选修一：专题二：课题1微生物的实验室培养学案

专题2 微生物的培养与应用课题1 微生物的实验室培养（第一课时）一、基础知识1．培养基(1)概念：人们按照微生物对__营养物质___的不同需求，配制出供其_生长和繁殖__的营养基质__。

(2)成分：一般含有__水__、__碳源_、__氮源__、_无机盐__，此外还要满足微生物对特殊营养物质(即生长因子)、____PH____以及氧气的需求。

常用于培养病毒的是活鸡胚。

⑭培养基配置原则：(1)目的要明确_(根据微生物的种类、培养目的等)，如培养基可由简单的无机物组成；生产用培养基内可加入化学成分不明确的天然物质，而分类鉴定用培养基内必须加入已知化学成分的物质。

(2)营养要协调_，注意各种营养物质的浓度和比例。

(3)pH要适宜_，各种微生物适宜生长的pH范围不同，细菌6.5～7.5、放线菌7.5～8.5、真菌5.0～6.0。

2．无菌技术(1)概念：防止一切外来杂菌的侵入，并保持灭菌物品及无菌区域不再被污染的方法，称为无菌技术。

注意在微生物的实验室培养中，无菌技术的核心是防止外来杂菌的入侵。

(2)无菌技术的具体内容①对实验操作的_空间、操作者的__衣着和手__进行清洁和消毒。

②将用于微生物培养的__器皿、接种用具和培养基等进行_灭菌_。

③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在_酒精灯火焰附近_进行。

④实验操作时应避免已___灭菌_处理的材料用具与周围的物品相接触。

(3)消毒和灭菌的概念①消毒：消毒是指使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的_对人体有害的微生物_(不包括芽孢和孢子)。

②灭菌：灭菌是指使用_强烈_的理化因素杀死物体内外_所有的微生物，包括_不包括芽孢和孢子_。

③消毒与灭菌的区别：两者最大的区别是__是否能杀死芽孢和孢子__。

拓展深化某些细菌在其生长发育后期，可在细胞内形成一个圆形的抗逆性休眠体，称为芽孢。

每个细菌细胞仅形成一个芽孢，故它无繁殖功能。

芽孢有极强的抗热、抗辐射、抗化学药物和抗静水压的能力。

人教版高中生物选修一专题2课题1微生物的实验室培养教学案含解析.微生物的实验室培养1.培养基中需含有碳源、氮源、水和无机盐等营养物质。

2．消毒的目的是杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物，灭菌则是杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。

3．实验室常用煮沸消毒法、巴氏消毒法和使用紫外线或化学药剂进行消毒，常用的灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌等。

4．固体培养基的配制过程为：计算―→称量―→溶化―→灭菌―→倒平板。

5．微生物接种最常用的方法是平板划线法和稀释涂布平板法。

6．长期保存菌种可以采用甘油管藏法。

一、培养基1．概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出的供其生长繁殖的营养基质。

2．种类：(按物理性质分)3．营养构成：各种培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。

二、无菌技术1．获取纯净培养物的方法.消毒灭菌较为温和强烈物体表面或内部的部分微生物物体内外所有的微生物不能能(2)常用方法：[连线]三、大肠杆菌的纯化培养1．制备牛肉膏蛋白胨固体培养基(1)操作步骤：计算→称量→溶化→灭菌→倒平板(2)倒平板的方法及注意事项：①请用文字和箭头写出正确的倒平板操作流程：丙→乙→甲→丁。

②甲、乙、丙中的灭菌方法是灼烧灭菌。

③丁中的操作需要等待平板冷却凝固才能进行。

2．纯化大肠杆菌(1)纯化原理：在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞，使其长成单个的菌落，这个菌落就是一个纯化的细菌菌落。

.(2)接种方法：①平板划线法：通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。

②稀释涂布平板法：将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。

..(3)培养：将接种后的培养基和一个未接种的培养基都放入37_℃恒温箱中，培养12.h和24.h后，分别观察、记录。

四、菌种的保存[连线]1．不同培养基的具体配方不同，但一般都含(..)A．碳源、磷酸盐和维生素B．氮源和维生素C．水、碳源、氮源和无机盐D．碳元素、氧元素、氢元素、氮元素解析：选C.培养基中一般都含有水、碳源、氮源和无机盐，此外还应考虑pH、特殊营养物质及O2等条件。

专题1 微生物的培养与应用课题1 微生物的实验室培养【学习目标】1.了解有关培养基的基础知识2.进行无菌技术的操作3.进行微生物的培养【重点难点】重点：无菌技术的操作难点：无菌技术的操作【预习案】任务一、基础知识1.培养基（1）培养基的种类包括培养基和培养基等。

（2）培养基的化学成分一般都含有、、、四类营养成分，（3）在提供上述几种主要营养物质的基础上，培养基还需要满足微生物生长对、以及等的要求。

例如：培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加；培养霉菌时需要将培养基的PH调至；培养细菌时需要将培养基的PH 调至；培养厌氧微生物时需要提供无氧的条件2.无菌技术（1）获得纯净培养物的关键是。

避免杂菌污染的方法主要包括以下四个内容：①②③④（2）消毒是指灭菌是指（3）实验室常用的消毒方法是，此外，人们也常使用化学药剂进行消毒，如用、等。

常用的灭菌方法有、、，此外，实验室里还用或进行消毒。

任务二、实验操作1.制备牛肉膏蛋白胨固体培养基（1）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的方法步骤：→→→→倒平板2.纯化大肠杆菌（1）微生物接种的方法中最常用的是和。

平板划线法是指。

稀释涂布平板法是指。

【探究案】探究点一概括制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤。

认真阅读P17倒平板操作过程，并回答讨论的问题。

探究点二微生物纯化培养技术中的平板划线法和稀释涂布平板法的原理分别是什么？探究点三认真阅读P18平板划线法的操作过程，用红笔画出关键词，并回答讨论的问题。

探究点四认真阅读P19稀释涂布平板法的操作过程，用红笔画出关键词，并回答讨论的问题。

【训练案】1．下列有关培养基的叙述正确的是( )A．培养基是为微生物的生长繁殖提供营养的基质B．培养基只有两类：液体培养基和固体培养基C．固体培养基中加入少量水即可制成液体培养基D．微生物在固体培养基上生长时，可以形成肉眼可见的单个菌落2.不同培养基的具体配方不同，但一般都含( )A．碳源、磷酸盐和维生素B．氮源和维生素C．水、碳源、氮源和无机盐D．碳元素、氧元素、氢元素、氮元素3．获得纯净培养物的关键是( )A．将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌B．接种纯种细菌C．适宜环境条件下培养D．防止外来杂菌的入侵4．下列常用的无菌操作中错误的是( )A．用酒精擦拭双手B．用氯气消毒水源C．验操作应在酒精灯火焰附近进行D．玻璃器皿(吸管、培养皿)可用酒精擦拭5．制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤是( )A．计算、称量、倒平板、溶化、灭菌B．计算、称量、溶化、倒平板、灭菌C．计算、称量、溶化、灭菌、倒平板D．计算、称量、灭菌、溶化、倒平板6．有关倒平板的操作错误的是( )A．将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上B．使打开的锥形瓶瓶口迅速通过火焰C．将培养皿打开，培养皿盖倒放在桌子上D．等待平板冷却凝固后需要倒过来放置7．有关平板划线操作正确的是( )A．使用已灭菌的接种环、培养皿，操作过程中不再灭菌B．打开含菌种的试管需通过火焰灭菌，取出菌种后需马上塞上棉塞C．沾有菌种的接种环迅速伸人平板内，划三至五条平行线即可D．最后将平板倒置，放人培养箱中培养8．有关稀释涂布平板法，叙述错误的是( )A．首先将菌液进行一系列的梯度稀释B．然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面C．再放在适宜条件下培养D．结果都可在培养基表面形成单个的菌落9．将接种后的培养基和一个未接种的培养基都放入37℃恒温箱的目的是( )A．对比观察培养基有没有被微生物利用B．对比分析培养基是否被杂菌污染C．没必要放人未接种的培养基D．为了下次接种时再使用10．自养生物唯一碳源的是（）A．糖类B．石油C．二氧化碳D．花生粉饼11．菌种保存控制的条件是（）（1）湿度（2）低温（3）干燥（4）有光（5）隔绝空气（6）适当有氧A．（1）（4）（6）B．（2）（3）（6）C．（1）（5）（6）D．（2）（3）（5）12．下列物质中，不能用作酵母菌碳源的是（）A．含碳有机物B．蛋白胨C．含碳无机物D．花生粉饼等天然物质13．平板冷却凝后要将平板倒置，其意义是（）A．利于大肠杆菌的接种B．防止杂菌污染C．利于培养的冷却D ．防止皿盖冷却水倒流入培养基14．含C、H、O、N的大分子化合物可以作为（）A．异养微生物的氮源、能源B．异养微生物的碳源、氮源C．自养微生物的氮源、能源、碳源D．自养微生物的氮源、能源、碳源15. 关微生物营养物质的叙述中，正确的是A.是碳源的物质不可能同时是氮源B.凡碳源都提供能量C.除水以外的无机物只提供无机盐D.无机氮源也能提供能量16. 下面对发酵工程中灭菌的理解不正确的是A.防止杂菌污染B.消灭杂菌C.培养基和发酵设备都必须灭菌D.灭菌必须在接种前17．鉴定培养基的制作是否合格的方法是：将制备好的培养基放在中保温1-2天看有无，如果没有说明制作合格，反之则不合格。

微生物的实验室培养“微生物的实验室培养”是研究和应用微生物的前提，其中包含的基本操作技术有培养基的制备、无菌技术操作以及纯化培养微生物，是生物科学、医学等领域最基本的实验技术，也是高中生必须掌握的实验操作技术。

因此，“微生物的实验室培养”是高中选修教材中一个非常重要的内容，本文从实验原理、实验操作和实验结果评价等方面提出相应的教学建议。

一、教材分析“微生物的实验室培养”是高中生物选修Ⅰ专题2“微生物的培养与应用”中的第1个课题，旨在为学生实践其他的关于微生物技术的实验做好铺垫，又由于本节内容位于传统的发酵技术之后，所以它是在传统的微生物实践技术的基础上发展起来的，同时又为微生物的应用奠定了基础，因此，可用“承前启后”这个词语来概括本课题的地位。

依据课程标准及教学要求确立本课题教学目标如下：（1）知识目标：列举培养基的种类，说明培养基配方及作用；概述无菌技术。

（2）能力目标：尝试培养基的制备、高压蒸汽灭菌和平板划线法等基本操作技术。

熟练规范地进行无菌操作，成功地培养微生物。

（3）情感态度价值观方面：体验制作牛肉膏蛋白胨培养基，培养纯化大肠杆菌的方法；参与实验过程，体验实验操作领悟实验原理，交流实验体会；形成勇于实践、严谨求实的科学态度和科学精神。

3.教学重难点：无菌技术的操作由于微生物在自然界分布广泛，在实验室培养微生物除了要为微生物提供合适的营养和环境条件外，还需要确保其他微生物无法混入。

因此，实验时针对培养基、操作者、用于培养的器皿、接种工具等使用不同的方法进行消毒灭菌处理。

在“无菌”的条件下接种和培养，获得纯净培养物，才能成功培养微生物。

可见无菌技术是微生物培养过程的关键。

教学中可联系医疗和生活实际深入理解无菌技术。

二、学情分析授课对象为高二理科普通班的学生，在学习完必修内容之后，已对生物知识有足够的理解和掌握，并对于微生物的认知已达到相关要求。

在学习完选修Ⅰ专题1“传统发酵技术的应用”之后，对于微生物的许多生物学特征等掌握更加透彻，也具有相应的逻辑思维以及解决问题的能力，对于本节课内容绝大部分学生可以掌握很透彻。

《微生物的实验室培养》学历案（第一课时）一、学习主题本课时学习主题为“微生物的实验室培养”。

这一主题属于高中生物课程中“微生物与人类生活”这一重要单元的内容，通过本课时的学习，学生将了解微生物的基本概念、实验室培养的意义及操作流程，从而加深对微生物学知识的理解。

二、学习目标1. 知识与理解：掌握微生物的基本概念，了解实验室培养的目的和意义，熟悉实验室培养的基本步骤和注意事项。

2. 技能与操作：学会制作微生物培养基、无菌操作技术及常见微生物的简单观察。

3. 情感态度与价值观：培养学生严谨的科研态度，以及实验安全意识和团队合作意识。

三、评价任务1. 过程性评价：评价学生在实验操作过程中的规范性和正确性，包括无菌操作、培养基制作等环节。

2. 结果性评价：通过学生提交的实验报告，评价学生对实验原理、步骤及结果的掌握程度，以及分析问题和解决问题的能力。

3. 互动性评价：通过小组讨论和课堂互动，评价学生的合作能力和表达能力。

四、学习过程1. 导入新课：通过展示微生物的图片和视频，引导学生了解微生物的存在和重要性，激发学习兴趣。

2. 理论学习：讲解微生物的基本概念、实验室培养的目的和意义，以及实验室培养的基本步骤和注意事项。

3. 实验操作：指导学生进行培养基制作，包括称量、溶解、调pH值、灭菌等步骤。

重点强调无菌操作的重要性。

4. 观察与记录：引导学生观察培养基的状态变化，记录实验过程中的现象和数据。

5. 课堂小结：总结本课时的学习内容，强调实验操作中的注意事项和无菌操作的重要性。

五、检测与作业1. 课堂检测：通过提问和互动，检测学生对本课时知识点的掌握情况。

2. 作业布置：要求学生完成实验报告，包括实验原理、步骤、结果分析和结论等部分，以及自我反思和感悟。

同时，要求学生预习下一课时的内容。

六、学后反思1. 学生反思：学生应反思自己在实验操作过程中的表现，包括操作规范性、团队合作能力等方面，以及在理论学习中的收获和疑问。

选修一生物2.1微生物的实验室培养学案（人教版）课题1 微生物的实验室培养问题导学一、培养基和无菌技术活动与探究1．配制培养基所用的琼脂的成分和作用是什么？．为什么有的微生物培养基中需加入特殊营养物质？．培养基是如何分类的？．消毒和灭菌的原理、实质相同吗？．请判断以下材料或用具是需要消毒还是灭菌。

培养细菌用的培养基与培养皿。

玻璃棒、试管、烧瓶和吸管。

实验操作者的双手。

迁移与应用1灭菌的标准是。

A．杀死所有的病原微生物B．杀死物体表面所有的微生物c．杀死所有的微生物，包括芽孢和孢子D．使病原菌不生长．培养基的类型及应用标准培养基类型配制特点主要应用物理性质固体培养基加入琼脂较多菌种分离，鉴定，计数半固体培养基加入琼脂较少菌种保藏液体培养基不加入琼脂工业生产，连续培养化学成分天然培养基含化学成分不明确的天然物质工业生产合成培养基培养基成分明确分类鉴定目的用途鉴别培养基添加某种指示剂或化学药剂菌种的鉴别选择培养基添加某种化学成分菌种的分离注：培养基中的营养物质是维持机体生命活动，保证生殖、发育所需的外源物质。

在人和动物中，营养物质包括水、无机盐、糖类、脂质、蛋白质、维生素六类；在植物中，营养物质包括矿质元素、水、二氧化碳三类；微生物共有的营养成分有水、无机盐、碳源、氮源，有些微生物还需要特殊营养物质。

．实验室常用的消毒或灭菌方法灭菌或消毒种类主要方法应用范围灼烧灭菌酒精灯火焰灼烧接种环、接种针及试管口等干热灭菌干热灭菌箱内，在160～170℃下加热1～2h玻璃器皿、金属用具等巴氏消毒70～75℃下煮30in牛奶、啤酒等一些不耐高温的液体高压蒸汽灭菌法高压蒸汽灭菌锅内，100Pa，121℃下持续加热15～30in培养基等紫外线消毒30紫外线灯照射30in接种室空气等化学药物消毒用体积分数为70%～75%的乙醇、碘酒涂抹等用于皮肤、伤口、动植物组织表面消毒，手术器械、玻璃器皿等消毒二、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基活动与探究2．用流程图表示该培养基的制备过程。

生物选修一《生物技术实践》教案专题2 微生物的培养与应用课题1 微生物的实验室培养江门市新会第二中学莫爱霞一、课题目标：了解有关培养基的基础知识，进行无菌技术操作，进行微生物的培养。

二、课题重点：无菌技术的操作。

三、课题难点：无菌技术的操作。

四、教学过程：（一）学习基础知识1、微生物的营养与功能知识要点：组成元素：C、H、O、N、P、S，其中C、H、O、N占细胞干重的90％以上。

这些元素最终来自外界环境中的各种无机化合物和有机化合物。

这些化合物归纳成碳源、氮源、生长因子、无机盐和水这五大类营养要素物质。

2、培养基知识要点：（1）配制原则①目的明确；②营养协调；③pH值要适宜（2）培养基的种类；（3）提供微生物生长的条件。

3、无菌技术（1）如何避免杂菌污染？（2）消毒与灭菌的区别4、阅读课本P14-P20，思考下列问题：（1）关于培养基：①按培养基外观物理状态来分，培养基可分为液体培养基和固体培养基，其中固体培养基用于菌种分离、鉴定菌落等。

②按培养基的功能来分，可分为选择培养基和鉴别培养基。

③按照人们对培养基成分的了解程度来分，可分为天然培养基和合成培养基（2）关于无菌技术①实验室常用的灭菌方法有：灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌；常用的消毒方法有：煮沸消毒法、紫外线、化学药物。

②获得纯净培养基的关键是防止外来杂菌的入侵。

③如何避免杂菌污染？（二）实验设计（由于学校实验室条件有限，根据实际情况，把培养细菌改为培养真菌并进行纯化）：1、实验题目：检测草坪病原微生物并进行纯化2、实验目的：对学校操场或校园内草坪的病原微生物情况进行摸底调查，对草坪的发病情况进行统计，并学会培养基的制作，以及纯化一种微生物。

3、实验材料和器材：有斑点的草若干条剪刀酒精培养皿酒精灯马铃薯葡萄糖琼脂大小烧杯纱布蒸馏水小刀干热灭菌箱（可充当恒温箱）高压蒸汽灭菌锅镊子三角锥瓶棉花玻棒4、实验操作：（1）把有斑点的青草若干条剪到培养皿中，加入酒精润洗两次，最后用清水洗净待用。

《微生物的实验室培养》教学设计方案（第一课时）一、教学目标1. 知识与技能：理解微生物的观点，掌握实验室培养微生物的基本步骤和方法。

2. 过程与方法：通过实验操作，培养观察、分析和解决问题的能力。

3. 情感态度与价值观：培养对生物科学的兴趣，树立科学精神。

二、教学重难点1. 教学重点：实验室培养微生物的基本步骤，如接种、培养、观察等。

2. 教学难点：微生物的观察和识别，以及实验过程中的安全操作。

三、教学准备1. 实验器械：无菌实验室、培养皿、接种针、牛肉膏培养基等。

2. 实验试剂：牛肉膏培养基的制备，以及无菌水的制备。

3. 实验服装：实验服、口罩、橡胶手套等。

4. 参考教材：高中生物教材及实验室培养微生物的参考书籍。

四、教学过程：本节课是《微生物的实验室培养》的第一课时，教学过程将包括理论教学和实践教学两个部分。

1. 理论教学（1）导入：起首，我会简要介绍微生物的基本观点和其在生物科学中的重要性，让学生对微生物有一个初步的了解。

（2）微生物的分类和特点：进一步讲解不同类型的微生物，包括细菌、真菌、病毒等，以及它们的特点和分类依据。

（3）实验室培养微生物的基本步骤：详细介绍实验室培养微生物的基本步骤，包括样品的采集、处理、接种、培养、观察等。

（4）实验室培养微生物的环境条件：讲解影响微生物发展和繁殖的环境因素，如温度、湿度、光照等。

（5）微生物实验室的安全与防护：强调微生物实验室的安全与防护的重要性，介绍实验室的消毒、个人防护等措施。

2. 实践教学（1）实验目标：让学生明确实验的目标，了解实验的意义。

（2）实验材料和设备：介绍实验所需的各种材料和设备，如试管、培养皿、接种针、恒温箱等。

（3）实验步骤：详细讲解实验的步骤和方法，确保学生能够正确操作。

（4）实验结果观察与记录：引导学生观察实验结果，记录实验数据和现象，加深对理论知识的理解。

（5）实验总结：分析实验结果，总结实验成功或失败的原因，进一步稳固理论知识。

《微生物的实验室培养》学案【学习目标】了解培养基的基础知识，进行微生物培养和无菌技术的操作。

【重点和难点】无菌技术的操作。

【课前预习】1.根据培养基外观的物理状态，可分为①培养基和②培养基。

各种培养基一般都含有③，此外还要满足微生物生长对④、⑤以及⑥的要求。

答案1.①液体②固体③水、碳源、氮源和无机盐④pH⑤特殊营养物质⑥氧气2.消毒是指是指使用①仅杀死物体表面或内部②。

常用的方法有③等消毒法。

灭菌则是指使用④杀死物体内外⑤，包括⑥。

常用的方法有⑦等。

2.①较为温和的物理或化学方法②一部分对人体有害的微生物③煮沸、化学药剂、紫外线④强烈的理化因素⑤所有的微生物⑥芽孢和孢子⑦烧灼灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌3.制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的操作步骤是：①、②、③、④、⑤。

倒平板要待培养基冷却至⑥℃左右时在⑦附近操作进行。

3.①计算②称量③溶化④灭菌⑤倒平板⑥50⑦酒精灯火焰4.微生物接种最常用的是①法和②法，其结果是在培养基上得到③。

不论哪种方法都有在④进行操作。

4.①平板划线法②稀释涂布平板③单个菌落④酒精灯火焰旁【课堂探究】一、微生物培养基下表是某微生物培养基成分，据表分析：（1）该培养基是液体培养基还是固体培养基？①。

为什么？②。

（2）表中的KH2PO4、NaHPO4和MgSO4·7H2O主要为微生物提供①，葡萄糖为微生物提供②，尿素为微生物提供③。

（3）不同微生物所需的pH不同，培养细菌时需要将pH调至①；培养乳酸杆菌时要在培养基中添加维生素，目的是要满足乳酸杆菌的②。

答案一、（1）①固体培养基②培养基中添加了凝固剂琼脂（2）①无机盐②碳源③氮源（3）①中性或微碱性②特殊营养需求二、无菌技术1.下列关于无菌技术的叙述正确的是①A.对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁和灭菌。

B.将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行消毒。

C.为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行。

中学高效课堂高二生物选修1导学案课题专题2 课题1 微生物的实验室培养导学案备课时间授课时间编号备课教师备课组长课型学习目标1.了解培养基的用途、种类及一般成分，2.掌握培养基制作的一般的步骤，3.掌握微生物分离中的划线法和涂布法。

4.学会一般的消毒、灭毒的方法，进行无菌技术的操作。

德育渗透通过本节学习，了解和掌握生物技术在日常生活中的应用，所以要认真学好生物知识。

学习重点培养基的制备、微生物的培养的操作。

学习难点培养基的制备和微生物的分离。

学法指导课前预习，完成自主学习内容。

课前阅读教材，完成自主学习部分，为课上合作探究作好准备。

自主学习内容教师活动（一）培养基1．概念：人们按照微生物对的不同需求，配制出供其营养基质称为培养基。

可分为培养基和培养基。

2．营养构成：各种培养基一般都含有水、、和无机盐，此外还要满足微生物生长对、特殊营养物质以及氧气的要求。

3．培养乳酸杆菌时需在培养基中添加、培养霉菌时需将培养基PH调至、培养细菌时需将PH调至、培养厌氧微生物则需提供条件。

（二）无菌技术A、获得纯净培养物的关键是防止外来的人侵，具体操作如下：1．对实验操作的、操作者的和进行清洁和消毒。

2．将用于微生物培养的、接种用具和培养基等器具进行。

3．为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在附近进行。

4．实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与相接触。

B、消毒和灭菌1．消毒是指使用较为的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部对人体有害的微生物(不包括芽孢和孢子)。

常用的方法有消毒法和消毒法。

2．灭菌是指使用的理化因素杀死物体内外的微生物。

常用的方法有：灭菌、灭菌、灭菌。

（三）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基步骤：计算→称量→溶化→灭菌→倒平板1.计算：根据比例，计算100mL培养基各成分用量。

2.称量：牛肉膏较黏稠，可用玻棒挑取，同一同称量。

称取牛肉膏和蛋白胨时动作要迅速，目的是防止牛肉膏吸收空气中水分。

3.溶化：加水加热熔化牛肉膏与称量纸→取出称量纸→加入蛋白胨和氯化钠继续加热→加入→用蒸馏水定容到100mL（整个过程不断用玻棒搅拌，目的是防止琼脂糊底而导致烧杯破裂）。