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广药2011药学概论重点资料完整版掌握1、抗体工程分类336（1）多克隆抗体（2）单克隆抗体（3）基因工程抗体2、抗肿瘤药物最常见的毒性反应251近期毒性、远期毒性3、成功的靶向制剂所具备的条件、分类。
316.317三个条件：定位浓集、控制释药、无毒可生物降解；分类：一级靶向、二级靶向、三级靶向；被动靶向制剂、主动靶向制剂、物流化学靶向制剂；4、口服硫酸镁和注射硫酸镁210注射硫酸镁：注射后可引起中枢抑制和骨骼肌松弛。
用于各种原因引起的惊厥。
原理是：镁离子抑制递质的释放和骨骼肌松弛。
也抑制中枢神经系统，引起感觉和意识消失。
口服硫酸镁：口服难以吸收，使肠腔内渗透压升高，大量水分使肠道扩张，使肠壁感受器受到刺激，导致腹泻；5、判定药品真伪的检验工作258程序：A、分析样品的取样B、检验C、检验报告的书写。
检验内容：性状是否符合要求，再进行鉴别、检查、含量测定。
药物鉴别常用方法：化学法、光谱法、色谱法、生物学法。
含量测定常用方法：化学分析法、仪器分析法、生物学方法、酶化学方法。
鉴别用来判断药物的真伪；检查和含量测定用来判定药物优劣。
一般鉴别试验用来证实某一类药物，专属鉴别试验用来证实某一种具体6、药物制剂稳定性288药物制剂稳定性：包括化学、物理及生物学三个方面。
7、药物剂型的作用286剂型可以改变药物的作用性质（硫酸镁，利凡诺）。
剂型可以改变药物的作用速度。
剂型可降低或消除药物的毒副作用。
剂型可产生靶向作用（脂质体）。
剂型可影响疗效。
8、抗生素时代的开创标志1941年青霉素的开发成功，标志着抗生素时代的开创9、《基本医疗保险药品目录》所列药品种类和要求348纳入《药品目录》的药品是有国家药品标准的品种和进口品种，并符合“临床需要、安全有效、价格合理、使用方便，市场能保证供应”的原则。
《药品目录》所列药品包括化学药、中成药、中药饮片。
《药品目录》又分为“甲类目录”和“乙类目录” 。
10、药事管理学的社会调查研究的步骤342可分为选题、准备、实施、总结四个步骤；11、机体的防御系统12、辅料定义及其在药物制剂中的作用287辅料：是构成药物剂型的一个重要物质条件，它赋予药物剂型必要的物理、化学、药效和生辅料：物学性质。
生物制药复习要点1. 药物研究与开发的基本过程？2. 生物技术制药的定义、分类？采用现代生物技术、借助某些微生物、植物、动物生产医药品。
3. 从生物制药的历史与看其发展趋势？基因操作技术不断完善；基因工程药物和疫苗研究；新的生物治疗制剂转基因动物和植物；在农业和畜牧业生产的应用生物体基因组及其编码蛋白质的结构与功能；基因治疗、蛋白质工程、生物信息学。
4. 简述生物药物的定义、来源及特性？生物药物的定义：运用生物学、医学、生物化学等研究成果，从生物体、生物组织、细胞、体液等，综合利用物理学、化学、生物化学、生物技术、药学等学科的原理和方法制造的一类用于预防、治疗和诊断的制品。
来源：天然生物材料如人体、动物、植物、微生物和各种海洋生物等。
人工生物材料如：免疫法制备的动物原料、基因工程技术制备的微生物或其它细胞原料。
特性 1. 药理学特性1 治疗的针对性强，治疗的生理、生化机制合理，疗效可靠。
⑵ 药理活性高⑶ 毒副作用小，营养价值高⑷ 生理副作用常有发生2.在生产、制备中特殊性(1)提取纯化工艺复杂（原料中有效物质含量低）(2)稳定性差(3)易变质腐败(低温、无菌操作) (4)注射用药要求3.检验上的特殊性（1）需理化检验指标（2）生物活性指标5. 基因工程技术生产药物的优点及生产的基本过程？优点 1.大量生产难以获得的生理活性蛋白质和多肽2.提供足够数量的生理活性物质，以便对其生理、生化和结构进行深入的研究，从而扩大这些物质的应用范围3.发现，挖掘更多的内源性生理活性物质4.改造和去除内源生理活性物质在作为药物使用存在的不足之处5.获得新型化合物，扩大药物筛选来源基本过程 1.获得目的基因 2.组建重组质粒 3.构建基因工程菌(细胞)4.培养工程菌5.产物分离纯化6.除菌过滤7.半成品检定 8.成品检定 9.包装6. 获得药用目的基因的方法？1逆转录法2逆转录－聚合酶链式反应法3化学合成法4筛选基因的新方法（功能克隆法、构建cDNA文库）7. 真核基因在大肠杆菌的表达方式？（1）以融合蛋白的形式表达药物基因：融合蛋白氨基端是原核序列，羧基端是真核序列。
生物技术制药总复习（11级制药工程）一、名词解释1.生物技术:，为社会提供商品和服务的一个综合性技术体系。
2.生物技术制药:3.生物技术药物:是指采用4.细胞工程:地进行精心设计，精心操作，从而达到改良或产生新品种的目的，以及使细胞增加或重新获得产生某种特定产物的能力，从而在离体条件下进行大量培养、增殖，并提取出对人类有用的产品。
5.cDNA文库:cDNA文库是指某种生物基因组转录的全部mRNA经反转录产生的cDNA片段分别与克隆载体重组，并将其引入到相应的宿主细胞中繁殖和扩增，理论上此群体就包含有该物种的全部mRNA 信息，称该生物基因组的cDNA文库。
6.限制酶 : 是指限制性核酸内切酶，是一类能识别双链DNA分子中的特定核苷酸序列，并对核苷酸之间的磷酸二酯键进行切割的核酸内切酶。
7.PCR :是指聚合酶链式反应，由变性、退火、延伸三个基本反应组成。
8.模拟酶：在分子水平上模拟酶活性部位的形状、大小及其微环境等结构特征，以及酶的作用机制和立体化学等特性，用各种方法人为制造的具有酶性质的催化剂。
9.抗体酶：抗体酶是抗体的高度选择性和酶的高效催化能力巧妙结合的产物，本质上是一类具有催化活力的免疫球蛋白，在其可变区赋予了酶的属性。
10.外植体：外植体是指用于植物组织（细胞）培养的器官或组织（的切段），植物的各部位如根、茎、叶、花、果、穗、胚珠、胚乳、花药和花粉等均可作为外植体进行组织培养。
11.微生物和植物的原生质体：是指去除细胞壁的微生物和植物细胞。
12.免疫：机体一种生理功能，机体依靠这一功能识别“自已”和“非已”成分，从而破坏与排拆进入机体的抗原物质或机体产生的异构物质。
13.抗原：凡能激发机体产生体液免疫或细胞免疫，并能与免疫应答的产物抗体和致敏淋巴细胞相结合的物质。
对人有重要性的抗原包括微生物、寄生虫、异物血清、异型红细胞、异体组织等。
14.抗体：机体内B淋巴细胞在抗原剌激下所合成的具特异性免疫功能的球蛋白；抗体与相应抗原能发生特异性结合，从而促进白细胞的吞噬作用，将抗原清除，或使微生物失去致病性。
生物药剂学第一节概述一、生物药剂学的概念生物药剂学的概念：生物药剂学研究的内容是剂型和制剂中的药物用于机体后在体内的吸收、分布、代谢、排泄过程及影响因素，即研究“药物在体内的命运”规律的科学。
生物药剂学研究药物的剂型因素、用药对象的生理因素与药效之间的关系。
其目的是为了正确评价和改进药剂质量，合理的设计剂型、处方和生产工艺，为临床给药方案设计和合理用药提供科学依据，以保证用药的安全性和有效性。
1.生物药剂学中研究的剂型因素包括：(1)药物的某些化学性质(2)药物的某些物理性状(3)药物制剂的处方组成(4)药物的剂型与用药方法(5)制剂的工艺过程、操作条件及贮存条件2.生物因素包括：种族差异、年龄差异、性别差异、遗传差异及生理与病理条件的差异二、药物的跨膜转运药物的吸收过程也是一个膜转运过程，体内具有吸收功能的主要组织为上皮组织，它是由上皮细胞组成的，上皮细胞膜是一种生物膜，其构造和性质决定药物的吸收难易程度。
(一)生物膜的结构：由类脂质、蛋白质及少量多糖等组成，具有半透膜特性。
(二)药物通过生物膜的转运方式各种药物的性质不同，其转运方式不同。
1.被动扩散(被动转运)(1)指药物由高浓度一侧通过生物膜扩散到低浓度一侧的转运过程(2)被动扩散符合一级速度方程，即一级吸收速度方程：dc/dt=-KC1(3)被动扩散的特点1)顺浓度梯度转运，即从高浓度向低浓度转运，具有一级速度过程特征;2)不需要载体，膜对通过物无特殊选择性;3)无饱和现象和竞争抑制现象，无部位特异性;4)扩散过程不需要能量(4)被动扩散途径(1)溶解扩散(2)膜孔转运2.主动转运(1)指借助于载体的帮助，药物分子由低浓度区向高浓度区逆向转运的过程，这种吸收转运需要能量。
(3)主动转运的特点：1)逆浓度梯度转运;2)需要能量，能量来源主要是细胞代谢产生的ATP提供;3)主动转运药物的吸收速度与载体数量有关，可出现饱和现象;4)可与结构类似物质发生竞争现象;5)受代谢抑制剂的影响;6)主动转运有结构特异性7)有部位特异性;主动转运：药物的吸收速度可用米氏方程来描述。
一．名词解释第一章1．生物技术：是人类对生物资源（包括微生物、植物、动物）的利用、改造并为人类服务的技术。
2.生物技术制药：就是利用基因工程技术、细胞工程技术、微生物工程技术、酶工程技术、蛋白质工程技术、分子生物学技术等来研究和开发药物，用来诊断、治疗和预防疾病的发生。
3.生物药物：是指利用生物体、生物组织或其成分、综合应用多门学科的原理和方法进行加工、制造而成的一大类药物。
第二章1.基因工程技术：基因工程技术又叫基因拼接技术或DNA重组技术。
将重组对象的目的基因插入载体，拼接后转入新的宿主细胞，构建成工程菌；实现遗传物质的重新组合，并使目的基因在工程菌内进行复制和表达的技术。
逆转录法:就是先分离纯化目的基因的mRNA，再反转录成cDNA，然后进行cDNA的克隆表达。
2.补料分批培养：补料分批培养是将种子接入发酵反应器中进行培养，经过一段时间，间歇或连续地补加新鲜培养基，使菌体进一步生长的培养方法。
3.连续培养：连续培养是将种子接入发酵反应器中，搅拌培养至菌体浓度达到一定程度后，开动进料和出料蠕动泵，以一定稀释率进行不间断培养。
4.透析培养技术：透析培养技术是利用膜的半透性原理使培养物和培养基分离，其主要目的是通过去除培养液中的代谢产物来解除其对生产菌的不利影响。
5.高密度发酵：是指培养液中菌体的浓度在50gDCW/L以上，目的是降低成本，提高效率。
6.离子交换层析：是依据流动相中的组分离子与交换剂上的平衡离子进行可逆交换时结合力大小的差别而进行分离的一种层析方法。
7.疏水层析：是利用蛋白质表面的疏水区域和固定相上疏水基团之间的相互作用力差异，对蛋白组分进行分离的层析方法。
8.亲和层析：是利用固定化配体与目的蛋白质之间非常特异的生物亲和力进行吸附，这种结合既是特异的，又是可逆的，改变条件可以使结合解除。
9.凝胶过滤层析：是以多孔性凝胶填料为固定相，按分子大小对溶液中各组分进行分离的液相层析方法。
第一章绪论1、生物技术制药是指采用现代生物技术可以人为地创造一些条件，借助某些微生物，植物或动物来生产所需的医药品。
它包括基因工程制药，动物细胞工程制药，抗体制药，植物细胞工程制药，酶工程制药。
4、生物技术药物的分类，按功能用途分：一是治疗药物，独特的生理调节，毒副作用低；二是预防药物，传染性疾病；三是诊断药物，疾病的临床诊断，速度快，灵敏度高，特异性强5、生物技术制药的特性：高技术、高投入、长周期、高风险、高收益第二章基因工程制药Gene Engineering for Biopharmaceutics 第二节基因工程药物生产的过程基因工程制药所使用的生物技术:（1）DNA重组技术（2）淋巴细胞杂交瘤技术（3）细胞培养技术（4）克隆表达技术DNA重组技术DNA重组（DNA recombination）指DNA分子内或分子间发生的遗传信息的重新共价组合过程。
包括同源重组、特异位点重组和转座重组等类型，广泛存在于各类生物。
体外通过人工DNA重组可获得重组体DNA，是基因工程中的关键步骤。
淋巴细胞杂交瘤技术又称单克隆抗体技术。
它是在体细胞融合技术基础上发展起来的。
克勒（Kohler）和米尔斯坦（Milstein）（1975）证明，骨髓瘤细胞与免疫的动物脾细胞融合，形成能分泌针对该抗原的均质的高特异性的抗体——单克隆抗体，这种技术通称为杂交瘤技术。
基因工程制药生产的基本步骤1、流程图获得目的基因--组建重组质粒--构建基因工程菌或细胞--培养工程菌--产物分离纯化--除菌过滤--半成品检定--成品检定--包装2、上游阶段主要是分离目的基因和构建工程菌细胞，其工作主要是在实验室内完成。
具体内容包括：（1）获得目的基因（2）用限制性内切酶和连接酶将目的基因插入到适当的载体质粒和噬菌体之中（3）将重组后的基因转移到大肠杆菌或者其它宿主细胞内3、下游阶段是指从工程菌的大规模培养，一直到产品的分离纯化，其工作主要是将实验室成果产业化、商品化。
生物药剂学一、名词解释1、生物药剂学（biopharmaceutics）:是研究药物及其剂型在体内的吸收、分布、代谢和排泄的过程，阐明药物的剂型因素、机体的生物因素与药物效应三者之间相互关系的学科。
2、吸收（absorption）:是指药物从用药部位进入体循环的过程。
3、分布（distribution）:药物从体循环向各组织、器官或体液转运的过程。
4、代谢（metabolism）:药物在吸收过程或进入体循环后,受肠道菌丛或体内酶系统的作用，结构发生转变的过程。
5、排泄（excretion）:药物及其代谢物排出体外的过程。
6、转运（transport）:药物的吸收、分布和排泄过程的统称。
7、处置（disposition）:分布、代谢和排泄的过程。
8、消除（elimination）:代谢与排泄的过程。
9、膜转运（menbrane transport）:物质通过生物膜或细胞膜的现象。
10、被动转运（passire transport）:是指存在于膜两侧的药物服用浓度梯度，即从高浓度一侧向低浓度一侧扩散的过程。
11、主动转运（active transport）:借助载体或酶促系统的作用，药物从膜的高浓度侧向低浓度侧扩散的过程。
12、膜动转运（menbrace mobile transport）:是指通过细胞膜的主动变形将药物摄入细胞内或从细胞内释放到细胞外的转运过程。
13、首过效应（first（liver）pass effect）:透过胃肠道生物膜吸收的药物经肝门静脉入肝后，在肝药酶作用下药物可产生生物转化，使药物进入体循环前降解或失活，导致进入体循环的原形药物的量减少，这种现象称为是“肝的首过效应”。
14、肠肝循环（enterhepaticycle）:是指经胆汁排入肠道的药物，在肠道中又重新被吸收，经门静脉返回肝脏的现象。
15、静脉注射（intravenous injection）:是指药物注射到骨骼肌中，通常选择臀部肌肉作为注射部位。
生物技术制药复习知识点第一章绪论1.生物制药的研究内容包括基因工程制药，细胞工程制药，酶工程制药和发酵工程制药。
2.生物技术制药，是采用现代生物技术人为地创造一些条件，借助某些微生物、植物或动物来生产所需的医药品。
3.生物技术药物，是采用DNA 重组技术、单克隆抗体技术或其它生物新技术研制的蛋白质、治疗性抗体或核酸类药物。
4.生物药物，指包括生物制品在内的生物体的初级和次级代谢产物或生物体的某一组成部分，甚至整个生物体用作诊断和治疗的医药品。
5.现代生物药物四种类型：①应用DNA重组技术制造的基因重组多肽、蛋白质类治疗剂。
②基因药物，如基因治疗剂、基因疫苗、反义药物和核酶等。
③来自动植物和微生物的天然生物药物。
④合成与部分合成的生物药物。
6.生物药物按功能用途分为三类：治疗药物，预防药物和诊断药物。
7.生物技术药物的特性：分子结构复杂，具种属特异性，治疗针对性强、疗效高，稳定性差，基因稳定性，免疫原性、重复给药会产生抗体，体内半衰期短，受体效应，多效性和网络效应，质量控制的特殊性，生产系统的复杂性。
8.生物技术制药特征：高技术，高投入，长周期，高风险，高收益。
9.基因诊断：指采用分子生物学的方法在DNA水平或RNA水平对基因的结构和功能进行分析从而对特定的疾病进行诊断。
第二章基因工程制药1.利用基因工程技术生产药品的优点：（1）可以大量生产过去难以获得的生理活性蛋白和多肽（如胰岛素、干扰素、细胞因子等），为临床使用提供有效的保障；（2）可以提供足够数量的生理活性物质，以便对其生理、生化和结构进行深入的研究，从而扩大这些物质的应用范围；（3）利用基因工程技术可以发现、挖掘更多的内源性生理活性物质；（4）内源性生理活性物质在作为药物使用时存在的不足之处，可通过基因工程和蛋白质工程进行改造和去除；（5）利用基因工程技术可获得新型化合物，扩大药物筛选来源。
2.基因工程技术就是将目的基因插入载体，拼接后转入新的宿主细胞，构建工程菌（或细胞），实现遗传物质的重新组合，并使目的基因在工程菌内进行复制和表达的技术。
生物技术制药期末复习提纲
一、分子生物学
1.克隆技术：反应机理、克隆流程以及克隆技术的应用
2.基因工程：基因分子的识别、基因突变以及基因工程的应用
3.基因转录与转译：基因转录反应的步骤、转录末端修饰以及基因转录和转译的应用
4.基因表达：基因表达技术的基本原理、转录组研究方法以及应用
二、制药技术
1.生物技术制药：生物技术制药的优势、研发流程以及生物技术制药的应用
2.双孢制药：双孢药物的原理、双孢药物的药动学以及双孢药物的应用
3.化学合成制药：化学合成制药的优势、合成流程以及化学合成制药的应用
4.生物制药：生物制药的优势、研发流程以及生物制药的应用
三、制药公司
1.实验室：实验室设备、实验室运行方式以及实验室的重要性
2.生物制造：生物制造原理、生物制造过程以及应用
3.GMP质量控制：GMP质量控制的基本原则、GMP系统的运行原理以及GMP的应用
四、再生医学
1.再生植入物：再生植入物的分类、再生植入物的研发过程以及再生植入物的应用
2.细胞培养：细胞培养技术的基本原理、细胞培养的研究方法以及细胞培养的应用
3.细胞治疗：细胞治疗的优势、细胞治疗的产品开发过程以及细胞治疗的应用
五、细胞分子生物学。
生物制药技术复习提纲第一章绪论1.生物技术涵盖的技术范畴：基因工程、细胞工程、酶工程、发酵工程、生化工程、蛋白质工程、抗体工程等。
2.生物制品：指以微生物、寄生虫、动物毒素、生物组织为起始材料，采用生物学工艺或分离纯化技术制备，并以生物学技术和分析技术控制中间产物和成品质量制成的生物活性制剂。
3.生物制品的分类：预防用~（疫苗、菌苗和类毒素）；治疗用~（抗血清与抗毒素、血液制品、细胞因子和抗体）；诊断用~（细菌学试剂、免疫试剂和临床化学试剂）。
4.生物技术制药：采用现代生物技术,借助某些微生物、植物、动物生产医药品。
5.生物技术药物的分类（1）按药物化学本质和特性：①aa及其衍生物类药物；②多肽及pro类药物；③酶与辅酶类药物；④核酸及其降解物和衍生物类药物；⑤糖类药物；⑥脂类药物；⑦vit与辅酶（2）按原料来源分类：①人组织来源的药物；②动物组织~；③植物组织~；④微生物~；⑤海洋生物~ （3）按功能用途分类：①治疗药物；②预防药物；③诊断药物；④其他用途6.生物技术药物的特性（1）药理学特性①治疗的针对性强，疗效高生理生化机制合理，疗效可靠（细胞色素C：治疗缺氧性疾病）②药理活性高（ATP直接供能，效果确切、显著）③毒副作用小，营养价值高（生物药物主要有:蛋白质、核酸、糖类、脂类）④生理副作用常有发生（免疫反应、过敏反应）（2）原料的生物学特性①原料中有效成分含量低，杂质多；②原料的多样性；③原料的易腐蚀性（3）在生产制备中特殊性①提取纯化工艺复杂；②稳定性差；③易变质腐败；④注射用药的特殊要求（4）检验的特殊性①理化性质指标；②生物活性指标；③安全性指标7.蛋白质类药物的分离纯化方法（1）沉淀法（2）按分子大小分离方法①超滤法；②透析法（膜分离法）；③凝胶过滤法；④超速离心法（3）按分子所带电荷进行分离的方法①离子交换层析法；②电泳法；③等电聚焦（4）亲和层析法8.核酸类药物的分离纯化方法（1）提取法：先提取核酸与蛋白质复合物,再解离核酸与蛋白质,然后分离RNA与DNA。
复习重点(2011-9)基本概念1．Biotechnology以现代生命科学为基础，结合先进的工程技术手段和其他基础学科的科学原理，按照预先的设计改造生物体或加工生物原料，为人类生产出所需产品或达到某种目的2．Fermentation Engineering 微生物工程是利用微生物制造工业原料与工业产品并提供服务的技术.其特点: 发酵工程是以某种特定的产物为工艺的目标,这就要求微生物细胞既能正常生长又能过量积累目的产物3．Enzyme Engineering是酶学和工程学相互渗透结合发展而形成一门新的技术学科。
它是从应用的目的出发研究酶、应用酶的特异性催化功能，并通过工程化将相应原料转化成有用物质的技术。
4. Gene Engineering 是将重组对象的目的基因插入载体，拼接后转入新的宿主细胞，构建成工程菌(或细胞），实现遗传物质的重新组合，并使目的基因在工程菌内进行复制和表达的技术。
5．蛋白质工程以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质。
6.抗体工程利用单克隆抗体技术和基因工程技术进行天然抗体的生产和抗体改造以及研制新型抗体.7．Metabolic engineering 利用多基因重组技术有目的的对细胞代谢途径进行修饰、改造，改变细胞特性，并与细胞基因调控、代谢调控及生化工程相结合，为实现构建新的代谢途径，生产特定目的产物而发展起来的一个新的学科领域。
8．biopharmaceutics是指运用生物学、医学、生物化学等的研究成果，从生物体、生物组织、细胞、体液等中，综合利用物理学、化学、生物化学、生物技术和药学等学科的原理和方法制造的一类用于预防、治疗和诊断的制品9．基因工程药物是指以DNA重组技术生产的蛋白质、多肽、酶、激素、疫苗、单克隆抗体和细胞生长因子类药物。
10．Gene DNA分子中含有特定遗传信息的一段核苷酸序列,是遗传物质的最小功能单位。
11．Cell 细胞是一切生物体进行生命活动的基本结构和功能单位.细胞是有膜包围的能独立进行繁殖的原生质。
12．Culture medium是人工配制的适合于不同细胞生长繁殖或积累代谢产物的营养基质.其主要成份碳源、氮源、无机盐、生长因子、前体和水等几大类. 13．hybridoma技术：将含有特异免疫信息的淋巴细胞与具有无限增殖的肿瘤细胞在诱导剂作用下使其融合,产生一个具有特异活性细胞及其产物技术.14. monoclonal antibody由一个克隆产生只针对一种抗原决定簇的结构与功能完全相同的抗体.15.Chimeric Antibodies将人抗体的恒定区(C区)替代鼠源单抗的可变区(C区)而得到的抗体16．immobilized enzyme固定化酶是指限制或固定于特定空间位置的酶，具体来说，是指经物理或化学方法处理，使酶变成不易随水流失即运动受到限制，而又能发挥催化作用的酶制剂。
17．Biosensor s由生物识别物质(酶,微生物动植物组织抗体等)与换能器组成的分析系统,其基于酶(细胞)固定化技术18．transgenic animal采用基因工程技术把外源基因导入动物生殖细胞、胚胎干细胞和早期胚胎,并在受体动物染色体上稳定整合,又经过各种发育途径能把外源基因稳定传给子代的这种动物19.gene knockout 用基因打靶技术定点灭活一个内源基因。
20．RNA interference（RNAi）是指对应于某种Mrna的正义RNA和反义RNA组成的双链RNA（ds RNA）分子使mRNA发生特异性降解，导致其不能表达的转录后基因沉默现象21．酶联免疫法（ELISA）以酶代替放射同位素对抗原或抗体进行标记，使酶与抗原抗体共价连接，称之为酶联免疫吸附法。
22基因治疗是指将正常的外基因导入生物体的靶细胞内，以弥补或纠正基因缺陷或异常表达，从而达到治疗目的。
23.原代培养：从机体取出后立即培养的细胞为原代细胞。
培养的第1代细胞与传10代以内的细胞称为原代细胞培养。
24传代培养：将原代细胞从培养瓶中取出，配制成细胞悬浮液，分装到两个或两个以上的培养瓶中继续培养，称为传代培养25细胞株：原代细胞一般传至10代左右细胞生长停滞，大部分细胞衰老死亡，少数细胞存活到40~50代，这种传代细胞为细胞株。
26细胞系：细胞株传代至50代后又出现细胞生长停滞状态，只有部分细胞由于遗传物质的改变，使其在培养条件下可以无限制传代，这种传代细胞为细胞系。
27细胞株和细胞系的区别：细胞系的遗传物质改变，具有癌细胞的特点，失去接触抑制，容易传代培养。
28生物芯片29 次级代谢产物，初级代谢产物30 。
基本方法：1.生物大分子的分离纯化主要方法超滤和凝胶过滤、离子交换法、电泳和等电聚焦法，等电点沉淀法和有机溶媒分级沉淀法、亲和色谱法等2.生物制药基本方法有提取法发酵法化学合成法组织培养法现代生物技术方法3.测定蛋白质类药物分子量方法超速离心、凝胶色谱法、SDS_PAGE 生物质谱法等4.酶和细胞固定化方法有载体偶联法、交联法、包埋法、新型固定法。
5.常用的菌种保藏方法①斜面低温保藏法②石蜡油封存法③砂土管保藏法④麸皮保藏法⑤甘油悬液保藏法⑥冷冻真空干燥保藏法⑦液氮超低温保藏法⑧宿主保藏法等6.基因工程操作中获得目的基因的方法逆转录法、化学合成法、PCR等7.基因诊断主要技术包括基因探针技术、PCR技术、单抗试剂等。
8.发酵工程制药中微生物发酵方式固体发酵、液体发酵9.。
基本过程：1．基因工程制药的基本流程获得目的基因、组建重组质粒、构建工程菌（或细胞）、培养工程菌、产物分离纯化、除菌过滤、半成品检定、成品检定、包装。
2．发酵的基本过程菌种、种子制备、发酵、发酵液处理、提取精制。
3．单抗制备的基本流程抗原的制备、动物的免疫、抗体产生细胞与骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞、杂交瘤细胞的选择性培养、筛选能产生某一特异抗体的阳性克隆和克隆化、体外培养(动物腹腔接种培养)、大量制备单克隆抗体。
4．动物细胞培养的基本过程：取动物器官、和组织、剪碎组织、胰蛋白酶处理、单个细胞、细胞培养。
5．生物制药的基本过程1.原料的选择、预处理和保存2.原料的粉碎3.提取4.分离纯化5.浓缩6.结晶7 .干燥6．PCR三个基本步骤变性--退火--延伸7. 基因治疗基本步骤。
基本原理、组成、分类和特点1.单抗制备的基本原理制备单克隆抗体通过B淋巴细胞杂交瘤技术把能产生单一抗体的淋巴细胞与有增殖能力的骨髓瘤细胞进行融合形成杂交瘤细胞，通过有限稀释法及克隆化使杂交瘤细胞成为纯一的单克隆细胞系而产生的只针对一个抗原决定簇、结构和特异性完全相同的高纯度抗体2．植物细胞培养技术的理论基础植物细胞的全能性。
3现代生物药物类型基因药物, 重组药物，天然药物，合成、半合成药物。
4．现代生物技术主要组成基因工程、细胞工程、酶工程、发酵工程。
5．现代生物技术特点: 高效益、高智力、高投入、高竞争、高风险、高势能。
6．生物药物来源主要有两大类①以天然生物材料为主,②有目的的人工制备生物原料。
7 基因工程抗体的类型有嵌合抗体、改型抗体、小分子抗体、多功能化抗体。
8. 生物药物特点化学结构和组成比较复杂；相对分子量较大，一般不易化学合成；药理作用针对性强，不良反应小；疗效确切，营养价值高；有的生物原料和生物药物不能代替.9.固定化酶的特点具有生物催化剂的功能，又有固相催化剂的功能。
①可多次使用②反应后，酶底物产物易分开，产物中无残留酶，易纯化，产品质量高。
③反应条件易控制。
④酶的利用效率高。
⑤比水溶性酶更适合于多酶反应10固定化细胞的特点有细胞特性，生物催化剂功能，固相催化剂特点。
优点：①无须进行酶的分离纯化②保持酶的原始状态，酶回收率高③比固定化酶稳定性高④细胞内酶附助因子可再生⑤细胞本身含多酶体系⑥抗污染能力强11.影响大肠杆菌中外源蛋白表达的主要因素①外源基因密码子的使用,②mRNA结构,③表达载体的构建,④培养条件如何实现高表达…12发酵工程制药特点是以某种特定的产物为工艺的目标,这就要求微生物细胞既能正常生长又能过量积累目的产物。
13．生物制药的特点（特殊性）1.生物原料组成成分非常复杂2.有效成分含量低3.易变性及被破坏4.分离制备过程影响因素多相对“均一性”13．发酵过程影响因素：温度、pH、溶解氧、菌体浓度、泡沫、营养浓度。
如何控制…14．微生物发酵生产药物主要种类抗生素类;氨基酸类;核苷酸类维生素类;甾体类激素;治疗酶及酶抑制剂等。
15．细胞的特征：在结构上具有自我装配的能力, 在生理活动中具有自我调节的能力, 在增殖上自我复制的能力。
16．生物技术在药学研究中两种基本作用方式1作为生产工具----生物技术药物2.作为研究手段----合理药物设计17．单抗优点和局限性优点单克隆抗体的特性高度特异性高度的均一性和可重复性高度专一性：大量产生及稳定性：局限性：固有的亲和性和局限的生物活性限制了它的应用范围反应强度不如多克隆抗体、制备技术复杂、费时费工、价格较高18生产用动物细胞类型贴壁依赖性细胞、非贴壁依赖性细胞、兼性贴壁细胞19．动物细胞培养特点无细胞壁,抗机械强度低,对剪切力敏感,适应环境差；倍增时间长,生长缓慢,易污染,培养市必须加抗生素；培养过程需氧量少,有的需要一定CO2；培养过程中细胞相互粘连以集群形式存在20．基因工程药物制备全程质量控制理念包括一、原材料的质量控制(1. 目的基因2. 表达载体3.宿主细胞),二、培养过程的质量控制( 1.生产用细胞库 2.培养过程)三、纯化工艺中的质量控制;四.目标产品的质量控制21.选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞培养材料的原理（目的）这些组织或器官上的细胞生命力旺盛，分裂能力强22．基因治疗的必要条件1发病机制在DNA水平上已经清楚2要转移的基因已经克隆分离，其表达产物有详尽的了解3该基因正常表达的组织可在体外进行遗传操作23．PCR原理是体外酶促合成特异DNA片段的方法反应特点1.特异性强 2.灵敏度高3.简便、快速。
确保PCR获得目的基因序列正确应注意:1.使用高保真的DNA聚合酶,和相对保守的PCR扩增条件.2.凡经PCR扩真制备的目的基因片段,克隆后必须要测序.24基因工程产品的质量控制内容：产品的鉴别、纯度、活性、安全性、稳定性、一致性。
利用多学科的技术生物化学、免疫学、微生物学、细胞生物学和分子生物学……..25.基因工程药物包含上游下游过程上游技术主要是分离目的基因、构建工程菌(细胞)。
主要技术涉及1、基因克隆载体:质粒载体，2、重组DNA技术的有关工具酶及其应用3、核酸制备技术；下游阶段：从工程菌的大量培养一直到产品的分离纯化和质量控制。
