显微鉴定

显微鉴定的操作方法包括显微鉴定是一种用显微镜观察和分析样品的方法，广泛应用于科研、专业实验室和法医学等领域。

下面将详细介绍显微鉴定的操作方法。

1. 准备工作在进行显微鉴定之前，需要做好以下准备工作：a. 清洁显微镜与配件：用清洁的无纺布或滤纸轻轻擦拭显微镜的各个零件，确保镜头与目镜清晰。

b. 样品准备：根据需要进行样品的处理和制备，如切片、染色等。

确保样品具有足够的细节和清晰度。

2. 调焦a. 将显微镜放在平稳的台面上，打开显微镜电源，调整照明灯的亮度，使其能够提供足够的光线。

b. 将目镜调整到最佳视角，使用调节轮使物镜与样品之间的距离最接近估计最优距离。

c. 通过转动调节轮，使样品聚焦在眼睛的焦点上。

此时可使用低倍物镜（通常为4倍或10倍）进行初步观察和调焦。

3. 焦距调整a. 在低倍物镜下调焦完成后，使用高倍物镜（如40倍或100倍）进一步调焦。

b. 将物镜转至最佳视野，使用调节轮细调焦距，使样品清晰度达到最佳状态。

c. 注意避免物镜和样品之间碰撞，以免损坏设备和样品。

4. 显微观察a. 将已调焦的显微镜放在一个适当的位置，使其稳定不动。

b. 将待观察的样品放在显微镜台上，将之与物镜对齐。

c. 通过调节台的移动装置，将样品移至物镜下方，然后逐渐移动至视野中央。

同时使用调焦和焦距调整使样品清晰可见。

d. 在观察过程中，可以旋转物镜头使得样品在不同方位显示。

若样品比较厚，可以使用调节轮改变物镜与样品距离，以观察不同深度的细胞结构。

5. 记录和分析a. 使用配备标尺的目镜深度计测量观察到的结构尺寸。

b. 观察到的细胞结构、微生物、矿物等特征可通过手绘或数码相机进行记录和保存。

c. 对观察到的样品特征进行分析和鉴定，比对参考资料，确定其可能的分类、性质或疾病。

显微鉴定是一项需要严密操作和仔细观察的技术，操作者需要具备良好的观察力和耐心。

同时，也需要对待样品具有一定的专业知识和实践经验。

在进行显微鉴定的过程中，务必保持设备和样品的清洁，以及注意显微镜和样品的安全操作。

内容：1 显微鉴别法：系指用显微镜对药材或饮片的切片、粉末、解离组织或表面制片及含饮片粉末的制剂中饮片的组织、细胞或内含物等特征进行鉴别的一种方法。

2 仪器和用具2.1 仪器生物光学显微镜、显微描绘器、滑走切片机、小型粉碎机或徒手圆筒生物切片器、镜台测微尺、离心机。

2.2 用具2.2.1 放大镜、刀片、解剖刀、镊子（包括粗镊及眼科弯镊与直镊）、剪（眼科剪与手术剪）、解剖针。

2.2.2 载玻片、盖玻片2.2.3 吸湿器（即玻璃干燥器改装蒸馏水加微量苯酚，潮气润湿药材样品用）、培养皿或小烧杯（放切片用，切片后的处理均可在其中进行）、酒精灯、铁三角架、石棉网、滴瓶、试管、试管架、滴管、玻璃棒（粗与细）、乳钵、量筒等2.2.4毛笔（从刀上刷取切片用）、铅笔（HB、3H、6H绘图用）、带盖搪瓷盘（装切片标本用）、纱布、吸水纸（滤纸）、火柴等。

3 试药与试液3.1 水合氯醛试液取水合氯醛50g，加水15ml与甘油10ml使溶解，即得。

此液为透化剂，可使干缩的细胞壁膨胀而透明，并能溶解淀粉粒、树脂、蛋白质及挥发油等。

3.2 甘油醋酸试液（斯氏液）取甘油、冰醋酸与水各等份，混合即得。

此液专用于观察淀粉形态，可使淀粉不膨胀变形，便于测量其大小。

3.3 甘油-乙醇溶液取甘油1份，50%乙醇1份，混合即得。

此液为封藏液，用于保存植物材料及临时切片，有软化组织的作用。

3.4 苏丹Ⅲ试液取苏丹Ⅲ0.01g，加90%乙醇5ml溶解后，加甘油5ml，摇匀即得。

本液应置棕色玻璃瓶内保存，在2个月内应用。

此液可使木栓化、角质化细胞壁及脂肪油、挥发油、树脂等染成红色或淡红色。

3.5 钌红试液取10%醋酸钠溶液1～2ml，加钌红适量使呈酒红色即得。

本液应临用新制。

此液可使粘液染成红色。

3.6 间苯三酚试液取间苯三酚1g，加90%乙醇100ml使溶解，滤过即得。

应置棕色玻璃瓶内，在暗处保存。

此液与浓盐酸合用，可使木化细胞壁染成红色或紫红色。

植物细胞的结构紫色洋葱细胞碘化铋钾的配制：直接用碘化铋钾0.85g，加冰醋酸10ml与水40ml溶解后，摇匀，即得。

水合氯醛的配制：稀甘油配制：稀碘液配制：碘-碘化钾溶液配制：临时装片的制作方法操作步骤口诀：擦、滴、取、展、盖、染、吸。

1、准备擦——用洁净的纱布把载玻片和盖玻片擦拭干净滴——把载玻片放在实验台上，用吸管在载玻片上滴一滴蒸馏水2、制片取（撕、刮、切、挑）——用镊子从洋葱鳞片叶内表皮上撕取一小块方形透明薄膜放（展、抹）——将撕下的洋葱鳞片叶内表皮浸入载玻片上的水滴中，用镊子轻轻展平盖——用镊子轻夹盖玻片的一边，使盖玻片另一边先接触载玻片上的水滴，而后慢慢地把盖玻片轻轻盖在材料上，尽量避免气泡产生。

如有气泡，可用镊子从盖玻片的一侧掀起，然后再慢慢重新盖上。

如有水溢出盖玻片，用吸水纸吸干净3、染色染——滴一滴染液（中性红试液、碘化钾试液）在盖玻片一侧，用吸水纸在另一侧吸引，直至染液浸润到标本的全部，如有染液溢出，用吸水纸吸干净洋葱内表皮细胞注意识别下列各部分：(1)细胞壁为植物细胞所特有。

为细胞的最外层，比较透明。

调节细调焦螺旋可见两细胞间实际上为三层；两侧为相邻两个细胞的细胞壁；中间是两个细胞共有的胞间层。

(2)细胞质：为无色透明的胶状物，紧贴在细胞壁以内，被中央大液泡挤成一薄层，仅细胞两端较明显。

(3)细胞核：埋在细胞质内；贴近细胞侧壁的只见其窄蔺，呈扁圆形，贴在上、下整的可见其宽面，呈球形。

仔细观察，可见包在细胞核外面的核膜，细胞核内有1—3个发亮的颗粒，即核仁。

(有的细胞看不见细胞核是因为该细胞被撕破，只剩一半了）(4)液泡：位于细胞中央，占细胞体积的大部分，由于澈泡内充满细胞液；所以比细胞质更透明。

植物细胞后含物1.观察马铃薯淀粉粒淀粉粒在形成时，先从一个点（脐点）开始，向外层层沉积，形成许多同心的层次——层纹（直链淀粉和支链淀粉交替沉积而成）。

切取马铃薯一小块，用刀片刮少许混浊液，置于载玻片上，或用马铃薯块直接涂片，加蒸馏水一滴，盖上盖玻片。

显微鉴定名词解释
显微鉴定是一种测定显微生物细胞及其各类产物的技术，使用荧光显微镜、透射电镜等高级仪器仪表，对细胞结构、细胞内细胞器的形态、细胞表面特征以及细胞内的成分、物质的状态及单独的物质进行有效检测和识别。

显微鉴定技术在现代生物学研究中具有举足轻重的作用，它是一种观察和测定细胞、细胞内结构和成分、细胞分子及有机物质的技术，其结果可以帮助研究者深入探索生命科学的奥秘。

显微鉴定的优点是可以获得精细的形象资料，具有较大的检测范围，从细胞和细胞分子水平上观察生物体的结构和形态，对对真菌、细菌、病毒和细胞的结构及功能有重要的应用。

它的主要缺点是由于使用显微镜来观察生物体是一种比较远的观察，所以根据观察结果往往无法在生物体内确定结构和形态信息。

此外，受限于显微镜的细节，往往无法确定被观察物体的活动状态，所以显微鉴定通常只能得到模糊的结果。

显微鉴定法是利⽤显微技术对中药进⾏显微分析，以确定其品种和质量的⼀种鉴定⽅法。

显微鉴定主要包括组织鉴定和粉末鉴定，利⽤显微镜来观察药材的组织构造、细胞形状及内含物的特征、矿物的光学特性，和⽤显微化学⽅法，确定细胞壁及细胞执业药师,中药鉴定学,辅导,精华,内含物的性质或某些品种有效成分在组织中的分布等，⽤以鉴别药材的真伪与纯度甚⾄品质。

（⼀）显微制⽚⽅法 显微鉴定时可根据检品的不同情况制作相应的制⽚，包括横切⽚或纵切⽚、表⾯制⽚、粉末制⽚、解离组织⽚、花粉粒与孢⼦制⽚、磨⽚制⽚、含粉末药材的制剂显微纸⽚等。

制作解离组织⽚时，解离液选择原则为：如样品中薄壁组织占⼤部分，⽊化组织少或分散存在，可⽤氢氧化钾法；如果样品坚硬，⽊化组织较多或集成较⼤群束，可⽤硝铬酸法或氯酸钾法。

（⼆）植物细胞壁和内含物的鉴别 （1）细胞壁性质的鉴别： ①⽊质化细胞壁加间苯三酚试液显红⾊或紫红⾊。

②⽊栓化或⾓质化细胞壁加苏丹Ⅲ显橘红⾊⾄红⾊。

③纤堆素细胞壁加氯医`学教育搜集整理化锌碘试液显蓝⾊或紫⾊。

④硅质化细胞壁加硫酸⽆变化。

（2）细胞内含物性质的鉴别： ①淀粉拉加碘试液显蓝⾊或紫⾊。

②糊粉粒加碘试液显棕⾊或黄棕⾊。

加硝酸汞试液显砖红⾊。

③脂肪油、挥发油或树脂加苏丹Ш试液显橘红⾊、红⾊或紫红⾊。

④菊糖加10%α-萘酚⼄醇溶液，再加硫酸显紫红⾊并很快溶解。

⑤黏液加钌红试液显红⾊。

⑥草酸钙结晶加稀醋酸不溶解，加稀盐酸溶解⽽⽆⽓泡医`学教育搜集整理发⽣。

加硫酸逐渐溶解，析出结晶。

⑦碳酸钙结晶（钟乳体）加稀盐酸溶解，同时有⽓泡发⽣。

⑧硅质加硫酸不溶解。

（三）显微测量 （四）显微常数测定 常见的显微常数主要有⽤于叶类鉴别的⽓孔数、⽓孔指数、栅表⽐、脉岛数和脉端数等。

（五）显微临时制⽚常⽤封藏试液 显微鉴定所⽤试剂包括⽔、稀⽢油、⽢油醋酸试液及⽔合氯醛试液。

（六）扫描电⼦显微镜和偏光显微镜的应⽤ 扫描电镜已⼴泛应⽤于⽣物样品表⾯及其断⾯⽴体形貌的观察。

显微鉴定要点显微鉴定是一种常用的分析技术，可以用于材料的组成分析、结构分析、形态分析等方面。

在显微鉴定中，需要注意以下几个要点。

一、样品制备样品制备是显微鉴定的第一步，样品的制备质量直接影响到后续的分析结果。

在样品制备过程中，需要注意以下几个方面。

1. 样品的选择：样品应该具有代表性，能够反映出整个样品的特征。

2. 样品的制备：样品的制备应该尽量避免对样品的结构和形态造成影响，同时要保证样品的纯度和完整性。

3. 样品的保存：样品在制备完成后应该妥善保存，避免受到外界环境的影响。

二、显微镜的选择显微镜是显微鉴定的核心工具，不同类型的显微镜适用于不同类型的分析。

在选择显微镜时，需要注意以下几个方面。

1. 分析目的：根据分析目的选择不同类型的显微镜，如光学显微镜、电子显微镜等。

2. 分析样品：根据样品的性质和形态选择适合的显微镜。

3. 分析条件：根据分析条件选择适合的显微镜，如分辨率、放大倍数等。

三、显微镜操作显微镜操作是显微鉴定的关键步骤，需要注意以下几个方面。

1. 样品的放置：样品应该放置在显微镜的适当位置，避免对样品造成损伤。

2. 显微镜的调节：根据分析需要调节显微镜的放大倍数、焦距等参数。

3. 观察样品：观察样品时需要注意样品的结构和形态，同时要注意观察样品的不同部位。

四、数据分析数据分析是显微鉴定的最后一步，需要注意以下几个方面。

1. 数据的准确性：数据的准确性是显微鉴定的关键，需要注意数据的来源和准确性。

2. 数据的解释：数据的解释需要结合样品的结构和形态进行分析，同时要注意数据的可靠性和合理性。

3. 结果的呈现：结果的呈现需要清晰明了，同时要注意结果的可读性和易于理解性。

总之，显微鉴定是一项复杂的分析技术，需要在样品制备、显微镜选择、显微镜操作和数据分析等方面注意各种要点，才能得到准确可靠的分析结果。

显微鉴别工作总结
显微鉴别工作是科学研究和实验室工作中常见的一项重要技术。

通过显微镜观
察样品的微观结构和特征，可以对其进行鉴别和分析，为科学研究和实验结果的准确性提供重要支持。

在进行显微鉴别工作时，需要注意一些关键点，以保证工作的准确性和可靠性。

首先，样品的制备是显微鉴别工作中至关重要的一步。

样品的制备质量直接影
响到后续的观察和鉴别结果。

在制备样品时，需要注意避免样品的污染和损坏，保证样品的原始状态得到保留。

同时，还需要根据样品的特性选择合适的制备方法，以保证样品的微观结构得到清晰展现。

其次，显微镜的使用和调试是显微鉴别工作中的关键环节。

在使用显微镜观察
样品时，需要根据样品的特性选择合适的放大倍数和光源强度，以保证观察到的图像清晰度和对比度。

同时，还需要进行显微镜的定期维护和校准，以保证显微镜的观察结果准确可靠。

最后，对观察到的样品进行鉴别和分析是显微鉴别工作的最终目的。

在进行鉴
别和分析时，需要结合样品的特性和先前的研究成果，进行综合判断和推断。

同时，还需要注意避免主观偏见和错误判断，以保证鉴别和分析结果的科学性和可靠性。

总的来说，显微鉴别工作是科学研究和实验室工作中不可或缺的一项技术。

通
过严格的样品制备、显微镜的使用和调试以及对样品的鉴别和分析，可以为科学研究和实验结果的准确性提供重要支持。

希望在今后的工作中，能够进一步提高显微鉴别工作的水平和质量，为科学研究和实验结果的可靠性和准确性提供更好的保障。