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葡萄不同品种和组织中白藜芦醇含量及其抗氧化活性分析陈梦微;邓群仙;张金容;吕秀兰;夏惠;王进【摘要】以6个品种3种色系葡萄的果梗、果皮及部分品种的葡萄籽为材料,采用有机溶剂法提取不同品种葡萄的果梗、果皮和种籽中的白藜芦醇,利用HPLC测定提取液中白藜芦醇的含量,并分析了白藜芦醇对DPPH自由基和羟自由基的清除能力.结果表明,葡萄不同品种和组织间白藜芦醇含量差异显著,整体表现为果梗>果皮>种籽,果皮紫黑色品种>红色>黄绿色;金田0608和夏黑果梗白藜芦醇含量较高(22.4~22.6 μg/g),阳光玫瑰和白罗莎里奥果梗藜芦醇含量很低(1.2~1.8 μg/g).除葡萄籽白藜芦醇含量与DPPH自由基清除率呈显著正相关外,其它组织白藜芦醇含量与自由基清除率无显著相关性.金田0608和夏黑果梗、果皮白藜芦醇提取液清除DPPH自由基和羟自由基的能力较强.%The stems, skin and some varietiesof grape seeds from six varieties classified as three kinds of color grape were used to extracted the resveratrol by organic solvent and then detected its content by HPLC.Moreover, the effect of resveratrol on DPPH radical and hydroxyl radical scavenging ability were also studied.The results showed that the resveratrol content in different grape varieties and tissue distributed differently, and the volume decreased in fruit stem, skin, and pip orderly.Furthermore, it was also found that the resveratrol content in the varieties of purple-black was the highest in the fruit skin, but it was the lowest in the varieties of yellow-green.The resveratrol content in stem of 'Jintian 0608' and 'Summer Black' was higher (22.4~22.6 μg/g), but it was very low (1.2~1.8 μg/g), in those of 'Sunshine Rose' and 'White Rosario' stems.It was confirmed that the resveratrol content in grape pipwas significantly positively related to DPPH free radical clearance, however no significant correlation was found between the content of other tissues and this clearance.Finally, the resveratrol extracts from the fruit stem and skin of 'Jintian 0608' and 'Summer Black' were found showing stronger ability in cleaning both DPPH and hydroxyl radicals than those of the other tissues.【期刊名称】《食品与机械》【年(卷),期】2017(033)001【总页数】5页(P148-152)【关键词】葡萄;白藜芦醇;抗氧化活性【作者】陈梦微;邓群仙;张金容;吕秀兰;夏惠;王进【作者单位】四川农业大学园艺学院,四川成都 611130;四川农业大学园艺学院,四川成都 611130;四川农业大学园艺学院,四川成都 611130;四川农业大学园艺学院,四川成都 611130;四川农业大学园艺学院,四川成都 611130;四川农业大学园艺学院,四川成都 611130【正文语种】中文白藜芦醇(resveratrol，Res)是1940年在毛叶藜芦根部首次发现的，是一种含有芪类结构的非黄酮类多酚化合物，主要存在于葡萄、花生、桑树、虎杖等21个科、31个属的72种植物中[1-2]。
天然产物研究与开发 NATURAL PRODUCT RESEARCH AND DEV ELOPMEN T 2003 Vo1115 No 12 收稿日期:2002205228 修回日期:2002208201白藜芦醇的药理作用机理和合成途径王 征 罗泽民 邓林伟(湖南农业大学理学院生物技术系 长沙 410128)摘 要 白藜芦醇具有多种药理作用,其合成的化学途径与生物途径研究有新的进展。
关键词 白藜芦醇;药理作用;生物合成 1989年,世界卫生组织(WHO )主持的世界心血管疾病控制系统的流行病学调查证实,法国人冠心病的发病率和死亡率比其他西方国家,尤其是比美国人和英国人要低得多。
尽管法国人使用的饱和脂肪酸几乎四倍于美国人和英国人,但法国人罹患心脏病的危险却只是后者的三分之一,发病率为每10万人中61位。
这一现象被为“法国悖论”。
研究表明,此现象与法国是全球最大的葡萄酒生产和消费国密切相关。
因为在优质的葡萄酒中存在一种称为白藜芦醇的物质,它对人体具有重要的保健功能。
白藜芦醇的化学全称为3,5,4′2三羟基2芪,简称三羟基芪。
它有顺式与反式两种构型,后者是白藜芦醇的稳定结构,而且生物活性更加广泛。
其结构式为(图1)图1 3,5,4′2三羟基反式芪Fig 11 t rans 23,5,4′2trihydroxystilbene这种多羟基芪物质是在外来病菌侵入、紫外线照射等不利因素影响下,由植物产生的一种植物抗毒素。
具有明显抗菌、抗炎、抗癌、抗高血脂症、抗脂质过氧化等多方面的活性。
1 白藜芦醇的药理作用及其机理的研究 白藜芦醇的保健功能,引起欧美科学家的普遍兴趣,近几年来,对其药理作用进行了有价值的探索,得出了一些令人鼓舞的结论。
白藜芦醇的保健功能主要表现在以下几个方面:111 白藜芦醇对癌症的起始、增殖、发展三个主要阶段均有抑制乃至逆转作用1997年,美国的科学家[1]以老鼠为对象,由人工方法使老鼠患上皮肤癌,2周后让其服用白藜芦醇,18周后发现,癌症细胞最多可减少98%,最少可减少68%。
葡萄白藜芦醇的提取研究摘要:本文以葡萄白藜芦醇为研究对象,选择乙醇溶液作为提取溶剂,通过单因素实验和正交实验结果分析得知,葡萄白藜芦醇的最佳提取工艺为:料液比为1:20,提取时间为5h,提取温度为75℃,提取溶剂浓度为80%,并且提取时间和料液比对于提取白藜芦醇效率影响最大,在温度分析中,确定最佳的提取温度为75℃。
关键词:白藜芦醇提取单因素正交实验1 仪器与试剂1.1 仪器电子天平(JA5003):上海精称天平;PHS-3C行精密PH计:上海雷磁仪器厂;SHB-3循环水多用真空泵:郑州杜甫仪器厂;UV-754型紫外-可见分光光度计:上海第三分析仪器厂。
1.2 试剂葡萄:葡萄新鲜果实,由超市购买。
无水乙醇、甲醇、丙酮,均为分析纯,去离子水,由实验室超纯水设备纯化提供。
2 实验部分2.1 原料预处理称取200g左右经过筛选去掉细小枝干、小叶等的鲜果实,分装在4～6个培养皿中,铺开,尽量避免重叠。
然后置于真空冷冻干燥机中冻干水分,经48小时后取出,用万能粉碎机粉碎,过100目的筛子,装入密封袋中,密封、避光、4℃下冷藏。
2.2 提取方法回流提取的单因素实验:各取1g葡萄粉末,在其他条件相同的情况下,分别规定提取溶剂(乙醇)、PH、料液比、温度、时间,两次提取的时间比,以提取液稀释后对应的吸光值为指标,逐个考察各提取条件对提取效果的影响,正交试验水平表如表1所示。
3 实验结果与分析3.1 提取溶剂的选择如图1中所示,1～5分别代表乙醇提取溶剂所占的质量分数,白藜芦醇是一种多酚类化合物,极性强,故易溶于极性溶剂。
（如图1）由图1可见,4号提取吸收剂,即80%的乙醇提取效果最好,故提取溶剂选择80%乙醇溶液。
3.2 提取料液比的选择合适的料液比不仅影响到产品的得率,而且对生产成本、仪器要求都有一定的影响,选择适合浓度的料液比能提高回流提取的效率。
通过实验可知,提取的最佳料液比为1:20。
3.3 回流提取温度的选择回流提取温度对提取效果的影响可以看出,温度在75℃时效果最好,低温时不能使白藜芦醇充分溶解出来,而温度过高则会影响到它的稳定性,反而会降低提取得率。
其立项调查研究。
结论与展望葡萄糖氧化酶和过氧化氢酶组成了一个安全有效的抗氧化体系,已经成功地应用于食品工业几十年了。
随着法规及消费者要求低二氧化硫含量葡萄酒的压力的增大,GOX 酶系可能会成为某些类型葡萄酒的实际的二氧化硫的替代或补充品。
另外,GOX 尤其可能对有机葡萄酒发展工业具有吸引力。
因为与化学抗氧化剂相比,GOX 是一种生物体系(自然地发生于葡萄园内),并且只要反应系中的酶系统不被破坏,就可以持续地提供保护作用。
初步的研究指出,GOX 可以被成功地用于稳定瓶装葡萄酒的风味及颜色,特别是对白葡萄酒及粉红葡萄酒。
值得注意的是,在乐观地考虑酶系在葡萄酒类型上的应用,以及在解释GOX 和酚类化合物及传统的葡萄酒防腐剂之间的相互影响方面,还有更多的工作要做。
GOX 酶系和溶菌酶联合应用的可能性研究看来也有着重要的意义和价值。
注:GRA S --公认为安全的(食品添加剂)主要参考文献:1 《P roducti on W ine A nalysis 》,B ruce W 1Zoeck 2lein 12 《Grapegrow er &W inem aker 》,N o 1417。
3感谢罗国光教授审阅并提出修改意见 收稿日期:1999-02-11葡萄酒中的保健物质白藜芦醇3马会勤1 陈尚武2(1.中国农业大学果树系,100094;2.中国农业大学食品学院,北京 100094)摘要 本文介绍了葡萄酒中重要的保健物质白藜芦醇的来源、在各种葡萄酒中的含量、影响含量的因素以及它对人体保健作用的机理,此外还探讨了国内外对白藜芦醇的研究和利用趋势。
关键词 白藜芦醇;葡萄酒;保健作用 通常高蛋白、高脂肪含量的食物容易导致人类发生心血管病,但是在本世纪80年代科学家们奇怪地发现尽管法国人同其他发达国家的居民一样,通过食物摄取了大量的高脂肪、高蛋白、高热量的食物,但他们的心血管病发病率却比其他发达国家低得多。
他们将这一现象称为“法国悖论”。
不同砧木葡萄组织中白藜芦醇含量的差异摘要：用HPLC 法测定由不同砧木嫁接的葡萄果肉、叶柄、种籽、叶片、果皮及果穗轴中白藜芦醇的含量, 发现葡萄各组织中白藜芦醇含量的差异很大。
其中葡萄果穗轴和果皮中的含量较高，其次是叶片、种子和叶柄，葡萄果肉中白藜芦醇含量最低，这一发现从而为应用优选砧木制作高白藜芦醇含量的葡萄酒, 进行为葡萄皮渣的综合利用提供了依据。
关键字:白藜芦醇、葡萄皮渣、果穗轴、高效液相色谱法、毛细管电泳法、气质联用法、薄层扫描法、示波分析法一、白藜芦醇的简介：目前，已知白藜芦醇及其衍生物存在于葡萄属、蓼属、桑树、花生、买麻藤、朝鲜槐等12科、31个属的72种植物中，然而就其含量而言，葡萄属、蓼属最高，并且人类日常生活中摄入白藜芦醇的方式主要有两种：一是饮用红葡萄酒、服药片和保健品等药用方式，二是来自于葡萄皮和葡萄籽以及中药虎杖等。
白藜芦醇（resveratrol, 3,4’,5-三羟基二苯乙烯），存在于葡萄、虎杖、花生、桑葚等许多植物中，其中葡萄，尤其是葡萄皮中含量较高，分子式为C14H12O3，相对分子量为228.25 。
它是葡萄属植物在抵御真菌侵染、机械、紫外线和臭氧等伤害时产生的植保素次生代谢产物，对人类健康特别是预防心血管疾病等方面具有显著功效。
白藜芦醇是一类在多种植物中存在的天然有机化合物，多以单体和其糖苷形式存在，每一种形式又存在顺、反两种异构体，故一般有4 种存在形式：顺式白藜芦醇、反式白藜芦醇、顺式白藜芦醇苷和反式白藜芦醇苷,在自然界中主要以反式存在，为无色针状结晶，熔点为256℃~257℃，升华温度为261℃，易溶于乙醚、氯仿、甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯等有机溶剂。
从大量的研究结果发现，白藜芦醇及其糖苷异构体是生物活性物质，对人体具有保健作用[1] ，它是一种对人类健康有显著作用的天然活性物质，在国际上已引起了广泛的关注。
由于其特殊的保健功能而备受消费者的青睐。
据报道，白黎芦醇除了可以治疗皮炎、癣等过敏性急病外，还能降低血清和肝脏的脂质、减少血小板凝聚、预防动脉硬化、防止冠心病、保护肝脏。
红葡萄皮渣中白藜芦醇的提取分离工艺研究蓝昭军（135****7080）1陈康（135****1575）2 陈晓华（134****2314）11 华南师范大学生命科学学院生物工程一班2 华南师范大学生命科学学院生物科学三班摘要白藜芦醇是一种存在于多种植物的酚类物质，能够阻止低密度脂蛋白的氧化，因而具有潜在的防心血管疾病、防癌、抗病毒及免疫调节作用。
作者分别用95％的乙醇浸取法和超声波破碎法提取葡萄皮渣中的白藜芦醇，利用乙酸乙酯萃取得到粗制的白藜芦醇，比较了乙醇浸取法和超声波破碎法的优劣。
用葡聚糖凝胶层析法分离粗制的白藜芦醇，得到精制的白藜芦醇。
关键词：葡萄皮渣白藜芦醇提取分离凝胶层析1 前言白黎芦醇（Resveratrol，Res），化学名称为芪三酚，分子式C14H12O3，分子量228.25，产生于葡萄叶表皮和浆果果皮中，是植株对真菌病害感染反应的结果。
它以游离态(顺式、反式)和糖苷结合态(顺式、反式)两种形式存在，且均具有抗氧化效能，是葡萄中的一种重要的植物抗毒素。
白藜芦醇是一种极有前途的化学物质,它对肿瘤具有化学预防作用,而且对癌细胞具有选择性杀伤力。
白藜芦醇对治疗心脑血管疾病有很好的疗效,且毒性很小,便于长期服药。
白藜芦醇的抗氧化作用很引人注目,因为它涉及到与人体健康密切相关的许多生理疾病,如动脉粥样硬化、炎症与过敏反应、老年痴呆症、病毒性肝炎等,这些病不仅关系到人们的健康,还进一步关系到人们的生活质量。
白藜芦醇甙近年来的研究状况表明,它具有增强心肌收缩性,调节血管张力,改善微循环,保护肝细胞,降血脂及抗氧化等作用。
白黎芦醇是葡萄植株或果实处在不良环境时而产生的植物抗毒素，它在很多食物中存在，如葡萄、桑葚和花生等。
葡萄酒中都存在白藜芦醇，但红葡萄酒中含量较高。
研究表明，白藜芦醇可通过保护细胞线粒体中的DNA（脱氧核糖核酸）免遭化学损害而发挥延缓衰老功效。
对葡萄果肉、叶柄、种子、叶片、果皮及穗轴的检测发现,各组织中白藜芦醇含量差异较大,穗轴和果皮中的含量较高[1]。
落叶果树㊀２０２０ꎬ５２(４):２０－２２ＤｅｃｉｄｕｏｕｓＦｒｕｉｔｓ㊀㊀试验研究 ㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀ＤＯＩ:㊀１０.１３８５５/ｊ.ｃｎｋｉ.ｌｙｇｓ.２０２０.０４.００７㊀㊀葡萄酒中白藜芦醇含量的测定研究张庆田１ꎬ李清锋２ꎬ王延书３ꎬ毛福建４ꎬ刘雪丽５(１.山东省果树研究所ꎬ山东泰安２７１０００ꎻ２.东营市广饶街道农业综合服务中心ꎻ３.临沂市果茶技术推广服务中心ꎻ４.泰山景区红门管理区ꎻ５.泰山科学技术研究院)㊀㊀摘㊀要:采用高效液相色谱法分别测定了毛葡萄－１㊁毛葡萄－２㊁北国蓝㊁北国红㊁法国蓝５个葡萄品种(系)酿制酒中的白藜芦醇及其醇苷的含量ꎮ结果表明ꎬ葡萄酒中白藜芦醇主要以醇苷的形式存在ꎮ可能因气候原因ꎬ２０１７年的葡萄酒白藜芦醇总含量均高于２０１８年ꎻ适时晚采的酒样白藜芦醇总含量高ꎬ北国蓝葡萄酒的白藜芦醇总含量达到１０.９２ｍｇ/Ｌꎮ㊀㊀关键词:葡萄酒ꎻ白藜芦醇ꎻ白藜芦醇苷ꎻ高效液相色谱㊀㊀中图分类号:㊀Ｓ６６３.１㊀㊀文献标识码:㊀Ａ㊀㊀㊀文章编号:㊀１００２－２９１０(２０２０)０４－００２０－０３ＤｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｒｅｓｖｅｒａｔｒｏｌｉｎｇｒａｐｅｗｉｎｅｓＺｈａｎｇＱｉｎｇｔｉａｎ１ꎬＬｉＱｉｎｇｆｅｎｇ２ꎬＷａｎｇＹａｎｓｈｕ３ꎬＭａｏＦｕｊｉａｎ４ꎬＬｉｕＸｕｅｌｉ５(１.ＳｈａｎｄｏｎｇＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＰｏｍｏｌｏｇｙꎬＴａｉ ａｎꎬＳｈａｎｄｏｎｇ２７１０００ꎬＣｈｉｎａꎻ２.ＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＣｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅＳｅｒｖｉｃｅＣｅｎｔｅｒｏｆＧｕａｎｇｒａｏꎬＤｏｎｇｙｉｎｇＣｉｔｙꎻ３.ＴｅａａｎｄＦｒｕｉｔＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙＳｅｒｖｉｃｅＣｅｎｔｒｅｏｆＬｉｎｙｉꎻ４.ＨｏｎｇｍｅｎＭａｎａｇｅｍｅｎｔＡｒｅａｏｆＭｏｕｎｔａｉｎＴａｉꎻ５.ＴａｉｓｈａｎＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ)㊀㊀Ａｂｓｔｒａｃｔ:ＴｈｅｃｏｎｔｅｎｔｓｏｆｒｅｓｖｅｒａｔｒｏｌａｎｄｐｏｌｙｄａｔｉｎｉｎｆｉｖｅｋｉｎｄｓｏｆｇｒａｐｅｗｉｎｅｗｅｒｅｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄｂｙＨＰＬＣ.Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｒｅｓｖｅｒａｔｒｏｌｍａｉｎｌｙｅｘｉｓｔｅｄｉｎｔｈｅｆｏｒｍｏｆｐｏｌｙｄａｔｉｎ.Ｔｈｅｔｏｔａｌｃｏｎ￣ｔｅｎｔｏｆｒｅｓｖｅｒａｔｒｏｌｉｎ２０１７ｗａｓｈｉｇｈｅｒｔｈａｎｔｈａｔｉｎ２０１８ꎬｐｏｓｓｉｂｌｙｂｅｃａｕｓｅｏｆｔｈｅｃｌｉｍａｔｅ.ＴｈｅｔｏｔａｌｒｅｓｖｅｒａｔｒｏｌｃｏｎｔｅｎｔｏｆｔｈｅｓａｍｐｌｅｓｌａｔｅｃｏｌｌｅｃｔｅｄｗｅｒｅｈｉｇｈꎬａｍｏｎｇｗｈｉｃｈｔｈｅｔｏｔａｌｃｏｎｔｅｎｔｏｆＢｅｉｇｕｏ￣ｌａｎｗｉｎｅｒｅａｃｈｅｄ１０.９２ｍｇ/Ｌ.㊀㊀Ｋｅｙｗｏｒｄｓ:ｗｉｎｅꎻｒｅｓｖｅｒａｔｒｏｌꎻｐｏｌｙｄａｔｉｎꎻｈｉｇｈｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅｌｉｑｕｉｄｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ收稿日期:２０１９－０２－２５基金项目:山东省重点研发计划(２０１９ＪＺＺＹ０１０７２７)ꎻ山东省农业科学院农业科技创新工程(ＣＸＧＣ２０１６Ａ０３)ꎻ泰安市农业良种工程(２０１７ＬＺ００６)ꎻ泰安市科技发展计划(２０１７ＮＳ００９７)ꎻ山东省重大科技创新工程项目(２０１８ＣＸＧＣ０２０８)ꎮ作者简介:张庆田(１９８１－)ꎬ男ꎬ山东新泰人ꎬ助理研究员ꎬ研究方向为果树资源评价与育种ꎮＥ－ｍａｉｌ:ｚｑｔ１２３＿１９８１＠１２６.ｃｏｍ㊀㊀白藜芦醇(Ｒｅｓｖｅｒａｔｒｏｌ)化学名称为芪三酚(３ꎬ４ꎬ５－ｔｒｉｈｙｄｒｏｘｙｓｔｉｌｂｅｎｅ)ꎬ有正式㊁反式白藜芦醇和正式㊁反式白藜芦醇苷[１－３]ꎬ在葡萄上主要积聚在叶片和果皮中ꎬ具有同样的生物活性ꎬ能抵御霉菌侵染㊁紫外线辐射以及化学损伤[４]ꎮ在肠道糖苷酶的作用下ꎬ白藜芦醇苷可分解为白藜芦醇[５]ꎮ现代药理实验证明ꎬ白藜芦醇具有抗炎㊁抗肿瘤㊁抗氧化㊁抗心血管疾病㊁抗血小板聚集㊁调节免疫㊁保护肝脏等药理作用[６－１０]ꎮ葡萄酒是人类摄入白藜芦醇及白藜芦醇衍生物的途径之一ꎮ白藜芦醇是检测葡萄酒品质的一个指标ꎬ葡萄酒中白藜芦醇主要以稳定的白藜芦醇苷形式存在ꎮ２０１７㊁２０１８年笔者采用高效液相色谱法分析了毛葡萄－１㊁毛葡萄－２㊁北国蓝㊁北国红㊁法国蓝５个葡萄品种(系)酿制酒中的白藜芦醇和白藜芦醇苷的含量ꎬ为进一步对葡萄品种进行开发利用奠定基础ꎮ０２第４期张庆田等:葡萄酒中白藜芦醇含量的测定研究１㊀材料与方法１.１㊀试验材料葡萄酒:山东省果树研究所资源圃中毛葡萄－１㊁毛葡萄－２㊁北国蓝(图１)㊁北国红㊁法国蓝５个品种(系)分别自酿的葡萄酒ꎮ图１㊀北国蓝结果状㊀㊀试剂:无水乙醇㊁甲醇㊁石油醚(天津市光复科技发展有限公司ꎬ分析纯)ꎻ乙腈(天津市光复科技发展有限公司ꎬ色谱纯)ꎻ白藜芦醇标准样品(天津尖峰ꎬ纯度９９％)ꎻ反式白藜芦醇苷标样(贵州迪大ꎬ纯度９８％)ꎮ仪器:高效液相色谱仪(美国Ａｇｌｉｅｎｔ１２６０系列)ꎻＳＰ－ＫＱ－３００ＤＥ数控型超声波清洗器ꎮ１.２㊀白藜芦醇与白藜芦醇苷含量的测定酒样过滤进样ꎬ梯度洗脱ꎬ由Ａ相(超纯水)与Ｂ相(乙腈)混合过程中Ｂ相所占比例确定ꎮ梯度洗脱条件为:０~１０分钟内Ｂ相从５％线性增至１５％ꎬ１０~２０分钟增至３０％ꎬ２０~３０分钟增至５０％ꎬ３０~３５分钟增至１００％ꎬ３５~４０分钟降至５％ꎬ保持１０分钟ꎬ二极管阵列检测器(ＤＡＤ)检测波长为３０６ｎｍꎬ２８８ｎｍꎬ进样量１０μＬꎮ总白藜芦醇含量(ｍｇ/Ｌ)＝白藜芦醇含量ˑ２２８.２４/３９０.３８＋白藜芦醇含量(其中ꎬ白藜芦醇分子量为２２８.２４ꎬ白藜芦醇苷分子含量为３９０.３８)ꎮ２㊀结果与分析２.１㊀白藜芦醇及醇苷的色谱曲线及其定量关系白藜芦醇及醇苷中存在双键ꎬ故存在正㊁反式异构体ꎮ在紫外线照射下反式白藜芦醇及醇苷可以等摩尔量地转化为正式异构体ꎬ并无其它产物ꎮ液相色谱采用时间定性ꎬ由标准品的出峰时间判定样品中目标物质的出峰时间ꎮ含量由峰面积通过线性关系计算而来ꎮ采用反式白藜芦醇及醇苷色谱峰面积减少的方法来定量研究正式白藜芦醇及醇苷的含量ꎮ吸取葡萄酒样１０μＬꎬ按色谱条件测定(图２㊁图３)ꎮ两图说明该色谱条件下标准品和样品中的目标物质可以得到很好地分离ꎬ从而较精确地计算含量ꎮ图２只展示北国蓝葡萄酿制酒的色谱图ꎬ另外４个品种毛葡萄－１㊁毛葡萄－２㊁北国红㊁法国蓝的都有各自的色谱图ꎬ都在同色谱条件下ꎬ标准品和样品中的目标物质可以得到很好的分离和精确的计算含量ꎮ图２㊀白藜芦醇及醇苷标准品色谱图图３㊀２０１７北国蓝酒样色谱图２.２㊀葡萄酒中白藜芦醇含量葡萄酒中白藜芦醇的含量受酿造品种㊁葡萄生长发育的地理环境和酿酒工艺等多种因素影响ꎮ如表１ꎬ供试５个葡萄品种酿制酒中的白藜芦醇苷含量均高于白藜芦醇含量ꎮ同一葡萄品种不同采收期酿制酒中的白藜芦醇含量不同ꎬ２０１７年晚采收１个月的北国蓝其酒样含量高达１０.９２ｍｇ/Ｌꎬ采收年份不同白藜芦醇含量也不同ꎬ所有品种均以２０１７年含量较高ꎬ这或许与该年度园区干旱有关ꎮ２０１８年的４个样品未检测到正式白藜芦醇ꎬ可能是因为正式白藜芦醇异构体光敏性强㊁极不稳定ꎬ会等量转换成反式白藜芦醇ꎮ１２落㊀叶㊀果㊀树第５２卷表１㊀葡萄酒样白藜芦醇与白藜芦醇苷含量测定结果年度酒样反式白藜芦醇苷(ｍｇ/Ｌ)正式白藜芦醇苷(ｍｇ/Ｌ)反式白藜芦醇(ｍｇ/Ｌ)正式白藜芦醇(ｍｇ/Ｌ)总白藜芦醇(ｍｇ/Ｌ)２０１７晚采北国蓝７.４５１０.７６０.１２０.１５１０.９２２０１７晚采毛葡萄－１５.６３７.４５０.１３０.１２７.９０２０１７北国蓝４.７７２.１４０.９５０.１１５.１０２０１７北国红３.６４２.７６０.３８０.１８４.３０２０１７毛葡萄－１３.０７２.８４０.１８０.２５３.８９２０１７毛葡萄－２３.９５１.８９１.０４０.１２４.５７２０１７法国蓝０.６４０.７９０.３９０.１３１.３６２０１８北国蓝１.６９１.６９９０.４７０.１６２.６１２０１８北国红１.０１２.２８０.２２－２.１４２０１８毛葡萄－１１.７２１.１９０.２３－１.９３２０１８毛葡萄－２１.６２０.９５０.１８－１.６８２０１８法国蓝０.８７０.９８０.２５－１.３３３㊀小结与讨论在自然界中ꎬ白藜芦醇存在于葡萄㊁虎杖㊁花生㊁桑椹等植物中ꎬ其中葡萄和葡萄加工品被认为是人类食品中白藜芦醇的最重要来源ꎮ白藜芦醇作为葡萄与葡萄酒一种重要的活性成分ꎬ是评价葡萄和葡萄酒的重要保健指标之一[１１ꎬ１２]ꎮ白藜芦醇主要以稳定的醇苷形式存在ꎮ大部分研究证明ꎬ白藜芦醇是植物对外界不良环境产生的一种应激物质ꎮ因此ꎬ葡萄酒白藜芦醇的含量高低与葡萄的生长环境㊁气候条件㊁采收年份㊁真菌感染等多种因素密切相关[１３ꎬ１４]ꎮ试验结果也验证了采收时期和年份对白藜芦醇含量有较大的影响ꎬ有必要进一步开展不同采收期对酒样品质及白藜芦醇含量的影响研究ꎬ确定最佳采收时期以提高酿酒品质ꎮ参考文献:[１]㊀冯永红ꎬ许实波.白黎芦醇药理作用研究进展[Ｊ].国外医药(植物药分册)ꎬ１９９６ꎬ１１(４):１５５－１５７.[２]㊀杨莹ꎬ管敬喜ꎬ谢太理ꎬ等.不同单品种葡萄酒中白藜芦醇以及白藜芦醇苷含量的研究[Ｊ].酿酒科技ꎬ２０１２(３):３０－３３.[３]㊀ＳｏｌｅａｓＧＬꎬＤｉａｍａｎｄｉｓＥＰꎬＧｏｌｄｈｃｒｙＤＭ.Ｒｅｓｖｅｒａｔｒｏｌ:Ａｍｏｌｅｃｕｌｅｗｈｏｓｅｔｉｍｅｈａｓｃｏｍｅ?ａｎｄｇｏｎｅ?[Ｊ].ＣｌｉｎｉｃａｌＢｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙꎬ１９９７ꎬ３０(２):９１－１１３.[４]㊀ＭｏｒｅｎｏＡꎬＣａｓｔｒｏＭꎬＦａｌｑｕｅＥ.Ｅｖｏｌｕｔｉｏｎｏｆｔｒａｎｓ－ａｎｄｃｉｓ－ｒｅｓ￣ｖｅｒａｔｒｏｌｉｎｒｅｄｇｒａｐｅｓｄｕｒｉｎｇｒｉｐｅｎｉｎｇ[Ｊ].ＥｕｒＦｏｏｄＲｅｓＴｅｃｈｎｏ１ꎬ２００８ꎬ２２７:６６７－６７４.[５]㊀舒友琴.葡萄酒中白藜芦醇及其糖苷异构体的快速测定方法研究[Ｄ].北京:中国农业大学ꎬ２００４.[６]㊀ＡｇｇａｒｗａｌＢＢꎬＢｈａｒｄｗａｊＡꎬＡｇｇａｒｗａｌＲＳꎬｅｔａｌ.Ｒｏｌｅｏｆｒｅｓｖｅｒａｔｒｏｌｉｎｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎａｎｄｔｈｅｒａｐｙｏｆｃａｎｃｅｒ:ｐｒｅｃｌｉｎｉｃａｌａｎｄｃｌｉｎｉｃａｌｓｔｕｄｉｅｓ[Ｊ].ＡｎｔｉｃａｎｃｅｒＲｅｓｅａｒｃｈꎬ２００４(２４):２７８３－２８４０.[７]㊀ＳｏｌｅａｓＧＪꎬＧｒａｓｓＬꎬＪｏｓｅｐｈｙＰＤꎬｅｔａｌ.Ａｃｏｍｐａｒｉｓｏｎｏｆｔｈｅａｎｔｉ￣ｃａｒｃｉｎｏｇｅｎｉｃｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓｏｆｆｏｕｒｒｅｄｗｉｎｅｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌｓ[Ｊ].ＣｌｉｎＢｉｏ￣ｃｈｅｍꎬ２００２(３５):１１９－１２４.[８]㊀ＷｈｉｔｓｅｔｔＴꎬＣａｒｐｅｎｔｅｒＭꎬＬａｍａｒｔｉｎｉｅｒｅＣＡ.ＲｅｓｖｅｒａｔｒｏｌꎬｂｕｔｎｏｔＥＧＣＧꎬｉｎｔｈｅｄｉｅｔｓｕｐｐｒｅｓｓｅｓＤＭＢＡ－ｉｎｄｕｃｅｄｍａｍｍａｒｙｃａｎｃｅｒｉｎｒａｔｓ[Ｊ].ＪＣａｒｃｉｎｏｇꎬ２００６(５):１５.[９]㊀肖本熙ꎬ黄忆明.白藜芦醇对去卵巢大鼠骨密度的影响[Ｊ].营养学报ꎬ２００５(２７):５１０－５１３.[１０]㊀黄瑞民ꎬ张娟ꎬ李凯ꎬ等.宁夏干红葡萄酒中反式白藜芦醇的含量测定[Ｊ].华中师范大学学报(自然科学版)ꎬ２０１８ꎬ５２(５):６７３－６７７.[１１]㊀张静ꎬ范永ꎬ王振平.贺兰山东麓不同酿酒葡萄品种成熟期白藜芦醇含量的差异[Ｊ].北方园艺ꎬ２０１７(２２):３２－３６.[１２]㊀郑先波ꎬ申炎龙ꎬ史江莉ꎬ等.中国野生葡萄果皮和叶片白藜芦醇含量测定[Ｊ].果树学报ꎬ２０１６ꎬ３３(９):１０９２－１１０２.[１３]㊀段朝辉.中国葡萄野生种白藜芦醇含量分析的研究[Ｄ].陕西杨凌:西北农林科技大学ꎬ２００２.[１４]㊀柴菊华ꎬ孙晓伟ꎬ崔彦志ꎬ等.ＨＰＬＣ法测定葡萄酒中白藜芦醇的含量[Ｊ].食品研究与开发ꎬ２０１４ꎬ３５(２２):１０６－１１０.２２。
葡萄中白藜芦醇的含量及功能研究摘要：白藜芦醇在人体中有降血脂、防血栓、抗癌、抗氧化、抗菌和预防老年痴呆等多种生理功能。
在植物中也是一种抗毒素。
本文总结了葡萄不同品种及部位白藜芦醇的含量差异，并对影响白藜芦醇含量的影响因素进行了总结。
关键词：葡萄白藜芦醇生理功能含量差异影响因素白藜芦醇化学名称为芪三酚（Resveratrol，3,4',5-三羟基二苯乙烯），是植物界分布较广的羟基二苯乙烯芪类化合物，属于二苯乙烯衍生物。
白藜芦醇有顺式和反式两种异构体。
自然界中的白藜芦醇以游离态和化合态两种形式存在，化合态以糖苷和低聚物的形式存在，故白藜芦醇一般有4种存在形式：顺、反式白藜芦醇和顺、反式白藜芦醇糖苷。
1 Res对人类疾病的药理作用流行病学调查发现，长期适量饮用红葡萄酒能够降低心血管疾病的发病率和死亡率，其中的Res是主要的活性物质，并发挥了重要作用。
近年来，国内外越来越多的研究表明，Res 具有多种生物学效用。
Res能与人体内雌性激素受体结合，调节血液中胆固醇水平，有效减少人罹患心血管病的危险[2]；Res还能抑制低密度脂蛋白过氧化和血小板凝集，调节脂类蛋白代谢水平，降低人体血脂，具有良好预防动脉粥样硬化和冠心病效果[3-4]。
Res还具有强抗氧化和抗自由基功能，1.3 μg/mL的白藜芦醇能明显抑制大鼠红细胞的自氧化溶血和由H2O2引起的氧化溶血，并对小鼠心、肝、脑、肾的体内外过氧化脂质的产生有明显抑制作用[6]。
Res具有抗突变以及抗癌作用，能抑制环加氧酶和过氧化氢酶的活性，在癌细胞的起始、增殖、发展3个主要阶段均有抑制乃至逆转作用[7]；Res可使老鼠皮肤癌细胞最多可减少98%[8]，能诱导人早幼粒细胞性白血病细胞株HL-60的分化[9]，被喻为继紫杉醇之后的又一新的绿色抗癌药物。
Res具有明显的辐射保护作用[10]，并影响骨骼代谢[11]等。
Res衍生物piceatannol具有和Res相同的抗癌[12]、免疫调节、抗菌、抗脂质氧化和抗癌细胞增殖的活性[13]。
此外，Res及其衍生物在肝脏保护、激活长寿基因、防治神经性疾病等方面也起着重要作用[14]。
因此，Res广泛应用于医药、保健品、化妆品和食品添加剂等领域。
2 葡萄Res对植物病害的抵抗作用Res作为葡萄属植物的一种抗毒素被发现后，引起了科学家的高度重视。
Langcake[15]等首次在葡萄叶片中发现Res，并能抵抗灰霉病（Botrytis cinerea）的侵染。
Pont[16]等认为白黎芦醇抗灰霉病的活性与其亲脂性大小、分子体积及电子特性相关，并破坏细胞膜的结构，影响电子的有效传递。
Hain[17]等将分离出的葡萄茎STS基因转到烟草中，结果发现这些烟草在受到病原菌感染时，感染部位有大量Res的积累，并且其合成Res能力与烟草抗灰霉病的能力呈正相关。
郜海燕[11]等研究发现，葡萄在遭到霜霉菌（Plasmopara viticola）侵染后，在没有被侵染且离坏死果实较近的部位其白藜芦醇的含量较高，说明Res作为植物抗毒素可以有效地抑制坏死区的扩展。
Dercks[18]等发现了17个葡萄品种对霜霉病的抗性与紫外线诱导产生Res的能力正相关。
John[19]等研究发现，Res与抗真菌能力相关。
从野生葡萄中提取的Res对金黄色葡萄球菌（Slaphylococcus aureus）、耻垢分支杆菌（Mycobaeteriam smegmatis）、表皮葡萄球菌（S.epidermidis）有较强的抑制作用，且大量报道葡萄中Res含量的高低与抗真菌能力有关[20]。
Schnee[21]比较研究了不同葡萄品种对白粉菌（Erysiphe necator）的抗性，发现敏感品种感染病菌后产生的大量Res迅速糖基化为较小毒性的白藜芦醇苷（piceid，PD），而抗性品种感染病菌后产生的大量Res则迅速氧化为更高毒性的白藜芦醇聚合体（viniferins）。
3葡萄Res含量研究葡萄不同品种间Res含量不同。
国内外大量学者对葡萄组织中Res含量进行研究，结果发现葡萄各品种间Res含量存在较大差异。
葡萄Res含量可能与生长环境、果实性状、用途等相关联，研究发现有核品种Res含量显著高于无核品种。
李婷[22]等用HPLC法测定14个葡萄品种Res含量，结果表明：酿酒葡萄中的Res含量明显高于鲜食葡萄，供试葡萄品种中以黑比诺的Res含量相对较高。
Li[23]等从种质资源水平上评价葡萄Res含量，结果发现种间杂交的砧木品种果皮和种子的Res含量显著高于其他栽培品种（美洲种＞欧亚种）。
葡萄不同器官间Res含量也存在着显著差异。
在正常生长状况下，葡萄果皮、种子含有较高的Res，果肉中很少，叶是检测Res最主要的器官，花和芽合成Res能力很低。
谢红旗[24]等测定葡萄的生长器官的Res含量，结果表明：主藤＞侧藤＞支藤＞根＞叶片≈叶柄；各部位白藜芦醇在生长期含量变化趋势是先升后降，变化趋势较小。
陈雷[25等对葡萄果肉、叶柄、种子、叶片、果皮及穗轴的检测发现，果穗轴和果皮中的Res含量较高，叶片和种子中的含量相对较低，果肉部分最低，而李婷[26]等研究发现：Res含量为果梗、叶片＞果皮＞种子＞叶柄。
赵权[27]等对山葡萄叶、茎、卷须、果实检测发现，卷须＞茎＞种子＞果皮果肉。
叶中白藜芦醇含量最高，达20.12 μg/g。
邓建平等研究了成熟度与Res含量之间的关系，结果表明成熟果皮＞成熟叶＞茎段；成熟果皮＞嫩果皮；成熟叶＞老叶＞嫩叶。
萄植植株某些器官之间Res含量存在着一定的相关性，研究结果表明：葡萄浆果中Res的含量与叶子中的含量呈正相关[28]。
4葡萄中Res含量的影响因素4.1影响葡萄中Res含量的内在因素Res是植物在受到病原形进攻和在环境恶化时产生的一种植物抗毒素[29]。
真菌细胞壁碎片常被用在刺激葡萄发生灰霉病感染的某些过程，例如通过酸的水解作用，葡萄属植物细胞从真菌细胞壁中可得到葡聚糖激发子、可溶性碎片、可溶性片段可阻断常规蛋白的合成，而启动一小部分与诱导抗性有关的蛋白的合成，经过诱导被强化的葡萄属植物细胞在葡聚糖激发子、可溶性碎片共同作用下产生Res及其衍生物[30]，末尾阶段是Res合成酶（简称RS）将一分子的对香豆酰辅酶A（P-coumarogl)）和三分子的丙二酰辅酶A（malonyl-CoA），经苯丙氨酸聚丙二酸盐路径，转化为几种Res[31]。
在Res的生物合成过程中有5种酶已被发现：合酶（简称STS），是人们研究最透彻的一种酶，STS的合成在整个Res的合成过程中速度是最快的，从空间角度来说，STS呈现微观的不均一性，是带一个亚基的二聚体，分子量为43000，等电点RI=5.4[32]。
进一步研究发现它是负责酚类形成及Res合成的，整段的STS的cDNA是从葡萄属植物的mRNA序列开始的，含有39种氨基酸的片段，用PSV25作载体片段再分别插入到载体PKK233-2和PDS12/RBSH-2所得到的cDNA基因库在大肠杆菌中的表达产生了一个单独展示STS活性的二聚体[33-34]。
通过对臭氧在欧亚种葡萄品种上诱导STS 转录表达的研究（此研究是通过溶合TST启动子与β-葡萄糖苷酸酶（GUS）报告基因，再转化到烟草上），发现0.1mg/L臭氧处理10h可以使GUS基因表达提高11倍，GUS基因活性组织化学定位发现其活性表达呈斑点状分布于整个叶片。
叶片的横切面组织化学定位表明STS的启动子（Vst1）在栅栏组织、海绵薄壁组织中被诱导，表皮组织细胞中表达较少。
5＇端缺失表明部分启动序列在-430和-280处构建臭氧反应作用区，有效病原菌灰霉病诱导应从-280到-140[35]。
Reniero等[36]从葡萄栽培品种霞多丽（Chardor-nay）的根中分离到Res的二聚体。
Pool[37]等测试了15种葡萄成熟节间的木质部，发现其Res的含量不同。
叶是检测Res使用最多、最方便的器官。
芽和花合成Res的能力较低。
果皮、果穗轴中含有较高的Res，尤其是果穗轴中，含量更可观，可达81.37mg·g-1[38]，是人类未来从饮食中摄取Res 的主要源泉。
青铜色和黑色果皮的圆叶葡萄，种子和果实与其它部分相比，Res的含量约占总量的23.4~30.1%。
果实的果肉部分Res的含量很低，有些品种根本就不含Res[39-40]。
葡萄植株某些器官之间Res含量存在着一定的相关性。
研究结果表明：葡萄浆果中Res的含量与叶子中的含量呈正相关[41]。
葡萄植物仅在适当的时期才合成Res，并且能合成的时期较短暂。
Res无论是否产生抗病作用，其含量都将呈下降趋势[42]。
Dercks等[43]调查了对霜霉病呈抗性、中抗、感病3个类型的不同品种，认为抗病品种卡斯特在霜霉病发病期可以一直保持较高的水平；抗病中等的Rupestris6544接种病菌后的最初几个小时积累一定量的Res，但积累水平很快下降；感病品种雷斯令一直呈下降趋势。
Res的明显动态变化期出现在果实成熟期，其含量下降很快[44-45]。
Jeandet[46]调查了葡萄栽培品种黑比诺（Pinot noir），认为Res的含量是易变的。
黑比诺与美洲葡萄（labrusca）浆果的Res含量在着色期后一直下降，黑比诺最后几乎接近于零。
Res在果皮中的含量与果实成熟过程中糖的含量呈负相关[47]。
Jeandet等[48]的研究认为，Res在果实成熟期骤然下降，这种源于葡萄不同生长期和花青素苷的消长关系，Res的前体为苯基苯乙烯酮，而此物的合成需要一种酶，这种酶又是花青素苷合成的关键酶，两种合成相抗争的结果，出现了Res合成能力的下降伴随着一系列花青素苷物质的升高。
4.2影响葡萄中Res的外在因素4.2.1紫外线（UV）紫外线照射是Res产生的必要外部因素之一。
紫外线最高峰值为260~270nm时可有效诱导Res的产生。
用通量率为1W/m2的UV（270nm）照射10min，4h后Res的合成酶活性达到最大，在低通量率照射下，合成酶达到最大活性时所需时间加长[49]，254nm以下的UV 对Res有破坏作用。
在照以高强度的UV时，溶于乙醇中的tras-Res能转变为cis-Res[50]。
4.2.2温度、湿度生长在湿热条件下的葡萄比生长在气候寒冷、干燥条件下的葡萄，由于病害侵染的压力较大，果实中所含的Res也较高[51]。
4.2.3病菌侵染胁迫研究认为[52]，对每个栽培品种来说，增加菌种的密度都会导致Res合成能力的提高。
10.2.4机械损伤果皮的机械损伤导致正常浆果合成Res能力下降。
4.2.5杀菌剂Dercks等[53]在葡萄霜霉病方面研究了杀菌剂（Fosetyl）对Res的积累的影响，此研究包括两个内容，是否需接种病菌孢子及FosetyL-A1的使用时期。
