生物样品的采集和保存方法
上海市劳动卫生职业病研究所陈寿椿
生物样品的采样和保存,在生物监测检验中是一个十分重要的问题,也是保证测定结果正确性的必要前提,如果忽视了这一点,而只重视分析方法的灵敏度精密度准确度等的研究提高,恐有失之毫厘,差之千里之憾,因此,今就有关样品的采集和保存,作一简要的介绍一工业毒物的代谢与生物样品采集的关系工业毒物进入人体并经代谢后,它可由尿呼出气汗液乳液粪便及头发等途径排出体外,鉴于各化学物的吸收代谢男卜泄等互有差异,而且各排泄物中所含被测化学物的量亦不相同,因此,在采样时,主要是考虑所采样品中的被测化学物的含量必须具有代表性,否则将会失去采样的真实意义在血液中采样时,也有相似的要求某些化学物进入体内代谢后,其排出的量,常随其进入的途径呼吸或皮肤吸收不同而异例如,乙苯经皮肤吸收后,约有 !的量被代谢为扁桃酸而由尿排出多反之,由呼吸吸收后,约有∀#!的量被代谢为扁桃酸而随尿排出,因此,在这种情况下,如按一般规律,以其尿中排出的扁桃酸量作为混合接触乙苯的测定指标,则显然是不够恰当的又如,少数金属如硒和磅在体内代谢甲基化后,较原金属更易挥发,并由呼出气中排出,所以如仍按金属的一般排泄规律,在尿中测定它的含量时,将会引起较大的误差还有,接触化学物后,究竟在什么时候收集被检化学物的样品,亦是一个重要问题,例如,接触苯乙烯后生成的马尿酸,约在接触后∃%小时左右,才于尿中出现多同样,在接触三氯乙烯后的∃%&∋∀小时,尿中才能出现有意义量的三氯乙酸因此,在进行生物监测时,对样品的采集,既要注意化学物的排泄途径,又要考虑它的排出量能否正确反映其实际的接触程度,这里当然涉及到采集什么样品,什么时间采样比较最理想的问题,这是卜分重要的关键二样品的污染预防在采集生物样品时,对所用的容器和用具必须保持洁净,且不受外来的污染,同时,在具体采样时,应让受试者脱离现场,并清除他身体外部手手臂及头脸部,衣服等可能存在的被测化学物的污染,然后在远离生产环境的适当场所进行采样三采样的方法和时间飞血液)根据测定方法的要求,凡需样童大的,可取静脉血,需样量小的,可取耳垂血或手指血在具体实行中,抽取静脉血时,建议最好不用止血带结扎法取血,因结扎法与不结扎法抽取血液的测定结果不一致,前者有人证明在某些微量金属离子如锌铁等的测定结果较后者偏高,对取血量较少者,建议抽手指血因血液容易放出,取血方便采血部位的皮肤,除用水洗外,必要时还应另用特殊的洗涤液,务使可能存在的污染物完全被洗除干净采血时间,一般以工作%或∗小时后取血较妥血样一般收集于聚乙烯聚丙烯试管或硬质玻璃试管中需要时可加抗凝剂如肝素等∃尿液)工业化学物在尿中排出的情况,各有差异,为了检测结果的可信起见,对住院病员,一般应取∃%小时的尿总量+门诊病员则以取晨尿为主对现场操作工人,一般可根据接触化学物的排泄半消除期而及时收集其尿液一次尿,或于工作%小时或∗小时后特殊情况例外进行取样取样时应在其上次排尿后间隔
废水采样和保存技术
和保存废水样品的技术要求依据《污水监测技术规范》（HJ 91.1-2019）和《水质采样样品的保存和管理技术规定》（HJ 493-2009）。对于部分监测项目，如动植物油类、石油类、挥发性有机物、微生物等，采样前不能荡洗采样器具和样品；其他项目则需要用水样荡涤采样和样品2-3次。对于部分检测项目，如水温、pH值、色度、动植物油类、石油类、生化需氧量、硫化物、挥发性有机物、氰化物、余氯、微生物、放射性等，不同时间采集的水样不能混合测定。部分检测项目的保存方式也不同，需要单独采集储存，如动植物油类、石油类、硫化物、挥发酚、氰化物、余氯、微生物等。在采集时，对于生化需氧量、挥发性有机物等监测项目，需要注满，不留顶上空间。对于一些监测项目，如悬浮物、石油类、动植物油、微生物等，采样时不能做平行样。
废水样品的材质和颜色分为透明塑料（P）和玻璃（G）两种。采样容量和样品数根据不同的项目而不同，需要使用不同的。在保存废水样品时，需要冷藏、避光、标签完好，并采取有效减震措施，以延长存储时间。对于一些监测项目，如臭和味、电导率、溶解氧等，需要加入固定剂。在现场固定时，需要使用硫酸，pH值不能超过2.在采样时，需要单独采样、定容采样，不能采现场平行样。记录表也需要写上项目，现场测定无需加固定剂。
单独采样时，采样前不得荡洗采样器具和样品，样品必须注满，不留空间。不同时间采集的水样不能混合测定，无法做混合样。采样后应立即送至实验室进行分析。
对于不同的污染物，采样时需要采用不同的方法和处理方式。例如，对于悬浮物、化学需氧量、高锰酸盐指数、五日生化需氧量等污染物，采样时需要使用不同的和处理方法。同时，不同的污染物的测定标准也不同，需要根据实际情况进行调整。
对于氨氮、总磷、总氮、硝酸盐氮、亚硝酸盐氮、汞、烷基汞等污染物，采样时也需要使用不同的和处理方法。同时，采样前也需要注意一些细节问题，例如加入一定量的CuSO4等。
水质 采样 样品的保存和管理技术规定
GB 12999-91 实施日期 1991-09-01本标准是水质采样标准第三部分。
本标准参照采用ISO 5667-3:1985《水质——采样——样
品保存和管理技术指导》。
1 主题内容与适用范围
本标准适用于天然水、生活污水及工业废水等，当所采集
的水样(瞬时样或混合样)不能立即在现场分析，必须送往实验
室测试时，本标准所提供的样品保存技术与管理程序是适用
的。
2 样品保存
各种水质的水样，从采集到分析这段时间里，由于物理
的、化学的、生物的作用会发生不同程度的变化，这些变化使
得进行分析时的样品已不再是采样时的样品，为了使这种变化
降低到最小的程度，必须在采样时对样品加以保护。
2.1 水样变化的原因
2.1.1 生物作用：细菌、藻类及其他生物体的新陈代谢会消耗
水样中的某些组分，产生一些新的组分，改变一些组分的性
质，生物作用会对样品中待测的一些项目如溶解氧、二氧化
碳、含氮化合物、磷及硅等的含量及浓度产生影响。
2.1.2 化学作用：水样各组分间可能发生化学反应，从而改变
了某些组分的含量与性质。例如溶解氧或空气中的氧能使二价
铁、硫化物等氧化；聚合物可能解聚；单体化合物也有可能聚
合。
2.1.3 物理作用：光照、温度、静置或振动，敞露或密封等保
存条件及容器材质都会影响水样的性质。如温度升高或强振动
会使得一些物质如氧、氰化物及汞等挥发；长期静置会使
A1(OH)3，CaCO3及Mg3(PO4)2等沉淀。某些容器的内壁能不可逆
地吸附或吸收一些有机物或金属化合物等。
水样在贮存期内发生变化的程度主要取决于水的类型及水
样的化学性质和生物学性质。也取决于保存条件、容器材质、
运输及气候变化等因素。必须强调的是这些变化往往是非常快。常在很短的时间里
样品就明显地发生了变化，因此必须在一切情况下采取必要的
保护措施，并尽快地进行分析。
保护措施在降低变化的程度或减缓变化的速度方面是有作
用的，但到目前为止所有的保护措施还不能完全抑制这些变
现场样品采集、保存和运输
在现场调查中，很重要的—项工作是正确采集、妥善保存、和尽快送检样品，以及随后对样品检测结果进行正确的判读和分析。
（一）样品采集的目的、作用和原则
现场调查的目的主要可分为两大类：一是查明突发公共卫生事件或疾病暴发流行的原因，二是进行卫生质量监测和评价。应该遵循如下总原则：
1.注意生物安全：需要采取的具体措施包括如下两方面：①个人防护：采样时要戴手套，接触不同患者时不能重复使用一副手套，以免交叉感染，并注意手套是否有小的破损；采样中尽可能穿防护服；采样后消毒要穿戴防护服和厚橡胶手套，对污染区表面和溢出物进行消毒；如怀疑有高度传染力的病原，需使用护目镜、呼吸面罩等；为了防止意外，确保安全，采样应备有急救包。②恰当处理污染废弃物：污染的可废弃设备和材料应先消毒后废弃；用过的针头妥善收集消毒，并按规定销毁或损毁；在暴发疫点使用过的防护服、设备、材料等使用化学消毒剂消毒后再清洗，特殊情况也可在现场建简易焚烧炉焚烧。
2.注意采样的代表性或针对性：以卫生质量评价为目的的样品采集，影响采样代表性的因素包括采样量、采样部位、采样时间、采样的随机性和均匀性，以及按批号抽样。以查明突发公共卫生事件或疾病暴发流行的原因为目的的样品采集，不要求样品的代表性，强调针对性，尽可能采集病原微生物含量最多的部位和足够检测用的样本。
3.注意采样时间和种类：以分离培养细菌为目的，则应尽量在急性发病期和使用抗生素之前采集标本，如果已使用抗生素，采样和分离培养最好加入相应的中和剂（中和样品中残存的抑菌物质）或进行其他处理。作病毒分离和病毒抗原检测的标本，应在发病初期和急性期采样，最好在发病1～2天内采取。
4.注意避免采样引入新的污染或者对微生物的杀灭因子：所有采样用具、容器需严格灭菌，并以无菌操作采样。对微生物样品，应避免采样时对微生物的杀灭作用和引入新的抑菌物质，如容器是否有消毒剂的残留，或使用刚烧灼未冷却的采样工具。
