低离子聚凝胺技术在临床输血检验中的应用

国际检验医学杂志２０１３年１１月第３４卷第２２期　Ｉｎｔ　Ｊ　Ｌａｂ　Ｍｅｄ，Ｎｏｖｅｍｂｅｒ　２０１３，Ｖｏ１．３４，Ｎｏ．２２　

・检验仪器与试剂评价・　

低离子强度溶液在输血相关检验中的应用研究　

周守容，邓安彦△，昊春磊，穆万洋，刘　敏，邓小倩　

（四川省南充市中心医院＿／Ｊ１ｌ北医学院第二临床医学院，四川南充６３７０００）　・　３Ｏ６３・　

摘　要：目的　探索低离子强度溶液（ＬＩＳＳ）在输血相关检验中的最佳应用方式。方法　选择人源的抗Ｄ血清进行标化，与　

Ｄ抗原阳性的筛选细胞分别进行聚凝胺试验、间接抗人球蛋白试验和微柱凝胶试验，根据最佳实验结果来确定ＬＩＳＳ液在不同的　

实验环境下的最佳使用方式。结果　该人源抗Ｄ血清用ＡＢ型血浆进行１：１６稀释后对后续的实验研究最佳；ＬＩＳＳ液在聚凝胺　

实验中的加入量至少应为５滴，才能取得最佳效果；在间接抗人球蛋白试验中加入２滴ＬＩＳＳ后反应速度明显加快，加入２滴　

ＬＩＳＳ液后温浴１０　ｍｉｎ的致敏效果和未加Ｉ　ＩＳＳ液温浴６０　ｒａｉｎ的致敏效果相当；在微柱凝胶试验中，与用生理盐水配制的红细胞　

悬液相比，用ＬＩＳＳ配制的红细胞悬液的实验结果稍强，但二者均弱于用生理盐水配制的红细胞悬液与抗Ｄ反应的基础上再追加　

１滴ＬＩＳＳ的反应模式。结论ＬＩＳＳ液可以加快红细胞抗原与抗体结合的速度，缩短了实验时间，提高输血相关实验的检测效率。　

关键词：低离子强度溶液；　聚凝胺试验；　抗人球蛋白试验；　微柱凝胶试验　

ＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１　６７３—４ｌ３０．２０１　３．２２．０５８　文献标识码：Ａ　文章编号：１６７３—４１３０（２Ｏ１３）２２—３０６３—０２　

低离子强度溶液（Ｉ　ＩＳＳ）于１９７６年首次被应用于红细胞抗　体筛检中＿１］，由于Ｉ　ＩＳＳ可以加速抗原抗体结合速率，具有重要　

的临床应用推广价值，但国内有关ＬＩＳＳ液在临床输血相关实　

验中的具体应用实践性报道并不多见，为了让Ｉ　ＩＳＳ在临床输　

主垦匡堂垄查　生！旦笙　堂笪！塑　ｉ　Ｍｅｄ　Ｊ，Ｓ　ｐ．２００２，ｖ。１　２４，Ｎ。．９　

文章编号：１００１—５９４９（２００２）０９—０５４９—０２　・实验研究・　

聚凝胺法在交叉配血中的应用　

赵舒斌，李淑霞　

【摘要］　目的　为了给安全输血提供有力的保证，采用聚凝胺法，该方法不论在交叉配血以及血型鉴定方面　

均有灵敏、快速、简便的优点。方法　病人血清加献血员血球加低离子强度介质加聚凝胺混匀，离心，发生凝集，再　

加入再悬液血球，立即分散为配合合适。结果５８００例的聚凝胺法与盐水法对比试验，结果聚凝胺交叉法检出１　

例有自身抗体，而盐水法未检出，在血型鉴定中聚凝胺法检出２例Ｒｈ阴性，盐水法未检出。结论聚凝胺法优于　

盐水法，是值得依赖的方法。　

［关键词］　聚凝胺；交叉配血；立型簦定　

［中图分类号］Ｒ４４６．６２　［文献标识码］Ｂ　

我国目前的输血技术大多数医院血库一直使用　

室温盐水配血法．由于盐水配血引起急、慢性溶血性　

输血反应时有发生，有的虽然不发生急性反应，但影　

响输血效果。手工聚凝胺技术是一种快速检测完全　

抗体、不完全抗体的方法，具有灵敏度高、操作简单　

快速等优点【１】。长期以来，临床配血作业一直沿用　

盐水法。这种方法只能检测出不配合的ＩｇＭ抗体，　

但不能检出不配合的ＩｇＧ抗体。ＩｇＧ抗体的检测方　

法，通常是需在胶体介质、酶介质或抗人球蛋白介　

质。但以上方法不能满足临床配血工作量大、时间　

紧迫的需要。手工聚凝胺试验技术具有快速检出　

ＩｇＧ抗体的能力，适合输血前的检查。近年来，我院　

在输血中应用此技术收到较好效果，现报告如下。　

１聚凝胺技术的基本原理　

低离子介质可以促进红细胞和相应抗体反应，　

在加入聚凝胺后，带正电荷的聚凝胺可以中和红细　

胞表面的负电荷，促进红细胞之间相互接近，引起红　

细胞之间非特异性凝集。在加入再悬液后，如果是　

由特异性抗原抗体反应引起的凝集，红细胞凝集不　

会散开，而非特异性凝集，则会被再悬液中和而散　

・４１８・　实用医技杂志２０１３年４月第２０卷第４期Ｊｏｕｍａｌ　ｏｆＰｒａｃｔｉｃａｌ　Ｍｅｄｉｃａ１　Ｔｅｃｈｎｉｃｍｅｓ，ＡＤｆｉｌ　２０１３，Ｖ０１．２０，Ｎｏ．４　

凝聚胺法和微柱凝胶抗人球蛋白法　

在配血中的应用比较　

冀中能源邢台矿业集团有限责任公司总医ｂ￣（０５４０００）　闫有敏　

在临床抢救患者的过程中，输血可迅速补充血容量，纠　

正休克，增强机体供氧能力，对挽救患者的生命具有着重要　

的意义。为寻求高灵敏度配血方法，我科对本院３９６例有过　

输血史或妊娠史的标本同时采用凝聚胺法和微柱凝胶抗人　

球蛋白法进行试验比较、探讨，最终微柱凝胶抗人球蛋白法　

因操作简单、敏感性好、准确度高、可标准化等优点，被选为　

我科的常规配血方法，而凝聚胺法因配血迅速的优点被选为　

急诊配血方法。　

１资料与方法　

１．１仪器与试剂　

微柱凝胶抗人球蛋白检测卡由长春博德生物有限公司　

生产；凝聚胺试剂由中山市生科试剂仪器有限公司生产；免　

疫微柱孵育器由长春博研科学仪器有限公司生产；ＴＤ一３Ａ型　

血型血清学离心机由长春博研科学仪器有限公司生产。　

１．２一般资料　

从我院２０１０年９月至２０１１年３月住院的１　１３９份输血　

前标本中挑选３９６份有输血史、妊娠史的标本，其中男性３１０　

例，女性８６例，年龄１７～８１岁。　

１．３标本　

取乙二胺四乙酸二钾（ＥＤＴＡ．Ｋ２）抗凝血５　ｍＬ。　

１．４方法　３９６份标本分别用聚凝胺法和微柱凝胶抗人球蛋白法进　

行交叉配血试验。　１．４．１凝聚胺法：取试管分别标记好主侧和次侧，主侧分别　

加入患者血清２滴，２％　５％的献血者红细胞１滴，次侧分别　加入献血者血清２滴，２％～５％的患者红细胞１滴。每管加入　

低离子介质０．８　ｍＬ，混匀，室温静置１　ｍｉｎ，再向各管中加入　

凝聚胺试剂２滴，混匀，静置１５　ｓ，以３　０００　ｒ／ｍｉｎ离心１５　ｓ后　弃去上清液，大约留０．２　ｍＬ，扣摇，肉眼可见明显的凝集，然　

・１６８・　西南国防医药２０１２年２月第２２卷第２期　不规则血型抗体筛查在临床输血中的应用　陈大庆，侍全，卜艳波，任家奇，郑维　

［摘要］　目的探讨临床输血患者中不规则血型抗体的构成情况，为保障临床输血安全提供参考依据。方法　对我部　体系部队医院输注红细胞制品的３２６４例患者血清样本进行不规则血型抗体检测，用涵盖常见人类红细胞血型抗原的红细胞　对不规则抗体进行筛查，并通过盐水介质试验和和聚凝胺试验对不规则抗体性质进行初筛。结果通过盐水介质试验和聚　凝胺试验，共检出含不规则血型抗体的血清样本５６例。结论我部体系部队医院目前所采用的不规则血型抗体筛查方法可　有效检出常见的不规则血型抗体，并进一步明确抗体的性质，最大程度避免输血并发症的发生。　［关键词］不规则血型抗体；筛查；输血　中图分类号Ｒ　４５７．１１　文献标识码Ａ　文章编号１００４—０１８８（２０１２）０２・０１６８－０３　ｄ０ｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００４・０１８８．２０１２．０２．０２２　溶血反应是临床输血中最严重的并发症，产生　溶血反应的原因有很多，在同型输血和配合性输血　的情况下，由受血者体内产生的不规则抗体与红细　胞上相应的血型抗原结合是导致溶血反应的一种较　常见原因。近年来，不规则血型抗体的筛查越来越　多地应用于临床输血，尤其是孕妇、多次输血患者、　自身免疫性疾病患者、肿瘤、严重消耗性疾病患者等　不规则血型抗体的高危携带者，应作为重点筛查对　象，保障输血的安全性和有效性。我部体系部队医　院自２００９年ｌ２月一２０１１年５月在临床输血中开展　不规则血型抗体筛查，共对输注红细胞制品的３２６４　例患者血清样本进行了不规则抗体的筛查，检测出　体内携带有不规则血型抗体的患者５６例，有效预防　了输血并发症的发生。　１资料与方法　１．１一般资料３２６４例患者均符合临床输血适应　证，其中男１７２３例，女１５４１例，年龄１　ｄ～８２岁。　其中失血性休克者２４２５例，慢性贫血者６２７例，严　重感染者１０７例，有凝血功能障碍者１０５例；合并有　妊娠者２８６例，合并自身免疫性疾病者１２５例，有肿　瘤、严重消耗性疾病者４２３例。所有患者均输红细　胞制品，其中输全血者２１２９例，输浓缩红细胞者　７２３例，输洗涤红细胞者３２５例，余８７例输去白细　胞红细胞。单次输血量在２００～２６００　ｍｌ，输血２次　以上者９２８例。　１．２方法所有待检血样均取自静脉采血，促凝管　抽血５　ｍｌ，常温下静置３０　ｒａｉｎ，待其完全凝固后，低　速离心２　ｍｉｎ，将血清完全分离出来（有纤维蛋白者　需剔除干净）。取上海血液生物医药有限责任公司　生产红细胞试剂（产品批号：２００９１０１２）３份，为ＡＢＯ　血型系统“０”型红细胞，表面不含Ａ、Ｂ抗原。此筛　选红细胞涵盖了常见的人类红细胞血型系统抗原，　例如Ｒｈ血型系统抗原、ＭＮ血型系统抗原、Ｌｅｗｉｓ血　型系统抗原、Ｄｕｆｆｙ血型系统抗原等，共计２０余种。　每份红细胞均涵盖不同类型的红细胞抗原亚型，３　份红细胞上涵盖的抗原成分见表１。　１．２．１盐水介质试验取３支硬质小玻璃试管，分　别标记“１号”、“２号”、“３号”。向各试管中滴加待　检患者血清３滴，加入１、２、３号筛选红细胞２滴；混　匀后以３４００　ｒ／ｒａｉｎ离心１５　ｓ，观察结果：若有凝集反　应，则标记为阳性反应；未出现凝集反应，则标记为　阴性反应。在盐水介质试验中，３管中有≥１管为阳　性，则抗体筛选试验为阳性，说明待检血清中存在着　体积较大的ＩｇＭ类抗体；若３管均为阴性，则表明盐　水介质抗体筛选试验阴性。为查明待检血清中是否　含有体积更小的ＩｇＧ类抗体，还应进一步做聚凝胺　介质试验。　表１　３份红细胞试剂上涵盖的抗原成分