实验室常用培养基配方及制备方法

实验室常用培养基的配制方法

在实验室中，培养基是微生物生长和繁殖的重要物质基础，正确配制培养基对于实验结果的准确性和可靠性至关重要。不同的微生物对营养物质的需求有所不同，因此需要根据实验目的和微生物的特性选择合适的培养基，并掌握正确的配制方法。接下来，我将为大家详细介绍几种实验室常用培养基的配制方法。

一、LB 培养基（LuriaBertani 培养基）

LB 培养基是一种常用于培养细菌的通用培养基，其成分包括胰蛋白胨、酵母提取物和氯化钠。

配制 1L 的 LB 培养基，所需材料如下：

胰蛋白胨 10g

酵母提取物 5g

氯化钠 10g

配制步骤：

1、 称取上述成分，将其放入一个干净的 1L 烧杯中。

2、 加入约 800ml 的去离子水，用玻璃棒搅拌，直至溶质完全溶解。

3、 用去离子水将溶液定容至 1L。 4、 调节 pH 值至 70（通常使用 1mol/L 的 NaOH 或 1mol/L 的 HCl

进行调节）。

5、 将培养基分装到锥形瓶中，每瓶的装液量不要超过锥形瓶体积的三分之二。

6、 盖上瓶塞，用报纸或牛皮纸包扎瓶口。

7、 放入高压灭菌锅中，在 121℃下灭菌 20 分钟。

二、牛肉膏蛋白胨培养基

牛肉膏蛋白胨培养基是一种常用的细菌培养基，适用于多种细菌的培养。

配制 1L 该培养基，需要准备以下材料：

牛肉膏 3g

蛋白胨 10g

氯化钠 5g

具体配制步骤如下：

1、 称取牛肉膏、蛋白胨和氯化钠，放入干净的烧杯中。

2、 加入适量的去离子水，搅拌溶解。

3、 定容至 1L，搅拌均匀。

4、 用 1mol/L 的 NaOH 或 HCl 调节 pH 至 72 74 之间。 5、 分装、包扎、灭菌，方法同上。

三、马铃薯葡萄糖培养基（PDA 培养基）

PDA 培养基常用于培养真菌，尤其是霉菌。

配制 1L 的 PDA 培养基，材料如下：

马铃薯 200g

葡萄糖 20g

培养基制备

一、概述

培养基是生物实验中必不可缺的基础设施，它为微生物、细胞等生物种群的繁殖和生长提供了必要的营养物质。本文将介绍常用的培养基配方和制备方法，以及如何根据中国国情进行优化。

二、常用培养基

1.大肠杆菌培养基（LB）

配方：10克蛋白胨、5克酵母提取物、10克氯化钠、加水至1L。

特点：优点是制备方便、易于培养，多数菌株生长良好。缺点是含有大量营养物质，若用于长期贮存菌株，容易导致突变风险增加。

2.液体麦康凯发酵培养基（BHI）

配方：将500克肉汤蛋白胨培养基、10克氯化钠、2克二氢磷酸氢二钠、2克葡萄糖溶解在1L蒸馏水中。

特点：适合多种微生物的生长，包括厌氧微生物。BHI较LB富含营养物质，可提供较好的生长环境，适合繁殖菌株。

3.青霉素酸糖盐地衣芽孢杆菌培养基（PDA）

配方：20克琼脂、4克葡萄糖、0.75克潮霉素、0.125克青霉素钾盐、0.05克维生素B1、加水至1L。

特点：适用于分离和培养种类繁多的真菌、放线菌等微生物，能有效地防止杂菌的污染。

三、优化培养基

由于中国的气候、温度等环境条件与西方国家有所不同，因此需要进行针对性的优化，以满足不同微生物的生长需求。

1.调整pH值

许多微生物生存和生长所需的pH值范围在7.0-7.5之间。但是，我们在制备培养基时应从当地水质的酸碱性入手，适当调整pH值，以便营养物质的有效吸收。

2.添加一些特殊成分

在中国有些地区，水质有问题，例如含有高浓度的重金属和有机物污染，这些都会影响微生物的生长和繁殖。因此，在制备培养基时，要添加些许抗菌剂和抗氧化剂，保证培养环境的纯净度和稳定性。

3.注意制备温度

对于不同的菌株，其适宜的生长温度也有所不同。在制备培养基时，应根据菌株的特点，以及所处的生态环境，调整制备温度，将传统的37度下的浸渍式消毒改为高温滤器灭菌法，避免纳米材料产生自拍。

四、结论

在国内微生物学、生物医学和生物工程研究领域中，培养基是至关重要的实验基础设施。在制备过程中，我们需要结合自己实验的具体情况，选取适合的培养基，进行针对性的优化，以满足实验需求，并保证实验的可重复性和精确性。

实验用培养基配制 >

1 ．牛肉膏蛋白胨培养基（用于细菌培养）

牛肉膏 3g ，蛋白胨 10g ， NaCl 5g ，水 1000mL ， pH7.4 ～ 7.6

2. 高氏 1 号培养基 ( 用于放线菌培养 )

可溶性淀粉 20g ， KNO 3 1g ， NaCl 0.5g ， K 2 HPO 4- · 3H 2 O 0.5g ， MgSO

4 · 7H 2 O 0.5g, ， FeSO4 · 7H 2 O 0.01g ，水 1000mL ， pH7.4 ～ 7.6 。

配制时注意，可溶性淀粉要先用冷水调匀后再加入到以上培养基中。

3 ．马丁氏（ Martin ）培养基（用于从土壤中分离真菌）

K 2 HPO 4 1g ， MgSO 4 · 7H 2 O 0.5g ，蛋白胨 5g ，葡萄糖 10g ， 1/3000 孟加拉红水溶液 100mL, 水 900mL ，自然 pH ， 121 ℃ 湿热灭菌 30min 。

待培养基融化后冷却 55 ～ 60 ℃ 时加入链霉素 ( 链霉素含量为 30 μ g/mL).

4. 马铃薯培养基 (PDA)( 用于霉菌或酵母菌培养 )

马铃薯 ( 去皮 )200g, 蔗糖 ( 或葡萄糖 ) 20g, 水 1000mL

配制方法如下 : 将马铃署去皮 , 切成约 2cm 2 的小块 , 放入 1500mL 的烧杯中煮沸 30min, 注意用玻棒搅拌以防糊底 , 然后用双层纱布过滤 , 取其滤液加糖 , 再补足至 1000mL, 自然 pH. 霉菌用蔗糖 , 酵母菌用葡萄糖 .

5. 察氏培养基 ( 蔗糖硝酸钠培养基 )( 用于霉菌培养 )

蔗糖 30g, NaNO 3 2g, K 2 HPO 4 1g, MgSO 4 · 7H 2 O 0.5g, KCl 0.5g, FeSO4 · 7H

2 O 0.1g, 水 1000mL, pH7.0 ～ 7.2

试剂与培养基配方

Jenny was compiled in January 2021 PDA培养基

马铃薯去皮200g，切成小块，加水煮烂，纱布过滤，加入15g葡萄糖加热，加琼脂20g，继续加热搅拌混匀，待琼脂溶解完后，搅拌均匀，稍冷却后补纯水定容至1000mL，121℃高压灭菌20min，室温保存。

0.5MTris-Cl(PH8.0)

Tris30.25g，纯水400mL，先加入8mL浓盐酸，待溶液冷却至室温后再缓慢加入浓盐酸直至PH值到8.0，加纯水定容至500mL，121℃高压灭菌20min，4℃保存。

0.5MTris-Cl(PH7.0)

Tris30.25g，纯水400mL，浓盐酸20mL，冷却至室温后缓慢加入浓盐酸调节PH值到7.0，加纯水定容到500mL，121℃高压灭菌20min，4℃保存。

0.5MEDTA(PH8.0)

EDTANa2·2H2O93.06g，纯水400mL，NaOH10g，再用NaOH溶液缓慢调节PH值到8.0，加纯水定容至500mL，121℃高压灭菌20min，4℃保存。

TE缓冲液配方

0.5MTris-Cl(PH8.0)10mL，0.5MEDTA(PH8.0)1mL，加纯水定容至500mL，121℃高压灭菌20min，4℃保存。

CTAB抽提液

CTAB20g，0.5MTris-Cl(PH8.0)200mL，0.5MEDTA(PH8.0)40mL，NaCl81.8g，加纯水定容至1L，121℃高压灭菌20min，室温保存。

3M醋酸钠(PH5.2)

NaAc·3H2O40.8g，纯水70mL，溶解后加入冰醋酸调节pH值至5.2，加纯水定容至100mL，121℃高压灭菌20min，4℃保存。

RNase(10mg/ml)配方 RNA酶100mg，TE10mL，沸水浴20min，分装于2mL离心管-20℃保存。