1基因工程概论

1 2011年材料员初证班《市政工程概论》试题（B）

单位： 姓名： 得分：

一、是非判断题（论述正确画√，论述错误画×，每题1分，共10分）

1.生活污水不属于城市污水。 （ × ）

2.城市道路平面图中，道路现状平面图简称地形图。 （ √ ）

3.我国现行规范规定，桥梁设计采用的作用可分为永久作用、可变作用和地震作用三类。 （ × ）

4.城市道路是城市内部，供车辆和行人通行的具备一定技术条件和设施的道路。

（ √ ）

5.混凝土和易性包括黏聚性、保水性和流动性。 （ √ ）

6.石灰是水硬性胶凝材料。 （ × ）

7.大体积混凝土施工宜采用高铝水泥。 （ × ）

8．先张法是先将预应力筋在台座上按构件设计要求张拉，然后浇筑混凝土，并立即放松预应力筋。 （ × ）

9．混凝土振捣的目的是增加混凝土的密度，防止出现蜂窝空洞等不良现象。（ × ）

10．道路养护应始终坚持“预防为主，防治结合”的原则。 （ √ ）

二、填空题（每空1分，共20分）

1．水泥混凝土路面的损坏可分为 裂缝 、 变形 、 接缝

和其他四大类。

2．桥梁按结构体系分： 梁

、 拱 、 悬索 、

专题一基因工程练习一

1. 正常细胞中含有抑癌的P53基因，若它失活而不能表达，则基因突变的细胞易形成肿瘤。基因治疗肿瘤是根本的方法，腺病毒以其嗜好增殖细胞和对人体基本无害而成为良好的基因载体。野生型腺病毒含有抑制P53基因活性的55Kda基因，以及病毒复制基因E1，因此需要重新构建有疗效的、安全的腺病毒。图甲、乙中箭头所指为相应限制酶切点。

(1)构建重组腺病毒时，限制酶最好选择_________________，这样既可以去除________基因以防止病毒复制后损伤健康细胞，同时还能破坏____________基因以防止其___________________________。

(2)将目的基因与腺病毒重组时，重组的成功率较低，依然还有大量非重组的野生型病毒的DNA，这是因为_____________________ ________。

(3)某DNA分子片段含有1 000个碱基对(即bp)。经扩增后，通过只用限制酶EcoRⅠ与同时用EcoRⅠ和HalⅢ两种方法切割，其电泳结果如图丙所示，可推断限制酶HalⅢ在该DNA片段上的切割点有________个。

2. 某一质粒载体如图所示，外源DNA插入Ampr或Tetr中会导致相应的基因失活(Ampr表示氨苄青霉素抗性基因，Tetr表示四环素抗性基因)。有人将此质粒载体用BamHⅠ酶切后，与用BamHⅠ酶切获得的目的基因混合，加入DNA连接酶进行连接反应，用得到的混合物直接转化大肠杆菌，结果大肠杆菌有的未被转化，有的被转化。被转化的大肠杆菌有三种，分别是含有环状目的基因、含有质粒载体、含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌。回答下列问题：

(1)质粒载体作为基因工程的工具，应具备的基本条件有________________________ __

第八章 基因重组与基因工程

一、选择题

A型题

1、 由病毒携带、将宿主DNA片段从一个细胞转移至另一个细胞的现象或机制称为

A、接合 B、转化 C、转导 D、转染 E、转座

2、 依赖整合酶、在两个DNA序列的特异位点间发生的整合称为

A、位点特异性重组 B、非位点特异性重组 C、同源重组

D、随机重组 E、人工重组

3、 基因工程的特点是

A、在分子水平上操作，在分子水平上表达

B、在分子水平上操作，在细胞水平上表达

C、在细胞水平上操作，在分子水平上表达

D、在细胞水平上操作，在细胞水平上表达

E、在细胞水平上操作，在整体水平上表达

4、 EcoR I的酶切位点为G▼AATTC，切割后产生的末端突出部分含

A、1个核苷酸 B、2个核苷酸 C、3个核苷酸

D、4个核苷酸 E、5个核苷酸

5、 在下列双链DNA序列中不属于完全回文结构的是

A、AGAATTCT B、TGAATTCA C、CGTTGC

D、GGAATTCC E、AGATATCT

6、 “配伍末端”是指

A、 同一限制性核酸内切酶识别相同的DNA序列，酶切产生的相同类型粘性末端

B、 不同限制性核酸内切酶识别相同的DNA序列，酶切产生的相同类型钝性末端

C、 同一限制性核酸内切酶识别不同的DNA序列，酶切产生的不同类型粘性末端

D、 不同限制性核酸内切酶识别不同的DNA序列，酶切产生的不同类型钝性末端

E、 不同限制性核酸内切酶识别不同的DNA序列，酶切产生的相同类型粘性末端

7、 cDNA是指

A、 细胞或生物体整套遗传信息(染色体和线粒体)的所有DNA序列

B、 细胞或生物体染色体的整套遗传信息所有DNA序列

C、 细胞或生物体线粒体的整套遗传信息所有DNA序列

D、 与细胞或生物体内rRNA互补的单链或双链DNA

E、 细胞或生物体整套mRNA互补的单链或双链DNA

8、 用“蓝白选择”筛选、鉴定重组体，所用的半乳糖苷酶的底物是

五位诺贝尔奖获得者，和工作的意义

沃森，克里克：DNA双螺旋结构，半保留复制。解决了DNA的自我复制和传递的问题。意义：对生命科学的发展作用可与达尔文学说媲美，与孟德尔定律齐名。从而使遗传学的研究全面进入分子遗传学阶段

Paul Berg小组完成了首次体外重组实验：将SV40的DNA片断与噬菌体的DNA片断连接起来

Stanley Cohen 1986年 Nobel生理或医学奖。把非洲爪蟾编码核糖体基因片断同pSC101质粒重组，转化大肠杆菌，并在菌体内成功转录出相应的mRNA。这是第一次成功的基因克隆实验。

Khorana基因的体外分离技术

PCR技术的发明K.Mullis

基因工程的基本操作程序

分离获得目的基因

限制性核酸内切酶将切割外源DNA和载体

DNA连接酶将外源DNA和载体连接，组成重组DNA分子。

将重组DNA分子转移到受体细胞

带有重组体的细胞培养扩增，获得大量的细胞繁殖群体

筛选和鉴定转化细胞

进一步研究分析，实现功能蛋白的表达

基因工程载体

能在宿主细胞中复制繁殖，而且最好要有较高的自主复制能力

容易进入宿主细胞，而且进入效率越高越好

容易插入外来核酸片段，插入后不影响其进入宿主细胞和在细胞中的复制。要求载体DNA上要有合适的限制性核酸内切酶位点

容易从宿主细胞中分离纯化出来， 这才便于重组操作

有容易被识别筛选的标志，当其进入宿主细胞、或携带着外来的核酸序列进入宿主细胞都能容易被辨认和分离出来。易于克隆操作

质粒的一般生物学特性

复制性（一般来说，一个质粒只有一个即复制子）

质粒的不相容性(incompatibility)

同一复制系统的不同质粒不能稳定地和平共处，称之为不相容性，也称之为不亲和性。确切的说，两个密切相关的质粒通常不能在同一宿主菌的子代细胞中共存。

这可能有两方面解释

a、 复制竞争性：复制酶或控制质粒复制的阻遏物近似或相同，可以调节对方的复制，在子细胞中质粒分配彼此竞争，将很快导致一些细胞含有一种质粒，而另一种细胞可能只含有另一种质粒。但生长几代后，只会有一种原代质粒保留下来而不会兼而有之，这就是细菌生长分配不平衡所致的差异。带有相同复制子的质粒属于同一不相容组。