饲用益生菌及其应用演示课件

? 目前作为兽药和饲 料添加剂的益生菌 菌种主要有 芽孢杆菌属 乳酸杆菌属 酵母
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单菌制剂
复合制剂
?现在已知含菌种数目最多的益生菌是日本的 EM(有效微生物群 ) ,它由5 科10 属几十种微生物 复合而成 ,在种植业、养殖业和环保等领域都取得 了明显的效果。 ?我国最近研制出由 30 多种微生物组成的 SEM 科 隆粉I ,在养鸡、养鱼的试验中取得了较好的效果。
? 益生菌(Probiotics) , 又称微生态调节剂、生 态制品、活菌制剂，是指能够促进肠内生 态菌群生态平衡．对宿主起有益作用的活 的微生物制剂。
? Fuller (1989 年) 将其定义为“一种通过改 善肠道菌群平衡而对动物施加有利影响的 活的微生物饲料添加剂。”这也是目前被 普遍接受的有关益生菌的定义。
? 此外，益生菌还有合成维生素B族、抑制有 害物质生成，产生抗菌素类物质及屏障作 用等作用机制的说法。
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5.猪肠道益生菌种类
十二指肠内优势菌 群依次为双歧杆菌、 乳酸杆菌、肠杆菌、 肠球菌
回肠内优势菌群 依次为双歧杆菌、 肠球菌、肠杆菌、 乳酸杆菌
盲肠内优势菌群 依次为双歧杆菌、 肠杆菌、肠球菌、 乳酸杆菌
? 产生各种酶
益生菌可产生水解酶、发酵酶和呼吸酶，这些酶 有利于降解饲料中蛋白质、脂肪和较复杂的碳水 化合物。
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? 抗感染
益生菌能增强畜禽免疫功能，合成细菌素、有机 酸、溶菌酶、过氧化氢等物质，对有害菌有拮抗 作用。
? 生物夺氧
一些需氧菌特别是芽孢杆菌会消耗肠道内氧气， 造成厌氧环境，有助于厌氧微生物的生长，从而 使失调的菌群平衡调整恢复到正常状态。
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1. DNA－DNA 分子杂交技术
将菌落裂解，使细胞内 DNA 暴露，即可直接 采用探针与该菌落进行原位杂交。对探针采用同 位素、酶或荧光素标记后，可以使其容易被检测。 目前，该方法已经被用来制备对双歧杆菌具有菌 株或种特异性的核酸探针。
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2. recA 基因序列分析
recA 基因负责编码 recA蛋白质， 后者在DNA 重组、DNA 修复与SOS 应急反应中具有至关重 要的作用。研究表明， recA 基因的一个小片段有 望成为一种灵敏性高、能用于种间进化发育亲缘 研究的分子标记。
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3. GC％含量
同种生物体內的 GC％是固定的，但不同种生 物的GC％会有很大的不同。测定 GC％的方法很 多， 其中最广泛和通用的方法是以化学法水解 DNA 后， 再用电泳或 HPLC 来分析其中成分。 DNA 的GC％含量测定已广泛用于微生物鉴定中。
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4. 基于16S或23S rRNA序列的DNA 标
直肠内优势菌群 依次为双歧杆菌、 乳酸杆菌、肠球 菌、肠杆菌
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6.饲用益生菌研究手段
? 传统方法
包含形态特征、生理生化反应、血清学反应等， 这些方法都基于微生物表面受体的特异性，属于 表型分类法。
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? 分子生物学方法
1. DNA－DNA 分子杂交技术 2. recA 基因序列分析 3. GC％含量 4. 基于16S 或23S rRNA 序列的DNA 标记技术 5. 变性梯度凝胶电泳
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随着我国集约化养殖业的迅猛发展， 病害的大规模暴发，大量抗生素及其他违 禁药物被用于疾病防治，引起了细菌抗药 性及药物残留等一系列问题，严重影响了 我国畜牧业的健康持续发展。为了解决养 殖病害和食品安全等诸多矛盾，寻找绿色 环保的抗生素替代品是目前的研究热点。
由此，益生菌产品应运而生。
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一.益生菌的定义
DGGE 是利用一个梯度变性胶来分离 DNA 片 段。由于不同 DNA 片段的变性条件不同，因此可 在凝胶上形成不同的泳带。它是一种快速、可靠、 重复性好的益生菌（能够产生有益代谢产物）非 培养检测和分析方法，它比传统的培养检测鉴定 方法应用前景广阔。
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三.饲用益生菌的应用 1.特点
①在工业生产条件下,菌种应保持存活; ②应能在长期储存和现场条件下保持稳定和
活性; ③在动物肠道有存活能力(不一定繁殖) ; ④能对宿主动物产生有利的影响。
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2.宿主
?牛
犊牛，奶牛，育肥牛
?鱼
?虾
? （狗）
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3.效果
?猪
?在育肥猪日粮中添加益生菌，与添加抗生素的效 果一样，能提高饲料转化率。
?鸡
?在仔猪日粮中添加益生菌，可增加断奶体重，降 低断奶仔猪黄白痢发病率。
?牛
?早期饲喂乳酸杆菌的雏火鸡，其死亡率明显低。
?鱼
?在蛋鸡日粮中饲喂益生菌，其产蛋率、饲料转化 率、生长速度和饲料利用率都提高。
?虾
?在犊牛的代乳饲料中添加益生菌，可提高犊牛的
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二.益生菌种类
? 第一代：乳酸菌类益生菌
? 第二代：双歧杆菌
芽孢杆菌
? 第三代：LGG（鼠李糖乳杆菌）
美国人发现的新型微生物，由健康人体 肠道分离得到。目前， 美国Hansen、 芬兰 Valio 、日本 Yakult 、荷兰 DSM等公 司均在生产第三代益生菌产品。
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? 被我国批准使用的 益生菌有：芽孢杆 菌、乳酸杆菌、粪 链球菌、酵母菌、 黑曲菌、米曲菌。
记技术
16S 或23S rRNA序列的DNA 标记技术利用 PCR 的方法， 采用针对16S rRNA 基因两端通用 保守区的引物直接对所分离到的菌株进行 16S rRNA 基因扩增， 然后测定整个 PCR 复制子（约 1．5 kb）的序列组成，并与 rRNA 数据库进行比 较。
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5. 变性梯度凝胶电泳
饲用益生菌及其应用
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2010 年下半年尤其是 8、9月份，河南 及其周边的安徽、江苏、河北、山东一带， 相继发生了猪类似前两年的高热病。对此有 专家进行了流行病学的调研， 发现本次猪 病的流行表现主要是发热及细菌和病毒混合 多重感染，给临床诊断带来了很大困难。很 多疾病，仅免疫抑制性疾病的存在就影响了 疫苗免疫效果。耐药菌株的出现使抗生素的 疗效越来越差，甚至出现一用药便加速猪只 死亡的现象。
? （狗） 日增重和饲料报酬，发病率降低。
?奶牛饲喂益生菌，可使产奶量提高，乳蛋白含量
提高。
?水产中使用可改善鱼虾肉质，净化水质 11
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4.作用机理
? 保持肠道内微生态平衡
畜禽胃肠道菌群是在长期进化过程中形成并与畜 禽保持相对平衡稳定状态的菌群，它对畜禽的生 长发育和抵抗疾病的能力具有重要意义。当畜禽 胃肠道微生物平衡失调时，畜禽出现生产性能下 降和疾病症状。