广东医学２０１５年９月第３６卷第１７期 Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ Ｍｅｄｉｃａｌ ＪｏｕｒｎＭ Ｓｅｐ．２０１５，Ｖｏ１．３６，Ｎｏ．１７ ・２６８９・
的影响［Ｊ］．广东医学，２０１４，３５（３）：４７４—４７６． ［１７］李雪迎，王春明．牵引力对颈椎间盘作用的三维有限元分析 ［１５］宁飞鹏，林定坤，陈博来，等．伴退变ｌ生脊髓压迫的神经根型颈椎 病治疗探讨［Ｊ］．中国中医骨伤科杂志，２０１１，１９（４）：１２—１３． ［１６］刘世文，宋洪臣，赵国库．不同牵引方向对颈椎间盘突出症形 态结构影响的ＭＲＩ影像学分析［Ｊ］．中国运动医学杂志， ２００１，２０（１）：４６—４９． ［Ｊ］．中华物理医学与康复杂志，２００３，２５（１０）：６０３—６０５． ［１８］ＷＯＮＧ Ａ Ｍ，ＬＥＯＮＧ Ｃ Ｐ，ＣＨＥＮ Ｃ Ｍ．Ｔｈｅ ｔｒａｃｔｉｏｎ ａｎｇｌｅ ａｎｄ ｃｅｒｖｉｃａｌ ｉｎｔｅｒｖｅｒｔｅｂｒａｌ ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｓｐｉｎｅ（Ｐｈｉｌａ Ｐａ １９７６）， １９９２，１７（２）：１３６—１３８． （收稿日期：２０１５—０ｌ一１８编辑：陈嘉伟）
酶联免疫荧光法与双抗夹心酶联免疫吸附法
测定屋尘螨组分ＩｇＧ４的比较木
彭洁雅，孙宝清 ，郑佩燕
广州医科大学附属第一医院、广州呼吸疾病研究所、呼吸疾病国家重点实验室免疫实验组（广州５１０１２０）
【摘要】 目的运用酶联免疫荧光法（ＵｎｉＣＡＰ法）和双抗夹心酶联免疫吸附法（Ｆｏｏｋｅ法）分别测定经特异 性免疫治疗（ＳＩＴ）的患儿血清ｓｌｇＧ４水平，评价两种免疫定量检测方法的相互关系。方法对４５例成功进行皮下 ＳＩＴ的患儿血清分别用ＵｎｉＣＡＰ法和Ｆｏｏｋｅ法检测治疗前、治疗６—８个月后、治疗１２～１４个月后ｓｌｇＧ４水平。 结果 与治疗前相比较，在治疗６～８个月和治疗１２—１４个月后，ＵｎｉＣＡＰ法检测４５例患儿血清ｓｌｇＧ４水平全部均 有不同程度升高，Ｆｏｏｋｅ法在ＳＩＴ后６～８个月和１２～１４个月后分别有４０和４３例患儿ｓｌｇＧ４水平有不同程度升 高，但两种方法检测ｓＩｇＧ４结果升高幅度有差异。结论对于ｓＩｇＧ４测定，ＳＩＴ后，ＵｎｉＣＡＰ法比Ｆｏｏｋｅ法测定值升 高的幅度更明显。 【关键词】 ｓｌｇＧ４；酶联免疫荧光法；双抗夹心酶联免疫吸附法
酶联免疫吸附法检测梅毒抗体假阳性产生的原因
梅毒是苍白螺旋体引起的危害人类健康较为严重的一种性传播性疾病之一，近年来在我国的发病率呈逐年上升的趋势，对梅毒作出快速、准确的诊断是非常重要的。目前临床上梅毒的诊断主要是根据临床症状和血清学检查，酶联免疫吸附法(ELISA)对IgG、IgM都有很好的检测能力［1］，因其灵敏度高、价格低廉、操作方便、结果客观在国内广泛使用。但在工作中遇到的最大问题是出现假阳性的问题，而大多数是由于弱阳性反应引起的，这给医疗工作带来麻烦，甚至引起医疗纠纷。为避免假阳性结果的出现，现将产生假阳性的原因作以总结，供同仁参考。
1 机体的内在因素
1.1 年龄因素 有些老年人梅毒检测结果阳性，而无临床症状，也无发病史和疾病接触史［2］。ELISA试剂盒主要是选自梅毒螺旋体外膜的脂蛋白47 KD、17 KD、15 KD为分子抗原，用基因重组表达和BOC氨基固相法得到多肽抗原，为使小分子多肽有较好的吸附性，再用人血清白蛋白与之连接，而且合成后的多肽一般不做提纯，直接作为试剂抗原使用。由于抗原不纯和使用了人血清白蛋白，增加了意外假阳性抗原位点的可能。老年人容易出现免疫功能的异常，易产生一些针对连接用的白蛋白的抗体或一些异常蛋白质而干扰了检测的结果出现假阳性。
1.2 疾病因素 有些疾病如其他螺旋体感染、淋巴肉瘤、糖尿病、类风湿性关节炎、红斑狼疮、丙型肝炎、肝硬化、海洛因成瘾、妊娠等可使患者体内含有治疗性抗体、嗜异性抗体、自身抗体、类风湿因子、甲胎蛋白等。这些特殊成分在反应过程中有一定的吸附作用，产生假的显色反应而出现假阳性。
2 标本因素
2.1 标本处理不完全 血液抽取后未完全凝固即离心分离血清，纤维蛋白未完全析出，容易在板孔中形成纤维蛋白薄膜或絮状物，造成洗板时清洗不干净，酶残留在相应的板孔中，使吸光度值偏高，造成假的阳性结果。
2.2 标本溶血 标本溶血时细胞内液的各种活性酶及具有酶样活性的物质可与底物非特异性结合；Hb具有类过氧化物酶的活性，其效应与辣根过氧化物酶类似，溶血后反应孔非特异性吸附Hb，洗涤时不易洗去，催化底物产生一定程度的显色，使本底吸光度值升高而造成假阳性［3］。
酶联免疫吸附法检测梅毒抗体准确性分析
【摘要】 目的 探讨酶联免疫吸附试验对梅毒检测的准确性。方法 采用ELISA检测方法,对210例被确诊为梅毒患者进行血清梅毒抗体检测分析,并与用梅毒螺旋体明胶凝集试验检测的210例作对照，比较2种方法的准确性。结果 观察组采用酶联免疫吸附试验对被确诊为梅毒患者的血清样本进行梅毒抗体检测，阳性检出率为98.10%；对照组采用梅毒螺旋体明胶凝集试验进行梅毒检测，阳性检出率为100%;两组相比梅毒筛查符合率无明显差异（P＞0．05）。结论 酶联免疫吸附试验是进行梅毒抗体检测的一种简便、特异性高的方法，值得推广。
【关键词】 酶联免疫吸附试验；梅毒螺旋体；特异性
梅毒是由苍白密螺旋体感染引起的一种性传播疾病，近年来呈现逐渐增多趋势。梅毒螺旋体可侵犯全身各脏器，造成多器官病变、功能失常、组织破坏甚至死亡。实验室检查是诊断和发现梅毒的重要手段，而选择合适的检查方法对临床确诊具有重要意义。我们于2003年2月至2007年5月用酶联免疫吸附试验(ELISA)对后经确诊的梅毒患者进行了梅毒血清学检测，并用梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA)作为参照方法，对检测结果进行比较，评价酶联免疫吸附试验检测梅毒血清学试验的适用性，现报告如下。
1 资料与方法
1．1 病例来源 2003年2月至2007年5月在我院性病门诊就诊后被确诊为梅毒患者治疗前的血标本420例，随机分成2组，每组210例，观察组采用酶联免疫吸附试验进行梅毒抗体检测，对照组采用梅毒螺旋体明胶凝集试验进行梅毒检测，两组患者在年龄性别以及一般临床资料等方面均无明显差异（P＞0．05），具有可比性。
1．2 试剂和方法 采用梅毒专用混匀器、Biocell awl型洗板机和Biocel2010型酶标仪，试剂由北医大贝尔生物制药有限公司提供。①ELISA法 预包被酶标孔中加入待检血清50 μl，同时设阴、阳性对照，质控及空白孔，每孔加入酶标记抗原，置37℃ 30 min，Biocell awl型洗板机上洗板5次，拍干后加入显色剂A、B液各50 μl，置37℃ 10 min，加终止液50 μl，混匀后在Biocell 2010型酶标仪上450 nm比色(参考波长630 nm)，以阳性OD值/阴性对照OD值大于2．1判为阳性;②TPPA法 取1∶20、1∶40、1∶80等倍稀释的待检血清25 μl加于微量反应板中，于1∶20稀释孔加入未致敏粒子25 μl，其余稀释孔分别加入致敏粒子25 μl (血清最终稀释倍数为加入倍数的2倍)，轻轻混匀后加盖放置于室温2
关于HIV抗体检验中酶联免疫吸附法和快速法的比较
(辽宁省鞍山市铁西区卫生防疫站辽宁鞍山114012)【摘要】艾滋病是当前严重威胁人类健康和生命的一种传染病,由早期的静脉吸毒者共用注射器传播,发展到当今性传播和母婴垂直传播,即向普通人群的传播, 艾滋病的流行给人类的健康、生命安全以及经济社会发展带来了严重影响。最常用的艾滋病诊断方式是进行抗体检测，要了解和掌握hiv的感染情况，关键就是实验室的检测技术，下文就关于在hiv抗体检测中酶联免疫吸附法和快速法的比较分析及其注意事项的总结。【关键词】酶联免疫吸附法;胶体金快速法;hiv抗体;检测【中图分类号】r446.6【文献标识码】b【文章编号】1004-5511（2012）04-0594-01 一、引言进入20世纪90年代，hiv在我国迅速传播，感染人数成倍增长，艾滋病的防治已经成为全世界面临的重要课题。hiv感染的诊断以hiv抗体的检测为金标准，为了达到早诊断、早治疗、早管理的目的，全国先后建立了大量的hiv抗体初筛实验室，对hiv抗体检测的准确性要求也越来越高。现简述关于我站用酶联免疫吸附法及胶体金快速法检测hiv抗体的思考。二、酶联免疫吸附法对hiv抗体的检测hiv抗体检测是发现hiv感染的有效途径，酶联免疫吸附法（elisa）是一种敏感性高、特异性强、重复性好的试验诊断方法，由于其试剂具有稳定、易保存、操作简便、结果判断较客观等因素，以及既适用于 规模筛查试验，又可以使用于少量标本的检测等优点，一直以来，成为
艾滋病初筛试验室检测hiv抗体普遍使用的方法之一 1、试剂的选择:试剂盒的质量直接影响到结果的准确性，因此，要选择灵敏度和准确度较高，而且特异性较强的试剂盒。选择试剂盒的原则是，必须是经国家食品药品监督管理局注册批准，批检合格，临床评估质量优良，在有效期内的试剂，并经常了解同行对试剂盒使用的反馈情况一级卫生部临床检验中心对参加室间质评实验室试剂盒的综合评价。本站检测hiv抗体主要采用北京万泰生物药业有限公司试剂盒。另外，也应该注意试剂的保存，试剂从冰箱中取出后，应先平衡到室温后再使用，用多少取多少，防治反复冻融。2、仪器设备的校准与检定: 对实验结果起关键作者用的仪器，水浴箱、洗板机和酶标仪等均需按周期进行计量检定，并在检定周期内进行期间核查，同时，建立仪器设备的维护及操作规程，进行日常维护，保持仪器设备的最佳状态。3、样品样品的采集与保存: 样品采集时候应该尽量避免溶血和细菌污染、霉变，否则会导致假阳性。尽量不用抗凝血，保存时间不宜太长，一般2°c-8°c冰箱中保存一周内完成检验，长期保存最好在零下20oc度低温冰箱存放，并避免反复冻融，浑浊或有沉淀的样品要离心。作hiv抗体检测的血样不宜用塑料试管，应用玻璃试管装。4、检测中关键点的控制：（1）加样：微孔板条从冰箱中取出后应平衡至潮气干尽方可使用，用微量加样器按规定量加入孔底，避免加在孔壁上部，尽量慢慢快放，以免溅出或产生气泡，同时不要使吸头碰到酶标板孔上的包被抗
