11-1-其他类型HPLC色谱法-离子对

高效液相色谱法习题第12章高效液相色谱法习题（一）选择题单选题1. 在高效液相色谱中影响柱效的主要因素是( )A 涡流扩散B 分子扩散C 传质阻力D 输液压力2. 在高效液相色谱中，提高柱效能的有效途径是( )A 提高流动相流速B 采用小颗粒固定相C 提高柱温D 采用更灵敏的检测器3. 高效液相色谱法的分离效果比经典液相色谱法高，主要原因是( )A 流动相种类多B 操作仪器化C 采用高效固定相D 采用高灵敏检测器4. 在高效液相色谱中，通用型检测器是( )A 紫外检测器B 荧光检测器C 示差折光检测器D 电导检测器5. HPLC与GC的比较，可忽略纵向扩散项，这主要是因为( )A 柱前压力高B 流速比GC的快C 流动相黏度较小D 柱温低6．液相色谱定量分析时，要求混合物中每一个组分都出峰的是( )A 外标标准曲线法B 内标法C 面积归一化法D 外标法7．下述四种方法中最适宜分离异构体的是是( )A 吸附色谱B 反离子对色谱C 亲和色谱D 空间排阻色谱8．在液相色谱中，梯度洗脱适用于分离( )A 异构体B 沸点相近，官能团相同的化合物C 沸点相差大的试样D 极性变化范围宽的试样9．在HPLC中，范氏方程中对柱效影响可以忽略不计的因素是( )A 涡流扩散B 纵向扩散C 固定相传质阻力D 流动相传质阻力10．当用硅胶为基质的填料作固定相时，流动相的pH范围应为( )A 在中性区域B 5一8C 1一14D 2一811．高效液相色谱法中，常用的流动相有水、乙腈、甲醇、正己烷，其极性大小顺序为( )A 乙腈>水>甲醇>正己烷B 乙腈>甲醇 >水>正己烷C 水> 乙腈>甲醇>正己烷D 水>甲醇> 乙腈>正己烷12．高效液相色谱法中,使用高压泵主要是由于( )A 可加快流速，缩短分析时间B 高压可使分离效率显著提高C 采用了细粒度固定相所致D 采用了填充毛细管柱13．液相色谱的H-u曲线（）。

高效液相色谱法的种类液相色谱操作规程高效液相色谱法按分别机制的不同分为液固吸附色谱法、液液调配色谱法（正相与反相）、离子交换色谱法、离子对色谱法及分子排阻色谱法。

1．液固色谱法使用固体吸附剂，被分别组分在色谱柱上分别原理是依据固高效液相色谱法按分别机制的不同分为液固吸附色谱法、液液调配色谱法（正相与反相）、离子交换色谱法、离子对色谱法及分子排阻色谱法。

1．液固色谱法使用固体吸附剂，被分别组分在色谱柱上分别原理是依据固定相对组分吸附力大小不同而分别。

分别过程是一个吸附－解吸附的平衡过程。

常用的吸附剂为硅胶或氧化铝，粒度5～10μM。

适用于分别分子量200～1000的组分，大多数用于非离子型化合物，离子型化合物易产生拖尾。

常用于分别同分异构体。

2．液液色谱法使用将特定的液态物质涂于担体表面，或化学键合于担体表面而形成的固定相，分别原理是依据被分别的组分在流动相和固定相中溶解度不同而分别。

分别过程是一个调配平衡过程。

涂布式固定相应具有良好的惰性；流动相必需预先用固定相饱和，以削减固定相从担体表面流失；温度的变化和不同批号流动相的区分常引起柱子的变化；另外在流动相中存在的固定相也使样品的分别和收集多而杂化。

由于涂布式固定相很难避开固定液流失，现在已很少接受。

现在多接受的是化学键合固定相，如C18、C8、氨基柱、氰基柱和苯基柱。

液液色谱法按固定相和流动相的极性不同可分为正相色谱法（NPC）和反相色谱法（RPC）。

正相色谱法接受极性固定相（如聚乙二醇、氨基与腈基键合相）；流动相为相对非极性的疏水性溶剂（烷烃类如正已烷、环已烷），常加入乙醇、异丙醇、四氢呋喃、三氯甲烷等以调整组分的保留时间。

常用于分别中等极性和极性较强的化合物（如酚类、胺类、羰基类及氨基酸类等）。

反相色谱法一般用非极性固定相（如C18、C8）；流动相为水或缓冲液，常加入甲醇、乙腈、异丙醇、丙酮、四氢呋喃等与水互溶的有机溶剂以调整保留时间。

适用于分别非极性和极性较弱的化合物。

高效液相色谱法习题一、思考题1．从分离原理、仪器构造及应用范围上简要比较气相色谱及液相色谱的异同点。

2．液相色谱中影响色谱峰展宽的因素有哪些? 与气相色谱相比较, 有哪些主要不同之处? 3．在液相色谱中, 提高柱效的途径有哪些?其中最有效的途径是什么?4．液相色谱有几种类型? 5．液-液分配色谱的保留机理是什么？这种类型的色谱在分析应用中，最适宜分离的物质是什么？6．液-固分配色谱的保留机理是什么？这种类型的色谱在分析应用中，最适宜分离的物质是什么？7．化学键合色谱的保留机理是什么？这种类型的色谱在分析应用中，最适宜分离的物质是什么？8．离子交换色谱的保留机理是什么？这种类型的色谱在分析应用中，最适宜分离的物质是什么？9．离子对色谱的保留机理是什么?这种类型的色谱在分析应用中,最适宜分离的物质是什么?10．空间排阻色谱的保留机理是什么？这种类型的色谱在分析应用中，最适宜分离的物质是什么？11．在液-液分配色谱中，为什么可分为正相色谱及反相色谱？12．何谓化学键合固定相？它有什么突出的优点？13．何谓化学抑制型离子色谱及非抑制型离子色谱？试述它们的基本原理14．何谓梯度洗提？它与气相色谱中的程序升温有何异同之处？15．高效液相色谱进样技术与气相色谱进样技术有和不同之处？16．以液相色谱进行制备有什么优点？17．在毛细管中实现电泳分离有什么优点？18．试述CZE的基本原理19．试述CGE的基本原理20．试述MECC的基本原理二、选择题1．液相色谱适宜的分析对象是（）。

A 低沸点小分子有机化合物B 高沸点大分子有机化合物C 所有有机化合物D 所有化合物2．HPLC与GC的比较，可忽略纵向扩散项，这主要是因为（）。

A 柱前压力高B 流速比GC的快C 流动相钻度较小D 柱温低3．组分在固定相中的质量为MA(g)，在流动相中的质量为MB（g），而该组分在固定相中的浓度为CA（g·mL －1），在流动相中浓度为CB（g·mL－1），则此组分的分配系数是( )。

离子色谱、气相色谱、GC-MS知识点第七节离子色谱法(一)基础知识分类号：W7-0一、填空题1．离子交换色谱主要用于有机和无机、离子的分离。

答案：阴阳2．离子排斥色谱主要用于酸、酸和的分离。

答案：有机无机弱醇类3．离子对色谱主要用于表面活性的离子、离子和络合物的分离。

答案：阴阳金属4．离子色谱仪中，抑制器主要起降低淋洗液的和增加被测离子的，改善的作用。

答案：背景电导电导值信噪比5．离子色谱分析样品时，样品中离子价数越高，保留时间，离子半径越大，保留时间。

答案：越长越长6．离子色谱中抑制器的发展经历了几个阶段，最早的是树脂填充抑制柱、管状纤维膜抑制器，后来又有了平板微膜抑制器。

目前用得最多的是抑制器。

答案：自身再生7．在离子色谱分析中，为了缩短分析时间，可通过改变分离柱的容量、淋洗液强度和，以及在淋洗液中加入有机改进剂和用梯度淋洗技术来实现。

答案：流速二、判断题1．离子色谱(IC)是高效液相色谱(HPLC)的一种。

( )答案：正确2．离子色谱的分离方式有3种，即高效离子交换色谱(HPIC)、离子排斥色谱(HPIEC)和离子对色谱(MPIC)。

它们的分离机理是相同的。

( )答案：错误正确答案为：它们的分离机理是不同的。

3．离子色谱分析中，其淋洗液的流速和被测离子的保留时间之间存在一种反比的关系。

( )答案：正确4．当改变离子色谱淋洗液的流速时，待测离子的洗脱顺序将会发生改变。

( )答案：错误正确答案为：待测离子的洗脱顺序不会改变。

5．离子色谱分离柱的长度将直接影响理论塔板数(即柱效)，当样品中被测离子的浓度远远小于其他离子的浓度时，可以用较长的分离柱以增加柱容量。

( )答案：正确6．离子色谱分析阳离子和阴离子的分离机理、抑制原理是相似的。

( ) 答案：正确7．离子色谱分析样品时，可以用去离子水稀释样品，还可以用淋洗液做稀释剂，以减小水负峰的影响。

( )答案：正确8．离子色谱分析中，水负峰的位置由分离柱的性质和淋洗液的流速决定，流速的改变可改变水负峰的位置和被测离子的保留时间。

HPLC的常用术语及符号第一部分色谱曲线1、色谱图（chromatogram）：色谱柱流出物通过检测器系统时所产生的响应信号对时间或流动相流出体积的曲线图，或者通过适当的方法观察到的纸色谱或薄层色谱斑点、谱带的分布图。

2、（色谱）峰（chromatographic peak）：色谱柱流出组分通过检测器系统时所产生的响应信号的微分曲线。

3、峰底（peak base）：峰的起点与终点之间的连接的直线（图1 中的CD）。

4、峰高（h ，peak height）：色谱峰最大值点到峰底的距离（图1 中的BE）。

5、峰宽（W，peak width）：在峰两侧拐点（图1 中的F ，G）处所作切线与峰底相交两点的距离（图1中的KL）。

6、半高峰宽（W h/2，peak withd at half height）：通过峰高的中点作平行于峰底的直线，此直线与峰两侧相交两点之间的距离（图1 中的HJ）。

7、峰面积（A，peak area）：峰与峰底之间的面积（图1中的CHEJDC）。

8、拖尾峰（tailing peak）：后沿较前沿平缓的不对称的峰。

9、前伸峰（leading peak）：前沿较后沿平缓的不对称的峰。

（又叫伸舌峰、前延峰）10、假峰（ghost peak）：除组分正常产生的色谱峰外，由于仪器条件的变化等原因而在谱图上出现的色谱峰，即并非由试样所产生的峰。

这种色谱峰并不代表具体某一组分，容易给定性、定量带来误差。

（又叫鬼峰）11、畸峰（distrorted peak）：形状不对称的色谱峰，前伸峰、拖尾峰都属于这类。

12、反峰（negative peak）：也称倒峰、负峰，即出峰的方向与通常的方向相反的色谱峰。

14、原点（origin）：纸或薄层板上滴加试样部位的中心点（图２）。

15、斑点（spot）：平面色谱法中，组分在展开和显谱后呈现近似圆形或椭圆形的色区（图2）。

16、区带（zone）：在色谱柱、纸或薄层板上被分离组分所占的区域。

反相离子对高相液相色谱法
反相离子对高效液相色谱法（Reversed-Phase Ion Pair HPLC）是一种高效液相色谱法，主要用于分离和分析具有不同电离程度的化合物。

它是一种常用的分离技术，具有较高的灵敏度和分辨率。



在反相离子对高效液相色谱法中，样品通过与离子对试剂（如缓冲液中的酸或碱）发生离子对形成，从而在固定相和流动相之间实现分离。

离子对试剂的类型和浓度以及流动相的组成会影响分离效果。



反相离子对高效液相色谱法的应用领域广泛，包括生物化学、药物分析、环境监测等。

它具有以下优点：
1.分离效果较好，可实现对复杂样品的分析。

2.灵敏度高，检测限低，有助于检测痕量化合物。

3.操作简便，重复性好，适用于批量分析。



然而，反相离子对高效液相色谱法也存在一些局限性，如对温度和流速的敏感性较高，以及可能出现的峰形扭曲等。

在实际应用中，需要根据具体需求和样品特性选择合适的条件，以实现最佳分离效果。


。

高效液相色谱法的常见问题及解决方法高效液相色谱法按分离机制的不同分为液固吸附色谱法、液液分配色谱法(正相与反相)、离子交换色谱法、离子对色谱法及分子排阻色谱法，这些方法在使用的过程中往往会遇到诸如鬼峰、基线漂移、拖尾、分叉峰、保留时间漂移、柱压过高等系列问题，如何解决这些问题呢?1.用HPLC进行分析时保留时间有时发生漂移，有时发生快速变化，原因何在?如何解决?关于漂移问题：①温度控制不好，解决方法是采用恒温装置，保持柱温恒定;②流动相发生变化，解决办法是防止流动相发生蒸发、反应等;③柱子未平衡好，需对柱子进行更长时间的平衡;关于快速变化问题①流速发生变化，解决办法是重新设定流速，使之保持稳定;②泵中有气泡，可通过排气等操作将气泡赶出;③流动相不合适，解决办法为改换流动相或使流动相在控制室内进行适当混合;2.液相色谱中峰出现拖尾或出现双峰的原因是什么?①筛板堵塞或柱失效，解决办法是反向冲洗柱子，替换筛板或更换柱子;②存在干扰峰，解决办法为使用较长的柱子，改换流动相或更换选择性好的柱子;③可能柱超载，减少进样量;3.HPLC灵敏度不够的主要原因及解决办法①样品量不足，解决办法为增加样品量;②样品未从柱子中流出。

可根据样品的化学性质改变流动相或柱子;③样品与检测器不匹配。

根据样品化学性质调整波长或改换检测器;④检测器衰减太多。

调整衰减即可;⑤检测器时间常数太大，解决办法为降低时间参数;⑥检测器池窗污染。

解决办法为清洗池窗;⑦检测池中有气泡。

解决办法为排气;⑧记录仪测压范围不当。

调整电压范围即可;⑨流动相流量不合适。

调整流速即可;⑩检测器与记录仪超出校正曲线。

解决办法为检查记录仪与检测器，重作校正曲线。

4.做HPLC分析时，柱压不稳定，原因何在?如何解决?①泵内有空气，解决的办法是清除泵内空气，对溶剂进行脱气处理;②比例阀失效，更换比例阀即可;③泵密封垫损坏，更换密封垫即可;④溶剂中的气泡，解决的办法是对溶剂脱气，必要时改变脱气方法;⑤系统检漏，找出漏点，密封即可;⑥梯度洗脱，这时压力波动是正常的。

离子对反相高效液相色谱法原理一、概述高效液相色谱法（HPLC）是一种常用的分析技术，广泛应用于生物医药、环境监测、食品安全等领域。

离子对反相高效液相色谱法（IP-RP-HPLC）是HPLC的一种变种，在分析离子化合物的研究中具有重要的地位。

本文将介绍IP-RP-HPLC的原理及其应用。

二、离子对反相高效液相色谱法原理1. 反相色谱反相色谱是HPLC分析中常用的一种分离方法。

在反相色谱柱中，填料是由亲水性的羟基矽胶和疏水性的碳链组成，样品在柱内由于亲水性和疏水性的差异而发生分离。

通常，极性物质在反相色谱柱中被快速洗脱，而非极性物质则被慢慢洗脱。

2. 离子对反相色谱在IP-RP-HPLC中，离子对试剂（例如磺酸盐、磺酰胺盐）被加入到流动相中，形成离子对复合物。

这些离子对复合物可以与离子化合物中的离子结合，使其变成中性物质，从而改变了其在反相色谱柱上的保留行为。

3. 原理离子对复合物的形成可以产生静电作用，改变了离子化合物在反相色谱柱上的分布。

这种作用不仅限于离子对复合物与离子化合物之间的相互作用，还包括离子对复合物与填料表面及样品分子之间的相互作用。

离子对反相色谱法可以提高对离子化合物的灵敏度和选择性。

4. 应用IP-RP-HPLC广泛应用于离子化合物的分析中，例如有机酸、无机阴离子、阳离子等。

尤其在环境监测和食品安全领域，各种离子对试剂的不断发展使得离子对反相色谱法成为分析离子化合物的重要手段之一。

三、总结离子对反相高效液相色谱法通过引入离子对试剂，改变了样品在反相色谱柱中的分布规律，增强了对离子化合物的分析能力。

随着离子对试剂的不断发展和完善，IP-RP-HPLC在离子化合物分离分析中的应用前景将更加广阔。

4. 分析方法的优势离子对反相高效液相色谱法具有许多优势，使其成为分析离子化合物的首选方法之一。

该方法可以提高对离子化合物的灵敏度和选择性。

通过引入离子对试剂，可以形成离子对复合物，使得离子化合物的分析变得更加精确和可靠。

离子对色谱柱是一种用于分离离子对的色谱柱。

离子对是指具有不同电荷的化合物之间的相互作用。

离子对色谱柱通常用于分离离子对混合物中的化合物，例如离子对色谱柱可以用于分离离子对混合物中的离子对。

离子对色谱柱通常使用离子交换树脂作为固定相。

离子交换树脂是一种具有离子交换基团的聚合物，可以通过交换不同电荷的离子来实现分离。

离子对色谱柱的分离原理是基于离子对之间的相互作用力。

当离子对混合物通过离子对色谱柱时，离子对之间的相互作用力会被打破，从而实现分离。

离子对色谱柱的分离效果受多种因素影响，例如离子对的性质、色谱柱的选择、流动相的组成、流速等。

因此，在使用离子对色谱柱进行分离时，需要根据混合物的性质和分离要求选择合适的离子对色谱柱和流动相组成，调整流速等参数，以获得最佳的分离效果。

总之，离子对色谱柱是一种用于分离离子对混合物中的化合物的色谱柱。

它的分离原理基于离子对之间的相互作用力。

在使用离子对色谱柱进行分离时，需要根据混合物的性质和分离要求选择合适的离子对色谱柱和流动相组成，调整流速等参数，以获得最佳的分离效果。