_42乜__ 时摄人 DNA 4、仅克隆基因（DNA片段）用途而言，最简单的质粒载体也必需包括三个组成部分： 复制区：含有复制起点__、选择标记：主要是抗性基因 ________ 、__克隆位点：便于外源_ DNA的插入_。另外，一个理想的质粒载体必须具有低分子量。 5、Southern blotting 杂交能够检测外源基因是否整合进受体细胞基因组；外源基 因的转录表达需要通过—northern_杂交或_ RT-PCR_来揭示；而外源基因_____ 翻 译—水平的表达则需通过免疫学检测或Western杂交才能揭示，其使用的探针是 —蛋白质____ 。 6、外源蛋白在大肠杆菌中的表达部位有—细胞质_、_ —周质_、一细胞外 _。 7、Vir区基因的激活信号有三类，它们是—酚类化合物_、_中性糖和酸性糖_、— _ pH 值_。 简答题（本大题共7 小题，总计50 分） 1欢迎下载
自然辩证法是马克思主义哲学的重要组成部分，是研究自然界科学技术本质及其规律的科学，是辨证唯物主义的自然观和科学技术观，也是指导人们认识世界，改造世界的科学方法论，还包括各门具体科学中的重大哲学问题，其内容主要有自然观，科学技术观，科技研究方法论三部分，其中两对矛盾，即人与自然的矛盾，科学实践与科学认识的矛盾，贯穿自然辩证法体系的始终 2、简述20世纪西方科学哲学的主要流派及观点 主要流派主要观点 逻辑实证主义以1923年成立的维也纳小组为代表，他们以科学为旗帜，以逻辑为武器，以统一科学为使命，其口号是拼搏，拒斥形而上学 批判理性主义波普尔认为理论的真正检验不在于试图证实它，而在于否认它，一种理论的科学性在于它的可否认性。一种不能为任何事实所否认的理论是非科学的。 历史主义以库恩为代表， “范式”：指某一科学家集团围绕某一学科所具有的理论上，方法上共同的信念， 这种共同的信念规定了它的共有的基本理论，基本观点，基本方法，为他们提 供了共同的理论模型和解决问题的框架，从而形成一种共同的科学传统，规定 了共同的发展方向，限制了共同的研究范围，科学研究就是在一定范式的制约 之下，从事解题的活动 3、简述恩格斯《自然辩证法》艺术的体系结构以及主要内容 自然辩证法一书以两对矛盾为主线，将论文和札记分成六个部分。第一部分导言，一篇论文，若干札记，论述了自文艺复兴以来自然科学的发展及取得的重大成就，说明形而上学自然观的产生有其必然性，同时论述了十九世纪以来重大科学发现，在形而上学自然观上打开了一个缺口，为辨证唯物主义自然观的产生奠定了基础； 第二部分自然科学与哲学，两篇论文《<反杜林论>旧序-论辩证法》，《自然科学中的神秘世界》，一篇札记，论述哲学与自然科学的关系，哲学为科学研究提供世界观和方法论的指导，研究者只要掌握了正确的哲学思维，就能在研究中避免麻木性，少走弯路，排除威信主义和宗教神学的干扰，加速研究进程； 第三部分辩证法，一篇论文《辩证法》一篇札记《辩证法》，论述了辩证法的科学体系，说明辩证法是客观的，是由三大规律，五大范畴构成的； 第四部分物质运动形式，一篇论文《物质运动形式》一篇札记《运动基本形式科学分类》，论述了辩证唯物主义运动观，解释了物质运动同时间，空间之间的内在联系，并说明科学分类是以对象运动形式为依据的； 第五部分各门科学中的哲学问题或各门具体科学中的辩证法，四篇论文，五篇札记，论述了各门学科中的重大哲学问题； 第六部分，劳动创造了人，一篇论文《劳动在从猿到人转化中的作用》，论述了劳动创造了人，创造了人类社会，在辨证唯物主义与历史唯物主义之间架起了桥梁，实现了辨证唯物主义与历史唯物主义的统一。 古代自然观的具体成就有： 元素论：探讨物质组成，主要有米利都学派的水是万物之源，爱菲所学派赫拉克利特的活火说，中国的八卦、五行学说 原子论：探讨物质构成，主要有留基伯-德谟克利特原子论，伊壁鸠鲁原子论 宇宙论：探讨天体运行规律，主要有中国古代的盖天说、宣夜说、浑天说，古代西方泰勒斯的平地论、阿那克西曼德的鼓状宇宙模型 古代自然观是朴素唯物主义与自然辩证法的有机统一。以自然界自身存在的事物为本原，从物出发，
2012《自然辩证法概论》 第一章马克思主义自然观 1.如何理解朴素唯物主义自然观、机械唯物主义自然观和辩证唯物主义自然观的辩证关系？ 2. 如何认识机械唯物主义自然观的方法论意义？ 3. 如何理解马克思主义自然观形成和发展的价值和意义？ 4. 如何把握系统自然观、人工自然观和生态自然观对认识人与自然辩证关系的意义和作用？ 5. 如何认识中国马克思主义自然观的理论意义和实践价值？ 第二章马克思主义科学技术观 1.怎样认识马克思、恩格斯的科学技术思想在马克思主义理论体系中的重要地位？ 2.马克思、恩格斯和国外学者关于技术本质的分析有何主要差异？ 3.如何理解科学技术一体化的特征？ 4.为什么说科学发展表现为继承与创新的统一？ 5.如何理解18、19世纪科学技术发展与马克思、恩格斯科学技术思想产生的关系？ 6.怎样认识技术发展的动力？ 第三章马克思主义科学技术方法论 1.如何把握创造性思维特性？ 2.数学方法的运用对于科学研究是否有创造性的作用？ 3.掌握系统科学和复杂性科学的方法对于科学研究有何积极意义？ 4.实验有自己独立的生命，是否不需要理论的指导？理论对实验如有指导，是否实验就没有自己独立的生命？ 5.如何理解马克思主义科学技术方法论与科学研究中的具体方法的关系 6.如何理解辩证思维渗透在科学研究的全部过程中 7.注意多学科的交叉与融贯有何方法论意义 8.观察是否渗透信念 9.技术构思、技术设计和技术试验三者的关系如何？ 第四章马克思主义科学技术社会论 1.如何看待科学技术对人的异化和对自然的异化？ 2.为什么要对科学技术工作者进行伦理规范？ 3.如何保障科学技术在社会中健康、持续地运行？ 4.如何理解科学技术文化与人文文化之间的冲突与协调？
马克思主义政治经济学思考题 第一篇 问题一：物品使用价值和商品价值的区别 答：①物品的有用性或它能够满足人们某种需要的属性，便是物品的使用价值。使用价值是物品的自然属性。有物品的物理、化学、生物等性质决定。②商品是用来交换的劳动产品，商品的价值是通过交换价值表现出来的。价值是一般人类劳动的凝结，价值是商品的社会属性。价值的本质是体现商品生产者互相交换劳动的生产关系。 问题二：劳动二重性与商品二因素之间的关系 答：①商品的二因素是由体现在商品中的劳动二重性决定的。劳动二重性包括具体劳动和抽象劳动。②具体劳动也叫有用劳动，它创造商品的使用价值。（具体劳动反应人与自然的关系，是人类社会生存和发展的永恒条件）但具体劳动不是使用价值即物质财富方的唯一源泉，具体劳动与自然物质共同构成使用价值的源泉。③抽象劳动是撇开劳动的具体形式的一半人类劳动或无差别的人类劳动。它形成商品的价值。抽象劳动是商品价值的唯一源泉。 问题三：商品价值量与生产商品的劳动生产率成反比，但是为什么商品生产者还要提高各自的生产率。 答：①商品的价值量不是有个别劳动时间决定的，而是由生产该商品的社会必要劳动时间决定的。②劳动生产率与商品的使用价值成正比，与商品的价值量成反比。个别劳动生产率高于社会必要劳动生产率的商品生产者，其商品的个别价值就体现为更多的社会价值。在市
场竞争中就具有更大的价格优势。 问题四：用等价形式交换具有哪些优势 答：①使用价值成为价值的表现形式。②具体劳动成为抽象劳动的表现形式。③私人劳动成为直接的社会劳动形式。 问题五：怎样解释“金银天然非货币，货币天然是金银” 答：1.金银天然非货币。①在人类产生前，金银就是自然界中存在两种金属，并不是货币。（无人类当然无货币）；②人类产生后，也并不是所有金银都是货币，只有那些固定充当一般等价物的金银才是货币（发展到一定阶段后的产物+金银首饰不是了）；③马克思主义认为，在产品经济时期（共产主义），按需分配，货币消失，但金银作为客观实在仍然存在。 2.货币天然是金银。货币的自然属性使它最适合充当货币材料。当金银固定来充当一般等价物时候，货币就出现了。 问题六：货币的职能有哪些，最基本的是什么 答：职能①价值尺度②流通手段③储藏手段④支付手段⑤世界货基本职能①价值尺度②流通手段 问题七：价值规律的内容、表现和作用 答：内容：商品的价值量由生产商品的社会必要劳动时间决定，商品按价值量进行等价交换。从商品生产角度看，价值规律是价值决定的规律。从商品流通的角度看，价值规律是价值交换的规律。 表现形式：价格受供求关系影响围绕价值上下波动。