大肠菌群计数平板法检验原始记录

大肠菌群检验原始记录（平板计数法）

检验单位

检验员

检验日期 至 环境条件 温度 ____ ℃,相对湿度 _____ %

检验依据 GB4789.3-2016《食品安全国家标准食品微生物学检验大肠菌群计数》第二法

样品名称 产品批号

仪器设备及耗材：

电子天平、洁净工作台、电热恒温培养箱、立式压力蒸汽灭菌器、水浴锅、PH计、移液器

培养基及试剂：

结晶紫中性红胆盐琼脂培养基（VRBA）： _____________ m1. 配制日期： ________________

煌绿乳糖胆盐肉汤（BG1.B）： _____________ m1. 配制日期： ________________

无菌生理盐水： ___________ m1. 配制日期： ________________

实验过程：

1 .样品处理和稀释：

1 .1如需要，使用Imo1./1.氢氧化钠或ImOI/1.盐酸将样品调整PH在6.5~7.5之间。

2 .2制备样品稀释液

根据样品状态，无菌操作，称取/无菌吸取25g（m1.）样品，加入到225m1.无菌生理盐水中充分混匀，制成1:10样品匀液。

用Im1.无菌吸管或微量移液器吸取1：10样品匀液Im1.,沿管壁缓慢注于盛有9m1.稀释液的无菌试管中（注意吸管或吸头尖端不要触及稀释液面），在振荡器上振荡混匀，制成1：IoO的样品匀液。

按上面步骤操作，制备10倍系列稀释样品匀液。每递增稀释一次，换用1次Im1.无菌吸管或吸头。从制备样品匀液至样品接种完毕，全过程不得超过15min.

2 .接种VRBA

选择适宜的2~3个连续稀释度的样品匀液（液体样品可包括原液），吸取Im1.于无菌平皿内，每个稀释度接种两个平皿。同时分别吸取1m1.生理盐水加入两个无菌平皿内作为空白对照。及时将15~20m1.融化并恒温至46℃的VRBA倾注平皿，并转动平皿使其混合均匀，待琼脂凝固后，再加3~4m1.VRBA覆盖平板表层。同时再以只加VRBA的平皿，作为VRBA的空白对照。将平板翻转，培养。

检验原始记录

产品批号： 共 页 第 页

检验项目 菌落总数/大肠菌群 型号规格 质量等级

抽样基数 抽样数量 抽样人员

生产日期 依据标准 检验环境

使用主要仪器设备 电热恒温培养箱 1℃

高压蒸汽灭菌锅 0.1Mpa

取样量ml 25.0

菌 落 总 数 检 验 记 录

稀释液 平行样1 平行样2 平均菌落数

比例 接种量

1：10 1ml

1:100 1ml

1:1000 1ml

菌落总数cfu/ml

大 肠 菌 群 检 验 记 录

稀释液 阳性管教

比例 接种量

1:10 10ml×3

1:10 1ml×3

1:100 1ml×3

大肠菌群

MPN/100ml

备注

审核员： 年 月 日 检验员： 年 月 日

样单编号： 共 页 第 页

样品名称 检验方法 GB4789.3 平板计数法

收样日期 年 月 日 检验日期 年 月 日至 月 日

使用仪器设备名称 型号 精度 设备编号 状态

电热恒温培养箱 □HH-B11-420 ±1℃ Sb005 □正常 □不正常

检验项目 操作步骤及培养条件 空白对照 检验结果

大

肠

菌

群

CFU/g

(mL) 样

1 样品稀释倍数 原液 10倍 100倍

VRBA平板试验36℃±1℃培养18h±24h

典型菌落数

BGLB肉汤试验36℃±1℃培养24h±48h

样

2 样品稀释倍数 原液 10倍 100倍

VRBA平板试验36℃±1℃培养18h±24h

典型菌落数

BGLB肉汤试验36℃±1℃培养24h±48h

样

3 样品稀释倍数 原液 10倍 100倍

VRBA平板试验36℃±1℃培养18h±24h

典型菌落数

BGLB肉汤试验36℃±1℃培养24h±48h

样

4 样品稀释倍数 原液 10倍 100倍

VRBA平板试验36℃±1℃培养18h±24h

典型菌落数

BGLB肉汤试验36℃±1℃培养24h±48h

样

5 样品稀释倍数 原液 10倍 100倍

VRBA平板试验36℃±1℃培养18h±24h

典型菌落数

BGLB肉汤试验36℃±1℃培养24h±48h

备注

校核人员： 检验人员： 年 月 日

大肠菌群检验检验原始记录

样品名称 样品编号：

生产日期 检验日期

检验依据 GB4789.3-2010 样品状态

检验步骤：

一、称取样品25g样品放入盛有225ml灭菌的生理盐水中，制成1：10的样品匀液，用1ml无菌吸管吸取1：10的样品匀液1ml，沿管壁缓缓注入盛有9ml生理盐水的无菌试管中，制成1：100的样品均液，用1ml无菌吸管吸取1：100的样品匀液1ml，沿管壁缓缓注入盛有9ml生理盐水的无菌试管中，制成1：1000的样品均液。

二、初发酵试验：大肠菌群每个样品，选择3个适宜的连续稀释度的样品匀液，每个稀释度接种3管月桂基硫酸盐胰蛋白胨（LST）肉汤（大肠菌群测定：如果超过1ml，则用双料LST肉汤），36℃±1℃培养24h±2h，观察倒管内产气情况。如未产气，培养至48h±2h。

三、复发酵试验：（大肠菌群的测定）用接种环从产气的LST肉汤管中分别取培养物1环，移种于煌绿糖胆盐肉汤（GBLB）管中，36℃±1℃培养48h±2h，，观察产气怦况。

四、根据证实为大肠菌群的阳性管数，查MPN检索表，报告大肠菌群的最可能数。

初发酵（月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤，37℃，48h） 稀释度 接种量（mL） 接种管数（支） 产气管数（支） 复发酵（煌绿乳糖胆盐肉汤，37℃，48h）

产气管数（支）

1:10 10 3

1:10 1 3

1:100 1 3

检验结果MPN/100g

检验员