红细胞裂解液使用说明
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红细胞裂解液(RBC Lysis Buffer ,10×)简介: 红细胞裂解液(Red Blood Cell Lysis Buffer)是一种从人、鼠或其他哺乳动物等体内的组织样品或血液中裂解并去除无核红细胞的溶液,其主要有效成分为NH 4Cl 。
RBC Lysis Buffer(10×)配方经过优化不同于ACK Lysis Buffer ,在裂解无核红细胞的同时几乎不损伤淋巴细胞(Lymphocyte)或其它有细胞核的细胞。
使用1×RBC Lysis Buffer 处理过的血液或组织细胞样品可以用于后续的细胞培养、细胞融合以及核酸或蛋白的提取及各种常规的分析和检测,尤其适用于流式细胞检测或需要高浓度裂解液的情况。
组成:操作步骤(仅供参考):注意:绝大多数情况下,应使用无菌去离子水稀释RBC Lysis Buffer(10×)至1×使用,流式细胞术除外。
(一)组织细胞样本的常规操作1、制备细胞悬液,离心弃上清。
2、裂解: 加入1×RBC Lysis Buffer ,轻柔吹打混匀,裂解。
本操作步骤在4℃条件下操作更佳,亦可在室温下操作。
3、离心: 4℃离心,弃红色上清。
本步骤亦可在室温下操作。
4、如果发现红细胞裂解不完全,可以重复上述步骤2和步骤3各一次。
5、洗涤:根据实验要求加入适量PBS 、HBSS 、生理盐水或无血清培养液,轻柔混匀重悬沉淀。
4℃,离心,弃上清,该离心步骤亦可在室温下操作。
6、如有必要,重复上述步骤5一次,共洗涤1~2次。
7、根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀,进行计数、培养等后续实验。
(二)组织细胞样本的快速操作(无需洗涤)1、制备细胞悬液:新鲜组织经胰蛋白酶或胶原酶等消化处理,制备细胞悬液,离心弃上清。
2、裂解:加入1×RBC Lysis Buffer ,轻柔吹打混匀,裂解。
本操作步骤在4℃条件下操作更佳,亦可在室温下操作。
红细胞裂解液(RBC Lysis Buffer ,10×)简介: 红细胞裂解液(Red Blood Cell Lysis Buffer)是一种从人、鼠或其他哺乳动物等体内的组织样品或血液中裂解并去除无核红细胞的溶液,其主要有效成分为NH 4Cl 。
RBC Lysis Buffer(10×)配方经过优化不同于ACK Lysis Buffer ,在裂解无核红细胞的同时几乎不损伤淋巴细胞(Lymphocyte)或其它有细胞核的细胞。
使用1×RBC Lysis Buffer 处理过的血液或组织细胞样品可以用于后续的细胞培养、细胞融合以及核酸或蛋白的提取及各种常规的分析和检测,尤其适用于流式细胞检测或需要高浓度裂解液的情况。
组成:操作步骤(仅供参考):注意:绝大多数情况下,应使用无菌去离子水稀释RBC Lysis Buffer(10×)至1×使用,流式细胞术除外。
(一)组织细胞样本的常规操作1、制备细胞悬液,离心弃上清。
2、裂解: 加入1×RBC Lysis Buffer ,轻柔吹打混匀,裂解。
本操作步骤在4℃条件下操作更佳,亦可在室温下操作。
3、离心: 4℃离心,弃红色上清。
本步骤亦可在室温下操作。
4、如果发现红细胞裂解不完全,可以重复上述步骤2和步骤3各一次。
5、洗涤:根据实验要求加入适量PBS 、HBSS 、生理盐水或无血清培养液,轻柔混匀重悬沉淀。
4℃,离心,弃上清,该离心步骤亦可在室温下操作。
6、如有必要,重复上述步骤5一次,共洗涤1~2次。
7、根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀,进行计数、培养等后续实验。
(二)组织细胞样本的快速操作(无需洗涤)1、制备细胞悬液:新鲜组织经胰蛋白酶或胶原酶等消化处理,制备细胞悬液,离心弃上清。
2、裂解:加入1×RBC Lysis Buffer ,轻柔吹打混匀,裂解。
本操作步骤在4℃条件下操作更佳,亦可在室温下操作。
Tris-氯化铵红细胞裂解液使用说明Tris-NH4Cl Lysis Buffer货号:R1012规格:100ml/500ml保存:4℃保存,有效期至少6个月。
产品简介:Tris-氯化铵红细胞裂解液(Tris-NH4Cl Red Blood Cell Lysis Buffer),也称为Tris-NH4Cl Lysis Buffer,是一种从人、鼠或其他哺乳动物等体内的组织样品或血液中裂解并去除无核红细胞的溶液,其主要有效成分为氯化铵。
Tris-NH4Cl Lysis Buffer经过优化配方,在裂解无核红细胞的同时几乎不损伤淋巴细胞(lymphocyte)或其它有细胞核的细胞。
对于裂解、去除有细胞核红细胞,例如鸟或禽类的红细胞,效果不佳,裂解类似细胞时,不建议采用。
本裂解液经过滤除菌,经过Tris-NH4Cl Lysis Buffer处理过的血液或组织细胞样品可以用于后续的细胞培养、细胞融合以及核酸或蛋白的提取及各种常规的分析和检测。
自备材料:胰蛋白酶、胎牛血清(FCS)、离心机、PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液操作步骤(仅供参考):(一)组织细胞样本的常规操作1、制备细胞悬液:新鲜组织经过胰蛋白酶或胶原酶等消化处理,通过适当方法制备成细胞悬液,离心弃上清。
2、裂解:加入3~5倍细胞沉淀体积的Tris-NH4Cl Lysis Buffer,轻柔吹打混匀,裂解1~2min。
本操作步骤在4℃条件下操作更佳,亦可在室温下操作。
3、离心:4℃,400~500g离心5min,弃红色上清。
如无低温离心机,本步骤亦可在室温下操作。
4、如果发现红细胞裂解不完全,可以重复上述步骤2和步骤3各一次。
5、洗涤:根据具体实验要求加入适量PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液,轻柔混匀重悬沉淀。
4℃,400~500g离心2~3min,弃上清,离心步骤亦可在室温下操作。
所加入的PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液的量一般应大于细胞沉淀体积的5倍以上。
红细胞裂解液产品简介:碧云天生产的红细胞裂解液(Red Blood Cell Lysis Buffer),也称ACK Lysis Buffer,是一种用于从人或鼠等的血液或组织样品中裂解并去除无细胞核红细胞的溶液。
本裂解液经过优化配方,在裂解红细胞的同时几乎不损伤淋巴细胞(lymphocyte)或其它有细胞核的细胞。
本裂解液的主要有效成分为氯化铵。
本裂解液不适用于有细胞核红细胞的裂解,例如鸟或禽类的红细胞。
本裂解液经过无菌处理,处理过的血液或组织细胞样品可以用于后续的原代培养、细胞融合以及核酸或蛋白的提取及各种常规的分析和检测。
保存条件:4℃保存,一年有效。
室温保存, 3个月有效。
注意事项:本裂解液为无菌产品,请注意保持无菌,使用本产品时宜在超净工作台内进行。
如果经过红细胞裂解液处理后的样品后续用于总RNA的提取,在处理细胞时不必使用经过DEPC处理过的溶液。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明:对于组织细胞样品:1.新鲜组织经过胶原酶或胰酶等消化处理,通过适当方法分散成细胞悬液,离心弃上清。
2.加入3-5倍细胞体积的红细胞裂解液,轻轻吹打混匀,裂解1-2分钟。
例如细胞沉淀的体积为1ml,则加入3-5ml的红细胞裂解液。
本步骤在室温或4度操作均可。
3.400-500g离心5分钟,弃红色上清。
4℃离心效果更佳。
4.如果发现红细胞裂解不完全,可以重复上述步骤2和步骤3一次。
通常极微量的红细胞不会影响后续的一些检测。
5.洗涤1-2次:加入适量PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液,重悬沉淀,400-500g离心2-3分钟,弃上清。
可再重复1次,共洗涤1-2次。
洗涤液的用量通常应至少为细胞沉淀体积的5倍。
4℃离心效果更佳。
6.根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀后即可进行计数等后续实验。
对于组织细胞样品无需洗涤的快速操作步骤:1.新鲜组织经过胶原酶或胰酶等消化处理,通过适当方法分散成细胞悬液,离心弃上清。
Tris-氯化铵红细胞裂解液产品简介:在生物科研领域,经常需要去除红细胞。
去除红细胞的方法有ACK Lysis Buffer、Tris-氯化铵细胞裂解液、Gey,s Lysis Buffer。
Tris-氯化铵细胞裂解液(Tris-NH4CI Red Blood Cell Lysis Buffer),也称为Tris-NH4CI Lysis Buffer,是一种从人、鼠或其他哺乳动物等体内的组织样品或血液中裂解并去除无核红细胞的溶液,其主要有效成份为NH4CI。
Jimei Tris-NH4CI Lysis Buffer经过优化配方,在裂解无核红细胞的同时几乎不损伤淋巴细胞(Lymphocyte)或其它有细胞核的细胞。
本裂解液经高压灭菌及过滤除菌,经过Tris-NH4CI Lysis Buffer处理过的血液或组织细胞样品可以用于后续的细胞培养、细胞融合以及核酸或蛋白的提取及各种常规的分析和检测。
自备材料:1、胰蛋白酶2、胎牛血清3、低温离心机4、Hanks平衡盐溶液(HBSS)操作步骤(仅供参考):(一)组织细胞样本的常规操作1、制备细胞悬液:新鲜组织经过胰蛋白酶或胶原酶等消化处理,通过适当方法制备成细胞悬液,离心弃上清。
2、裂解:加入3~5倍细胞沉淀体积的Tris-NH4CI Lysis Buffer,轻柔吹打混匀,裂解1~2min。
本操作在4。
C条件下操作更佳,亦可在室温下操作。
3、离心:4。
C,400~500g离心5min,弃红色上清。
本步骤亦可在室温下操作。
4、如果发现红细胞裂解不完全,可以重复上述步骤2和步骤3各一次。
5、洗涤:根椐实验要求加入适量PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液,轻柔混匀重悬沉淀。
4。
C,400~500g离心2~3 min,弃上清,该离心步骤亦可在室温下操作。
所加入PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液的量一般应大于细胞沉淀体积的5倍以上。
6、如有必要,重复上述步骤5一次,共洗涤1~2次。
Toll Free: 400 6721 600 (China Only) Website: Lysing solution for FACS (10×)I.产品信息目录号: LSB01, LSB02, LSB03 规格: 100T,250T, 500T保存: 室温效期: 一年II.产品简介本产品可在哺乳动物外周血细胞经荧光素标记的抗体染色后,将红细胞裂解,随后进行流式分析。
当抗体加入到全血中,与白细胞特异性的表面抗原结合。
染色的样品随后用流式红细胞裂解液处理,在温和的低渗条件下裂解红细胞,从而保留住白细胞。
III.使用方法1.用蒸馏水将10×红细胞裂解液稀释为1×,稀释后的工作液可在室温保存一个月。
2.用合适的抗凝管收集全血。
3.取100 μl混匀的抗凝血到流式管。
4.按照抗体说明书加入合适的剂量,混匀后孵育适当时间。
5.加入2 ml 1×红细胞裂解液,涡旋振荡混匀。
6.室温避光孵育10分钟。
7.300 - 400 g离心5分钟,弃上清。
8.加入2 ml PBS,300 - 400 × g离心5分钟。
9.弃上清,加入0.5 ml PBS重悬细胞沉淀。
10.在流式细胞仪上进行分析。
如不能马上检测,请将样品避光保存于2 - 8℃。
IV. 结果示例图. FSC/SSC散点图。
全血细胞经1×红细胞裂解液裂解后,在Becton Dickinson FACSCalibur TM流式细胞仪。
通过FSC和SSC可以清晰地区分出淋巴细胞、单核细胞和粒细胞,几乎很少细胞碎片产生。
Toll Free: 400 6721 600 (China Only) Website: V. 注意事项1.本产品经优化,专门针对临床实验室所用的流式细胞仪,包括Becton Dickinson FACSCalibur TM和CoulterEPICS® XL®。
红细胞裂解液红细胞裂解液红细胞裂解液是一种用于从人或鼠等的血液或组织样品中裂解并去除无细胞核红细胞的溶液。
在裂解红细胞的同时几乎不损伤淋巴细胞或其它有细胞核的细胞。
本裂解液不适用于有细胞核红细胞的裂解,例如鸟或禽类的红细胞。
本裂解液经过无菌处理,处理过的血液或组织细胞样品可以用于后续的原代培养、细胞融合以及核酸或蛋白的提取及各种常规的分析和检测。
应用对于组织细胞样品1. 新鲜组织经过胶原酶或胰酶等消化处理,通过适当方法分散成细胞悬液,离心弃上清。
2. 加入3~5倍细胞体积的红细胞裂解液,轻轻吹打混匀,裂解4~5min。
例如细胞沉淀的体积为1mL,则加入3~5mL的红细胞裂解液。
3. 1000g离心5 min,弃红色上清。
4. 如果发现红细胞裂解不完全,可以重复上述步骤2和步骤3一次。
通常极微量的红细胞不会影响后续的一些检测。
5. 洗涤1~2次:加入适量PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液,重悬沉淀,1000g离心2~3 min,弃上清。
可再重复1次,共洗涤1~2次。
洗涤液的用量通常应至少为细胞沉淀体积的5倍。
6. 根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀后即可进行计数等后续实验。
对于组织细胞样品无需洗涤的快速操作步骤1. 新鲜组织经过胶原酶或胰酶等消化处理,通过适当方法分散成细胞悬液,离心弃上清。
2. 对于0.2mL细胞沉淀加入1mL红细胞裂解液,轻轻吹打混匀,裂解4~5min。
3. 加入15~20mL PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液,混匀。
4. 1000g离心5min,弃红色上清。
5. 如果发现红细胞裂解不完全,可以重复上述步骤2和步骤3一次。
通常极微量的红细胞不会影响后续的一些检测。
6. 根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀后即可进行计数等后续实验。
说明:对于常规步骤,多一步洗涤过程中的离心,但可以节省洗涤液的用量,并且洗涤效果也更好一些,同时不需要大体积的离心管。
快速步骤少了一次离心,但洗涤效果略差一些,同时需要大体积的离心管。
红细胞裂解液使用说明书产品货号:SL1070储存条件:2-8度保存,有效期1年。
产品内容:产品内容SL1070-100ml SL1070-500ml 红细胞裂解液100ml500ml说明书1份产品简介:红细胞裂解液(Red Blood Cell Lysis Buffer),也称ACK Lysis Buffer,是一种用于从人或鼠等的血液或组织样品中裂解并去除无细胞核红细胞的溶液。
本产品经过优化配方,在裂解红细胞的同时几乎不损伤淋巴细胞(lymphocyte)或其它有细胞核的细胞。
不适用于鸟或禽类等有细胞核红细胞的裂解。
本产品主要成分为氯化铵,经过无菌处理。
经过处理的血液或组织细胞样品可以用于后续的原代培养、细胞融合,核酸或蛋白的提取,及各种常规的分析和检测。
使用说明:组织细胞样品常规操作步骤:.1、新鲜组织经过胶原酶或胰酶等消化处理,通过适当方法分散成细胞悬液,离心弃上清。
2、加入3-5倍细胞体积的红细胞裂解液,轻轻吹打混匀,裂解1-2分钟。
室温或4度操作均可。
3、400-500g离心5分钟,弃红色上清。
4℃离心效果更佳。
4、如果红细胞裂解不完全,可以重复步骤2和步骤3。
一般极微量的红细胞不影响后续检测。
5、加入5-8倍细胞体积的PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液,重悬沉淀,400-500g离心2-3分钟,弃上清。
4℃离心效果更佳。
洗涤1-2次。
6、根据实验需要,选用适当溶液重悬细胞沉淀,随后进行计数等后续实验。
组织细胞样品快速操作步骤:1、新鲜组织经过胶原酶或胰酶等消化处理,通过适当方法分散成细胞悬液,离心弃上清。
2、加入5倍细胞体积的红细胞裂解液,轻轻吹打混匀,裂解1-2分钟。
室温或4度操作均可。
3、加入15-20倍红细胞裂解液体积的PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液,混匀。
4、400-500g离心5分钟,弃红色上清。
4℃离心效果更佳。
5、如果红细胞裂解不完全,可以重复步骤2和步骤3。
使 用 说 明 书◆RIPA裂解液◆目录号1912◆使用手册◆实验室使用,仅用于体外RIPA裂解液目录号:1912目录编号包装单位191201 50ml191202 100ml产品介绍:RIPA裂解液(RIPA Lysis Buffer)是一种传统的细胞组织快速裂解液。
RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品可以用于常规的Western、IP等。
RIPA的本意是Radio Immunoprecipitation Assay。
RIPA裂解液的配方有很多种,本产品RIPA裂解液的主要成分为50mM Tris(pH7.4),150mM NaCl,1% Triton X-100,1% sodium deoxycholate,0.1% SDS 以及sodium orthovanadate,sodium fluoride,EDTA 等多种磷酸酶抑制剂。
产品储存:4℃注意事项:1.裂解得到的蛋白样品,由于含有较高浓度的去垢剂干扰,不能用Bradford法测定蛋白浓度,可以选用本公司生产的BCA蛋白定量试剂盒测定蛋白浓度。
2.用户使用前需加入蛋白酶抑制剂如PMSF或者根据需要再加入leupeptin,aprotinin等其它抑制剂。
3.裂解液中SDS 4℃保存易沉淀析出,使用前应该37℃-60℃水浴重新溶解完全后回复到室温使用。
4.裂解蛋白的所有步骤都需在冰上或4℃进行。
操作步骤:(实验前请先阅读注意事项)1.对于培养细胞样品:1)取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF,使PMSF的最终浓度为1mM。
2)对于贴壁细胞,去除培养液,用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍(如果血清中的蛋白没有干扰,可以不洗)。
按照6孔板每孔细胞加入100-200微升裂解液的比例加入裂解液。
用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触。
通常裂解液接触细胞1-2秒后,细胞就会被裂解。
3)对于悬浮细胞,离心收集细胞,用手指把细胞用力弹散。
按照6孔板每孔细胞加入100-200微升裂解液的比例加入裂解液。