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HPLC法测定三磷酸胞苷二钠注射液的含量

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２００８年９月第１０卷第３期　Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ．２００８．Ｖｏ１．１　０，Ｎｏ．３　湖北中医学院学报　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｈｕｂｅｉ　Ｃｏｌｌｅｇｅ　ｏｆ　ＴＣＭ　・５７・　

ＨＰＬＣ法测定三磷酸胞苷二钠注射液的含量　

徐菁　

（武汉大学研修班，湖北中医学院药学院药物分析教研室，　北武汉４３００　６５）　

摘要：目的　建立三磷酸胞苷二钠注射液含量测定方法。方法　采用高效液相色谱法　，以十八烷基键合硅胶为填　

充柱；检测波长：２７１ｎｍ；流动相：０．２ｍｏｌ／Ｌ磷酸盐缓冲液；柱温：３５％。结果　此法可使三磷酸胞苷Ｓ－钠与二磷酸　

胞苷二钠、一磷酸胞苷二钠得到非常好的分离。结论　本法操作简便、快速、准确，适用于本制剂的质量控制。　

关键词：三磷酸胞苷二钠；高效液相色谱法；含量测定　

中图分类号：Ｒ２８３．４　文献标识码：Ａ　文章编号：１００８—９８７Ｘ（２００８）０３—００５７—０２　

Ｈ　ＰＬＣ　Ｍｅｔｈｏｄ　ｆｏｒ　Ｄｅｔｅｒｍｉｎｉｎｇ　ｔｈｅ　Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ　ｏｆ　Ｓｏｄｉｕｍ　

Ｃｙｔｉｄｉｎｅ　Ｔｒｉｐｈｏｓｐｈａｔｅ　ｉｎ　Ｃｙｔｉｄｉｎｅｄｉｓｏｄｉｕｍ　ｔｒｉｐｈｏｓｐｈａｔｅ　Ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ　

ＸＵ　Ｊｉｎｇ　（Ｗｕｈａｎ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｈｕｂｅｉ　Ｃｏｌｌｅｇｅ　ｏｆ　Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｗｕｈａｎ，Ｈｕｂｅｉ，４３００６５）　

Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏ　ｅｓｔａｂｌｉｓｈ　ａ　ＨＰＬＣ　ｍｅｔｈｏｄ　ｆｏｒ　ｄｅｔｅｒｍｉｎｉｎｇ　ｔｈｅ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ　ｏｆ　ｓｏｄｉｕｍｃｙｔｉｄｉｎｅ　ｔｒｉｐｈｏｓｐｈａｔｅ　

（ＣＴＰ）ｉｎ　ｃｙｔｉｄｉｎｅ　ｄｉｓｏｄｉｕｍ　ｔｒｉｐｈｏｓｐｈａｔｅ　ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ．Ｍｅｔｈｏｄ：ＯＤＳ　Ｃｌ８　ｃｏｌｕｎｍ　ｗａｓ　ａｐｐｌｉｅｄ，ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ　ｗａｓ　２７１　ｎｍ，　

ｔｈｅ　ｍｏｂｉｌｅ　ｐｈａｓｅ　ｗａｓ　０．２ｍｏｌ／Ｌ．ｔｈｅ　ｃｏｌｕｍｎ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ　ｗａｓ　３５℃．Ｒｅｓｕｌｔｓ：Ｔｏ　ｓｅｇｒｅｇａｔｅ　ｓｏｄｉｕｍｅｙｔｉｄｉｎｅ　ｔｒｉｐｈｏｓｐｈａｔｅ，ｓｏｄｉｕｍ　

ｃｙｔｉｄｉｎｅ　ｄｉｐｈｏｓｐｈａｔｅ　ａｎｄ　ｓｏｄｉｕｍ　ｃｙｔｉｄｉｎｅ　ｍｏｎｏｐｈｏｓｐｈａｔｅ　ｓｕｃｃｅｓｓｆｕｌｌｙ．Ｃｏｎｘｌｕｓｉｏｎ：Ｔｈｉｓ　ｍｅｔｈｏｄ　ｉｓ　ｓｉｍｐｌｅ，ｆａｓｔ　ａｎｄ　ａｃｃｕｒａｔｅ　

ａｎｄ　ｉｓ　ｓｕｉｔａｂｌｅ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｑｕａｌｉｔｙ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ．　

Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：ｓｏｄｉｕｍ　ｃｙｔｉｄｉｎｅ　ｔｒｉｐｈｏｓｐｈａｔｅ；ＨＰＬＣ；ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　

三磷酸胞苷二钠（ＣＴＰ）是一种核苷类药物，能在体内参与　

核酸及磷脂的合成代谢，促进蛋白质合成，临床上主要用于治　

疗多种原因引起的神经系统疾病及血管硬化症、脂肪肝等，疗　

效确切，副作用少。ＣＴＰ是一类核苷酸，常温下不太稳定，易降　

解成二磷酸胞苷（ＣＤＰ）和单磷酸胞苷（ＣＭＰ）。国家标准的检　

验方法为纸电泳法…，操作繁琐，准确度不高，误差在３％左　

右，很不利于质量控制。注射用三磷酸胞苷二钠的含量测定采　

用国家食品药品监督管理局药品标准　，先采用紫外分光光度　

法测定总核苷酸的量，再采用高效液相色谱法测定三磷酸胞苷　二钠的重量比，最后计算样品中三磷酸胞苷二钠的含量。笔者　

采用液相色谱法专用的色谱柱测定ＣＴＰ含量，具有快速、灵敏　

的特点，并能对降解的产物进行定性定量分析，现介绍如下。　１仪器及试药　ＬＣ一１０ＡＴ　ＶＰ型液相色谱仪（１３本岛津公司）；Ｈｙｐｅｒｓｉｌ　

ｃＩ　８色谱柱，５　ｍ，‘ｐ４．６ｍｍ×２５０ｒａｍ；对照品：规格：２０ｍｇ　（由北京双鹭药业股份有限公司生产，批号：０３０８１８）；规格：　

４０ｍｇ（由北京双鹭药业股份有限公司生产，批号：０３０８２１）。　

２方法及结果　２．１　色谱条件　

色谱柱：Ｈｙｐｅｒｓｉｌ　Ｃｌ８，５　ｍ，ｑｏ４．６ｒａｍ　Ｘ　２５０ｒａｍ，流速：　

１．０ｍｌ／ｍｉｎ，柱温：３５％，检测波长：２７１ａｍ，灵敏度：０．０２　

ＡＵＦＳ　

作者简介：徐菁（１９８０一），女，湖北中医学院药学院助教。　流动相：０．２ｍｏｌｌ／Ｌ磷酸盐缓冲液（取磷酸氢二钠３５．８ｇ，　

磷酸二氢钾１３．６ｇ，加水９００ｍｌ溶解，用１ｍｏｌ／Ｌ氢氧化钠溶液　

调节ｐＨ值至７．０，加入四丁基溴化铵１．６１　ｇ，加水至１０００ｍｌ，　

摇匀）。　

２．２线性关系考察　

精密称取经干燥至恒重的三磷酸胞苷二钠对照品１．００４ｇ，　

置ｌＯＯｍｌ量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，分别精密量取　

１．０、２．０、４．０、６．０、８．０ｍｌ，置１００ｍｌ量瓶中，再加流动相稀　

释至刻度，摇匀，作为对照品溶液，分别吸取２Ｏ　１，注入液相　

色谱仪，记录色谱图，量取峰面积，为方便计算，以三磷酸胞　

苷二钠的峰面积为纵坐标（Ｙ），以三磷酸胞苷二钠的浓度为　横坐标（ｘ），进行线性回归，测定结果见表１。　

表１三磷酸胞苷二钠标准曲线的测定数据　

得回归方程：Ｙ：６１５４８＋９１６７９５９Ｘ，相关系数ｒ＝０．９９９９。　

结果表明三磷酸胞苷二钠的浓度在０．１～０．８ｒａｇ／ｍｌ范围　

内，浓度和峰面积呈良好的线性关系。　

２．３含量测定　取本品５支，各精密加水２ｍｌ溶解后，混匀按下法测定。

　维普资讯 http://www.cqvip.com ・５８・　湖北中医学院学报　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｈｕｂｅｉ　Ｃｏｌｌｅｇｅ　ｏｆ　ＴＣＭ　２００８年９月第ｌＯ卷第３期　Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ．２００８．Ｖｏ１．１０，Ｎｏ．３　

ＨＰＬＣ法测定三黄清火片中盐酸小檗碱的含量　

梅　凌，曹干生，刘大鹏　

（武汉市中医院药学部，湖北武汉４３００１４）　

摘要：目的　建立三黄清火片中盐酸小檗碱含量的测定方法。方法　采用高效液相色谱法，色谱柱：ＹＷＧ—Ｃ，　

（１０ｉｘｍ，２５０　ｘ４．６ｍｍ），柱温：３０℃；流动相：乙腈－０．０２５ｍｏｌｌ／Ｌ磷酸二氢钾－０．０２５ｍｏｌ・１　十二烷基硫酸钠（５０：２５：２５）：　

检测波长：３４７ｎｍ；流速：１．０ｍｌ・ｍｉｎ～；进样量：２０ＩＸｌ：外标法计算含量。结果　盐酸小檗碱在０．２０３２—２．４３７２ｉｘｇ范围内　

具有良好的线性关系（ｒ＝０．９９９０），平均回收率为９９，２％，ＲＳＤ为１．１４％，得线性回归方程为Ｙ＝６７２４５Ｘ＋２７７０６（ｒ＝　

０．９９９Ｏ）。结论本方法操作简便、结果准确、重现性好，可作为该制剂盐酸小檗碱的含量测定方法。　

关键词：三黄清火片；盐酸小檗碱；含量测定；高效液相色谱法　

中图分类号：　文献标识码：Ａ　文章编号：１００８—９８７Ｘ（２００８）０３—００５８—０３　

Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｃｏｎｔｅｎｔ　ｏｆ　Ｂｅｒｂｅｒｉｎｅ　ＨＶｄｒＯｃｈＩＯｒｉｄｅ　ｉｎ　

Ｓａｎｈｕａｎｇ　Ｑｉｎｇｈｕｏ　Ｃａｐｓｕｌｅｓ　ｂｙ　ＨＰＬＣ　

ＭＥＩ　Ｌｉｎｇ，ＣＡＯ　Ｇａｎｓｈｅｎｇ，ＬＩＵ　Ｄａｐｅｎｇ　

（Ｐｈａｒｍａｃｙ　Ｓｃｈｏｏｌ　ｏｆ　Ｗｕｈａｎ　ＴＣＭ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｗｕｈａｎ，Ｈｕｂｅｉ，４３００１４）　

Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏ　ｅｓｔａｂｌｉｓｈ　ｔｈｅ　ｍｅｔｈｏｄ　ｏｆ　ｄｅｔｅｒｍｉｎｉｎｇ　ｔｈｅ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｏｆ　ｂａｒｂｅｒｉｎｇ　ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ　ｉｎ　Ｓａｎｈｕａｎｇ　Ｑｉｎｇｈｕｏ　ｃａｐｓｕｌｅｓ．Ｍｅｔｈｏｄ：Ｕｓｅ　ＨＰＬＣ．Ｔｈｅ　ｃｏｌｕｍｎ　ｗａｓ　ＹＷＧ—Ｃｌ８（１０ｌ￣ｍ，２５０　Ｘ　４．６ｍｍ），ｔｈｅ　ｃｏｌｕｍｎ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ　ｗａｓ　３０％；ｔｈｅ　

ｍｏｂｉｌｅ　ｐｈａｓｅ　ｗａｓ　ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ，ｔｈｅ　ｐｏｔａｓｓｉｕｍ　ｄｉｈｙｄｒｏｇｅｎｔ　ｐｈｏｓｐｈａｔｅ　ｗａｓ　０．０２５ｍｏｌ／Ｌ，ｔｈｅ　ｓｏｄｉｕｍ　ｄｏｄｅｃｙｌ　ｓｕｌｆａｔｅ　ｗａｓ（５０：２５　

：２５），ｔ　ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ　ｗａｓ．３４７ｍｎ；ｔｈｅ　ｖｅｌｏｃｉｔｙ　ｗａｓ　１．０ｍｌ・ｍｉｎ～；ｔｈｅ　ｉｎｊｅｅｔｉｏｎ　ｖｏｌｕｍｅ　ｗａｓ　２０ＩＸ１．Ｒｅｓｕｌｔｓ：Ｔｈｅ　ｂａｒｂｅｒｉｎｇ　ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ　ｈａｓ　ａ　ｇｏｏｄ　ｌｉｎｅａｒ　ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ　ｆｒｏｍ　０．２０３２　ｔｏ　２．４３７２ｉｘｇ，（ｒ＝０．９９９０），ｔｈｅ　ａｖｅｒａｇｅ　ｒｅｃｏｖｅｒｙ　ｉｓ　９９．２％，　

ＲＳＤ　ｉｓ　１．１４％，ｔｈｅ　ｒｅｇｒｅｓｓｉｏｎ　ｅｑｕａｔｉｏｎ　ｉｓ　Ｙ＝６７２４５Ｘ＋２７７０６（ｒ＝０．９９９０）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｔｈｉｓ　ｍｅｔｈｏｄ　ｉｓ　ｓｉｍｐｌｅ，ａｃｃｕｒａｔｅ，　

２．３．１　总核苷酸：精密量取上述溶液２ｍｌ，用０．Ｏ１ｍｏＬ／Ｌ盐酸　

溶解至５０ｍｌ量瓶中；精密量取５ｍｌ至１００ｍｌ量瓶，用０．０１ｍｏｌ／　

Ｌ盐酸溶解并定容，制成每１ｍｌ中约含２０ｉｘｇ的溶液，按分光光　

度法（《中国药典》２０００年版二部附录ⅣＡ）测定，在２８０ｎｍ　

的波长处测定吸收度，接Ｃ　Ｈ。　Ｎ，Ｎａ：０。　Ｐ　的吸收系数Ｅ：　为　

２４３计算。　２．３．２　三磷酸胞苷二钠的重量比：按照高效液相色谱法（《中　

国药典》２００５年版二部附录ＶＤ）测定。　

系统适用性试验：理论塔板数按三磷酸胞苷二钠峰计算大　

于１５００；各色谱峰的分离度应符合规定。出峰次序依次为一磷　

酸胞苷、二磷酸胞苷、三磷酸胞苷。　

测定法：精密量取上述溶液２ｍｌ用流动相溶解至５０ｍｌ量　

瓶中，制成１ｍｌ中含０．４ｍｇ的溶液；取２０ＩＸｌ注入液相色谱仪，　

记录色谱图，按下式计算：　

三磷酸胞苷二钠的重量比＝　亍－　而×１。。％　

式中：Ｔ。为一磷酸胞苷峰面积；Ｔ　为二磷酸胞苷峰面积：　

Ｔ　为三磷酸胞苷峰面积：Ｔ　为其他峰（溶剂峰除外）峰面积　之和。　２．３．３　三磷酸胞苷二钠含量：按下式计算：三磷酸胞苷二钠含　

量（％）＝总核苷酸×三磷酸胞苷二钠的重量比，结果见表２。　

表２　三磷酸朐苷二钠含量　

３结论　用ＨＰＬＣ法测定三磷酸胞苷二钠注射液中三磷酸胞苷二钠　

的含量，操作简便、快速、准确，适用于本制剂的质量控制。　

参考文献：　［１］　国家药品标准［Ｓ］．ＷＳ１一ＸＧ～Ｏｌ　３—２００１　１６—２７２．　［２］　国家食品药品监督管理局药品标准［Ｓ］．ＷＳ　～ＸＧ一０１４—　

２００Ｉ．　（收稿日期：２００８—０２—１０编辑：郑晓屏）

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HPLC法测定注射用阿扎胞苷的含量

HPLC法测定注射用阿扎胞苷的含量

HPLC法测定注射用阿扎胞苷的含量

聂德平;郑玉丽;冯中

【期刊名称】《药学研究》

【年(卷),期】2015(000)006

【摘 要】OBjective

ToestablishanHPLDmethodforthedeterminationofAzacitidine.MethodsWelchUltimate XB-D18 column(4. 6 mm × 250 mm,3μm)was used. The mobile

phase consisted of 0. 02 mol·L-1 dipotassium hydrogen phosphate

solution(adjust pH to 6. 5 by phosphoric acid)-methanol(90:10). The

detection wavelength was 243 nm and the column temperature was(15 ±

2)℃. Results The calibration curve was linear in the range of 8. 16~30. 6

μg·mL-1 ( r=0. 999 9 ). The average recoveries was 98. 97% with

corresponding RSD of 0. 73%. Conclusion The method had strong

specialization and high accuracy,and can be used for the quality control of

azacitidine.%目的：建立测定阿扎胞苷含量的高效液相色谱方法。方法采用Welch Ultimate XB-D18（4.6 mm ×250 mm，3μm）色谱柱，以0.02 mol·L-1磷酸氢二钾溶液（以磷酸溶液调pH至6.5）-甲醇（90：10）为流动相，检测波长为243 nm，柱温为（15±2）℃。结果阿扎胞苷浓度在8.16～30.6μg·mL-1浓度范围内线性良好（r=0.9999），平均回收率为98.97%，RSD为0.73%。结论本方法专属性强、准确度高，可用于阿扎胞苷的质量控制。

注射用三磷酸胞苷二钠含量测定的方法学验证

注射用三磷酸胞苷二钠含量测定的方法学验证

龙源期刊网

注射用三磷酸胞苷二钠含量测定的方法学验证

作者：张 祥 刘伟芬

来源：《硅谷》2010年第13期

摘要: 目的:注射用三磷酸胞苷二钠含量测定的方法学验证。方法:采用高效液相色谱法(HPLC)测定三磷酸胞苷二钠的重量比;采用紫外-可见分光光度法(UV)测定总核苷酸的量,并将结果与纸电泳法对比。结果:电泳法测得三磷酸胞苷二钠含量为80.1%,申请注册标准的含量测定为79.6%,两者结果一致.结论:申请注册标准的含量测定方法与经典的纸电泳法结果基本一致。

关键词: 三磷酸胞苷二钠;含量测定;高效液相色谱法;紫外可见分光光度法;纸电泳法

中图分类号:R9文献标识码:A文章编号:1671-7597(2010)0710165-03

HPLC法测定注射用米力农的含量

HPLC法测定注射用米力农的含量

HPLC法测定注射用米力农的含量

石其德;张娜

【期刊名称】《药学研究》

【年(卷),期】2010(029)005

【摘 要】目的 建立高效液相色谱法测定注射用米力农含量的方法.方法 采用Ultimate LP-C18(4.6×250mm,5μm)色谱柱,流动相为乙腈-0.01mol·L-1的磷酸二氢钾溶液(用氢氧化钠试液调节pH值至6.8)(20:80),检测波长为254nm.结果 米力农在39.92～239.52μg·mL-1范围内线性关系(r=0.9999)良好,平均回收率为99.52%,RSD为0.38%.结论 本方法简便、快速、准确,可用于注射用米力农的质量控制.

【总页数】2页(P275-276)

【作 者】石其德;张娜

【作者单位】山东大学药学院,山东,济南,250012;鲁南制药集团股份有限公司,山东,临沂,276000;鲁南制药集团股份有限公司,山东,临沂,276000

【正文语种】中 文

【中图分类】R927.2

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温度对三磷酸腺苷二钠注射液含量的影响

温度对三磷酸腺苷二钠注射液含量的影响

温度对三磷酸腺苷二钠注射液含量的影响

目的 探讨温度对三磷酸腺苷二钠注射液含量的影响。 方法 采取高温破坏性试验，用药典规定的紫外分光光度法测定含量。 结果 找出了温度对三磷酸腺苷二钠注射液含量的影响，该产品在高温条件下存放时，温度越高含量下降越明显。 结论 为三磷酸腺苷二钠注射液的生产、储存及运输过程中怎样保证质量稳定提供了切实可行的建议和方法。

标签： 三磷酸腺苷二钠注射液；温度；含量；质量

三磷酸腺苷二钠注射液是腺嘌呤核苷-5′-三磷酸脂二钠盐三水合物的灭菌制剂。具改善机体代谢的作用，参与体内脂肪、蛋白质、糖、核酸以及核苷酸的代谢。用于（1）因组织损伤后细胞酶减退所引起的疾病，如心力衰竭、心肌炎、心肌梗死、冠心病、脑动脉硬化、脑卒中后遗症、阵发性室上性心动过速等。（2）进行性肌萎缩、肌无力症、眼疲劳、萎缩性皮炎、湿疹等。（3）肝炎、肾炎、梅尼埃综合征[1]。该品种收载于《中国药典》2010年版二部，成品贮存条件为阴凉处保存，也就是说储存条件不宜超过20℃。在工作中我们发现往往由于储存不当，尤其是在炎热的夏季，气温较高的环境条件下，该产品含量易偏低。为了考察该产品含量与温度的关系，我们对某厂生产的该产品进行了研究性实验，为更好的控制该产品质量提供科学依据，具体结果报道如下：

1 仪器、试药与样品

1.1 仪器

数显式恒温自控装置一套 UV/KON紫外分光光度计（法国赛科曼）。

1.2 试药

磷酸氢二钠、无水磷酸二氢钾（均为分析纯）。

1.3 样品

国内某知名企业生产的三磷酸腺苷二钠注射液，规格2 mL，20 mg*10支/盒。

2 方法与结果

2.1 操作

取三磷酸腺苷二钠注射液若干支，分别置数显式恒温自控装置中，经表1所示不同温度段进行恒温破坏性实验，30 min后取出，立即冷却至室温，备用。

2.2三磷酸腺苷二钠注射液含量测定

（总核苷酸）精密量取本品适量，加0.1 mol/L磷酸盐缓冲液（取磷酸氢二钠35.8 g，加水至1 000 mL，无水磷酸二氢钾13.6 g，加水至1 000 mL，两液互调pH值至7.0）使溶液定量稀释成每1 mL含20 μg的溶液、照紫外-可见分光光度法（中国药典附录ⅣA）测定[2]22，在259 nm的波长处测定吸光度，按C10H14N5Na2O13P3的吸收系数为279计算。