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挥发性脂肪酸的测定一、GC（Gas chromatograph）工作条件仪器：GC-14B型气相色谱仪（日本岛津公司）毛细柱：NUKOLTM Capillary Column ( Supelco )；Column No.34292-07B30m×0.32mm×0.25μm film thickness气相色谱仪参数：色谱柱采用毛细吸管柱，柱温130℃，汽化温度180℃，采用氢离子火焰检测器，检测温度180℃，载气为氮气，压力为60 KPa，氢气压力为50 KPa，氧气压力50 KPa，灵敏度（档）为101，衰减 3.0二、样品制备1．试剂制备（1）配制25%w/v 的偏磷酸溶液，将25g偏磷酸溶在100mL双蒸水中（2）巴豆酸的配制，在100ml的偏磷酸溶液中加入0.6464g的巴豆酸，定容到100mL。
（可先用80 ml双蒸水，加热溶解偏磷酸，然后定容至100 ml）（3）标准样品，准确称取色谱标准级乙酸0.9100 g、丙酸0.3700 g、丁酸0.1765 g、异丁酸0.1765g、戊酸和异戊酸分别为0.1985g，分别溶于双蒸水中，再各自定容至100 mL。
2．样品制备(1) 发酵液取（或过滤瘤胃液）VFA测定1ml样品到离心管中，再加入0.2 ml的偏磷酸巴豆酸混合溶液，－20℃冰箱保存过夜，解冻后12000rpm离心5min，取上清液保存，测定前再12000rpm离心5min(或少许通过0.22μm针式滤器，滤液直接进样用 1.0微升微量进样器瞬时注入色谱仪，进样量为0.2－1.0μL。
(2) 食糜及粪样VFA测定取1g置于离心管中，加入5－10倍的双蒸水，混合均匀。
取1mL上清夜，加偏磷酸巴豆酸0.2mL/mL。
其它步骤同上。
3．保留时间的确定与样品处理相同，在 1 ml标准样品中加入0.2mL偏磷酸与巴豆酸的混合样，上样测出乙酸、丙酸、丁酸、异丁酸、戊酸和异戊酸的保留时间。
VFA（挥发酸）的做法试剂：0.1N NaOH溶液、10%磷酸溶液、0.5%酚酞指示剂。
做法：(1) 取500mL原液；(2) 取50mL样品加入500mL烧瓶中，加入6mL磷酸（10%），加入300mL蒸馏水；(3) 连接好设备加热，直到蒸出300mL蒸馏液；(4) 蒸馏液加入3滴酚酞，用NaOH滴定，记录数：挥发酸(mg/L)=(V-C)*V1*60*1000/50备注：V---滴定数；V1—NaOH浓度；C----空白数配制0.1N NaOH溶液带着小烧杯、NaOH、500ml容量瓶一张滤纸去直接用小烧杯测2.08gNaOH，用蒸馏水稀释一下倒进容量瓶，继续稀释倒进容量瓶，直到刻度即可。
0.5%酚酞指示剂的配制方法：①0.5g 酚酞溶于75mL体积分数为95%的乙醇中，并加人20mL水，然后再加入约0. lmol/L的氢氧化钠溶液，直到加入一滴立即变成粉红色，再加入水定容至l00ml （GB604 酸碱指示剂pH变色域测定通用方法时使用的配制方法，用来测定酚酞的显色范围的）②1g酚酞, 溶解于100mL95％的乙醇（GB603用来做酸碱滴定用）网上其他的VFA 的测定方法常见的VFA 测定方法有滴定法和气相色谱法。
由于条件限制，本实验采用滴定法。
滴定法的原理是将废水以磷酸酸化后，从中蒸发出挥发性脂肪酸，再以酚酞为指示剂用NaOH 溶液滴定馏出液。
废水中的氨态氮可能对测定形成干扰，因此应当首先在碱性条件下蒸发出氨态氮。
药品:a.10%NaOH 溶液;b.NaOH 标准溶液，O.1000mo1/L;c.10%磷酸溶液，取70m1密度1.7g/cm ，的磷酸用水稀释至1L;d.酚酞指示剂。
测定步骤:于蒸馏瓶中放入50～200m1的待测废水，其VFA 含量不超过30mmo1。
如水体积不足100m1，可以蒸馏水稀释至100m1。
放入几滴酚酞指示剂。
（我一般用100ml ） 加入10%NaOH 溶液，使溶液成碱性，并使NaOH 略过量。
挥发性脂肪酸的测定挥发性脂肪酸〔VFA〕的测定一般来说,碳原子数在10以下的脂肪酸大局部具有挥发性,并且易溶于水.在它们中间,随着碳原子数的增加,挥发性逐渐下降.典型的挥发酸见下表：低级脂肪酸的分子式及沸点挥发性脂肪酸易被微生物利用.在有机物的厌氧分解中,挥发性脂肪酸是作为生物代谢的中间或最终产物而存在.在厌氧发酵的液化产酸阶段,这一类低级脂肪酸是这一阶段的主要产物,其中以乙酸为主.在某种条件下,乙酸可以到达该类酸总量的80%.在CH4形成过程中,甲酸和乙酸是形成甲烷的重要前体物.据研究,自然界有机物产生的CH4中大约有70%上由乙酸中的甲基原子团形成的.丙酸、丁酸可以转化成甲酸.有机酸过多往往反映出发酵池的病态.因此可以认为,在微生物厌氧发酵过程中,挥发性脂肪酸不仅是一种不可缺少的营养成分,更重要的意义在于这类有机酸已是沼气发酵研究有机物降解工艺条件优劣的重要参数,在甲烷形成的研究和生产中,它们的含量也是重要的参数.挥发性脂肪酸的测定在挥发性脂肪酸的总量测定中,是以乙酸作为基数进行计算,除了要求测定总量外,对甲酸、乙酸等各种低级脂肪酸的分别定量分析也是十分重要的.中文名磷酸爆由22七英文名Phospharicacid沸£261+C一、滴定法测VFA1、原理将废水酸化后,从中蒸储出挥发性脂肪酸,再以酚醐为指示剂用氢氧化钠滴定储出液.废水中的氨态氮先在碱性条件下蒸储出.2、仪器：50ml碱式滴定管、锥形瓶、带磨口的具支蒸储烧瓶(500ml)、与烧瓶配套的蛇形冷凝管、橡胶导管、电炉试齐I」：(1)10%氢氧化钠：10g氢氧化钠溶于水,稀至100ml.(2)10%磷酸溶液：取70ml浓磷酸稀释至1L.(3)酚醐指示剂：称取0.5g酚醐溶于50ml95%的乙醇中,用水稀释至100ml.(4)氢氧化钠标准溶液(0.1000mol/L):称取60g氢氧化钠溶于50ml水中,转入聚乙烯瓶中静置24h以上,吸取上层清夜约7.5ml置于1000ml容量瓶中,稀释至标线,摇匀.称取在105-110C枯燥过的基准试剂(邻)苯二甲酸氢钾约0.5g(称准至0.0001g),置于250ml锥形瓶中,加无二氧化碳水100ml挥发性脂肪酸的测定使之溶解,参加4滴酚醐指示剂,用待标定的氢氧化钠标液滴定至浅红色为终点,同时,用无二氧化碳水做空白滴定.氢氧化钠标准溶液浓度〔mol/L〕=MX1000/[〔V1-V0〕x204.23]式中：m-称取苯二甲酸氢钾的质量〔g〕;V0-滴定空白时所耗氧氧化钠标准溶液体积〔ml〕;V1一滴定苯二甲酸氢钾时所耗氢氧化钠标准溶液的体积〔ml〕;204.23一苯二甲酸氢钾的摩尔质量〔g/mol〕.3、测定步骤：〔1〕于蒸储烧瓶中参加100ml待测水样,几粒玻璃珠,参加几滴酚醐指示剂,然后参加10%€氧化钠溶液使使水样呈碱性〔溶液出现红色〕,并使氢氧化钠略过量.〔2〕翻开冷凝水,开始蒸储,蒸储至瓶中液体为50〜60ml,〔如果测定氨氮,那么可用50ml硼酸吸收储出液.如果不,可倒掉.〕〔3〕参加约40〜50ml蒸储水,参加10ml10%^酸酸化,在接受瓶中参加10ml蒸储水,将冷凝管插入液面下,蒸储至瓶中液体为15~20ml.待冷却后,参加50ml蒸储水继续蒸储,至瓶中剩余液体10〜20ml止.〔4〕向储出液中参加10滴酚醐指示剂,用氢氧化钠标液滴定至氮淡粉红色不消失止,记录用量.计算：挥发酸〔VFA〔mg/l〕=〔V3-V4〕xNX60x1000/V5挥发性脂肪酸的测定式中:VT滴定样品日t所消耗的NaOK升数;V4一滴定空白时所耗的NaOK升数；V5-取样量(ml);N-NaO聆液的浓度(mol/L);60一乙酸的分子量.考前须知：(1)蒸储前翻开冷凝水；(2)冷却时,把接受瓶移开,以免倒吸；。
油和脂肪中的〔挥发性〕酸化学分析方法挥发性酸（volatile fatty acids, VFAs）是一类在油和脂肪中常见的有机酸，由于其具有较强的气味和对产品品质的影响，因此在食品和化妆品行业中，对挥发性酸的含量进行分析具有重要的意义。
下面将介绍两种常用的化学分析方法：蒸馏法和气相色谱法。
一、蒸馏法蒸馏法是一种常用的分析挥发性酸的方法，它主要包括以下步骤：1.将待测样品加入适量的蒸馏水，并用酸或碱调整样品的pH值，以确保挥发性酸被完全释放。
2.将样品放入蒸馏器中，并通过加热使样品蒸发。
3.蒸发的挥发性酸进入冷凝管，在凝结器中冷却成液体。
4.收集液体样品，并用适当的溶剂稀释和调整pH值。
5.采用酸碱滴定或色谱等方法对挥发性酸进行定量分析。
蒸馏法的优点是简单、容易操作，但存在一定的局限性，如需要大量的试剂和设备，无法同时分析多种酸，对挥发性酸的分析结果具有一定的误差。
二、气相色谱法气相色谱法是目前应用较广泛的分析挥发性酸的方法，它主要包括以下步骤：1.将待测样品溶解在适当的溶剂中。
2.通过冷冻离心分离样品中的固体和杂质。
3.将清澈的样品溶液注入气相色谱仪中。
4.在气相色谱仪中，样品被注入进入进样口，进入色谱柱进行分离。
5.经过分离的挥发性酸进入检测器进行检测，并根据检测结果进行定量分析。
气相色谱法具有高灵敏度、高分辨率和高精确度的特点，能够同时分析多种酸，且分析结果可靠。
但气相色谱法的设备和试剂成本较高，对操作人员的技术要求也较高。
总之，通过蒸馏法和气相色谱法可以对油和脂肪中的挥发性酸进行分析。
选择何种方法需要考虑实际需求、分析目的和实验条件等。
食品中挥发性脂肪酸的检测与分析研究食品安全一直是人们关注的焦点，而挥发性脂肪酸作为食品中的一种常见成分，对食品的品质和安全具有重要影响。
因此，食品中挥发性脂肪酸的检测与分析研究成为了食品科学领域的热门话题。
挥发性脂肪酸是一类易于蒸发和呈挥发性的脂肪酸，常见于植物和动物的食物中。
它们不仅对食物的气味和口感产生影响，还与食品的储存寿命和品质相关。
因此，准确检测和分析食品中的挥发性脂肪酸成为了重要而复杂的研究课题。
当前，食品中挥发性脂肪酸的检测与分析主要采用气相色谱-质谱联用技术（GC-MS）。
该技术以高灵敏度和高分辨率的优势，可以对食品中的挥发性脂肪酸进行准确的定性和定量分析。
一般来说，检测食品中的挥发性脂肪酸需要将食品样品提取出脂肪酸，然后通过衍生化反应将其转化为能够通过GC-MS分析的适当形态，并使用该技术进行定性和定量分析。
这种方法在食品行业中得到了广泛应用，并为食品质量控制和安全监测提供了可靠的技术支持。
食品中挥发性脂肪酸的检测与分析不仅有助于评估食品质量，还能为食品加工和存储提供科学依据。
通过检测和分析食品中的挥发性脂肪酸，可以判断食品是否存在质量问题，比如过氧化脂质、酸败、腐败等。
此外，挥发性脂肪酸的检测还有助于研究食品的保存条件和贮存期，并找到延长食品寿命的方法。
因此，挥发性脂肪酸的检测与分析研究具有重要的实际意义和应用价值。
然而，食品中挥发性脂肪酸的检测与分析也面临着一些挑战。
首先，不同食品中的挥发性脂肪酸种类和含量各不相同，需要针对不同的食品样品进行专门的提取和分析方法优化。
其次，挥发性脂肪酸的提取和衍生化反应过程中，存在着化学反应速率、催化剂选择等技术难题，需要克服。
此外，食品中的复杂基质和其他成分也会对挥发性脂肪酸的检测和分析产生干扰，需要进一步优化样品处理方法。
因此，针对食品中挥发性脂肪酸的检测与分析研究仍面临着一系列的挑战与难题。
为解决这些挑战，科学家们正在不断研究和改进挥发性脂肪酸的检测与分析技术。
挥发性脂肪酸（VFA）的测定一般来说，碳原子数在10以下的脂肪酸大部分具有挥发性，并且易溶于水。
在它们中间，随着碳原子数的增加，挥发性逐渐下降。
典型的挥发酸见下表：低级脂肪酸的分子式及沸点挥发性脂肪酸易被微生物利用。
在有机物的厌氧分解中，挥发性脂肪酸是作为生物代谢的中间或最终产物而存在。
在厌氧发酵的液化产酸阶段，这一类低级脂肪酸是这一阶段的主要产物，其中以乙酸为主。
在某种条件下，乙酸可以达到该类酸总量的80%在CH4形成过程中，甲酸和乙酸是形成甲烷的重要前体物。
据研究，自然界有机物产生的CH4中大约有70%上由乙酸中的甲基原子团形成的。
丙酸、丁酸可以转化成甲酸。
有机酸过多往往反映出发酵池的病态。
因此可以认为，在微生物厌氧发酵过程中，挥发性脂肪酸不仅是一种不可缺少的营养成分，更重要的意义在于这类有机酸已是沼气发酵研究有机物降解工艺条件优劣的重要参数，在甲烷形成的研究和生产中，它们的含量也是重要的参数。
在挥发性脂肪酸的总量测定中，是以乙酸作为基数进行计算，除了要求测定总量外，对甲酸、乙酸等各种低级脂肪酸的分别定量分析也是十分重要的。
中文名磷酸榕点22英文名Phospharicacid 狒点261+C一、滴定法测VFA1、原理将废水酸化后，从中蒸馏出挥发性脂肪酸，再以酚酞为指示剂用氢氧化钠滴定馏出液。
废水中的氨态氮先在碱性条件下蒸馏出。
2、仪器：50ml碱式滴定管、锥形瓶、带磨口的具支蒸馏烧瓶 (500ml)、与烧瓶配套的蛇形冷凝管、橡胶导管、电炉试剂：(1) 10%氢氧化钠：10g氢氧化钠溶于水，稀至100ml。
(2) 10%磷酸溶液：取70ml浓磷酸稀释至1L。
(3) 酚酞指示剂：称取0.5g酚酞溶于50ml 95%的乙醇中，用水稀释至100ml。
(4) 氢氧化钠标准溶液(0.1000mol/L):称取60g氢氧化钠溶于50ml水中，转入聚乙烯瓶中静置24h以上，吸取上层清夜约7.5ml 置于1000ml 容量瓶中，稀释至标线，摇匀。
气相色谱法快速测定牛奶中脂肪酸
林秋萍;李瑾;冯书惠
【期刊名称】《食品科学》
【年(卷),期】2005(026)008
【摘要】牛奶中高级脂肪酸经甲酯化后,利用气相色谱法测定,结果表明十二碳以上的长链脂肪酸的线性范围好,相关系数为r=0.9991以上,回收率在89.0%～109%之间.方法简便,快速.
【总页数】3页(P346-348)
【作者】林秋萍;李瑾;冯书惠
【作者单位】农业部农产品质量监督检验测试中心(郑州),河南,郑州,450002;农业部农产品质量监督检验测试中心(郑州),河南,郑州,450002;农业部农产品质量监督检验测试中心(郑州),河南,郑州,450002
【正文语种】中文
【中图分类】TS252.1
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气相色谱法测定污泥酸化水解工程中产生的挥发性脂肪酸邵永怡【摘要】介绍了用气相色谱法测定污泥酸化水解工程中产生的挥发性脂肪酸的方法,包括样品前处理方法、测定时的pH值和色谱条件.在此基础上进行了实际样品的测定,同时进行了加标回收率、标准偏差和CV值的检验.实践证明,此方法速度快、操作简便、准确性高,所测定结果与理论值符合较好.这种方法能够很好地应用于污水处理厂污泥酸化水解工艺,检测污泥中的挥发性脂肪酸.【期刊名称】《分析仪器》【年(卷),期】2008(000)006【总页数】4页(P15-18)【关键词】挥发性脂肪酸;气相色谱法;污泥;酸化水解【作者】邵永怡【作者单位】北京城市排水集团水质检测中心,北京,100124【正文语种】中文【中图分类】TH741 前言挥发性脂肪酸(volatile fatty acids，VFA)，是污水处理厂酸化水解处理过程的最终产物。
其检测原理是，利用兼性菌和厌氧菌的酸化水解作用，将复杂的非溶解性聚合物转化为简单的溶解性物质，实现对污泥的处理。
污泥聚合物中的主要成分是淀粉和纤维素，在酸化水解过程中被分解为葡萄糖(分子式为C6H12O6)，葡萄糖在酶的作用下最终被降解为VFA。
它的主要成分是乙酸、丙酸、丁酸和戊酸，它们是反映污泥酸化水解效果的重要参数[1]。
但是，传统的常量分析法只能测定脂肪酸的总含量，无法对VFA的各种成分进行测定。
现代气相色谱法是普遍应用于各种有机成分测定的快速准确的方法。
近年来，污水中的VFA的气相色谱检测有所报道，但关于污泥VFA测定未见报道。
本文根据污水处理厂工作的需要，研究了酸化水解污泥样品中VFA气相色谱测定的前处理方法，同时通过一系列实验，确定了测定污泥VFA的色谱条件，并在污水处理厂酸化水解过程中污泥样品的VFA测定中作了实际应用。
2 实验部分2.1 仪器及工作条件Varian公司CP3800气相色谱仪。
色谱条件：玻璃柱(2m×3mm)： GDX担体： 10%PEG-20M+磷酸/C.W.D(80～100目)固定相。
