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专家笔谈脾虚证动物模型的实验研究进展金敬善北京市中医研究所,北京 100010 〔作者简介〕 金敬善,浙江省临海市人。
研究员、硕士生导师。
1962年毕业于南京大学生物系生化专业,并分配到北京市中医研究所生化室从事中西医结合和中医基础理论研究。
对脾虚证的实质进行了长期而深入的研究,取得省、部级成果奖15项,发表论文100余篇。
现任北京市中医研究所生化室主任,北京市中西医结合学会理事,基础理论专业委员会副主任委员,北京市生化学会医用生化专业委员会副主任委员,全国中西医结合学会基础理论专业委员会委员,消化疾病专业委员会委员等职。
1988年北京市人民政府授予有突出贡献的专家,享受国务院政府特殊津贴。
关键词 脾虚证; 动物,实验; 模型 从事脾虚证动物模型的实验研究已有20多年,从最早的大黄致慢性腹泻模型,到最近常用的病证结合模型,虽然思路不同,方法各异,但有一点应该肯定,各种模型在脾虚证实质研究的不同时期都起到了一定的推动作用。
本文简要介绍各类脾虚证动物模型造模方法,以供同道们参考。
1 根据中医理论复制动物模型111 泻下法制脾虚证动物模型用泻下法致脾虚是脾虚证模型最常用的造型方法,其中,绝大多数为苦寒泻下法。
苦寒泻下法中最常用药物为大黄、芒硝、番泻叶、大承气汤、蓖麻油、玄明粉等。
大黄脾虚模型是我国最早的脾虚模型之一,应用时间长,比较普及,并积累了较多的实验研究资料。
常用造模动物有昆明种小鼠、W istar大鼠、叙利亚种金黄地鼠、兔、驴等。
大黄、芒硝等中药以水煎剂灌服,用药量16～52g (kg.d),造模时间一般为5～40d。
造模后的动物常表现便溏、脱肛、肛门红肿、纳呆、腹胀、消瘦、四肢不收、毛枯槁、畏寒、活动频度下降、耐寒力降低、游泳时间减少、萎靡、倦卧、体重降低。
有称应用玄明粉者体重升高,体温降低,或有死亡。
此外,双耳发光强度下降,百会穴、双耳、双腋下、双天枢穴、双足三里穴体表温度下降,经穴体表电阻值下降,耳部发光强度失衡,这些变化与脾虚状态密切相关。
・研究生论坛・脾虚证动物模型的研究进展及不足浙江中医学院2000级研究生(310053) 刘越洋 指导:周亨德 摘 要:分别从中医、西医、中西医结合3个不同的方面总结脾虚证动物模型的造模方法,并对其进行评价,提出脾虚证动物模型造模方法的不足及今后的发展趋势。
从1977年以来,脾虚证动物模型的研制已获得许多成功的经验,同时也存在一些不足之处。
本文将总结二十多年的研究进展,希望对今后的工作有所促进。
1 脾虚证动物模型的造模方法 1.1模拟中医传统病因建立脾虚证动物模型:此方法依据中医传统理论研制开发“纯”中医病证动物模型。
例如:最早问世的苦寒泻下法,以李时珍对大黄“其性苦寒,能伤元气耗阴血”及李杲“大忌苦寒之药损其脾胃”的论述为依据,运用大黄水浸煎剂[1]、大黄粉悬液[2]、大黄加蕃泻液或大黄加玄明粉水浸煎液[3]等苦寒泻下方药喂饲动物造成脾虚证动物模型。
与此同时根据“谷不入,半日则气虚,一日则气少”、“饥则损气”、“饮食自倍,肠胃乃伤”为依据,采用限量营养[4](饮食失节法和饥饱失节法)建立脾虚证动物模型。
随后,在苦寒泻下法基础上,进一步衍生了以《本草经疏》“脾虚忌下、降泄、破气"为根据的耗气破气法[5],避免苦寒泻下法伤阴亡阳之不足。
与上述方法类似,之后又相继出现根据《景岳全书》:“脾胃之伤于外者,惟劳倦最能伤脾”为依据的劳倦过度法[6]和根据脾喜燥恶湿为依据的伤湿法[7]建立脾虚证动物模型。
所有这些方法均为单因素造模,而复杂的病因是中医临床症候的一个特点,因此为弥补单因素造摸的不足又创建了劳倦过度加饮食失节法[8]、劳倦过度加饥饱失节法[9]、耗气破气加饥饱失节法[10]、苦寒泻下加饥饱失节法、苦寒泻下加劳卷过渡法、劳倦过度加饮食失节加苦寒泻下法[11]等复合因素造模法。
模拟中医传统病因建立动物模型是建立脾虚证动物模型最主要的方法,建立的模型病因、症状、客观指标和药物反应比较一致,其实验结果与中医理论较易吻合,较好体现中医辨证论治的理论。
肝郁脾虚证模型大鼠免疫细胞分化和增殖变化规律研究目的探讨实验条件下的肝郁脾虚证大鼠骨髓和外周血淋巴细胞和中性粒细胞分化和增殖的变化规律。
方法采用夹尾激怒、束缚应激、过度疲劳与饮食失节的复合方法复制肝郁脾虚证动物模型。
检测空白对照组和模型2、6、9周组雄性大鼠外周血象、骨髓象和骨髓细胞增殖周期。
结果外周血象显示：与空白对照组比较，模型大鼠2周组白细胞和中性粒细胞数量升高（P＜0.05，P＜0.01），9周组淋巴细胞数量降低（P＜0.05）。
骨髓象显示：与空白对照组比较，模型大鼠2周组成熟中性粒细胞升高、淋巴细胞比例降低（P＜0.05），9周组淋巴细胞比例升高（P＜0.05）。
骨髓细胞周期显示：与空白对照组比较，模型大鼠2周组S期和G2/M期升高（P＜0.05），2周、6周组增殖指数升高（P＜0.05，P＜0.01）。
结论肝郁脾虚因素会影响机体免疫细胞的分化和增殖，早期可促进骨髓增殖。
标签：肝郁脾虚证；外周血细胞；骨髓象；骨髓细胞周期；大鼠肝郁脾虚证是临床常见证候之一，有研究表明肝郁脾虚证患者常有免疫功能低下的临床表现[1-2]。
本研究拟通过动物实验来探讨肝郁脾虚证对血液免疫细胞分化、增殖的影响，为中医脏腑辨证和“证”本质的研究提供实验依据。
1 材料与方法1.1 动物SPF级Wistar雄性大鼠40只，体质量（200±10）g，甘肃中医学院实验动物中心提供，动物合格证号：SCXK（甘）2001- 0001-0001122；设施许可证号：SYXK（甘）2011-0001-0002704）。
1.2 仪器950S动物血球分析仪（HEMA VET，美国），Biofuge Primo离心沉淀器（Heraeus，德国），350DSQ大鼠固定器（上海中胜公司），流式细胞仪（Beckman，美国），骨髓细胞分析系统（重庆天海公司）。
1.3 造模与分组采用夹尾激怒+束缚应激+过度疲劳+饮食失节的复合方法复制肝郁脾虚证动物模型[3-4]，为避免大鼠较长时间造模产生适应，其中夹尾激怒+束缚应激每日选择一种因素和过度疲劳配合进行。
脾虚模型大鼠肠道菌群分布及时效性研究一、研究背景随着人们对健康的关注度不断提高，肠道健康逐渐成为研究的热点。
肠道菌群作为肠道生态系统的重要组成部分，其平衡与否直接影响着人体的健康状况。
近年来越来越多的研究发现肠道菌群与多种疾病的发生密切相关，如肥胖、炎症性肠病、自身免疫性疾病等。
因此探讨肠道菌群在疾病发生发展中的作用，对于提高人们的健康水平具有重要意义。
脾虚是中医常见的一种病理状态，表现为脾气虚弱，运化失常导致机体各系统功能失调。
脾虚模型大鼠是一种常用的实验动物模型，用于研究脾虚证候的机制。
然而目前关于脾虚模型大鼠肠道菌群的研究较少，且多为定性研究，缺乏系统性和时效性的分析。
因此本研究旨在通过对脾虚模型大鼠肠道菌群的分布进行动态观察，探讨脾虚证候的发生机制及其与肠道菌群的关系，为进一步揭示脾虚证候的本质提供理论依据和实验支持。
1.脾虚模型大鼠的定义和特点脾虚模型大鼠是一种常见的实验动物模型，主要用于研究脾虚证候的发病机制、病理生理过程以及药物防治等方面。
脾虚模型大鼠的定义主要包括两个方面：一是具有典型的脾虚证候特征，如食欲不振、便溏、乏力等；二是在实验室条件下，通过一系列操作手段模拟脾虚状态，使大鼠出现类似人类脾虚的症状。
脾虚模型大鼠作为一种常用的实验动物模型，具有明确的定义和特点，为研究脾虚证候提供了有力支持。
在未来的研究中，可以通过对脾虚模型大鼠进行深入探讨，揭示脾虚证候的病理生理机制，为临床治疗提供理论依据。
2.肠道菌群与健康的关系肠道菌群是指生活在人体肠道内的微生物群落，包括细菌、真菌、病毒等多种生物。
近年来越来越多的研究发现肠道菌群与人类的健康密切相关，研究表明肠道菌群失调可能导致多种疾病，如肥胖、炎症性肠病、自身免疫性疾病等。
因此维护肠道菌群的平衡对于人类健康具有重要意义。
在脾虚模型大鼠的研究中，肠道菌群的分布和变化也受到了关注。
脾虚模型大鼠是指通过喂养特定食物或药物导致脾脏功能减弱的实验动物。
脾虚证动物模型的研究进展蒋琦彭怡雯沈淑怡黄越燕*（嘉兴学院医学院，浙江嘉兴314001）【摘要】脾虚证是临床常见证型，在脾虚证模型基础上复制病证结合动物模型，可以为中医药实验研究提供中医理论基础及新的研究方案和手段。
本文对近年来脾虚证动物模型的研究现状进行了综述。
【关键词】脾虚证动物模型研究现状综述Research progress on animal medels of spleen deficiency syndromeJiang Qi，Peng Yiwen，Shen Shuyi.The Medical School of Jiaxing University，Jiaxiang，Zhejiang314001【Abstract】Spleen deficiency syndrome is a common clinical syndrome.It can provide a theoretical basis of traditional Chinese medicine and a new research program and means for experimental research of traditional Chinese medicine.This paper reviews the research status of animal models of spleen deficiency syndrome in recent years.【Key Words】Spleen deficiency syndrome Animal medels Research siatus Revlew中图分类号：R4文献标识码：B文章编号：1672-1721（2021）13-1903-03DOI：10.19435/j.1672-1721.2021.13.064以动物证候实验为科研先导，弥补临床研究的不足，揭示中医理论本质，科学评价中药新药，对推动中药现代化发展具有重要的促进作用。
浅述肝郁脾虚证的实验研究进展张国萍郭蕾在《金匮要略・脏腑经络先后病脉证第一》日：“见肝之病，知肝传脾，当先实脾，四季脾旺不受邪，即勿补之”的论述。
古人对肝脾的相关性已有足够的重视，不仅提出其病理上的相互联系，而且更进一步提出了治疗中对肝脾相关性的应用。
肝与脾的研究一直是各代医家和现代医学研究的热门，它不仅涉及“治未病”的范畴，也对更进一步揭示“证”的内部作用机制发挥着不可估量的作用。
本文主要论述“肝郁脾虚证”的现代研究进展，包括动物模型的研究，指标及其现状的探讨，为进一步揭示“肝郁脾虚证”的生物学机制奠定理论基础。
肝郁脾虚证；模型；动物；实验指标１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００３－８９１４．２０１１．０９．１２７１００３－８９１４（２０１１）－０９－１９４３－０３Ｔｈｅ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｐｒｏｇｒｅｓｓ ｏｆ Ｌｉｖｅｒ Ｄｅｐｒｅｓｓｉｏｎ ａｎｄ Ｓｐｌｅｅｎ Ｉｎｓｕｆｆｉｃｉｅｎｃｙ Ｚｈａｎｇ Ｇｕｏｐｉｎｇ Ｇｕｏ Ｌｅｉ 帕金森病中医系统治疗方案和疗效评价体系的研究课题（ Ｎｏ．３０８７３２３６）山西中医学院（太原０３００２４）万方数据＠＠［１］孙广仁．中医基础理论［Ｍ］．北京：中国中医药出版社，２００７： １１７－１２０．万方数据＠＠［２］吴咸中，高金亮．脾虚证的现代研究［Ｍ］．天津：天津科技翻译出 版公司，１９９２：２５７．＠＠［３］李乾构．中医胃肠病学［Ｍ］．北京：北京中国医药出版社， １９９３：６３６．＠＠［４］赵金铎，张镜人．中医证候鉴别诊断学［Ｍ］．北京人民卫生出版 社，１９８７：１６８－１６９．＠＠［５］ 罗云坚，陈慧．溃疡性结肠炎的中医药的研究进展［Ｊ］．河北 中医，２００１， ２３ （１１）：８７８．＠＠［６］彭成．中医药动物实验方法学［Ｍ］．北京人民卫生出版社，２００８： ２８９－２９１．＠＠［７］ 湖南医学院第一附属医院中医基础理论研究室．肝郁脾虚的理 论与实验研究［Ｊ］．湖南医学院学报，１９７９，４（３）：１３１－１４３．＠＠［８］ 范北海．对肝脏脏象研究的一些看法［Ｊ］．湖北中医杂志，１９８０，２ （１）：１０．＠＠［９］张伟荣．中医病理研究丛书［Ｍ］．上海：上海科学普及出版社， １９９５：１３０－１３１．＠＠［１０］ 郭振球，赵晓威．肝纤宁对肝郁脾虚大鼠的保肝抗纤作用［Ｊ］．湖 南中医学院学报，１９９８，１８（２）：１０－１２．＠＠［１１］颞永华，彭鳓．中医肝都诞研究概况［Ｊ］．成都中医药大学学报， １９８７，１０（３）：５６１一５６２．＠＠［１２］ 马超英．实验中医学基础［Ｍ］．北京：中国协和医科大学出版杜， ２０００：９７ －９８．＠＠［１３］韩秋艳．肝郁脾虚证动物模型的建立［Ｊ］．贵阳中医学院学报， ２００１，２３（３）：５９－６１．＠＠［１４］须惠仁，傅湘琦，向丽华，等．肝郁证的动物实验研究一激怒刺激 对大白鼠血液流变学的影响［Ｊ］．中医杂志，１９９１，３２（６）：４１．＠＠［１５］乔明琦，张患云，陈雨振，等．肝郁证动物模型研究的理论思考 ［Ｊ］．中国医药学报，１９９７，１２（５）：４２－４４．＠＠［１６］ 陈小野．实用中医证候动物模型学［Ｍ］．北京：中国协和医科大 学，北京医科大学联合出版社，１９９３：２６３．＠＠［１７］顾立刚，郭学志，王庆国．大鼠溃疡性结肠炎肝郁脾虚证模型的 研究［Ｊ］．北京中医药大学学报，１９９９，２２（２）：２１－２３．＠＠［１８］顾立刚，郭学志，王庆国，等．疏肝健脾方对溃疡性结肠炎肝郁脾 虚证大鼠结肠溃疡的影响［Ｊ］．北京中医药大学学报，２０００，２３ （４）：２４－２６．＠＠［１９］董字，彭成．肝郁证实验动物模型的研究进展［Ｊ］．四川动物， ２００４，２１ （１）：６４－６６．＠＠［２０］ 彭延娟，彭成．大鼠肝郁脾虚证胃肠运动功能障碍动物模型的实 验研究［Ｄ］．成都中医药大学２００４级硕士学位论文．＠＠［２１］ 肖桂林，金益强．肝郁脾虚实验诊断指标的研究［Ｊ］．湖南中医 学院学报，１９９８，２（１８）：４－５．＠＠［２２］ 黄泰康，陶汉华．中医病因病机学［Ｍ］．北京：中国医药科技出版 社，２００２：２９４－２９５．＠＠［２３］ 田鄂华，王丽君，宾陈玉，等．肝郁脾虚证酶学指标的初步探讨 ［Ｊ］．湖北中医杂志，１９８９，１１（３）：４３－４４．２０１１－０２－２８关于脑卒中偏瘫康复护理的研究进展黄德莲郑峰脑卒中是导致人类死亡的三大疾病之一，在我国，发病率约为１２０～１８０／１０万人。
脾虚证的实验研究进展关键词脾虚证实验研究文献综述脾为后天之本，为气血生化之源。
中医“脾”的功能主要为主运化、主升清。
因此脾的功能主要体现在胃肠道的消化吸收功能，除此还包括内分泌、免疫、植物神经、能量代谢及运动等多系统的功能在内。
脾为五脏生理病理之枢纽，脾气虚则诸脏之气无源，亦应之而虚。
随着医学水平的提高，对脾虚证，尤其是脾气虚的研究也越来越广泛，本文就脾虚证的实验研究作一综述如下。
1 不同方药对脾虚证的实验研究1．1 黄芪建中汤对脾虚证的影响：黄芪建中汤是建中的代表方，即建立中焦脾胃之气，亦即直补“后天之本”。
临床上黄芪建中汤可广泛用于多种身体衰弱性疾病，目前此方亦被用于脾、肾、气、血虚的实验研究[1]。
王雪萍等[2]研究发现，脾虚大鼠的胃粘膜组织中的相关酶活性化学指标明显低于正常组，通过黄芪建中汤来调整可使相关酶活性提高至正常水平，说明了黄芪建中汤治疗脾虚证与改善机体状况的内在机制和提高有关酶的活性以增强组织细胞的代谢水平相联系。
王红伟等[3]研究发现，黄芪建中汤能明显提高脾虚大鼠的红细胞数、血红蛋白、血浆白蛋白含量及淋巴细胞转化率，降低IcRR，显著增强机体的免疫功能。
孙宁等[4]研究发现黄芪建中汤对脾虚型慢性萎缩性胃炎大鼠的胃粘膜病理形态学改变具有明显的复健作用。
刘旺根等[5]从实验研究发现脾虚大鼠胃粘膜组织细胞中三磷酸腺苷酶(Mg-ATPase)、琥珀酸脱氢酶(SDH)和碳酸酐酶(CA)等酶活性明显低于正常组，而黄芪建中汤可使之提高至正常水平，从而提示组织细胞代谢低下是脾虚证的重要表现之一，黄芪建中汤对此有调整作用。
1．2 补中益气汤对脾虚证的影响：毛平等[6]研究发现补中益气汤对动物机体的细胞免疫、体液免疫及非特异性免疫功能都有促进作用，能显著提高动物的免疫功能，而脾虚型动物机体主要表现为免疫功能的低下，有不少实验研究运用补中益气汤来修复机体的免疫功能。
米娜等[7]发现补中益气汤能使脾虚小鼠脾脏指数和胸腺指数及下降的NK细胞活性和高浓度的TNF恢复至正常。
专家笔谈脾虚证动物模型的实验研究进展金敬善北京市中医研究所,北京 100010 〔作者简介〕 金敬善,浙江省临海市人。
研究员、硕士生导师。
1962年毕业于南京大学生物系生化专业,并分配到北京市中医研究所生化室从事中西医结合和中医基础理论研究。
对脾虚证的实质进行了长期而深入的研究,取得省、部级成果奖15项,发表论文100余篇。
现任北京市中医研究所生化室主任,北京市中西医结合学会理事,基础理论专业委员会副主任委员,北京市生化学会医用生化专业委员会副主任委员,全国中西医结合学会基础理论专业委员会委员,消化疾病专业委员会委员等职。
1988年北京市人民政府授予有突出贡献的专家,享受国务院政府特殊津贴。
关键词 脾虚证; 动物,实验; 模型 从事脾虚证动物模型的实验研究已有20多年,从最早的大黄致慢性腹泻模型,到最近常用的病证结合模型,虽然思路不同,方法各异,但有一点应该肯定,各种模型在脾虚证实质研究的不同时期都起到了一定的推动作用。
本文简要介绍各类脾虚证动物模型造模方法,以供同道们参考。
1 根据中医理论复制动物模型111 泻下法制脾虚证动物模型用泻下法致脾虚是脾虚证模型最常用的造型方法,其中,绝大多数为苦寒泻下法。
苦寒泻下法中最常用药物为大黄、芒硝、番泻叶、大承气汤、蓖麻油、玄明粉等。
大黄脾虚模型是我国最早的脾虚模型之一,应用时间长,比较普及,并积累了较多的实验研究资料。
常用造模动物有昆明种小鼠、W istar大鼠、叙利亚种金黄地鼠、兔、驴等。
大黄、芒硝等中药以水煎剂灌服,用药量16～52g (kg.d),造模时间一般为5～40d。
造模后的动物常表现便溏、脱肛、肛门红肿、纳呆、腹胀、消瘦、四肢不收、毛枯槁、畏寒、活动频度下降、耐寒力降低、游泳时间减少、萎靡、倦卧、体重降低。
有称应用玄明粉者体重升高,体温降低,或有死亡。
此外,双耳发光强度下降,百会穴、双耳、双腋下、双天枢穴、双足三里穴体表温度下降,经穴体表电阻值下降,耳部发光强度失衡,这些变化与脾虚状态密切相关。
112 饮食失常法制脾虚证动物模型这类脾虚证动物模型包括限量饮食脾虚模型、饮食失节脾虚模型、劳倦过度加饮食失节脾虚模型、劳倦过度加饥饱失常脾虚模型、饥饱失常脾虚模型、耗气破气加饥饱失常脾虚模型等多种。
常用造模动物有昆明种小鼠、W istar大鼠、SD纯系大鼠、兔、驴等。
以破气苦降加饮食失节所致大白鼠脾虚证模型为例,W istar大鼠80只,随机分4组,即对照组、造模组、四君子汤复健组和自然恢复组。
厚朴、枳实、大黄按3∶3∶2比例与散米混合,布包冷水浸泡30 m in,煮沸10m in,制成质量分数为100%煎剂,隔天灌胃于模型组动物,4m l (d・只),上下午各1次,喂药当日禁食,次日给足量食;对照组灌以同量蒸馏水,正常饮食,造模期42d。
复健方法:炙黄芪、党参、茯苓、炒白术、炙甘草按2∶2∶2∶2∶1比例煎煮,灌胃法同上,隔天灌胃于四君子汤组动物,自然恢复组灌以同样量的蒸馏水,二组均以正常饮食,复健期21d。
结果模型动物造模8d出现体瘦;18d出现竖毛、毛枯不泽、懒动、耳色淡;30d见拱背、清便粘尾、反应迟钝、尾灰白,与对照组在外观上有明显差异,类似临床脾虚患者脾失健运,精微不生,不能充养皮毛四肢等所致的便溏、疲倦懒言、乏神嗜睡、消瘦、毛发不荣、舌淡、面白等现象。
造模动物便溏出现较晚,与单味大黄泻下致虚模型不同。
用四君子汤复健需8d,而自然恢复组则需15d,其他症状体征恢复二组无显著性差异。
此类脾虚动物模型多数出现较晚,继大黄致脾虚模型之后,应用较广泛。
113 证病结合脾虚证动物模型包括脾虚溃疡型结肠炎动物模型、脾阳虚型腹水型肝癌模型、脾阳虚型实体型肝癌模型、脾阳虚型S180肉瘤模型、脾阳虚型肝损伤模型、脾气虚型创伤愈合模型、脾气虚型胃溃疡模型、脾阳虚型胃溃疡模型、气虚型慢性萎缩性胃炎模型等多种。
造模方法:先用耗气破气加饥饱失常或大黄煎剂灌胃法造成脾虚模型,再用病的造模方法。
例如通过埋殖同种异体结肠抗原和注射异种结肠抗原两种方法制作大鼠脾虚溃疡型结肠炎模型;通过免疫损伤加饮用胆酸法(慢性萎缩性胃炎)和醋酸注射法(胃溃疡)制作大鼠脾虚型胃病模型;通过接种腹水型肝癌细胞(HA C)于腹外侧皮下接种6×106(或316×104、112×105、316×105)个细胞制作小鼠脾阳虚型腹水型肝癌模型;通过腋下皮下接种一块约2mm3的裸鼠原发性人体肝癌癌组织制造小鼠脾阳虚型实体型肝癌模型;通过接种S180瘤种制作小鼠脾阳虚型S180肉瘤模型;按115g kg剂量皮下注射体积分数为50%的四氯化碳花生油液制作大鼠脾阳虚型肝损伤模型;通过背部皮肤切去2c m×2c m皮块,深至深筋膜,形成创伤,术后观察21d,制作脾气虚型创伤愈合模型等。
这类模型的特点是既有脾虚证的各种表现,又有病的体征,目前应用越来越广泛。
陈小野教授认为有三方面意义:①使中医临床对疾病的辨证施治有相应的动物实验条件,特别是使中医辨证施治新药药理实验有相应证、病结合模型可采用;②克服中医动物模型研究虚化倾向,特别是避免中医动物模型难以实用的缺陷;③通过证病结合研究以求对疾病研究、证候研究取得进展。
证、病结合动物模型脾虚证的特点表现为便溏、乏力、体重明显减轻、消瘦、舌淡嫩苔少、胃粘膜颜色淡、小肠功能紊乱及实质损害、营养物质吸收障碍及供给减少而致机体物质和能量代谢障碍,胃壁等机体组织修复、分化功能障碍,胃体粘膜上皮DNA含量减少等。
证、病结合动物模型还有病的特征。
例如脾虚型溃疡动物模型病的特征为溃疡修复上皮中酸性粘液明显增多,中性粘液减少,反映其分化障碍,上皮及肉芽组织生长不良,舌象呈舌根型化,可能也与营养不良有关,营养不良还会导致胃壁组织细胞防御能力下降,易损性增高。
脾阳虚型腹水型肝癌模型病的特征为免疫功能低下,表现在无论是否去除粘附细胞,脾淋巴细胞转化率对ConA反应明显低下。
健脾理气合剂(党参、白术、茯苓、八月札)能减慢脾虚鼠移殖性肿瘤生长,肿瘤出现的潜伏期延长,小鼠一般情况良好,食欲增加、活动正常、恶液质出现晚等。
脾阳虚型实体型肝癌模型病的特征为脾虚型肝癌肿瘤的S期细胞比例最高,增殖指数明显增高,血清甲胎蛋白浓度显著增高,经健脾理气合剂治疗后,以上三项指标均降低。
脾阳虚型S180肉瘤模型病的特征为大黄造型后有典型的脾虚症状出现,例如溏泄、脱肛、纳差、消瘦、体重减轻、毛疏枯槁、移植性肿瘤生长快等,经健脾及滋阴药物治疗后对免疫功能有保护作用。
脾阳虚型肝损伤模型病的特征为肝小叶结构紊乱、瘀血,炎细胞浸润;肝细胞明显肿大、浊肿、脂肪变、空泡变、坏死及肝糖原减少等;超微结构见肝细胞核中常染色质减少,线粒体基质密度下降,糖元颗粒大量减少;肝SDH活性、G262P活性明显降低;肝细胞核酸、蛋白质合成能力下降,细胞免疫功能低下等。
经和肝助脾饮治疗后,肝脏SDH、G262P 活性增高,肝细胞内核酸、蛋白质、糖元和能量合成增加,提高了肝细胞膜系统的稳定性,增强了其抗损伤能力,体重显著恢复。
益气健脾方能改善肝组织病变,提高细胞免疫功能。
脾气虚型创伤愈合模型病的特征为动物在施行创伤手术时易于麻醉,创伤时出血较多,创伤愈合较迟,愈合程度较差,全血维生素C值明显降低,肉芽组织羟脯氨酸含量降低,术后2周创伤组织超微结构见成纤维细胞呈功能不活跃状态。
经加味四君子汤治疗后,体重增加,便清、毛枯不泽、粘尾等症状消失,伤口收缩较快,收缩幅度较大,创口愈合较早,且愈合较好;全血维生素C值显著增高,肉芽组织羟脯氨酸含量显著增高;超微结构见成纤维细胞功能较活跃。
2 借用西药制作脾虚证动物模型这类模型有利血平脾虚模型、新斯的明脾虚模型、环磷酰胺动物模型和胆汁氢氧化钠动物模型等。
对用西药制作中医“证”的模型,学术界也有不同看法,张启元等对制作中医“证”的动物模型提出8点意见:①模型设计要以中医理论为指导;②要从中医临床症状出发,使动物模型呈现出类似临床的症状;③由于中医注重整体,因此在制作模型时要保持机体完整,最好不经手术;④动物应在正常环境中生活,勿处于应急紧张状况下;⑤如用药物引起某种症状制作动物模型时,最好不用西药,更勿用激素类药;⑥“证”的模型,应能用药物证治复健加以反证;⑦要选用食性与人相近的常见的动物类群;⑧所选用的动物,应以其生活过程中亦会产生类似所研究的疾患为最佳。
3 讨论为进一步深入研究脾虚证的实质,阐明中医药的作用机制,用中西医结合的方法开展实验研究是很必要的。
借助动物实验的方法来研究中医的理论问题,有着临床研究所不能比拟的优势,那就是它可以严格控制实验条件、按照预定的设计去做各种客观的观察及定量分析,即使对机体有害的因素也可进行研究。
当然,对于“证”的动物模型仍有争议,如何统一认识,目前还有困难。
考虑到关于“证”的模型的探索为时尚短,这种争论是很自然的。
即使是现代医学常用的各种疾病的动物模型,也和临床上人的情况有相当的距离,但这并不否定其在医学研究中的重要作用。
动物模型即使复制得和临床的“证”非常近似,也还有很大的局限性,几乎所有的研究者都承认,动物和人毕竟不同。
动物实验中所证实的东西必须与临床结合起来分析才有参考意义。
否则,很可能出现严重的错误,这也是现代医学研究的基本原则之一,更何况我们将其用于中医理论的研究。
(1999203208收稿)胃镜与手术诊断胃癌的比较分析熊汉华 苑 陵同济医科大学附属协和医院消化科,武汉 430022 关键词 胃肿瘤; 内窥镜; 胃切除术 胃癌是消化道常见恶性肿瘤之一,胃镜作为早期诊断胃癌的手段之一,在临床上具有重要价值。
我们对1986～1997年间胃镜诊断为胃癌并经过手术切除、病理学诊断证实的757例病例进行了分析。
现将结果报告如下。
1 临床资料以本院外科胃癌切除术病例757例为研究对象,病例资料有术前本院门诊胃镜诊断报告、病理切片报告、术中描述(手术记录单)、大标本病理切片诊断等。
757例均以日本欧林巴斯纤维胃镜及电子胃镜作形态学诊断,并经活体组织病理学诊断,确诊后由我院外科作手术切除,再将标本送病理检查。
757例中男560例,女197例;年龄21～78岁,平均4915岁,21～30岁58例,31～50岁121例,51～78岁578例。
757例中胃窦癌387例(51112%),胃角癌194例(25162%),胃体癌84例(11109%),胃底癌5例(0166%),贲门癌35例(4162%),食管下段癌42例(5154%),十二指肠球部癌2例(0126%),幽门管癌3例(0139%),术后复发癌5例(0166%)。
757例中744例术前胃镜确诊为癌,13例术前胃镜诊断为胃溃疡不排除恶变,确诊率达9813%,与文献报道相似[1]。
