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生物安全手册
1．目的
预防各种感染因素对微生物实验室、实验人员和环境的污染。2．适用范围
整个微生物实验室。
3．岗位承担人员职责
微生物实验室负责人督促执行, 相关工作人员负责执行。4．具体工作程序
4.1．微生物危害评估
4.1.1．感染性微生物危险度等级分类
4.1.1.1．危险度1级: 无或极低的个体和群体危险。不太可能引起人或动物致病的微生物。
4.1.1.2．危险度2级: 个体危险中等, 群体危险低。病原体能够对人或动物致病, 对实验室工作人员、社区、牲畜或环境不易导致严重危害。实验室暴露可能会引起严重感染, 但对感染有有效的预防和治疗措施, 而且疾病传播的危险有限。
4.1.1.3．危险度3级: 个体危险高, 群体危险低。病原体一般能引起人或动物的严重疾病, 但一般不会发生感染个体向其它个体的传播, 而且对感染有有效的预防和治疗措施。
4.1.1.4．危险度4级: 个体和群体的危险均高。病原体一般能引起
人或动物的严重疾病, 而且很容易发生个体之间的直接或间接传播, 对感染一般没有有效的预防和治疗措施。
4.1.2．实验室分级:
4.1.2.1．根据处理的微生物及其毒素的危害程度将实验室各分为四级。各级实验室的生物安全防护要求依次为: 一级最低, 四级最高。
4.1.2.2．一级生物安全防护实验室: 实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用于对健康成年人已知无致病作用的微生物。
4.1.2.3．二级生物安全防护实验室: 实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用于对人或环境具有中等潜在危害的微生物。
4.1.2.4．三级生物安全防护实验室: 实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用于主要经过呼吸途径使人传染上严重的甚至是致死疾病的致病微生物及其毒素, 一般已有预防传染的疫苗。4.1.2.5．四级生物安全防护实验室: 实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用于对人体具有高度的危险性, 经过气溶胶途径传播或传播途径不明, 当前尚无有效的疫苗或治疗方法的致病微生物及其毒素。与上述情况类似的不明微生物, 也必须在四级生物安全防护实验室中进行。待有充分数据后再决定此种微生物或毒素应在四级还是再较低级别的实验室中处理。
4.2．微生物实验室生物安全防护程序
4.2.1．总则
4.2.1.1．微生物实验室应对实验微生物可能给人或环境带来的危害进行评估。
4.2.1.2．工作人员所处理的实验对象含有致病的微生物及其毒素时, 经过在实验室设计建造、使用个体防护设置、严格遵从标准化的工作及操作程序规程等方面采取综合措施, 确保实验室工作人员不受实验对象危害, 确保周围环境免受其污染。
4.2.1.3．实验室生物安全防护的内容包括安全设备、个体防护装置和措施, 实验室的特殊设计和建设要求, 严格的管理制度和标准化的操作程序及规程。
4.2.1.4．实验室根据不同的微生物和防护要求进行相对应的生物安全等级防护。
4.2.2．实验室生物安全防护
4.2.2.1．工作空间设置: 标本接种室、细菌鉴定室、培养基室( 包括培养基配制室和无菌室) 及仪器室。其中:
4.2.2.1.1．孢子的真菌或疑有生物危害3～4级微生物生长等应严格在生物安全柜中进行。
4.2.2.2．各实验室分区依照生物安全防护等级进行生物防护。
4.2.3．微生物实验室总体要求
4.2.3.1．有需要时, 应配备保护性装置或呼吸保护性设备供员工预防使用。
4.2.3.2．应设置洗眼装置。
4.2.3.3．实验室应配备移液辅助器避免用口吸的方式移液。
4.2.3.4．实验室可配备一次性接种环在生物安全柜中接种, 以减少气溶胶的生成。
4.2.3.5．应设置实施各种消毒方法的设施, 如高压灭菌锅、化学消毒装置等对废弃物进行处理。
4.2.4．标本接种室的设计
4.2.4.1．标本接种室是工作人员直接接触病人标本处, 可能含高度空气传播性危险的标本和微生物或引起气溶胶, 因此应有以下设置:
4.2.4.2．实验室负压:
4.2.4.2.1．实验室应处于负压防止污染气体外逸。
4.2.4.2.2．并有一定的通风换气系统保持室内空气流通。
4.2.4.3．缓冲间:
4.2.4.3.1．进入标本接种室前有一个在实验室和邻近空间保持压差的缓冲区。
4.2.4.3.2．门自带锁, 可自动关闭。
4.2.4.3.3．缓冲区禁止同时开启两扇门, 门配备自动报警铃, 当开启其中一扇门时, 警报铃将自动响起以提醒不要开启另一扇门。
4.2.4.3.4．工作人员进入接种室后应保持门紧闭, 不得随意开启。
4.2.4.4．标本的传递:
4.2.4.4.1．微生物标本应从缓冲区左侧的传递窗内传送至接种室内, 不得直接开启接种室门传递。
4.2.4.5．生物安全柜:
4.2.4.
5.1．根据《中华人民共和国生物安全通用准则》, 牛型分枝杆菌为分枝杆菌中生物危害最高型三级, 必须在Ⅱ级或Ⅱ级以上生物安全柜中操作, 本实验室配备ⅡB级生物安全柜。
4.2.4.
5.2．生物安全柜含有高效空气过滤网对排气进行净化, 工作空间为高效过滤网净化的无涡流的单向流空气。
4.2.4.
5.3．工作时正面玻璃推拉窗打开一半, 上部为观察窗, 下部为操作窗口。外部空气由操作窗口吸进, 而不可能由操作窗口逸出。
4.2.4.
5.4．工作状态下遵守操作规程时保证工作人员不受侵害, 也保证实验对象不受污染。
4.2.4.
5.5．所有可能使致病微生物及其毒素外溅或产生气溶胶的标本, 如如痰、脑脊液、分枝杆菌培养及抗酸涂片检查、怀疑有生物危害3～4级微生物生长或怀疑有产生气生性孢子的真菌标本等的操作, 须在生物安全柜中进行。
4.2.4.
5.6．生物安全柜应至少每年进行一次检查, 以保证安全柜滤网工作正常, 空气滤过率达标。
4.2.4.6．封闭的离心机: