5气虚血瘀证动物模型制作方法与评价

血虚证两种造模方法的比较及中药疗效评价卢文丽方肇勤2007-01-17一、实验目的1. 比较血虚证两种不同造模方法的优劣。

2. 评价中药复方的疗效。

二、实验材料1．实验动物：昆明种小鼠，雄性，40只。

2．药物或试剂乙酰苯肼（APH，为白色粉末状固体，用时配制成2％溶液）、环磷酰胺粉针剂：200mg×10支×1盒（用时配成10mg/ml溶液）、无水乙醇500ml×1瓶、0.9%氯化钠溶液500ml×1瓶或250ml×1瓶。

3．仪器或设备电子天平1台，100ml柱形小烧杯2个，50ml/100ml量筒各1个，10ml刻度吸管2个，洗耳球1个，玻璃棒2根，60ml小口试剂瓶2个，标签纸1张，酒精棉球，1ml一次性注射器数支，小鼠灌胃针2支。

以上为动物造模及药物配制用材料，余具体见各实验指导。

三、实验步骤1．动物分组随机分为正常组A、环磷酰胺模型组B、乙酰苯肼模型组C、乙酰苯肼治疗组D等4组，每组10只。

分笼饲养于内铺垫料的塑料笼内，每笼等量。

2．2％乙酰苯肼溶液的配制（1）电子天平取乙酰苯肼粉末1g，并将其小心倒入100ml小烧杯内；（2）玻璃滴定管吸取10ml无水乙醇，注入烧杯内，玻璃棒搅拌；（3）待粉末几乎溶解完全后，50ml量筒量取30ml生理盐水倒入烧杯内，搅拌。

若仍有粉末未溶解，置于37℃水浴箱内一段时间即可。

（4）将完全溶解后的溶液倒入50ml量筒内，添加生理盐水定容至50ml。

将溶液倒入50ml小口试剂瓶内，贴好标签，常温下保存。

3．药物及剂量采用四物汤治疗：当归10g，川芎10g，白芍10g，熟地黄10g。

给药剂量按照成人体重（60kg）的10倍计算。

药物煎煮浓度为0.4g/ml，约灌胃0.5ml/只。

4. 造模及给药方法组别造模灌胃给药A 腹腔注射同C组造模药物等量的生理盐水，第1、2日各1次。

皮下注射同B组造模药物等量的生理盐水，第1、4日各1次。

脊髓损伤气虚血瘀证大鼠模型的建立及其合理性评价李亮; 李丰; 殷坚; 潘波; 余清平; 蔡雄; 黄惠勇; 陈安【期刊名称】《《数字中医药（英文）》》【年(卷),期】2018(001)001【摘要】目的制备脊髓损伤(SCI)气虚血瘀证大鼠模型,评价该模型的合理性。

方法采用游泳力竭法联合红核脊髓束(RST)横断手术制备SCI气虚血瘀证大鼠模型,通过观察中医宏观表征、肢体行为学、血液流变学及脊髓组织形态,结合益气活血中药复方补阳还五汤(BYHWD)进行反证,最终评价该模型的合理性。

结果气虚血瘀组大鼠体重、摄食量和前肢使用率降低,舌象评分上升,符合气虚血瘀证的表现;35 d后BYHWD组各指标均优于气虚血瘀组。

与正常组相比,气虚血瘀组全血黏度、红细胞压积上升(P <0.05),红细胞变形指数下降(P <0.05);BYHWD组经过中药干预后各指标基本接近正常组。

脊髓受损局部出现隆起、硬结,疑似空泡或瘢痕,HE染色显示大鼠脊髓冠状切片伤侧面积比率BYHWD组高于气虚血瘀组(P <0.05)。

结论游泳力竭法联合RST横断术能顺利制备SCI气虚血瘀证大鼠模型。

【总页数】11页(P102-112)【作者】李亮; 李丰; 殷坚; 潘波; 余清平; 蔡雄; 黄惠勇; 陈安【作者单位】中医诊断学湖南省重点实验室湖南中医药大学湖南长沙410208 中国; 人体解剖学和组织胚胎学重点学科湖南中医药大学湖南长沙410208 中国; School of Dentistry University of California Los Angeles California CA 90095 USA【正文语种】中文因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

血虚证实验动物造模及其证候的检测与评价徐向前2006711038[摘要]通过近年来相关文献综述和评析血虚证动物模型造模方法。

期间该模型的研发工作在持续发展，涉及到多手段、多技术。

目前研究和发展趋势比较集中的是化学药物造模、射线造模，当然还包括其他一些方法。

各造模方法比较集中的问题主要是各造模剂量、时间，以及造模后持续时间尚未确定，以及造模动物的证候检测与评价没有统一的标准，同时对血虚证模型的认识亦在不断深入。

[关键词]血虚证动物模型证候检测评价1．血虚证是中医的基础病证，主要表现为营血亏损。

要阐明血虚证的本质和病理生理，以及中药治疗血虚证的机理，动物实验研究是不可缺少的途径。

而要进行实验研究，首先必须有一个标准化的血虚证动物模型，这是中医药现代化研究的重要环节。

许多科研工作者在这方面做了探索和努力“然而至今尚无统一的造模规范程序和公认指标。

实验动物选择不同、实验方法不统一，甚至缺乏客观指标，严重影响对血虚证本质的探讨和对治疗血虚证药物的药效评价[1]。

2.中医药动物造模是中医基础医学研究和中医药研发的重要手段，是发展辨证论治实验研究的基础工作。

为探讨中医血虚证动物造模的发展方向，通过关键词“血虚证+实验”．检索了1989年～2011年CNKI系统和VIP系统收集的文献共计50余篇，通过对20余年文献回顾，总结了血虚证动物模型造模方法，并对经验与教训进行了评析。

目前所常用的几种方法如下：2.160Co／射线造模法该造模方式是用放射线照射小鼠全身，造成白细胞量下降和骨髓损伤，造模血虚证效果明显。

动物品种包括雌／雄昆明种、C57BL，6J、C57BLL、BALb／e小鼠，主要为雌性小鼠；体重在l4～25g之间，集中在l8～22g。

造模方法：Coy射线全身照射，多为一次性照射，照射距离为4 m，照射时间集中在161～250S，照射率在127～131Gy，min，照射剂量大多在2.5～7.0Gy之间。

2.2化学药物造模常用的化学药物有乙酰苯肼（APH）溶血造模法，乙酰苯肼与其他方法复合造模法，环磷酰胺化学损伤造模法。

丹参饮对气虚血瘀模型大鼠的血小板生物学临床研究表明，中药丹参具有活血化瘀、补气养血的功效，对一些血液循环方面的疾病有一定的治疗作用。

为了更深入地了解丹参对气虚血瘀模型大鼠的血小板生物学的影响，本文通过一系列实验，对丹参饮对气虚血瘀模型大鼠的血小板生物学进行研究，以期为丹参的临床应用提供更为可靠的实验依据。

一、材料与方法1.1 材料实验所需的主要材料包括：健康雄性SD大鼠，氯化钠注射液，丹参饮，抗凝血酶，乙醇，PBS缓冲液，脉冲离心机，扫描电镜，光镜，光电板，离心管等。

1.2 方法1.2.1 气虚血瘀模型建立选取一定数量的健康雄性SD大鼠，按照一定的方法建立气虚血瘀模型。

将建立气虚血瘀模型的大鼠分为实验组和对照组，实验组大鼠给予丹参饮处理，对照组给予等量的生理盐水处理，每天一次，连续观察一定的时间。

1.2.3 采集血样在给药后的一定时间内，采集实验组和对照组大鼠的血样，进行相关血小板生物学指标的检测。

1.2.4 数据分析对实验所得数据进行统计学分析，比较实验组和对照组的差异，评估丹参饮对气虚血瘀模型大鼠的血小板生物学的影响。

二、结果经过实验和数据分析，我们得出以下主要结果：2.1 血小板形态学经过扫描电镜观察，在实验组中，血小板形态较为规整，体积均一，表面光滑；而对照组中，血小板形态不规则，体积发生变化，表面粗糙。

2.2 血小板聚集功能实验组血小板聚集功能显著低于对照组，表明丹参饮对气虚血瘀模型大鼠的血小板聚集功能有一定的抑制作用。

2.3 血小板激活指标实验组的血小板激活指标，如P-selectin、丙二醛等水平较对照组明显降低，说明丹参饮能够抑制气虚血瘀模型大鼠的血小板激活。

2.4 其他相关指标实验组大鼠的血小板数量、平均体积和分布宽度等指标，均相对对照组有所改善。

三、讨论通过本次实验的结果分析，可以得出结论：丹参饮对气虚血瘀模型大鼠的血小板生物学有一定的影响，主要表现为抑制血小板聚集、减少血小板激活和改善血小板形态。

江西中医药大学学报2020年12月第32卷第6期3谭子剑3罗小泉3龚美富1**（1.江西中医药广州 510006；3.江西中医药大学 南昌 330004）辨证是中医的优势。

病以病理学为核心，证以评价与研究的发展方向，为中医方-证-病的深入研究奠定3, HUA Shi-pei3, TAN Zi-jian3, LUO Xiao-quan3, GONG Mei-fu13. Jiangxi University of Traditional Chinese Medicine, Nanchang 330004, China.Abstract: Animal model is the experimental basis of medical experimental hypothesis and clinical hypothesis. Differentiation of disease is the specialty of Western medicine, while dialectics is the advantage of Traditional Chinese Medicine. The core of disease is pathology, the core of syndrome is pathogenesis, and the establishment of model based on dialectical treatment is a sign to distinguish the animal model of Traditional Chinese Medicine from that of Western medicine. In this paper, the existing problems of the animal model of blood stasis syndrome in Traditional Chinese Medicine are summarized and analyzed, and the establishment, evaluation and research direction of the animal model of blood stasis syndrome are discussed, which lays a solid foundation for the in-depth study of TCM prescription syndrome disease.Key words: Blood Stasis Syndrome；Animal Model；Evaluate证候研究是中医基础理论研究的重要领域，是临床治疗和科学研究的基础和前提。

气虚动物造模方法综述张艺200220712402中基（七）摘要：根据传统中医理论的指导和现代药理研究的结果，运用各种不同的方法喂养或对待实验动物造成所需要的气虚证模型，通过查阅1989年至2006年的各种文献，按心气虚、肺气虚、脾气虚的分类总结归纳了三类虚证的造模方法，并对其进行了评价和分析，希望今后的实验研究者能取长补短，更加完善我们的中医实验。

关键字：气虚证；动物模型；综述在对中药的研究中，往往需要具有典型疾病特征的实验动物作为实验对象以检验中药作用的可行性和有效性，因此如何造出符和实验要求的模型动物是研究的第一步，也是决定实验成功与否、判断中药是否有效的至关重要的一步。

气虚证在临床上有很多的分型，其中以肺气虚、脾气虚、肾气虚这三者最为常见，通过对近15年来相关文献的查阅，发现关于肾气虚的造模方法少之甚少，反而心气虚的造模方法倒是不乏，所以这里我就对肺气虚、心气虚、脾气虚这三者的造模方法进行一下综述：1.肺气虚烟熏法此法是文献报道中比较公认，且易操作、易复制的制造肺气虚动物模型的方法。

最简易的模型：杨明华提出的香烟烟雾刺激，每次每10只小鼠2支香烟，把点燃的香烟固定在一透明玻璃钟罩内，将造模小鼠放入其中，每日2次，每次12分钟×15天。

王元勋将大鼠放入特制的体积为1m3的烟室中，以刨花、锯末、烟叶各30～50g点燃熏烟，每日1次，每次30min，55~57天后观察。

孔繁智和徐锡鸿提出用多因素造模。

方法如下：用200～250ppmSO2定量刺激，每日1小时×13天。

在SO2刺激结束后进行风、寒刺激，用低于常温5~C的冷风，刺激量为每日15min×13天。

且该模型已于1992年通过专家鉴定。

这类模型在制模上吸取了中、西医在造模方面的成功经验，即与中医理论相联系，又与现代医学的某些疾病相一致，且易于操作，重复性好，具有较好的优势。

但由于中医的“证”和西医的病是两个概念完全不同的体系，理论上尚难统一，因此，目前制作的模型在理论依据上牵强附会、以偏概全，不能完全反映传统中医的理论特色。

一、实验背景血虚证是中医学中常见的一种证候，表现为面色苍白、唇色淡白、头晕目眩、心悸失眠、手足发麻、月经量少色淡等症状。

血虚证的病机主要是血液亏虚，脏腑百脉失养。

为探究血虚证的病理生理机制，本实验通过动物模型模拟血虚证，观察其临床表现和生化指标变化，分析血虚证的病理生理特点。

二、实验方法1. 实验动物：选取体重、年龄相近的SD大鼠60只，随机分为对照组、血虚模型组、中药治疗组，每组20只。

2. 模型制备：采用放血法模拟血虚证。

血虚模型组大鼠采用放血法，每次放血量为大鼠体重的10%，每周放血1次，连续4周。

对照组大鼠仅进行放血操作，不进行放血。

中药治疗组大鼠在放血的同时，给予中药（当归、熟地黄、白芍等）干预。

3. 实验观察指标：观察大鼠的面色、唇色、爪甲、毛发、体重、活动度等临床表现；检测血清红细胞计数、血红蛋白含量、白细胞计数、血小板计数、血糖、血脂等生化指标。

4. 数据分析：采用SPSS 22.0软件进行统计分析，组间比较采用单因素方差分析，多重比较采用LSD法。

三、实验结果1. 临床表现：血虚模型组大鼠出现面色苍白、唇色淡白、爪甲无光泽、毛发枯黄、活动度下降等临床表现。

中药治疗组大鼠临床表现较血虚模型组明显改善。

2. 生化指标：血虚模型组大鼠血清红细胞计数、血红蛋白含量、白细胞计数、血小板计数均显著低于对照组（P<0.05）；中药治疗组大鼠上述指标较血虚模型组显著升高（P<0.05）。

血虚模型组大鼠血糖、血脂水平显著高于对照组（P<0.05）；中药治疗组大鼠血糖、血脂水平较血虚模型组显著降低（P<0.05）。

四、结果分析1. 血虚证的临床表现：本实验结果显示，血虚模型组大鼠出现面色苍白、唇色淡白、爪甲无光泽、毛发枯黄、活动度下降等临床表现，与血虚证的典型症状相符。

2. 血虚证的生化指标变化：本实验结果显示，血虚模型组大鼠血清红细胞计数、血红蛋白含量、白细胞计数、血小板计数均显著低于对照组，表明血虚证患者存在血液系统功能异常。