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第十五章弧菌科及检验本章内容一、弧菌属（一）霍乱弧菌（二）O139型霍乱弧菌（三）副溶血性弧菌（四）其他弧菌二、气单胞菌属与邻单胞菌属（一）气单胞菌属（二）邻单胞茵属革兰阴性直杆菌或弧菌有极端鞭毛氧化酶阳性动力阳性发酵葡萄糖弧菌属——分类根据细菌的抗原性、生化特性、DNA同源性、致病性和耐盐性等将弧菌分为四类：①O1群霍乱弧菌；②不典型O1群霍乱弧菌:能被O1群血清凝集但不产生致病毒素；③非O1群霍乱弧菌；④其他弧菌：包括副溶血性弧菌、溶藻弧菌、河弧菌、创伤弧菌、麦氏弧菌和拟态弧菌。
大多数为非病原菌，对人类致病的主要有霍乱弧菌和副溶血性弧菌，分别引起霍乱和食物中毒。
霍乱弧菌——生物学特性形态与结构形态：弧形或逗点状，“鱼群状”。
人工培养后呈杆状。
染色：G-。
特殊结构：有菌毛，无芽胞，部分有荚膜。
一端有一根粗而长的鞭毛，悬滴观察可见穿梭样或流星状运动。
·培养特性营养要求：不高，可无盐生长。
气体环境：兼性厌氧。
菌落特征：耐碱不耐酸。
pH8.5的碱性蛋白胨水：培养6～9h，增菌形成菌膜。
碱性琼脂平板：较大圆形扁平、无色透明或半透明似水滴状菌落。
硫代硫酸盐-柠檬酸盐-胆盐-蔗糖琼脂平板（TCBS）：较大黄色菌落。
亚碲酸钾琼脂平板：还原亚碲酸钾成金属碲，使菌落中心呈灰褐色。
庆大霉素琼脂：形成的菌落中心呈灰褐色。
·抗原·变异性：有形态变异、菌落变异、溶血性变异和毒力变异。
·抵抗力：对热、干燥、日光、酸、消毒剂很敏感。
但耐碱力较强。
霍乱弧菌——微生物检验及鉴定·标本采集：以粪便（米泔水样便）为主，尽可能在用药之前采取。
及时接种适宜培养基。
常用的保存或运送培养基有碱性蛋白胨水、文-腊二氏保存液和卡-布运送培养基等。
·形态学检查：①动力观察：米泔水样粪便悬滴观察可见流星或穿梭状运动的细菌。
②制动试验：加霍乱多价诊断血清后弧菌凝集，运动停止。
③涂片染色：革兰染色，观察革兰染色阴性呈鱼群状排列的弧菌。
弧菌属常规鉴定:弧菌属分类上归弧菌科.生物学特性::革兰氏阴性菌,直或弯曲.月牙形大部分菌种为兼性厌氧.氧化酶实验为阳性.具有鞭毛.运动活泼如穿梭状.常规鉴定分两步:与相近的菌属鉴别.定属后在做种的鉴定一,与相似的菌属的区别:弧菌属的弧菌科,同科中有气单胞菌属,邻单胞菌属,均为氧化酶阳性,F,弧菌与其的区别,可依嗜血性,甘露醇,氧化酸盐O/129敏感性的区别见表:弧菌科3个菌属特性的鉴别特性气单胞菌属邻单胞菌属弧菌属甘露醇+ - +/-鸟氨酸- + +/-精氨酸+/- + +/-嗜血性- - +/-O/129敏感R R S弧菌属的鉴定:目前我院临床细菌室对霍乱弧菌的鉴定,一般的作初步鉴定,方法如下:1.直接涂片:2.悬滴检查:取患者粪便做悬滴标本(亦可用压滴法),检查细菌的动力,呈极活泼的穿梭性运动,O1型霍乱血清制动试验阳性,可做早期推测性报告.3.染色检查:取米泔样粪便的酶化物,黏液部分涂片,干燥后用乙醇固定,分别用革兰氏染液1/10稀释的石炭酸副虹染色,干后,油镜镜检,观察有无革兰氏阴性,呈鱼群排列的弧菌,涂片检查,只能做初步参考,不能作确诊依据.4.玻片凝集试验:自分离平板上挑取可疑菌落,与霍乱多价诊断血清(既O1群霍乱多价血清),做玻片凝集试验,所用血清效价应在1/80~1/160之间,如过浓,则稀释后再做凝集.将稀释的血清滴加在清洁的玻片上,挑取可疑菌落混匀于血清中,即刻(一般不超过10S),可见肉眼可见的明显凝集为阳性菌落应以出现销价对照,应不发生血凝为了提高阳性率应多挑取可疑菌落进行涂片凝集试验.做初步鉴定试验后将此疑似菌退卫生防疫站做最后鉴定.[编写者]:日期[科主任签字]:。
弧菌科及检验考点总结一、弧菌属WHO腹泻病控制中心将弧菌分为四类：①O1群霍乱弧菌；②不典型O1群霍乱弧菌；③非O1群霍乱弧菌；④其他弧菌（副溶血性弧菌）。
（一）霍乱弧菌霍乱的病原菌，该病为一种急性烈性肠道传染病，发病急，传染性强，死亡率高。
1.生物学特性（1）形态染色弧形或逗点状；无芽胞、有菌毛、有些菌株有荚膜；一端有一根粗而长的鞭毛，运动活泼。
取患者米泔水样粪便作悬滴观察，可见该菌呈穿梭样或流星状运动。
液体培养物滴片染色镜检，可见排列如“鱼群状”革兰阴性弧菌。
（2）培养特性需氧或兼性厌氧菌；营养要求低；耐碱不耐酸，可在无盐环境生长。
碱性蛋白胨水：形成菌膜。
碱性琼脂平板：较大、圆形、扁平、无色透明或半透明似水滴状菌落。
硫代硫酸盐-枸橼酸盐-胆盐-蔗糖琼脂平板（TCBS）：较大黄色菌落。
含亚碲酸钾琼脂平板：菌落中心呈灰褐色。
庆大霉素琼脂：菌落中心呈灰褐色。
（3）生化反应分解甘露醇、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖，产酸不产气。
迟缓发酵乳糖，不分解阿拉伯糖。
氧化酶、明胶酶试验和ONPG试验均阳性。
能产生靛基质，霍乱红反应（即亚硝基靛基质试验）阳性。
（4）抗原结构与分型耐热的特异性O抗原：特异性高，具有群特异性和型特异性，是分群和分型的基础。
不耐热的非特异性H抗原：H抗原为弧菌属所共有。
分类-血清学：分类-生物学：性状古典生物型ElTor生物型溶血（羊红细胞）-d血凝（鸡红细胞）-+V-P试验-+多粘菌素B敏感+-噬菌体Ⅳ组裂解+-噬菌体Ⅴ组裂解-+（5）变异性形态变异菌落变异溶血性变异毒力变异（6）抵抗力对热、干燥、日光、酸、消毒剂很敏感。
但耐碱力较强。
2.微生物学检验（1）标本采集标本以粪便为主，尽可能在患者用药之前采取。
一般米泔水样便采取1～3ml，成形便采取蚕豆大小。
注：采集的标本应及时接种适宜培养基。
不能及时接种者，要接种于保存或运送培养基内尽快送检。
（2）检验方法及鉴定（二）O139型霍乱弧菌属非O1群霍乱弧菌，可与O139抗血清凝集。
