铁皮石斛的组培及污染处理技术

铁皮石斛种苗组培实施方案铁皮石斛（Dendrobium）是一种重要的兰科植物，具有多种药用价值，被广泛用于中药材生产和养生保健。

其种苗组培是一种快速繁殖的方法，可以大大提高植物的繁殖效率和质量。

下面将介绍铁皮石斛种苗组培的实施方案。

一、材料准备1. 无菌种子：选择外观完整、无病害的铁皮石斛种子。

2. 培养基：配制适合铁皮石斛生长的培养基，包括营养物质、植物生长调节物质等。

3. 器具：培养瓶、无菌操作台、无菌手套、无菌培养室等。

二、种子消毒1. 将铁皮石斛种子浸泡于75%酒精中消毒5分钟，然后用无菌水冲洗3次。

2. 将种子浸泡于含有0.1%过氧化氢的无菌水中消毒20分钟，然后用无菌水冲洗3次。

3. 最后将种子浸泡于含有0.1%漂白粉的无菌水中消毒15分钟，然后用无菌水冲洗3次。

三、组培操作1. 在无菌操作台上进行操作，先将培养瓶中的培养基加热至121摄氏度，压力15磅，持续20分钟，使其无菌化。

2. 将消毒处理好的种子移入无菌培养瓶中，每瓶放入适量的种子。

3. 将培养瓶密封，放入无菌培养室中，温度控制在25-28摄氏度，光照强度控制在3000-5000勒克斯，光照时间为12小时。

四、生长管理1. 定期观察种苗生长情况，发现有病虫害立即进行处理。

2. 每隔一周更换一次培养基，保持培养基的新鲜和养分充足。

3. 控制培养室的温度、湿度和光照，提供良好的生长环境。

五、移栽1. 当种苗长到一定高度时，可以进行移栽。

将种苗移入含有适量营养物质的培养基中，继续进行培养。

2. 移栽后继续进行生长管理，直至种苗长成成熟植株。

通过以上实施方案，可以实现铁皮石斛种苗的组培繁殖，提高植物繁殖效率，为铁皮石斛的种植生产提供了可行的技术方案。

希望这些内容对您有所帮助。

铁皮石斛组培苗驯化移栽技术铁皮石斛是一种名贵的中药材，其功效在中医学中被广泛地应用，其价值也随之显现。

因此，对铁皮石斛的栽培技术也越来越重视。

本文将介绍铁皮石斛组培苗的驯化和移栽技术。

1.1 原料选择最好的组培苗原料应该是从皮培苗中选择获取的。

当然，也可以从鳞茎或者幼苗中产生。

但是，由于果园栽培中的种子不太适合组培，因为它经过了处理，可能会影响组培过程，所以建议使用来自自然生长环境的石斛作为组培的原料。

1.2 培养基的配制铁皮石斛的组培需要特定的培养基配方。

通常，最适合的配方为MS基础培养基（Murashige和Skoog，1962年）和B5基础培养基（Gamborg等，1968年）。

常见的培养基成分为植物生长素和愈伤组织生长素。

不同的组合将产生不同的效果。

在这里，我们建议使用进行MS培养（高含量5-10mg / L）和B5基础培养（高含量3-4mg / L）。

1.3 组培过程一般来说，组培过程包括四个阶段：准备工作、预处理、培养和移栽。

具体的组培步骤如下：准备工作：在取材前，需要准备所需的设备和材料（如培养瓶，培养基，工具等），并消毒处理。

接着，将原料表面去除，洗净后用微型刀进行分离和处理。

预处理：首先，在含有10%的漂白水中去除微生物和细胞外污染。

接着，在401液中预处理组织，以去除竹酸（C6H5COOH）的抑制性效果。

然后，进行快速冷却处理，以促进未成熟状态。

培养：将预处理好的组织放入含有所需浓度培养基的培养瓶中，以确保其生长。

对于ICPMS营养元素分析，建议使用60种元素培养液。

需要注意的是，组培过程中对于温度、湿度的控制及光照的安排均需要重视。

移栽：在成熟之后，使用盆栽对其进行移栽。

移栽是铁皮石斛组培苗的一个重要步骤。

为了确保铁皮石斛组培苗的存活率和分化率，需要针对情况进行不同分析，来选择不同的移栽方案。

2.1 种植土的选择铁皮石斛的种植土依个体的存活情况和分化程度而定，一般可选用有机泥炭土或者复合基质。

铁皮石斛组培苗移栽技术与病虫害防治一、石斛论述（一）紫皮石斛Den.devonianum Paxt学名：齿瓣石斛附生植物。

茎悬垂，细圆柱形，长可达1.5米，具多节。

叶薄纸质，狭卵状披针形，长8—13厘米，先端渐尖；叶鞘常具紫红色斑点。

总状花序侧生于落叶茎上，具1—2花；花茎4—5厘米，花白色，先端有淡紫色晕；花瓣卵形，长2.5厘米；萼片披针形，唇瓣近圆形，唇瓣基部两侧有2个黄色斑块，边缘具有缘毛，两面密被短柔毛；蕊柱白色，两侧具紫色条纹。

花期4—5月，持续约2周。

紫皮石斛要求生长环境湿润而又不能处于过湿的水分中，其适宜的生长温度为18℃—22℃，适宜空气湿度55°—75°，在我国生长于海拔500—1800米的山地落叶林中树干上。

（二）铁皮石斛Den.officnaleKimura et Migo.[Syn:Den.candidum]别名黑节草。

附生植物。

茎直立，圆柱形，长9—35厘米，粗2—4毫米，具多节。

叶鞘带肉质，矩圆状披针形，长3—7厘米，宽0.9—2厘米，先端钝。

花序生于落叶茎的上部，长2—4厘米，具2—3花；花茎1.5—2厘米，萼片与花瓣淡黄绿色或白色；唇瓣白色，卵状披针形，上半部具有一个紫色斑块，下部两侧具有紫红色条纹；唇盘上密被乳突状短柔毛，基部有1枚绿黄色胼胝体。

花期3—6月。

铁皮石斛要求生长环境湿润而又不能处于过湿的水分中，其适宜的生长温度为20℃—25℃，适宜空气湿度55°—75°，主要分布在海拔500—1600米的山谷半阴湿林中树上或林缘岩石上。

二、价值千金的药中黄金草石斛为中药材中的极品，应用历史悠久。

唐开元年间的道家经典《道藏》曾把铁皮石斛、天山雪莲、千年人参、百年首乌、花甲茯苓、深山灵芝、高山苁蓉、海底珍珠、冬虫夏草列为“中华九大仙草”，铁皮石斛位居首位，唐宋以来的历代皇帝都把铁皮石斛列为贡品，民间称之为“救命仙草”。

过去，山多地少的山区人民生活十分贫困，村人无钱买药，多靠野生石斛来治疗各种疑难杂症，采集仙草石斛也是主要的谋生手段。

铁皮石斛栽培技术铁皮石斛（Dendrobium officinale）是一种珍贵的中药材，具有重要的药用价值。

在中国，它被广泛种植和使用。

为了确保高品质的铁皮石斛的生产，农民们需要掌握正确的栽培技术。

本文将介绍铁皮石斛的栽培技术，包括育苗、营养管理、病虫害防治等方面。

一、铁皮石斛的育苗1. 种子选用：种子应选用完整、成熟的铁皮石斛种子。

种子选择是确保高质量苗木的第一步。

2. 种子消毒：将种子放入2%的福尔马林溶液中浸泡30分钟，然后用清水冲洗干净，以避免病菌感染。

3. 播种方法：可以选择用多孔盆或穴盘进行播种。

播种前，将盆或穴盘用土壤消毒液进行处理，保证良好的环境。

4. 基质准备：可选用腐殖土、泥炭和珍珠岩等材料混合作为基质，以提供良好的透气性和水分保持能力。

5. 播种与管理：将种子均匀撒在基质表面，覆盖一层薄薄的培养土，并保持适当湿润。

置于光照充足、温度适宜的环境下，每天喷水保持土壤湿润。

约15-20天后，种子开始发芽。

二、铁皮石斛的营养管理1. 光照需求：铁皮石斛喜欢光照充足的环境。

在秋冬季节，可以增加光照时间，利用人工光源补充光照。

2. 温度要求：铁皮石斛对温度要求较高，适宜的生长温度为20-30摄氏度。

夏季高温时，要注意给植株提供降温的措施。

3. 水分管理：铁皮石斛喜欢湿润的环境，但过量的水分会导致根系腐烂。

应根据天气情况合理浇水，保持土壤湿润但不积水。

4. 施肥技巧：在生长季节，每隔2-3周施一次稀薄的有机肥料。

避免过量施肥，以免造成肥料积累和植株生长不良。

三、铁皮石斛的病虫害防治1. 病害防治：常见的病害有灰霉病、红蜘蛛等。

应注意及时清除草丛和杂草，保持通风良好。

出现病害时，可使用合适的农药进行喷洒治疗。

2. 害虫防治：害虫包括蚜虫、螟虫等。

可以使用合适的杀虫剂进行喷洒防治。

同时，定期检查植株，及时发现并清除害虫。

通过合适的育苗、营养管理和病虫害防治，铁皮石斛的栽培可以获得较高的产量和质量。

铁皮石斛组培技术介绍铁皮石斛的组织培养技术，大都以茎段、根尖、原球茎、茎尖和种胚等为外植体。

除了固体培养外，近几年来还出现了铁皮石斛液体悬浮培养。

一、铁皮石斛组培技术（1）茎段培养1.培养条件2.取材与消毒从铁皮石斛植株上切下长2～5cm的幼嫩茎段，在流水下冲洗，用刷子蘸少许洗衣粉水溶液轻轻刷洗，并经自来水充分洗净。

在超净工作台上将茎段放置在75%的酒精中消毒30s后，再用0.1%的HgClz 水溶液浸泡8～10min，无菌水冲洗5～6次。

3.诱导培养用解剖刀将铁皮石斛的幼嫩茎段切下，接种在诱导培养基①中进行培养。

15～20天后，外植体开始萌动，茎段膨大，切面及顶部组织形成疏松组织。

继续培养20天后，转入培养基②中，切面及顶部膨大组织的表面形成凹凸不平的颗粒物，随着培养时间的延长，颗粒物长大形成直径1～2mm的类原球茎颗粒物。

4.增殖培养将诱导形成的原球茎转入到增殖培养基中，原球茎增殖速度很快，增殖倍数可达3～4倍，同时部分原球茎开始分化出芽点并长出1～2片小叶，原球茎的增殖与芽分化同时进行。

5.生根培养待增殖芽数量较多时，将高1～2cm、带有2～3片叶的小芽切下转入生根培养基上进行生根培养。

培养30天左右，基部开始出现2～3条约1cm长的白色根，随后逐渐伸长，生根率达到90%以上。

6.出瓶苗的过渡管理当苗高3cm以上、具3～4片叶时，便可出瓶移栽。

移栽前，将生根瓶苗打开瓶盖，移至常温下炼苗7天，然后将瓶苗取出，洗去附着在根部的培养基，用0.01%的高锰酸钾溶液浸泡8～10min，栽种于已灭菌的碎树皮基质中(移栽前浇透水)，放置在遮光度50%～60%、湿度达80%以上的温室中，2 个月后，成活率达90%以上。

（2）种子培养(胚培养)取人工授粉的铁皮石斛果实，用75%的酒精表面消毒，30秒后再用0.1%升汞消毒8分钟，无菌水冲洗4—5次。

在无菌操作下，把果实切成0.1mm方块，接种到培养基上，每瓶3—5块。

铁皮石斛组培苗驯化移栽技术铁皮石斛是一种珍贵的中草药材，具有极高的市场价值和药用价值。

为了满足市场需求，提高铁皮石斛的生产量和品质，组培苗驯化移栽技术成为关键。

一、组培苗繁殖技术组培是指从植物的体细胞、组织或器官中，在无菌环境下培养成植株的一种技术。

组培苗有良好的一致性和规格性，便于发扬遗传育种作用，提高植物生产效益。

1. 选取无病、无虫、无害虫危害的铁皮石斛茎段或赘生物作为组织培养的材料，并在无菌条件下进行处理。

2. 将茎段或赘生物表皮去除，切成约0.5cm的小段，经无菌条件下的壮苗培养、增殖培养后得到一定量的快速增殖组织。

3. 将增殖组织移入悬浮液或凝胶中，经愈伤组织诱导、悬浮培养、分化培养，得到大量组培苗成活率达80%以上。

组培苗的快速生长对于移栽是非常有利的，但过快的生长也会造成苗期管理难度和移栽后的生长不良。

因此，必须对组培苗的生长进行调控。

1. 光照与照明光照充足有利于组培苗的生长，但过强光照会使组培苗叶片掉水、老化，影响其生长。

组培苗生长需要提供人工光源，照明应充分使用光照周期，例如12/12小时的光照。

2. 适宜温度不同植物对温度的适应性不同。

在组培苗培养中，应根据铁皮石斛生长喜好选择适宜的温度。

保持适宜温度是组培苗健康生长的基本保证。

3. 营养素供应组培苗营养充足是快速增长的重要保障。

组培苗生长需要提供适宜的培养基及养分配制。

可以通过添加植物生长调节剂、有机氮肥等方式，为组培苗提供充足的营养。

组培苗移栽是组培苗技术的最后一步，也是最关键的一步。

组培苗经过一系列处理的苗木，笔者建议采用“半雾化法”移栽。

1. 前期准备准备约5mm*5mm的生石灰渣团作为基质，以铁皮石斛为例，将铁皮石斛盆栽移于干燥通风处进行3天预养。

2. 操作步骤(1) 取出组培苗，将培养基从根部彻底洗掉，将根露出，除去老化和畸形部分，形成整齐鲜活、外形正常、完整的组培苗。

(2) 取适量的生石灰渣，加入适量的水，混合均匀，使其平均含水率达到60%~70%。

铁皮石斛的组织培植简介铁皮石斛（Dendrobium officinale）是一种珍贵的中药材，被公认为具有滋补养生的功效。

由于其野生资源减少，组织培植成为了其繁殖的重要途径。

本文将介绍铁皮石斛的组织培植方法，用于指导相关研究和实践。

材料与方法1. 无菌实验室条件：培养室温度为25℃，相对湿度为60%-70%，光照强度为3000-4000lx。

2. 培养基配方：- MS培养基：含有葡萄糖（30g/L）、琼脂（8g/L）、pH值调整到5.8。

- 添加生长调节剂：添加6-苄氨基酸（0.1mg/L）和吲哚-3-乙酸（0.5mg/L）。

过程1. 选取健康无病的铁皮石斛茎段作为外植体，将其进行消毒处理。

使用70%酒精浸泡2分钟，随后用0.1%高锰酸钾溶液浸泡10分钟，最后用无菌蒸馏水冲洗3次。

2. 切取消毒后的茎段偏上部位的小芽组织，每个芽组织含有1-2个小芽。

3. 将切取的芽组织置于含有MS培养基和生长调节剂的培养瓶中。

4. 培养瓶密封并置于培养室中，进行组织培养。

每周移植一次，移至新的含有培养基的培养瓶中。

结果与讨论经过适当的组织培养时间，铁皮石斛的小芽可以快速生长并分化出根系。

在合适的培养条件下，每个芽组织可以发育成为整株植物，从而实现大规模繁殖。

值得注意的是，在铁皮石斛的组织培植过程中，应加强对培养基和环境条件的控制。

培养基中添加的生长调节剂和孕育液质量对结果有重要影响。

同时，无菌操作的严格执行也是保证培植过程成功的关键。

结论铁皮石斛的组织培植方法是一种有效的繁殖途径，能够满足市场需求，并促进可持续发展。

通过合理控制培养基配方和环境条件，可以实现铁皮石斛的大规模繁殖与种植，为相关产业的发展提供有力保障。

这一研究对于进一步深入了解铁皮石斛的生物学特性和开发利用具有重要意义。

铁皮石斛组培苗驯化移栽技术铁皮石斛是一种极具药用价值和观赏价值的兰科植物，由于其在生长过程中对环境条件的要求比较苛刻，使得铁皮石斛的繁殖和栽培工作变得相对困难。

组培苗是一种在人工环境下培植的植物幼苗，通过组培苗技术可以有效地提高铁皮石斛的繁殖速度和存活率，使得铁皮石斛更容易被大规模栽培和传播。

1.材料准备铁皮石斛种子、无菌工作舱、无菌罐、培养基、植物生长调节剂等。

2.种子消毒将铁皮石斛种子进行外层消毒处理，使用75%的乙醇对种子进行表面消毒，消毒时间为3-5分钟。

3.培养基准备将所需的培养基成分按照一定比例混合搅拌均匀，再进行高压灭菌处理，以保证培养基的无菌状态。

4.种子播种将消毒后的铁皮石斛种子均匀撒播在准备好的无菌培养基上，然后将无菌培养基和种子一起装入无菌罐内，进行培养。

5.培养条件将装有种子的无菌罐放入无菌工作舱内，控制适宜的温度、光照和湿度等条件，促进种子的萌发和生长。

6.生长调节剂处理在种子萌发和生长过程中，可以添加适量的植物生长调节剂，以促进组织分化和增加苗木成活率。

1.温室适应期当铁皮石斛组培苗生长到一定阶段后，需要将其从无菌环境中取出，放入温室中逐渐适应外界环境条件，这个过程需要持续一段时间，以确保组培苗顺利过渡到自然环境中。

2.土壤驯化铁皮石斛组培苗在温室适应期结束后，可以将其移植到培土中进行土壤驯化。

选择适宜的培土，如沙壤土或腐殖质土，调节土壤的酸碱度和养分含量，促进组培苗的生长。

3.养护管理在土壤驯化阶段，需要加强对铁皮石斛组培苗的养护管理工作，包括及时浇水、施肥、防治病虫害等，确保组培苗能够顺利生长。

1.移栽时机选择在春季或秋季气温适宜、湿度较大的时候进行移栽，有利于组培苗的生长和成活。

2.移栽方法将驯化好的铁皮石斛组培苗小心地取出培土，植株留心不要受到损伤，然后将植株移植到准备好的地块或盆土中，将根系埋入土壤中，然后轻轻拍实土壤，最后浇适量水。

经过组培苗制备、驯化和移栽，铁皮石斛可以成功地进行大规模繁殖和栽培。

铁皮石斛的组织培养技术简介铁皮石斛（Scientific name: Dendrobium officinale），是一种珍贵的药用植物，在中医药中有着悠久的历史和广泛应用。

铁皮石斛的组织培养技术是指利用无菌培养方法，通过细胞分裂和再生，培育大量优质的植株，以满足人们对铁皮石斛的需求。

本文将介绍铁皮石斛的组织培养技术的基本步骤和注意事项。

步骤1. 选择合适的外植体材料：铁皮石斛的外植体材料通常选取新鲜的茎段、叶片或花轴，并确保这些材料来自无病虫害的植株。

2. 表面消毒处理：将收集到的外植体材料进行表面消毒处理，常用的消毒剂包括漂白粉和酒精。

消毒时间和浓度应根据不同的外植体材料进行调整。

3. 建立无菌培养基：制备含有适当激素和营养物质的无菌培养基。

常用的基本培养基是MS培养基和B5培养基。

可以根据实验需要调整培养基的成分和浓度。

4. 培养和增殖：将表面消毒后的外植体材料放入含有适当培养基的培养瓶中，并置于暗室或恒温箱中进行培养。

光照和温度是影响铁皮石斛组织培养的重要因素，应根据植物的生长性进行调控。

5. 分化和再生：通过植物激素的投入和适当调控培养条件，促使外植体材料分化和再生成优质的铁皮石斛植株。

这一步骤往往需要持续几个月到数年的时间。

注意事项1. 保持无菌条件：组织培养需要在无菌条件下进行，以避免外源病原微生物的污染。

实验器具、培养基和操作环境必须经过严格的消毒和无菌处理。

2. 控制培养基成分和浓度：培养基的成分和浓度对植物的生长和分化起着重要的影响，需要根据不同的外植体材料和培养阶段进行合理的调整。

3. 确保适当的光照和温度：铁皮石斛对光照和温度有一定的要求，光照不足或温度过高都会影响植物的生长和分化。

应根据植物的生理特性，设置合适的光照和温度条件。

4. 定期检查和处理：组织培养过程中，应定期检查植株的生长状态和培养基的污染情况，并采取适当的措施处理。

需要及时除去培养瓶内的污染物，以保证植株的健康生长。

学院：生命科学与技术学院专业：农学学号：2姓名：曾通明指导老师：薛春丽铁皮石斛愈伤组织诱导培养中的污染问题曾通明（红河学院生命科学与技术学院，云南蒙自661100）摘要以铁皮石斛无菌苗的茎段作为外植体，讨论MS培养基中添加不同浓度的激素对铁皮石斛的诱导、增殖、分化以及生根的影响。

结果表明：最适合铁皮石斛茎段根诱导的培养基为MS+IBA 1.5 mg/L+香蕉汁100 g/L。

同时以铁皮石斛愈伤组织培养快速繁殖过程中出现了各种污染，并以此为对象, 分析污染发生的原因, 研究对此应采取的控制措施。

结果表明: 外植体的消毒灭菌程度和接种过程中是否存在有菌环境等是引起污染的主要因素，而细菌和真菌是引起污染的次要因素; 污染在组织培养的每一步骤都会发生; 注重无菌操作的训练, 提高操作水平是降低污染率的重要手段。

关键词：铁皮石斛；诱导；组织培养；污染前言铁皮石斛（Dendrobium officinale）是兰科石斛属植物，又名铁皮枫斗、黑节草，主要分布于云南、安徽、贵州、浙江、江西、广东、广西等地，不仅是名贵的室内盆栽花卉，还是一种珍贵的中药材，在《神农百草经》中记载，铁皮石斛具有滋阴清热，生津益胃，润肺止咳，润喉明目，延年益寿的功效，是日常生活的保健佳品。

天然状态下主要生长于悬崖峭壁上，自然繁殖力低，加上药农掠夺性挖采，造成自然资源匮乏、濒临绝迹的境况。

而常规条件下人工繁殖又较难，长期以来组织培养在植物生产中得到广泛应用，是产生极大经济效益的一项生物技术[1]。

1 试验材料与方法原理1.1 试验材料和用具材料：多年生铁皮石斛植株茎段。

实验药品：1/2MS基本培养基、琼脂、NAA、6-BA、70%酒精、0.1%Hgcl、无菌水等。

实验用具：超净工作台、高压蒸汽灭菌锅、PH试纸、分析天平、酒精灯、剪刀、镊子、试管、培养瓶、烧杯、移液管、量筒、脱脂棉、火柴、手术刀等。

1.2 实验原理已有特定结构与功能的植物组织，在一定条件下，其细胞被诱导改变原来的发育途径，逐步逆转其原有的分化状态，转变为具有分生能力的胚性细胞，这个过程称为脱分化（dedifferentiation）。