食品化学综合实验
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实验 2 美拉德反应初级阶段的评价
食品的褐变反应分为酶促褐变和非酶促褐变两类,酶促褐变指由多酚氧化酶催化下的多酚化 合物与氧之间的反应,而非酶褐变包括焦糖化和美拉德反应,美拉德反应即蛋白质、氨基酸或胺 与碳水化合物之间的相互作用,它是热加工食品发生的主要反应之一,反应的结果会产生类黑精 色素、风味化合物等重要物质,对食品的风味、色素、营养价值等产生重要的影响。美拉德反应 通常按照三个反应阶段进行,在早期主要是蛋白质或氨基酸的-NH2 与还原糖之间的反应、还原糖 的降解等为主。与常见的化学反应一样,糖的种类、胺基所处位置、温度、pH、水分、金属离子、 一些化合物等都会影响美拉德反应的进行。 实验的目的就是要通过模拟体系中赖氨酸与葡萄糖的反应,了解食品中美拉德早期反应情况, 从两个不同方面半定量验证酸碱度、亚硫酸盐以及反应时间等对反应的影响,以及可以采用的评 价方法。
1原理 美拉德反应的起始阶段随着反应不断进行,溶液变成黄色,随着黄色的不断加深,在近紫外 区吸收也逐渐增大,同时还有少量糖脱水变成5-羟甲基糠醛(HMF),以及发生键断裂形成二羰 基化合物和色素的初始产物,最后生成类黑精色素。本实验利用模拟实验,即葡萄糖与赖氨酸在 一定pH缓冲液中进行加热反应,一定时间后目视颜色变化,可以观察反应的进程情况。实验过程 中通过改变反应的介质条件,例如改变pH、加入亚硫酸盐、选择不同的氨基酸,确定这些因素对 美拉德反应的影响情况。
2 仪器与试剂 2.1 仪器 水浴锅、移液管、容量瓶、试管等
2.2 试剂
2.2.1 1mol·L -1 葡萄糖溶液; 2.2.2 0.1 mol ·L -1 赖氨酸溶液;
2.2.3 0.1 mol ·L -1 甘氨酸溶液; 2.2.4 0.1mol·L -1 亚硫酸钠溶液;
2.2.5 2 mol·L -1 HCl溶液; 2.2.6 广范pH试纸(1~14)
Folin-酚法测定蛋白质含量
一、 目的掌握Folin-酚法测定蛋白质含量的原理和方法,熟悉分光光度计的操作。二、原理Folin-酚试剂法包括两步反应:第一步是在碱性条件下,蛋白质与铜作用生成蛋白质-铜络合物;第二步是此络合物将磷钼酸-磷钨酸试剂(Folin 试剂)还原,产生深蓝色(磷钼蓝和磷钨蓝混合物),颜色深
一、 目的
掌握Folin-酚法测定蛋白质含量的原理和方法,熟悉分光光度计的操作。
二、原理
Folin-酚试剂法包括两步反应:第一步是在碱性条件下,蛋白质与铜作用生成蛋白质-铜络合物;第二步是此络合物将磷钼酸-磷钨酸试剂(Folin 试剂)还原,产生深蓝色(磷钼蓝和磷钨蓝混合物),颜色深浅与蛋白质含量成正比。此法操作简便,灵敏度比双缩脲法高100 倍,定量范围为5~100μg 蛋白质。Folin 试剂显色反应由酪氨酸、色氨酸和半胱氨酸引起,因此样品中若含有酚类、柠檬酸和巯基化合物均有干扰作用。此外,不同蛋白质因酪氨酸、色氨酸含量不同而使显色强度稍有不同。
三、实验材料、主要仪器和试剂
1.实验材料
绿豆芽下胚轴(也可用其它材料如面粉)
2.仪器
(1)722 型(或721 型)分光光度计
(2)4 000r/min 的离心机
(3)分析天平
(4)容量瓶(50mL)
(5)量筒
(6)移液管(0.5mL、1mL、5mL)
3.试剂(纯度均为分析纯)
(1)0. 5mol/L NaOH
(2) 试剂甲:
(A)称取10g Na2CO3,2g NaOH 和0.25g 酒石酸钾钠,溶解后用蒸馏水定容至500mL。
(B)称取0.5g CuSO4·5H2O,溶解后用蒸馏水定容至100mL。每次使用前将(A)液50 份与(B)液1 份,即为试剂甲,其有效期为1d,过期失效。
(3)试剂乙:
在1.5L 容积的磨口回流器中加入100g 钨酸钠(Na2WO4·2H2O)和700mL 蒸馏水,再加50mL 85 %磷酸和100mL 浓盐酸充分混匀,接上回流冷凝管,以小火回流10h。回流结束后,加入150g 硫酸锂和50mL 蒸馏水及数滴液体溴,开口继续沸腾15min,驱除过量的溴,冷却后溶液呈黄色(倘若仍呈绿色,再滴加数滴液体溴,继续沸腾15min)。然后稀释至1L,过滤,滤液置于棕色试剂瓶中保存,使用前大约加水1 倍,使最终浓度相当于1mol/L。
东北师范大学远程与继续教育学院
(网络教育)
实 验 报 告
学习中心: 句容奥鹏教育
专业名称: 化学
课程名称: 综合化学实验 *
学 号: **************
* 名: ***
2 0 13 年 12 月 13 日
报告正文
课程名称:综合化学实验
实验日期: 2013年 11 月 6 日 编号NO: 1
开始时间: 9时 20分; 结束时间: 10 时 20 分;
实验题目:二氧化碳相对分子质量的测定
同 组 者:陈三宝
内 容: 一、实验目的
1.学习气体相对密度法测定分子量的原理和方法,加深理解理想气体状态方程式和阿佛加德罗定律;
2.学会大气压力计的使用;
3.巩固分析天平的使用;
4.了解启普发生器的构造和原理,掌握其使用方法,熟悉洗涤、干燥气体的装置。
二、实验原理
阿佛加德罗定律:同T、P,同V的气体物质的量相等
理想气体状态方程式:PV= nRT = mRT/M
对同T、P,同V的空气(air)和二氧化碳(CO2)有 :
=
式中,m,M分别为空气(二氧化碳)的质量和相对分子质量
则,
[教学重点]
分析天平的使用
启普发生器的使用
分子量的测定和计算
[教学难点]
分析天平的称量操作
启普发生器的使用
[实验用品]
仪器:台秤(电子称)、分析天平、启普发生器、洗气瓶、锥形瓶、干燥管
药品:石灰石、无水CaCl2、6mol·L-1HCl、1mol·L-1NaHCO3、1mol·L-1CuSO4
材料:玻璃棒、玻璃导管、橡皮塞(3、6、8~12号)、玻璃棉
[基本操作]
一、大气压力计的使用方法
1.首先观察附属温度计,记录温度;
2.调节水银槽中的水银面。旋转调节螺旋使槽内水银面升高,这时利用水银槽后面白磁片的反光,可以看到水银面与象牙针的间隙,再调节螺旋至间隙恰好消失为止;
1 食品化学与分析实验设计
根据实验需要,通过查阅手册,工具书和其他信息源获取必要信息,能独立、正确地设计实验(选择实验方法、实验条件、所需仪器、设备和试剂等),独立撰写设计方案。
一、粮食中水分的测定(直接干燥法)
粮食中的水分与粮食的品质、耐保藏性等密切相关。粮食的含水率越高,品质则越差,出现霉变的机率也大大增加。因此,应对粮食中的水分加以控制。
(一)原理
利用食品中水分的物理性质,在101.3 kPa(一个大气压),温度101 ℃~105 ℃下采用挥发方法测定样品中干燥减失的重量,包括吸湿水、部分结晶水和该条件下能挥发的物质,再通过干燥前后的称量数值计算出水分的含量。
(二)仪器和设备
1. 玻璃制称量瓶。
2. 电热恒温干燥箱。
3. 干燥器:内附有效干燥剂。
4. 天平:感量为0.1 mg。
(三)分析步骤
1. 容器恒重 取洁净玻璃制称量瓶,置于105 ℃干燥箱中,瓶盖斜支于
瓶边,加热1.0 小时,取出盖好,置干燥器内冷却0.5小时,称量,并重复干燥至前后两次质量差不超过2 mg,即为恒重。
2. 样品处理 将混合均匀的粮食迅速磨细至颗粒小于2 mm。
3. 测定 称取上述样品5g(精确至0.0001g),放入上述称量瓶中,试样厚度不超过5 mm,加盖,精密称量。置105 ℃干燥箱中,瓶盖斜支于瓶边,干燥4小时后,盖好取出,放入干燥器内冷却0.5小时后进行称量。然后再放入105 ℃干燥箱中干燥1 h左右,取出,放入干燥器内冷却0.5 h后再称量。并重复以上操作至前后两次质量差不超过2 mg,即为恒重。
(四)分析结果的表述
样品中水分的含量按下列公式进行计算。
m1-m2
X = ――――――――×100
m1 -m3
式中: 2 X ——样品中水分的含量,单位为克每百克(g/100g);
m1 ——称量瓶和试样的质量,单位为克(g);
m2 ——称量瓶和试样干燥后的质量,单位为克(g);