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HPLC 故障及排除方法

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HPLC 故障及排除方法

诊状 可能的原因 解 决 方 法

（ 一 ） 1. 柱温变化 柱恒温

保留时间变化 2. 等度与梯度间未能充分平衡 至少用 6 倍柱体积的流动相平衡柱

3. 缓冲液容量不够 用 >25mmol/L 的缓冲液，但MS尽量<10mmol/L

4. 柱污染 每天冲洗柱

5. 柱内条件变化 稳定进样条件 , 调节流动相

6. 柱快达到寿命 采用保护柱

（ 二 ） 1. 流速增加 检查泵 , 重新设定流速

保留时间缩短 2. 样品超载 降低样品量

3. 键合相流失 流动相 PH 值保持在 3~7.5 检查柱的方向

4. 流动相组成变化 防止流动相蒸发或沉淀

5. 温度增加 柱恒温

（ 三 ） 1. 流速下降 管路泄漏 , 更换泵密封圈 , 排除泵内气泡

保留时间延长 2. 硅胶柱上活性点变化 用流动相改性剂 , 如加三乙胺 , 或采用碱至钝化柱

3. 键合相流失 同前 （ 二 ）3

4. 流动相组成变化 同前 （ 二 ）4

5. 温度降低 同前 （ 二 ）5

（ 四 ） 1. 样品体积过大 用流动相配样 , 总的样品体积小于第一峰的 15%

出现肩峰或分叉 2. 样品溶剂过强 采用较弱的样品溶剂

3. 柱塌陷或形成短路通道 更换色谱柱 , 采用较弱腐蚀性条件

4. 柱内烧结不锈钢失效 更换烧结不锈钢 , 加在线过滤器 , 过滤样品

5. 进样器损坏 更换进样器转子

（ 五 ） 1. 进样阀残余峰 每次用后用强溶剂清洗阀 , 改进阀和样品的清洗

鬼峰 2. 样品中未知物 处理样品

3. 柱未平衡 重新平衡柱 , 用流动相作样品溶剂 （ 尤其是离子对色谱 ）

4. 三氟乙酸 （TFA） 氧化 （ 肽谱 ） 每天新配 , 用抗氧化剂

5. 水污染 （ 反相 ） 通过变化平衡时间检查水质量,用 HPLC 级的水

（ 六 ） 1. 气泡 （ 尖锐峰 ） 流动相脱气 , 加柱后背压

基线噪声 2. 污染 （ 随机噪声 ） 清洗柱 , 净化样品 , 用 HPLC 级试剂

3. 检测器灯连续噪声 更换氘灯

4. 电干扰 （ 偶然噪声 ） 采用稳压电源 , 检查干扰的来源 （ 如水浴等 ）

5. 检测器中有气泡 流动相脱气 , 加柱后背压

（ 七 ） 1. 柱超载 降低样品量 , 增加柱直径采用较高容量的固定相

峰拖尾 2. 峰干扰 清洁样品 , 调整流动相

3. 硅羟基作用 加三乙胺 , 用碱致钝化柱增加缓冲液或盐的浓度降低流动相 PH 值 , 钝化样品

4. 同前 （ 四 ）4 同前 （ 四 ）4

5. 同前 （ 四 ）3 5. 同前 （ 四 ）3

6. 死体积或柱外体积过大 连接点降至最低 , 对所有连接点作合适调整 , 尽可能采用细内径的连接管

7. 柱效下降 用较低腐蚀条件 , 更换柱 , 采用保护柱

（ 八 ） 1. 进样体积过大 同 （ 四 ）1

峰展宽 2. 在进样阀中造成峰扩展 进样前后排出气泡以降低扩散

3. 数据系统采样速率太慢 设定速率应是每峰大于 10 点

4. 检测器时间常数过大 设定时间常数为感兴趣第一峰半宽的 10% 5. 流动相粘度过高 增加柱温 , 采用低粘度流动相

6. 检测池体积过大 用小体积池 , 卸下热交换器

7. 保留时间过长 等度洗脱时增加溶剂含量也可用梯度洗脱

8. 柱外体积过大 将连接管径和连接管长度降至最小

9. 样品过载 进小浓度小体积样品

（ 九 ） 1. 洗针液用完 加入洗针液，使其充满流路

LC/MS峰面积不稳定 2. 流路进空气 排除气泡

3. 基质效应 改变保留时间或梯度洗脱

氨基柱的使用：

需要注意的是，氨基柱的键合官能团氨丙基要比C18,C8柱的键合官能团C18,C8要容易水解，所以首先要做好其使用寿命稍逊的心理准备，特别是当你的使用条件是反相条件下时。

反相条件下使用时，要特别注意控制PH值范围，PH值越低越有发生水解的危险，流动相中水的比例越高当然也越有发生水解的危险。所以，在使用后以及准备长时间放置该柱时，必要的清洗和将氨基柱保存于纯的有机溶剂中是很好的保养措施。

有一种情况是，当使用氨基柱进行酸性物质如果汁的分析时（分析其中的糖份），酸性物质的存在意味着质子的存在，可能会使略带负电荷的氨基官能团质子化，导致使用一段时间后对于某些类的分析物保留性质有所改变或表现在柱效下降。这时，Kromasil专家所给的建议是：用5-10倍的柱体积的含0.5-1.0％NH3的50-50乙腈-水溶液冲洗该柱（冲洗后当然要再用不含碱的流动相洗去多余氨），之后再进行分析这类酸性分析物时建议在流动相中略微添加少许氨如0.1％。

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注射泵常见故障及排除方法

注射泵常见故障及排除方法

注射泵常见故障及排除方法

常见微量泵的报警及处理：

1. 残留提示（NEA.EMPTY）：

当药液在3ml以下时,微量泵会自动报警,红灯亮闪, 提醒你即将用完，此时报警，不要按STOP键，以免关键药物停止进入影响病情，按消音键既可，将注射器和滑座向后移动1～2cm,红灯停止亮闪,可使注射器内剩余药液全部匀速注入体内,避免药液浪费,保证药物足量供给,以保证药液在血液中持续维持有效浓度。夜间消除报警声音,使患者睡眠充足,消除紧张心理。此时,可准备好另一注射器的药物。

2. 注射完毕报警（EMPTY）：

报警提示完全用完，应按STOP 键消音。

3. 阻塞报警（OCCLUSION）：

(1)针头阻塞，可试抽回血、推肝素液，甚至重建静脉通路；

(2)管道的阻塞、受压反折、三通开关放置错误、一路静脉使用多路微量注射泵等。针对原因解除故障、另开静脉通路；

(3)针头脱出血管外，要立即停止用药，重建静脉通路；

(4)注射泵本身的故障，有待维修。

4.电池欠压报警、电池电量耗尽报警（LOW-BATT）、电源线脱落报警

(1)蓄电池能源耗尽,应立即接通外电源,使其继续工作。

(2)发现电源插头松脱,应立即接好电源。

5注射器装夹不正确报警

无意碰撞使注射器松动,应检查注射器是否处于正常位置。

HPLC日常维护办法之一

HPLC日常维护办法之一

HPLC日常维护办法之一：压力异常

压 力 异 常

操作压力的变化往往是故障的征兆。从下表中找出所观察到的现象，并在右侧的列表中参考相应的解决方法。

A没有压力显示，没有流动相流动

原 因 解决方法

1、电源问题 1、接通电源，开机

2、保险丝被烧坏 2、更换保险丝

3、控制器设定不正确或设定失败 3、a、采取恰当的设定

b、修理或更换控制器

4、柱塞杆折断 4、更换柱塞杆

5、泵头内有空气 5、溶剂脱气、启动泵抽出空气

6、流动相不足 6、a、补充流动相

b、更换入口滤头

7、单向阀损坏 7、更换单向阀

8、漏液 8、拧紧或更换手紧接头

B流动相流动正常，但没有压力显示

原 因 解决方法

1、仪表损坏 1、更换仪表

2、压力传感器损坏 2、更换压力传感器

C压力持续偏高

原 因 解决方法

1、流速设定过高 1、调整流速设定

2、柱前筛板堵塞 2、a、在允许情况下反冲色谱柱

b、更换筛板

c、更换色谱柱

3、流动相使用不当或缓冲盐的结晶沉淀 3、a、使用恰当的流动相

b、冲洗色谱柱

4、色谱柱选择不当 4、选择恰当的色谱柱 5、进样阀损坏 5、清洗或更换进样阀

6、柱温过低 6、提高温度

7、控制器失常 7、修理或更换控制器

8、保护柱阻塞 8、清洗或更换保护柱

9、在线过滤器阻塞 9、清洗或更换在线过滤器

D压力持续偏低

原 因 解决方法

1、流速设定过低 1、调整流速

2、系统漏液 2、确定漏液位置并维修

3、色谱柱选择不当 3、选择恰当的色谱柱

4、柱温过高 4、降低温度

5、控制器失常 5、维修或更换控制器

E压力不断上升

原 因 解决方法

1、见列表C 1、见列表C

F压力降为零

原 因 解决方法

1、见列表A、B 1、见列表A、B

G压力不断下降，但不回零

原 因 解决方法

1、见列表D 1、见列表D

H压力波动

原 因 解决方法

1、泵中有气体 1、a、溶剂脱气

磨床故障及排除方法

磨床故障及排除方法

磨床故障及排除方法

珠海朝舜五金有限公司

一、 磨工件时有波纹

原因：

1、 Z轴导轨是否有润滑油

2、砂轮是否做了静平衡

二、 加工工件时精度超差

原因：

1、机床的动态水平是否好的

2、检查加工工艺

3、工作台面是否平的

三、 漏油

原因：

1、检查润滑是否太大

2、密封圈是否损坏

3、回油孔是否堵死

四、 工作台爬行

原因：

1、工作台导轨是否拉伤

2、导轨是否有油

3、活塞上的密封圈是否损坏

4、高压油是否进空气

五、工作台的速度

原因：

1、导轨是否有润滑油

2、液压油是否太脏

3、过滤网是否堵死（太脏）

4、泵体内孔是否损坏

5、调整油压阀回提螺丝

高效液相色谱常见故障的判定及解决方法

高效液相色谱常见故障的判定及解决方法

1 高效液相色谱常见故障的判定及解决方法

(一)保留时间变化

1. 柱温变化 柱恒温，必要时需配置恒温箱

2. 等度与梯度间未能充分平衡 至少用10倍柱体积的流动相平衡柱

3.缓冲液容量不够 用>25mmol/L的缓冲液

4.柱污染 每天冲洗柱

5.柱内条件变化 稳定进样条件,调节流动相

6.柱快达到寿命 采用保护柱

(二)保留时间缩短

1.流速增加 检查泵,重新设定流速

2.样品超载 降低样品量

3.键合相流失 流动相PH值保持在3~7.5检查柱的方向

4.流动相组成变化 防止流动相蒸发或沉淀

5.温度增加 柱恒温

(三)保留时间延长

1.流速下降 管路泄漏,更换泵密封圈,排除泵内气泡

2.硅胶柱上活性点变化 用流动相改性剂,如加三乙胺,或采用碱至钝化柱

3.键合相流失 同前(二)3

4.流动相组成变化 同前(二)4

5.温度降低 同前(二)5

(四) 出现肩峰或分叉

1.样品体积过大 用流动相配样,总的样品体积小于第一峰的15%

2.样品溶剂过强 采用较弱的样品溶剂

3.柱塌陷或形成短路通道 更换色谱柱,采用较弱腐蚀性条件

4.柱内烧结不锈钢失效 更换烧结不锈钢,加在线过滤器,过滤样品

5.进样器损坏 更换进样器转子

(五)鬼峰

1.进样阀残余峰 每次用后用强溶剂清洗阀,改进阀和样品的清洗

2.样品中未知物 处理样品

3.柱未平衡 重新平衡柱,用流动相作样品溶剂 (尤其是离子对色谱)

4.三氟乙酸(TFA)氧化(肽谱) 每天新配,用抗氧化剂

5.水污染(反相) 通过变化平衡时间检查水质量，用HPLC级的水

(六) 基线噪声

1.气泡(尖锐峰) 流动相脱气,加柱后背压

2.污染(随机噪声) 清洗柱,净化样品,用HPLC级试剂

3.检测器灯连续噪声 更换氘灯。

4.电干扰(偶然噪声) 采用稳压电源,检查干扰的来源(如水浴等)

5.检测器中有气泡 流动相脱气,加柱后背压

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(七)峰拖尾