实验六 VC含量测定
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果蔬中维生素C的测定
维生素C(抗坏血酸)是一种重要的水溶性维生素,可以在多种果蔬中找到。以下是一种常见的方法来测定果蔬中的维生素C含量:
1. 准备样品:将所需的果蔬样品洗净,去除外皮、种子和纤维,然后将其切碎成小块。
2. 提取维生素C:将切碎的果蔬样品加入足够的去离子水中,使用搅拌器将其搅拌均匀。然后使用滤纸或离心机将提取液分离出来。
3. 准备标准曲线:制备一系列已知浓度的维生素C标准溶液,可以使用市售的维生素C标准品。标准溶液的浓度应该涵盖预期测定样品中的维生素C范围。
4. 进行反应:将提取液和维生素C标准溶液分别加入试剂中,常见的试剂是重铬酸钾溶液。经过一段时间的反应,产生颜色变化。
5. 反应色彩测定:使用分光光度计或相关仪器,对样品和标准溶液中的颜色进行测定。维生素C的浓度与测定的吸光度或测得的颜色深浅有关。
6. 计算维生素C含量:使用标准曲线得出的吸光度与维生素C标准溶液的浓度的关系,计算样品中的维生素C含量。
维生素C注射液含量测定
维生素C,也称为抗坏血酸,是一种重要的水溶性维生素,对人体的生长和发育、维护结缔组织、治疗感染、促进铁吸收、增强免疫力等方面都具有重要作用。维生素C是人体所必需的,但人体无法自己合成,必须从外部获得。维生素C主要存在于新鲜的蔬菜、水果和肉类中。为了满足人体对维生素C的需求,维生素C注射液被广泛应用于医疗领域。然而,由于注射液的生产过程中,可能会出现维生素C含量偏低等问题,因此对维生素C注射液的含量进行测定,是确保维生素C注射液质量的重要措施。
一、实验目的
1. 学习对维生素C含量的测定方法;
2. 掌握分光光度法测定维生素C的原理和操作技术;
3. 熟悉实验中的注意事项和操作方法。
二、实验原理
分光光度法是测定维生素C含量的一种常用方法。其基本原理是:维生素C有特征性吸收波长,可以在紫外-可见光谱仪上测定,得到图谱后,根据标准曲线计算维生素C的含量。
三、实验仪器和试剂
仪器:紫外-可见光谱仪;
试剂:含0.1% H3PO4的维生素C标准溶液、未知浓度的维生素C注射液。
四、实验步骤
1. 准备工作
① 维生素C标准曲线的制备
取维生素C标准溶液1mL,加入10mL比色管中,加入0.1%的磷酸溶液和适量的双氧水,用0.1mol/L NaOH溶液调节pH值为3.0,加适量去离子水至刻度即可。
将所选维生素C注射液10mL加入容量瓶中,加入0.1% H3PO4溶液,用去离子水定容至10mL;
2. 测定实验
① 范围测试 设置紫外-可见光谱仪的波长范围为200~400nm,用去离子水校准基线,并检查荧光灯是否正确打开。
② 确定波长
在紫外-可见光谱仪上选择波长为265nm,记录基线的吸光度值。
将处理好的维生素C注射液1000μL加入试验药液中,稳定立即记录吸光度值。
1 实验十:果蔬中维生素C的测定(2,6—二氯靛酚滴定法)
教学目的要求
基本知识点
1、 了解从果蔬中提取Ve的方法。
2、 掌握2,6—二氯靛酚滴定法测定果蔬中VC的原理、基本过程和操作关键。
3、 熟练采样、样品处理、称量、过滤、定容、滴定等基本操技术。
4、 掌数据处理和结果计算技术。
重占
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2,6—二氯靛酚滴定法测定果蔬中Vc的基本过程和操作关键。
难点
2, 6—二氯靛酚滴定法测定果蔬中Vc的原理
课时教学方案:
复习与提问: 2 1、 2,6—二氯靛酚滴定法测定果蔬中VC的原理。
2、 2,6—二氯靛酚滴定法测定果蔬中Vc的基本过程和操作关键。
3、 检查学生实验准备情况。
【引入新课】
Ve在人体内的主要功能是:参加体内的氧化还原过程,促进人体的生长发育,增强人体对疾病的抵抗能力,促进细胞间质中胶原的形成,维持牙齿、骨骼、血管和肌肉的正常功能,增强肝脏的解毒能力。当人体中缺少VC时,就会出现牙龈出血、牙齿松动、骨骼脆弱、粘膜及皮下易出血、伤口不易愈合等症状。近年来,科学家们还发现,VC能阻止亚硝酸盐和仲胺在胃内结合成致癌物质一亚脱胺,从而减低癌的发病率。
据测定,成年男子每天约需VC65mg,成年女子每天约需VC60mgo
VC广泛存在于植物组织中,新鲜的水果、蔬菜,特别是獄猴桃、鲜枣、草莓、枇杷、橙、橘、柿子等含有丰富的%。以IOOg水果的VC的含量来计算,獄猴桃含420nιg,鲜枣含380mg,草莓含8Omg,橙含49mg,枇杷含36mg,橘含30mg,柿子含3Omg0但葡萄、无花果、苹果各自只有5nιg,香蕉、桃子各含IOmg,梨子仅含3 4mg。
实验十:果蔬中维生素C的测定
—2,6—二氯靛酚滴定法
维生素C是人类营养中最重要的维生素之一,缺少它时会产生坏血病,因此又称为抗坏血酸(ascorbicacid)。化学名称为:L-3-氧代苏己糖醛酸内酯【英文名:ASCOrbiCACid(INN)],分子式为C6H8O6,相对分子质量:176.13o4 自然界存在两种形式的维生索C:抗坏血酸(还原型VC)和脱氢抗坏血酸(氧化型DHVC),抗坏血酸易氧化成脱氢抗坏血酸,脱氮抗坏血酸又易还原成抗坏血酸。,脱氢抗坏血酸水解后生成二酮古乐糖酸,失去抗坏血酸的生理活性。
百度文库
1 姓名:郭沈杰 年级专业:2012级生物科学 同组者:蔡萍萍
学号:12050011012
实验六 维生素C的定量测定(2,6-二氯酚靛酚滴定法)
一、实验目的
掌握2,6-二氯酚靛酚法测定维生素C的原理和方法。
二、实验原理
维生素C又称抗坏血酸(ascorbic acid)。在1928年,从牛的肾上腺皮质中提取出的结晶物质,证明对治疗和预防坏血病有特殊功效,因此称为抗坏血酸。
还原型抗坏血酸能还原染料2,6-二氯酚靛酚钠盐。本身则氧化成脱氢抗坏血酸。在酸性溶液中,2,6-二氯酚靛酚呈红色,被还原后变为无色。
因此可用2,6-二氯酚靛酚滴定样品中的还原型抗坏血酸。当抗坏血酸全部被氧化后,稍多加一些染料,使滴定液呈淡红色,即为终点。若无其它杂质干扰,样品提取液所还原的标准染料量与样品中所含的还原型抗坏血酸量呈正比。
三、实验仪器
1、新鲜水果
2、电子分析天平
3、吸管
4、容量瓶 百度文库
2 5、滴定装置
6、锥形瓶
7、研钵
8、漏斗
四、实验试剂
1、2%草酸溶液:草酸2g,溶于100ml蒸馏水。
2、1%草酸溶液:草酸1g,溶于100ml蒸馏水。
3、标准维生素C液:准确称取10.0mg维生素C,溶于1%草酸溶液,并稀释至100ml,贮于棕色瓶中,冷藏,最好临用时配制。此溶液浓度0.1mg/ml.
4、0.1%2,6-二氯酚靛酚溶液:称取500mg2,6-二氯靛酚溶于300ml含有104mg碳酸氢钠的热水中,冷却,加蒸馏水并稀释至500ml,滤去不溶物,贮于棕色瓶中,冷藏。每次临用时,以标准抗坏血酸液标定。
五、实验步骤
(一)样品中抗坏血酸的提取:
1、将水果用水洗干净,用滤纸吸取表面水分。
2、称取5.0g,加2%草酸试剂10ml置研钵中研成浆状。
3、称取浆状物5.0g,倒入50ml容量瓶中,用2%草酸溶液稀释并定容,混匀,静止10分钟,过滤(最初数毫升滤液弃去),滤液备用。