CD4+ 和CD8+ T淋巴细胞检测
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T淋巴细胞亚群CD4、CD8、CD3+细胞检测临床应用讲座-呼吸科
CD4 CD4/CD8
应用：呼吸科 - 抗肿瘤
T淋巴细胞亚群变化，判断恶性肿瘤转移与否
42例肺癌患者，转移患者CD3、CD4及CD4/CD8比值均显著低于未转移患 者及正常组。
当患者细胞免疫功能明显降低时，大部分患者易发生肿瘤转移，T淋巴细 胞亚群检测，对肿瘤转移与否判断起重要指导作用。
应用：呼吸科 – 抗肿瘤
CD3
CD4 CD8
免疫细胞
T淋巴细胞—细胞免疫
通过效应T细胞分泌穿孔素等，摧毁侵入到 寄主细胞内的病毒、胞内寄生菌或外来的组 织团块、癌变的细胞等。
B淋巴细胞—体液免疫
通过效应B细胞分泌抗体，与抗原发生特异 性结合，清除的是游离在寄主细胞外的抗原 及其产生的有毒物质。
体内许多免疫反应如微生物(病毒、结核菌、真菌、原虫)的抗感染免疫、 迟发型变态反应、抗肿瘤作用、移植排斥反应、细胞内寄生虫等，都是 由细胞免疫主导。
制因子，抑制CD4（辅助性T细胞）和B细胞增殖与分化，从而抑制机体免疫功能。
应用：呼吸科 - 抗肿瘤
CD3
1、肿瘤患者处免疫抑制状态，T淋巴细胞降低。 2、肿瘤患者T淋巴细胞与病程相关，随病程逐渐降低。 CD3、CD4、CD4/CD8细胞数下降程度： Ⅳ期 > Ⅲ期> Ⅱ期 >Ⅰ期 3、肿瘤患者T淋巴细胞持续低下，转移率高、易复发。
应用：呼吸科 - 小儿肺疾病
易感儿（支气管炎、支气管哮喘、肺炎）病情迁延不愈或反复，
重要病因是原发或继发性免疫功能低下。 小儿发热症状
血常规 CRP（C反应蛋白） CD3/4/8检测（免疫力）
血常规 CRP（C反应蛋白）
小儿支气管炎 T 细胞 CD4、CD8、CD3 检测介入时间 结合退热、消咳、肺罗音消失时间观察T细胞变化，特别针对儿科患者可合
扩张型心肌病CD4^+和CD8^+T淋巴细胞的检测及临床意义
心 理 平 衡 。同 时 分 析 失 眠 原 因 ， 做好说 明解释工 作 ， 指 导 家 庭
成员主动参与改善睡眠的护理工作 ， 帮助 其 妥 善处 理各 种 引 起 不 良心 理 刺 激 的 事 件 ， 争取 患者家庭 、 朋 友 等 支 持 。应 用 通 俗
易懂的语言对患者进行疾病相关知识教育 ， 如 教 患 者 一 些 自我
素的研究［ Ｊ ］ ． 第三军医大学学报 ， ２ ０ １ ２ ， ３ ４ （ ２ ） ： １ ３ ７ １ ４ ０ ．
Ｆ － ｌ Ｏ ￣黄 昆 ， 许勤 ， 蒋明． 乳 腺 癌 术 后 化 疗 患 者 的 心 理 弹 性 水 平 及其影响因素调查［ Ｊ ］ ． 护理研究 ， ２ ０ １ ３ ， ２ ７ （ ２ ） ： ４ ９ ３ ４ ９ ５ ． ［ １ １ ］左 昕 ， 彭李 ， 李敏 ， 等． 不 同 心 理 弹 性 水 平 个 体 在 特 里 尔 社 会应激时主观紧张度 、 唾液 Ｃ （ － 淀 粉 酶 和 糖 皮 质 激 素 浓 度 的变化［ Ｊ ］ ． 第三军医大学学报 ， ２ ｏ １ ２ ， ３ ４ （ ２ Ｏ ） ： ２ １ １ ５ — ２ １ １ ８ ．
（ 收 稿 日期 ： ２ ０ １ ５ － ０ ４ ２ ５ 修 回 日期 ： ２ ０ １ ５ — ０ ５ — １ ５ ）
情 况 明显 优 于 对 照 组 ， 患者 的总体 护理满 意度也 比对照组 高 ，
差 异 均有 统计 学 意 义 （ Ｐ ＜０ ． ０ ５ ） 。 综 上 所述 ， 对癌症患者 采用心 理护理 ， 可 显 著 改 善 患 者 睡
２ ０１ ４， ３４（ ９）： １ ２ ３ — １ ２ ４．
［ ２ ］ 曾艳 芳 ． 住院冠心病患 者睡 眠质 量的 护理 干预 ［ Ｊ ］ ． 护 理
小鼠T淋巴细胞亚群（CD3,CD4,CD8）酶联免疫分析（
小鼠T淋巴细胞亚群（CD3,CD4,CD8）酶联免疫分析（ELISA）试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定小鼠血清，血浆，组织液及相关液体样本中T淋巴细胞亚群（CD3,CD4,CD8）的含量。
实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠T淋巴细胞亚群（CD3,CD4,CD8）水平。
用纯化的小鼠T淋巴细胞亚群（CD3,CD4,CD8）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入T淋巴细胞亚群（CD3,CD4,CD8），再与HRP标记的T淋巴细胞亚群（CD3,CD4,CD8）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的T淋巴细胞亚群（CD3,CD4,CD8）呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中小鼠T淋巴细胞亚群（CD3,CD4,CD8）浓度。
试剂盒组成：样本处理及要求：1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。
2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。
3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。
离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清。
检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。
通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。
离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
艾滋病T淋巴细胞检测中CD4、CD8比值的正常参考值
艾滋病T淋巴细胞检测中CD4/CD8比值的正常参考值对感染了HIV病毒的无症状艾滋病感染者及CD4+T淋巴细胞计数高的感染者，至少每六个月进行一次CD4+T淋巴细胞计数检测，以评估疾病进展，判断预后状况是十分有必要的。
T淋巴细胞亚群检测中的CD4、CD8、CD56正常参考值：CD3：60-80%；CD4：35-55%；CD8：20-30%；CD4/CD8比值：1.4-2.T淋巴细胞检测的临床意义1.CD3下降常见于①恶性肿瘤；②自身免疫性疾病，如系统性红斑狼疮、类风湿关节炎等；③先天性免疫缺陷病,艾滋病；④接受放疗、化疗或者使用肾上腺皮质激素等免疫抑制剂。
CD3上升则见于慢性活动性肝炎、重症肌无力等。
2.CD4淋巴细胞减少：见于恶性肿瘤、遗传性免疫缺陷病、艾滋病、应用免疫抑制剂的患者。
影响正常人CD4的标准，在不同种族，不同民族之间有所差异，综合不同研究机构几项调查结果，在我国正常人的CD4值大致在600-1200之间，影响CD4检测值的因素很多，如1、季节性和昼夜差异：如每日最低水平在中午12点30分，峰值在下午8点30分（JAIDS，1990，3：144）。
2、肾上腺皮质激素对CD4细胞数有较大的影响，短期服用可能使CD4从900 /ul下降到300 /ul.。
3、合并感染HTLV-1的病人可能造成CD4的假性升高。
3.CD8淋巴细胞增多：见于自身免疫病，如SLE、慢性活动性肝炎、肿瘤及病毒感染等。
4.CD4/CD8比值异常：CD4/CD8的比值做为免疫调节的一项指标，正常值约1.4～2.0，若其比值＞2.0或＜1.4，表明细胞免疫功能紊乱。
CD4/CD8＜1．4常见于①免疫缺陷病，如艾滋病的比值常小于0.5；②恶性肿瘤；③再生障碍性贫血，某些白血病；④某些病毒感染，急性巨细胞病毒感染；⑤其它，SLE肾病、传染性单核细胞增多症、骨髓移植恢复期等。
CD4/CD8＞2.0常见于自身免疫性疾病，如系统性红斑狼疮、类风湿关节炎、I型糖尿病等等。
艾滋病感染者及艾滋病病人CD4和CD8T淋巴细胞检测质量控制管理
药 ，０ ０ ２ １．
艾 滋病感 染者 及艾 滋病病 人 Ｃ ４和 Ｃ ８ Ｄ Ｄ Ｔ淋 巴细 胞检测 质量 控制管理
王 兴金
云南 省 昭 通 市疾 病 预 防 控 制 中心 ， 南 云 昭通 ６７ ０ ５０ ０
【 摘要】 为准确检测 Ｃ ４和 Ｃ ８ Ｄ Ｄ Ｔ淋 巴细胞提 够数据保证 ， 保证结果的准确性和 可靠性。本文结合笔者 自身的 实际经验和理 论， 对艾滋病病人 Ｃ ４和 Ｄ Ｃ８ Ｄ Ｔ淋 巴 细胞 检 测 的样 本 、 器 、 本 处理 进 行 了讨 论 、 仪 样 总结 ， 检 测 Ｃ ４和 Ｃ ８ 为 Ｄ Ｄ Ｔ淋 巴细 胞 质 量控 制 管 理提 供 参 考 。 【 关键词 】 Ｉ Ｅ） ４＋Ｔ淋巴细胞 ； Ｄ Ｃ ８＋Ｔ淋巴细胞 ； 类免疫缺陷病毒 ； 人 内部质控 ｄｉ１．９ ９ｊｉ ｎ １０ ０：０３ ６ ／． ｓ．０ ６—１５ ．０ ０ １ ，９ ｓ ９ ９２ １ ．０３ ８ 文章编号 ：０ ６—１５ （０ ０ １０ ９ ９ ２ １ ）一１ ２ ９ ０ ０— ９７— ２
续 用 率 。 同时 ， 可 以缩 短 经 期 、 少 经 量 、 少 放 置 节 育 器 后 的 腹 痛 、 血 还 减 减 出 等 副 作用 。 新 型磁 性 节 育器 ， 由横 臂 纵杆 构 成 支 架 ， 臂 具 有 长 、 横 臂 ， 杆 近 下 横 短 纵
［ ］ 郝书平． ３ 放置 Ｇ Ｎ ＦＸＮ宫内节育 器临床
减少宫外孕 ， 防止子宫内感染 ， 同时也降低 了脱落、 出血 、 疼痛等副作用 。 带孕激素 的节育器 ， 如曼月乐宫内节育系统 ， 是一种带有孕激素的节育 设施 。主要通过在宫内缓慢释放低剂量 的左炔诺孕酮来实现高效率的避 孕 目的， 同时还可 以通过主动 引起 排卵性闭经而实现缓 解或治疗子宫 内膜 异
艾 滋病感 染者 及艾 滋病病 人 Ｃ ４和 Ｃ ８ Ｄ Ｄ Ｔ淋 巴细 胞检测 质量 控制管理
王 兴金
云南 省 昭 通 市疾 病 预 防 控 制 中心 ， 南 云 昭通 ６７ ０ ５０ ０
【 摘要】 为准确检测 Ｃ ４和 Ｃ ８ Ｄ Ｄ Ｔ淋 巴细胞提 够数据保证 ， 保证结果的准确性和 可靠性。本文结合笔者 自身的 实际经验和理 论， 对艾滋病病人 Ｃ ４和 Ｄ Ｃ８ Ｄ Ｔ淋 巴 细胞 检 测 的样 本 、 器 、 本 处理 进 行 了讨 论 、 仪 样 总结 ， 检 测 Ｃ ４和 Ｃ ８ 为 Ｄ Ｄ Ｔ淋 巴细 胞 质 量控 制 管 理提 供 参 考 。 【 关键词 】 Ｉ Ｅ） ４＋Ｔ淋巴细胞 ； Ｄ Ｃ ８＋Ｔ淋巴细胞 ； 类免疫缺陷病毒 ； 人 内部质控 ｄｉ１．９ ９ｊｉ ｎ １０ ０：０３ ６ ／． ｓ．０ ６—１５ ．０ ０ １ ，９ ｓ ９ ９２ １ ．０３ ８ 文章编号 ：０ ６—１５ （０ ０ １０ ９ ９ ２ １ ）一１ ２ ９ ０ ０— ９７— ２
续 用 率 。 同时 ， 可 以缩 短 经 期 、 少 经 量 、 少 放 置 节 育 器 后 的 腹 痛 、 血 还 减 减 出 等 副 作用 。 新 型磁 性 节 育器 ， 由横 臂 纵杆 构 成 支 架 ， 臂 具 有 长 、 横 臂 ， 杆 近 下 横 短 纵
［ ］ 郝书平． ３ 放置 Ｇ Ｎ ＦＸＮ宫内节育 器临床
减少宫外孕 ， 防止子宫内感染 ， 同时也降低 了脱落、 出血 、 疼痛等副作用 。 带孕激素 的节育器 ， 如曼月乐宫内节育系统 ， 是一种带有孕激素的节育 设施 。主要通过在宫内缓慢释放低剂量 的左炔诺孕酮来实现高效率的避 孕 目的， 同时还可 以通过主动 引起 排卵性闭经而实现缓 解或治疗子宫 内膜 异
CD3^+、CD4^+、CD8^+T淋巴细胞亚群在HIV感染者外周血中检测的临床意义
• 临床研究 •1153 讨 论开颅手术造成的脑水肿、麻醉药物选择不当、呼吸障碍、脑脊液循环受阻等因素，都可能造成颅内压升高，甚至对患者的生命安全造成严重威胁，所以，开颅手术过程中必须合理选择麻醉药物，积极预防并治疗颅内压升高。
舒芬太尼与芬太尼相比，消除半衰期比较短，镇痛作用相对较长，相关报道称为芬太尼的2倍[3-5]，其原因在于舒芬太尼与阿片受体具有较强的亲和力，并且其代谢产物去甲舒芬太尼也存在一定镇痛效应，其强度大致与芬太尼相当，因此与等效剂量芬太尼比较，舒芬太尼在静脉麻醉过程中可以维持患者循环功能的稳定性，更适合应用于心血管手术中及老年患者手术麻 醉中。
从本次研究结果来看，行麻醉诱导之前，两组患者HR 、SBP 、DBP 以及MAP 均无明显统计学意义，P ＞0.05；行麻醉诱导之后，观察组插管时、去骨瓣时以及拔管时HR 、SBP 、DBP 以及MAP 与对照组同时段指标相比，更加稳定，P ＜0.05，观察组术后麻醉清醒时间、气管拔管时间与对照组相关指标相比，也明显时间更短，差异具有统计学意义，P ＜0.05。
由此可见，与芬太尼相比舒芬太尼药物作用持续时间更长，患者苏醒时间较短，镇痛作用持续时间更长，充分确保了患者血流动力学稳定，更适宜应用在开颅手术麻醉之中。
参考文献[1] 黎海平,石少梅,李宇,等.不同剂量舒芬太尼应用于妇科腹腔镜手术麻醉中的临床效果[J].蛇志,2017,29(1):14-16.[2] 阳婷婷,唐轶洋,张兴安.舒芬太尼与瑞芬太尼复合丙泊酚全凭静脉麻醉用于神经外科手术效果与安全性的系统评价[J].中国循证医学杂志,2013,13(12):1492-1499.[3] 陈锴,薛鹏,张兆伟.不同剂量舒芬太尼应用于颅脑外伤手术的临床效果比较[J].中国实用神经疾病杂志,2013,16(17):30-32.[4] 康西斌,董保芳,王刚,等.舒芬太尼与瑞芬太尼用于心血管手术的麻醉效果比较[J].中西医结合心血管病电子杂志,2015,3(23): 42-43.[5] 陈烨,蓝天,耿智隆,等.舒芬太尼复合七氟醚在婴幼儿先天性心脏病手术中的应用[J].西北国防医学杂志,2016,37(10):644-646.表1 观察组与对照组不同时段血流动力学变化比较（x -±s ）时间段指标HR(次/分)SBP(mm Hg)DBP(mm Hg)MAP(mm Hg)观察组对照组观察组对照组观察组对照组观察组对照组麻醉前82.15±15.2482.22±16.34135.40±15.51134.55±16.6177.62±10.2177.21±11.3497.23±15.3198.48±14.29插管时60.12±5.2270.21±9.33102.31±11.52106.51±15.2133.43±7.2064.39±13.2970.09±5.2975.38±8.28去骨瓣时73.18±7.0979.20±15.30105.42±10.53118.22±20.1161.11±8.4568.21±13.5472.37±10.4180.09±10.54拔管时80.17±5.2188.22±12.35115.35±10.50130.38±20.5373.29±6.397944±9.4689.11±14.5897.35±20.34艾滋病（AIDS ）又称为获得性免疫缺陷综合征，是由人类免疫缺陷病毒（HIV ）引起的一种性病。
CD4+ 和CD8+ T淋巴细胞检测
CD4＋与CD8+ T淋巴细胞检测1 范围本章规定了用多平台三级程序法与单平台一步法检测全血中得CD４＋与CＤ8＋T淋巴细胞。
2 规范性引用文件1９９7Reｖｉsed Guideｌｉneｓfor PeｒformingＣD4+ T-Cell Deterｍｉnatioｎs in Peｒsons Iｎfecteｄwiｔh Ｈumａn ImmunodeficｉeｎcｙVｉｒｕs (HIV) MMWR 46(ＲＲ—2);1-29 Pubｌiｃatｉon date:0１/10/199７。
3 实验室条件3、１人员进行HIＶ感染者CD4＋与CD8＋Ｔ淋巴细胞检测得人员须具有艾滋病实验室得上岗资格,并接受过省级以上艾滋病实验室安全及实验操作技术培训。
３。
2 设施与设备3.2.1 样品处理区:生物安全柜、离心机、冰箱、水浴箱、旋转振荡器、精确移液器(5μl～50μl、２0μl～200μl、20０μl~１０00μｌ)。
3。
2。
2 流式细胞仪检测区:流式细胞仪3、３功能分区实验室原则上应分为样品处理区与流式细胞仪检测区,各区得功能就是:3、3.1 样品处理区应达到生物安全Ⅱ级(ＢＳL-２)实验室要求,用于样品处理、流式检测样品制备。
3、3、2 流式细胞仪检测区用于制备好得样品上机检测。
４样品采集、运输与接收４、1 样品得采集４、１。
1 选择合适得抗凝剂,分别用于血液学检测与流式细胞仪得免疫表型检测、4.1。
1.1 用于血液学检测得抗凝剂(1) EＤTA(1、5±0.15ｍg/ｍｌ血液)。
(２)在血球分析仪生产商允许得时间范围内检测,不超过30ｈ,不检测超出抗凝时间范围得样品。
4。
１。
１。
２用于流式细胞仪免疫表型检测得抗凝剂(１)用K3ＥＤTＡ抗凝,收集样品应在30h以内,尽早(8h以内)处理。
(2)用ACＤ或肝素抗凝,收集样品在4８h以内,尽早(8ｈ以内)处理。
4、1。
2 静脉采血收集血样,将血液注入一个事先加入适当抗凝剂得试管(用真空试管)。
T淋巴细胞亚群检测，帮助了解你的免疫力
T淋巴细胞亚群是人体重要的细胞群，生活中很多人对这个细胞群并不熟悉，和人体免疫能力息息相关，是人体抵抗外来病原体的重要屏障。
人们谈之色变的艾滋病，之所以会引发极高的死亡率，很多都是因为小病导致的死亡。
究其原因，正是因为艾滋病病毒会破坏人体的T淋巴细胞亚群，导致人体免疫力每况愈下，甚至一场小感冒都有致死率。
因此，为了自身身体健康，每个人都应当加强对免疫系统和T淋巴细胞亚群的了解，从而针对性提高自身免疫力。
1 什么是免疫系统？免疫系统是人体抵御病原体入侵的保卫系统，大致可分成免疫器官、免疫细胞和免疫分子等。
具体而言，免疫器官主要包含胸腺、骨髓和淋巴结等；免疫细胞包括巨噬细胞、树突状细胞、嗜酸细胞、嗜碱细胞、淋巴细胞（T淋巴细胞、B淋巴细胞和NK细胞等）；免疫分子包括细胞因子和抗体等。
可以看出，T淋巴细胞和B淋巴细胞等，都是人体免疫的重要细胞，T淋巴细胞为细胞免疫，可通过效应T细胞可以分泌穿孔素，对宿主细胞中病毒、细胞内寄生菌、外来组织团块和癌变细胞等摧毁，达到免疫目的。
B淋巴细胞则为体液免疫，可以通过效应B细胞分泌抗体，特异性结合抗原，将宿主细胞外的抗原及有毒物质清除。
其中，T淋巴细胞可以视为人体免疫的主力军，可以起到针对原虫、真菌、病毒、细菌的抗感染免疫，也可起到明显的抗肿瘤作用，同样也可主导迟发型变态反应（细胞内寄生虫、移植排斥反应）和自身免疫性疾病等。
2 T淋巴细胞包括什么？T淋巴细胞是一类免疫细胞的总称，当前一经发现的免疫细胞总计上百种，是引导人体免疫的重要细胞，以CD3、CD4和CD8为主要免疫细胞。
具体而言，CD3细胞为成熟T淋巴细胞，可以作为判断人体总T淋巴细胞水平的重要依据，可帮助判断人体免疫状况。
CD4细胞为有效和辅助性细胞，也是人体免疫细胞最重要的枢纽细胞。
CD8可对细胞毒性起到明显抑制作用，可以识别并将致病细胞杀死，并与CD4协同抵御外界病毒入侵。
CD4/CD8比值同样是免疫系统检查时的重要比值，CD4和CD8之间可以相互制约并共同作用，如果比值一旦出现异常表现，即可作为判断人体免疫功能的重要指标。
CD4+ 和CD8+ T淋巴细胞检测
CD4+ 和CD8+ T淋巴细胞检测1围本章规定了用多平台三级程序法和单平台一步法检测全血中的CD4+ 和CD8+ T淋巴细胞。
2规性引用文件1997 Revised Guidelines for Performing CD4+ T-Cell Determinations in Persons Infected with Human Immunodeficiency Virus (HIV) MMWR46(RR-2);1-29 Publication date: 01/10/1997。
3实验室条件3.1 人员进行HIV感染者CD4+ 和CD8+ T淋巴细胞检测的人员须具有艾滋病实验室的上岗资格，并接受过省级以上艾滋病实验室安全及实验操作技术培训。
3.2设施和设备3.2.1样品处理区：生物安全柜、离心机、冰箱、水浴箱、旋转振荡器、精确移液器（5μl~50μl、20μl~200μl、200μl~1000μl）。
3.2.2流式细胞仪检测区：流式细胞仪3.3功能分区实验室原则上应分为样品处理区和流式细胞仪检测区,各区的功能是：3.3.1样品处理区应达到生物安全Ⅱ级（BSL-2）实验室要求，用于样品处理、流式检测样品制备。
3.3.2流式细胞仪检测区用于制备好的样品上机检测。
4样品采集、运输和接收4.1样品的采集4.1.1选择合适的抗凝剂，分别用于血液学检测和流式细胞仪的免疫表型检测。
4.1.1.1用于血液学检测的抗凝剂（1）EDTA（1.5±0.15mg/ml血液）。
（2）在血球分析仪生产商允许的时间围检测，不超过30h，不检测超出抗凝时间围的样品。
4.1.1.2用于流式细胞仪免疫表型检测的抗凝剂（1）用K3EDTA抗凝，收集样品应在30h以，尽早（8h以）处理。
（2）用ACD或肝素抗凝，收集样品在48h以，尽早（8h以）处理。
4.1.2静脉采血收集血样，将血液注入一个事先加入适当抗凝剂的试管（用真空试管）。
如何看懂CD4CD8的比值,多久检测一次小四值？
如何看懂CD4/CD8的比值，多久检测一次小四值？通常A友们在拿到检测单，关注的最多的还是小四，即CD4，当然对于一个全面性的检查不能光看小四数值，尤其是艾滋病这种全身性的免疫缺陷病，那么今天咱们来聊聊CD4及CD4/CD8代表着什么？CD3 淋巴细胞代表全T淋巴细胞，它包括辅助/诱导T淋巴细胞（CD3+CD4+）（病友们简称为CD4）、抑制/细胞毒T淋巴细胞（CD3+CD8+）（病友们简称为CD8）。
CD3 CD4 / CD3 CD8 代表T辅助细胞/T抑制细胞的比值（病友们简称为CD4/CD8比值）。
CD4 加CD8 等于CD3 吗？CD3 理论上应约等于CD4 细胞和CD8 细胞的总和，但往往出现CD4 加CD8 细胞之和大于CD3 ，所以，用CD4、CD8的值来得出CD3的值是不准确的，反之亦然。
我们简单记住——CD3约等于但必然小于CD4加CD8之和。
关于CD4T辅助淋巴细胞带有大量CD4分子，所以叫CD4细胞，简称T4细胞。
它的作用是，有病毒入侵，CD4对免疫系统发出对抗信息，起到免疫应答的枢纽作用。
CD4本身不杀病毒。
HIV病毒对CD4分子有亲嗜性，凡带有CD4分子的细胞就成了它侵害的靶子。
这些细胞主要是T4和巨噬细胞，此外还有粘膜、淋巴结L细胞、神经细胞和树突细胞，它们表面也有CD4分子，也易受到攻击。
在验单上常以“CD3+CD4+T细胞/淋巴细胞”（百分比）或“CD3+CD4+T细胞绝对数”来表示。
CD4标准值到底是多少？CD4细胞正常值标准，在我国多为420以上。
但是正常值范围在不同的国家会有所差别，即便是同一国家的不同地区其指标也可能存在差异，一般比较认可的范围是每微升血中500~1500个。
实验室通过对我国20—40岁青壮年人群样本的检测发现，CD4的平均值为750个左右，但也不乏每微升血中只含有CD4细胞350或者400个的健康成人。
随着年龄增长（如60岁以上），CD4细胞会逐渐减少。
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CD4+ 和CD8+ T淋巴细胞检测
1 范围
本章规定了用多平台三级程序法和单平台一步法检测全血中的CD4+ 和
CD8+ T淋巴细胞。
2 规范性引用文件
1997 Revised Guidelines for Performing CD4+ T-Cell Determinations in Persons Infected with Human Immunodeficiency Virus (HIV) MMWR 46(RR-2);1-29 Publication date: 01/10/1997。
3 实验室条件
3.1 人员
进行HIV感染者CD4+ 和CD8+ T淋巴细胞检测的人员须具有艾滋病实验室的上岗资格，并接受过省级以上艾滋病实验室安全及实验操作技术培训。
3.2 设施和设备
3.2.1 样品处理区：生物安全柜、离心机、冰箱、水浴箱、旋转振荡器、精确移液器（5μl~50μl、20μl~200μl、200μl~1000μl）。
3.2.2 流式细胞仪检测区：流式细胞仪
3.3 功能分区
实验室原则上应分为样品处理区和流式细胞仪检测区,各区的功能是：
3.3.1 样品处理区应达到生物安全Ⅱ级（BSL-2）实验室要求，用于样品处理、流式检测样品制备。
3.3.2 流式细胞仪检测区用于制备好的样品上机检测。
4 样品采集、运输和接收
4.1 样品的采集
4.1.1 选择合适的抗凝剂，分别用于血液学检测和流式细胞仪的免疫表型检测。
4.1.1.1 用于血液学检测的抗凝剂
（1）EDTA（1.5±0.15mg/ml血液）。
（2）在血球分析仪生产商允许的时间范围内检测，不超过30h，不检测超出抗凝时间范围的样品。
4.1.1.2 用于流式细胞仪免疫表型检测的抗凝剂
（1）用K3EDTA抗凝，收集样品应在30h以内，尽早（8h以内）处理。
（2）用ACD或肝素抗凝，收集样品在48h以内，尽早（8h以内）处理。
4.1.2 静脉采血收集血样，将血液注入一个事先加入适当抗凝剂的试管（用真空试管）。
4.1.2.1 当收集儿童样品时，采用儿童用注射器、小试管。
4.1.2.2 采血后立即握住试管两端，颠倒混匀数次，将血液与抗凝剂混匀，以防止凝固。
4.1.3 准备适当数量的样品管
4.1.3.1 当同一样品的血球检测和流式细胞仪免疫表型检测在不同实验室内进行时，用2个装有K3EDTA的试管即可。
4.1.3.2 在所有其它条件下用2个试管（用K3EDTA作血球检测，用K3 EDTA、ACD或肝素作流式细胞仪免疫表型检测）。
4.1.4 对所有样品编号，并写明日期和收集时间。
4.2 样品运输
4.2.1 在室温下（18~23℃）保存和运输样品，避免极端温度（冷冻或过热）。
超过37℃的温度会破坏细胞，对血液学和流式细胞仪的检测有影响。
天气热时，需要用一个隔热的容器装样品，并且把这个容器放于另一个有冰袋和吸热物质的容器中。
这种方法有助样品的保存。
4.2.2 尽可能快地将样品送至免疫表型检测实验室。
4.2.3 如需运送样品到其它地点时，应将装样品的试管放于一个防漏的容器中，并将此容器放于一个装有充足的吸水性物质的纸罐中，以防止震动并可吸收所有因试管破裂漏出的血液。
盖紧纸罐，用橡皮带系紧。
4.2.4 应选择特定的方案，并且安排合适的时间收集和运输样品。
4.3 样品接收
4.3.1 样品到达以后立即检查试管及其所装的血样。
4.3.2 如有以下现象发生，采取正确的方法处理：
4.3.2.1 如果样品较热或较冷，但没有明显的溶血或结冰，可以处理样品，但要在工作表的报告上注明温度条件。
不要马上加热和冷冻样品以使其达到室温，因为这样会对免疫表型检测的结果产生不利的影响，散射光模式的不正常会显示出所受到的影响。
4.3.2.2 不可检测溶血或结冰的样品。
4.3.2.3 不可检测凝血的样品。
4.3.2.4 如果样品的采集时间已超出48h，不可检测。
5 方法
目前用于CD4+ 和CD8+ T淋巴细胞计数的检测方法分为自动检测方法和手工操作法。
自动检测方法包括流式细胞仪（主要采用单平台一步法）和专门的细胞计数仪，手工操作法包括几种手工操作试验，需要显微镜或酶联免疫试验设备。
6 实验资料的记录
6.1 实验应及时、准确地记录结果。
6.2 实验记录中应包括以下内容：日期、操作者、所有样品、实验内容、过程（步骤）、结果及有无事故等。
6.3 整个实验室的实验资料要统一有专人负责，按固定格式记录在案。
6.4 计算机生成的实验结果，存档备案；定期拷贝计算机结果文档，备案保存。
7 结果报告
7.1 按照实验结果填写CD4+ 和CD8+ T淋巴细胞检测报告单，检测人员签字。
7.2 根据CD命名标准报告数据，用一个简短的描述解释命名的意义。
注意：CD4+T细胞是指辅助性T细胞。
正确的报告CD4+ T细胞应该是那些CD4+ 和CD3+ 双阳性的细胞。
同样地，CD8+ T细胞是T-suppressor/cytotoxic细胞，为CD3+ 和CD8+ 双阳性的细胞。
在CD4+ 和CD8+ 的判定中重要的是排除其它细胞（非T 细胞）的干扰。
7.3 以全部淋巴细胞的百分比报告数据，并且修正门内淋巴细胞纯度。
例如，如果淋巴细胞纯度是94%，而CD3值为70%，可以通过0.7除以0.94乘以100
得到74%，修正CD3的值。
7.4 为检测免疫亚群而取血的同时，用该血样作自动测定全血细胞（CBC）计数白细胞（WBC）及分类测定，报告淋巴细胞亚群绝对数值。
7.4.1 用淋巴细胞的总数（来自于WBC及分类）乘以淋巴细胞亚群的百分率（从流式细胞仪的数据中得到），计算绝对数值。
7.4.2 如可能，应报告计数的百分率和绝对值。
7.5 单平台一步法由计算机软件直接出结果并打印出报告单，报告单的内容包括如下结果：CD45+ Abs Cnt；CD3+ Abs Cnt；CD3+ CD4+ %T Lym；CD3+CD4+ Abs Cnt；CD3+CD8+ %T Lym；CD3+CD8+ Abs Cnt；Th/Ts及其正常参考值范围(BD公司建立的正常参考值范围见表3)，检测人员签字。
表3 BD公司应用单平台一步法建立的正常参考值范围表
*另有报告：①0.68-2.47（中华检验医学杂志，2003，26（2）：123-125）
②0.71-2.87（中华检验医学杂志，1998，21（4）：223-227）
③1.38±0.34(中华检验医学杂志，1998，21（2）：98)
7.6 应报告所有相关数据的正常值范围（如CD4＋T淋巴细胞百分率和绝对数）。
每个实验室都应测定参考数值。
应分别建立成人和儿童的正常值参考范围，在对病人样品检测时应使用合适的参考值。
7.7 报告单经复核人复核签字及签发，加盖检验专用公章后发出。
7.8 报告发放时，可经挂号邮寄或直接交给送检人。
8 质量控制和评价
制定质量保证计划，建立内部质量控制制度。
参加室间质量评价。
正常参考数据见7.5。
9 检测CD4+、CD8+ T淋巴细胞的意义
T淋巴细胞是机体免疫系统内功能最重要的一群细胞。
在正常机体内各淋巴细胞亚群相互作用，维持着机体正常免疫功能。
当不同淋巴细胞亚群的数量和功能发生异常时，可导致机体免疫功能紊乱并发生一系列病理变化。
因此，Ｔ淋巴细胞亚群的免疫分型能够提供有关患者免疫状态的重要信息。
AIDS是由HIV引起的一组综合征，HIV主要侵犯人CD4+ T淋巴细胞，导致其数量上的减少和功能缺陷，使机体免疫平衡被打破造成免疫功能低下，最终导致各种机会感染和肿瘤。
因而，对HIV感染者和AIDS病人定期进行CD4+、CD8+T淋巴细胞检测具有十分重要的意义。
主要表现在以下几个方面：
9.1 了解机体的免疫状态以进行疾病分期，如美国CDC就是以此为基础制订了HIV感染者/AIDS病人的诊断和分类标准（见表4），目前国内外仍被采纳应用。
表4 1993年修订的HIV感染的分类系统和青少年及成人扩展的AIDS监测病例定义
备注：A、B、C的解释请参考《艾滋病病毒感染的诊断与治疗》邵一鸣、蒋岩、栾文民主译，
科学出版社，2002年。
9.2 长期监测CD4+ T淋巴细胞绝对数的变化，有助于了解患者的病情发展，决定正确的治疗方案，并观察对治疗的反应。
如判断HIV感染者的临床合并症（当CD4+ T淋巴细胞细胞＜200/ml时，很容易发生卡氏肺孢子虫肺炎；当CD4+ T淋巴细胞<50时，易发生CMV感染）。
9.3 帮助确定抗HIV药物治疗及预防机会性感染治疗的适应症，如当CD4+ T 淋巴细胞＜200/ul时，应给予抗卡氏肺孢子虫肺炎的预防性治疗。
9.4 是用来评价一些新的、针对HIV的治疗方法和治疗药物疗效的重要指标。