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补骨脂水提液对成骨细胞OPG—RANKL mRNA表达的影响

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样本 进 行检测 。２ ０份样 品 中空 肠组 织 有 ８份 阳性 ，
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肝脏 组 织 有 ４份 阳性 ， 阳性率 分 别 为 ４ 和 ２ ； Ｏ／ ９ ６本 都 呈
阳 Ｉ 生。 ３ 讨 论
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较强 （ 中插彩 版 图 ２ 。 见 ）
参考 文献 ：
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２ ５ 间接 原 位 Ｐ Ｒ 对 发 病 雏 鹅 高 免 血 清 紧 急 免 ． Ｃ 疫后 ＧＰ 的检 测 以 所 建 立 的 检 测 ＧＰ 间 接 原 Ｖ Ｖ 位 Ｐ Ｒ方 法对 ２ Ｃ Ｏ份 ４日龄 发病雏 鹅霍 尔 多 巴吉 白 鹅 ＧＰ 高 免 血 清 紧急 免 疫 ６ｄ后肝 脏 和 空 肠组 织 Ｖ
１ ２
中国兽医杂志 ２１ ０ １年 （ ４ 第 ７卷 ） １ 第 ２期
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补 骨 脂 水提 液 对 成 骨 细 胞 ＯＰ — Ａ Ｇ Ｒ ＮＫＬ ｍＲ Ａ 表 达 的影 响 Ｎ
田 丹 ，刘钟 杰 ， 晓 燕 ，李 彩 虹 ，王 炼 ，邢 晓 旭 ，韩 博 赵
（ 国 农 业 大 学 动 物 医 学 院 ，北京 海 淀 １０ ９ ） 中 ０ １ ３
摘 要 ： 了探 讨 补 骨 脂 水 提 液 对 体 外 培养 大 鼠成 骨 细胞 核 因 子一 受 体 活 化 因 子 配 体 （ 为 ＲＡＮ ）和 骨保 护 素 （ Ｇ）ｍＲ— ＫＬ ＯＰ ＮＡ 表 达 的 影 响 ， 取 出 生 ２ 选 ４ｈ内的 Ｓ 大 鼠颅 盖 骨 ， 次 用 胰 酶 和 胶 原 酶 消 化分 离 培 养 成 骨 细 胞 ， 不 同浓 度 的 补 骨 脂 水 提 Ｄ 依 用 液 （０ 。１０ｍｇ ｍＬ和 １ ／ ） 用 第 三 代 细 胞 ， 别 在 药 物 作 用 ２ 、８ｈ和 ７ １ ＿ ，． ／ ０ｍｇ ｍＬ 作 分 ４ ４ ２ｈ后 提 取 细 胞 总 Ｒ ＮＡ， 实 时 荧 光 定 量 用 Ｐ Ｒ法 检 测 细 胞 中 ＲＡ Ｃ ＮＫＬ和 ＯＰ Ｇ ｍＲＮＡ。结 果 显 示 ， 骨 脂 水 提 液 各 浓 度 均 能 不 同 程 度 地 促 进 成 骨 细 胞 ＯＰ ＮＡ 的 补 Ｇ ｍＲ
ｇ ｔｏ ｆａ ｕ ｂ ｅ ｋ ｏ ｏ ｓ ａ ｖ ｉ ｕ ｎ ｅ ｔｏ ｎ ｓ ｄ ｎ ａ ｉ ｎ ｏ ｎ ｏ ｔ ｒ ａ ｆ ｇ ｏ ｅ ｐ ｒ ｏｖ ｒ ｓ ｉ ｆ ｃ ｉ ｎ ｉ ｗｅ ｅ
－ ．Ａｖ ｎＤｓ ２０ ，１２ ：６ ９１ ． ｌ］ Ｊ ｉ ｉ， ０ ７ ５ （ ） ０ —３ ａ Ｉ］ Ｇａｎ ｕＥ － ３ ｉ ｏ ，Ｋａｏ ｒ Ａ，Ｍａｉｓ ｎ ｋｕ ｉ ｔａｉ Ｂ Ｂ，ｅ １ Ｆ ｔ ｆＬｓ ｒ ｊ ｅ ｔ ． ａｅｏ ｉｅｉ ａ ｔａ
收 稿 日期 ：０ １０—９ ２ １ —３０ 作者简介 ： 田丹 （９ ５） 女 ， 士 ， １８一， 硕 主要 从 事 中兽 医学 研 究 通 讯作 者 ： 钟杰 ， — ｉ ｌ ｚｏ ｇｉｃｕ １ ３ ｔｍ 刘 Ｅ ｍａｌ ｉ ｈ ｎ ｊ ａ ＠ ６ ．ｏ ：ｕ ｅ
管部 位通 常 出现 阳性 信 号 ， 管 内皮 细胞 阳性 信 号 血

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补骨脂素对乳腺癌干细胞的毒性作用及TopoⅡα基因mRNA和蛋白表达水平的影响

补骨脂素对乳腺癌干细胞的毒性作用及TopoⅡα基因mRNA和蛋白表达水平的影响

【摘要】 目的 分析补骨脂素对乳腺癌干细胞的毒性作用及拓扑异构酶Ⅱα（ＴｏｐｏⅡα）基因 ｍＲＮＡ和蛋白表达水 平的影响。方法 以乳腺癌多药耐药细胞株 ＭＣＦ－７／ＡＤＲ为模型，通过免疫磁珠法对乳腺癌干细胞进行筛选，并观察 其生长状态。取细胞生长抑制率≤１０％的药物浓度（ＩＣ１０）≈６μｇ／ｍｌ，细胞生长抑制率≤２０％的药物浓度（ＩＣ２０）≈１０ μｇ／ｍｌ分别为模型 １组、模型 ２组的用药浓度，另设置对照组（未加入补骨脂素）。根据 ＣＣＫ－８法测定不同浓度（０μｇ／ ｍｌ，２μｇ／ｍｌ，４μｇ／ｍｌ，８μｇ／ｍｌ，１２μｇ／ｍｌ，１６μｇ／ｍｌ，３２μｇ／ｍｌ）补骨脂素对乳腺癌干细胞的毒性作用，分别采用免疫印迹 法和实时荧光定量 ＰＣＲ法对 ＴｏｐｏⅡα蛋白和 ｍＲＮＡ的表达情况进行检测。结果 于光学显微镜下观察可见乳腺癌干 细胞出现球性生长。ＣＣＫ－８法检测发现，补骨脂素可阻滞乳腺癌干细胞增殖，补骨脂素作用于乳腺癌干细胞 ２ｄ后，不 同浓度的补骨脂素对细胞毒性作用存在显著差异，随着补骨脂素浓度的升高，其毒性作用明显提升，细胞抑制率明显升 高（Ｐ ＜０．０１）。模型 １组、模型 ２组蛋白的表达水平分别为 １．５２±０．１５、１．８７±０．１８，较对照组 ０．７８±０．０９显著升高 （Ｐ ＜０．０１），模型 ２组 ＴｏｐｏⅡα蛋白的表达水平较模型 １组显著升高（Ｐ ＜０．０１）。模型 １组、模型 ２组 ｍＲＮＡ相对表 达量分别为 ２．１３±０．１３、３．７５±０．２４，较对照组 １．００±０．０７显著升高（Ｐ＜０．０１），模型 ２组 ＴｏｐｏⅡαｍＲＮＡ相对表达量 较模型 １组显著升高（Ｐ ＜０．０１）。结论 补骨脂素对乳腺癌干细胞具有一定的毒性作用，且具有剂量依赖性的特点， 可提高乳腺癌干细胞 ＴｏｐｏⅡα蛋白和 ｍＲＮＡ表达，使得化疗药物的作用靶点增多。
补肾中药及方剂对骨质疏松OPGRANKRANKL系统作用的研究进展

补肾中药及方剂对骨质疏松OPGRANKRANKL系统作用的研究进展

补肾中药及方剂对骨质疏松OPG/RANK/RANKL系统作用的研究进展作者：李佳凌高明利来源：《风湿病与关节炎》2019年第02期【摘要】骨保护素（OPG）/核转录因子-κB受体活化因子（RANK）/核转录因子-κB受体活化因子配体（RANKL）系统是调节骨重建过程中破骨细胞功能的重要信号通路。

OPG竞争性地抑制RANK与RANKL的结合，抑制破骨细胞功能，减少骨质吸收。

许多补肾中药及方剂通过影响该信号通路抑制破骨细胞功能，进而防治骨质疏松。

通过补骨脂、骨碎补、蛇床子、淫羊藿等中药以及独活寄生汤、六味地黄丸、左归丸等方剂对OPG/RANK/RANKL系统的调节作用进行综述，旨在为骨质疏松的防治提供新思路。

【关键词】骨质疏松;OPG/RANK/RANKL信号通路;补肾中药;综述中医学中有肾主骨生髓理论，如《素问·上古天真论篇》曰：“女子七岁，肾气盛，齿更发长……，三七，肾气平均，故真牙生而长极，四七，筋骨坚，发长极，身体盛壮……。

”“丈夫八岁，肾气实，发长齿更……，二八，肾气盛……，三八，肾气平均，筋骨劲强，真牙生而长极，四八，筋骨隆盛，肌肉满壮……。

”《素问·脉要精微论篇》曰：“骨者，髓之府。

”“髓者，骨之充也。

”《素问·痿论篇》曰：“肾主身之骨髓……肾气热，则腰脊不举，骨枯而髓减，发为骨痿……，肾者，水脏也，今水不胜火，则骨枯而髓虚，故足不能任身、发为骨痿。

”由此可知，肾精充盛对于骨骼生长、发育、强劲具有重要作用。

因此，临床上予骨质疏松症（osteoporosis，OP）患者补肾中药及方剂治疗。

从微观角度解释补肾中药及方剂对OP的治疗作用与机制，进而指导临床用药显得尤为重要。

笔者通过查阅文献发现，补肾中药及方剂主要通过影响骨保护素（OPG）/核转录因子-κB受体活化因子（RANK）/核转录因子-κB受体活化因子配体（RANKL）信号通路影响骨代谢。

本文以中药补骨脂、骨碎补、蛇床子、淫羊藿以及方剂独活寄生汤、六味地黄丸、左归丸为代表，从OPG/RANK/RANKL信号通路及骨代谢角度总结补肾中药及方剂对OP的治疗作用。

补骨脂素对成骨细胞核因子-κB受体激活配体和骨保护素表达的影响

补骨脂素对成骨细胞核因子-κB受体激活配体和骨保护素表达的影响


Effects of psoralen on the expressions of receptor activator of nuclear factor-κB ligand and osteoprotegerin in murine osteoblasts in vitro WU Mi-Shan，ZHAO Su-Zhi，REN Li-Zhong，et al. Department of Formulaology，Traditional Chinese Medicine College of Hebei Medical University，Shijiazhuang 050091，Hebei，China
补骨脂素对成骨细胞核因子-κB 受体激活配体和骨保护素表达的影响
武密山 赵素芝1 任立中2 王 茹 白 霞 韩红伟 李 彬3 陈华岳4 （ 河北医科大学中医学院方剂学教研室，河北 石家庄 050091）
〔摘 要〕 目的 研究补骨脂素（ psoralen，PSO） 对体外培养的小鼠成骨细胞（ OB） 分化及核因子-κB 受体激活配体（ receptor activator of nuclear factor-κB ligand，RANKL） 和骨保护素（ osteoprotegerin，OPG） 表达的影响。方法 取第 1 代 BALB / c 小鼠颅盖骨成骨细胞，将 PSO 以 0. 1、1、10 μmol / L 3 种浓度分别加入新生大鼠颅骨成骨细胞培养液中，MTT 法观察各组药物对成骨细胞的增殖作用并绘制细胞生长曲线； 用 PNPP 法测定成骨细胞内 碱性磷酸酶（ alkaline phosphatase，ALP） 活性； RT-PCR 法检测成骨细胞 OPG 和 RANKL 的转录水平。结果 细胞生长曲线显示各组成骨细胞数量均随 时间延长而增加，中、高浓度 PSO 能显著提高成骨细胞的 ALP 活性，促进 OPG、RANKL 的表达（ P ＜ 0. 05） ，OPG / RANKL1 μmol / L） 对骨更新作用不明显，而中、高浓度 PSO（ 1、10 μmol / L） 能通过上调 OPG、RANKL mRNA 表达及 OPG / RANKL 比例，促进成骨 细胞的生成功能，增强骨更新。
骨碎补提取液对成骨细胞增殖的影响

骨碎补提取液对成骨细胞增殖的影响

骨碎补提取液对成骨细胞增殖的影响
秧荣昆;郭磊磊
【期刊名称】《贵阳中医学院学报》
【年(卷),期】2006(028)004
【摘要】目的:观察骨碎补提取液对体外培养成骨细胞增殖的影响.方法:实验药物与体外培养成骨细胞共同培养3、5、7、10d后,分别采用免疫组化染色和放免法测定Ⅰ型胶原蛋白和碱性磷酸酶的含量,检测成骨细胞的增殖情况.结果:骨碎补提取液对成骨细胞的增殖有促进作用,且和药物剂量有密切关系.1000mg/L的骨碎补提取液对成骨细胞有明显的促进作用,在1000～1500mg/L的浓度范围内,其促进作用随浓度升高而增加,并于1500～1600mg/L时达到最大效应.结论:骨碎补提取液对成骨细胞的增值分化有促进作用.
【总页数】2页(P61-62)
【作者】秧荣昆;郭磊磊
【作者单位】贵阳中医学院,贵州,贵阳,550002;贵阳中医学院,贵州,贵阳,550002【正文语种】中文
【中图分类】R285.5
【相关文献】
1.骨碎补含药血清对成骨细胞增殖、成骨的影响 [J], 宋渊;李盛华;何志军
2.骨碎补提取液及柚皮甙对小鼠成骨细胞MC3T3-E1基质矿化作用影响的比较研究 [J], 唐琪;王仁飞;王维倩;丁佩惠;陈莉丽
3.比较浓缩生长因子提取液和富血小板纤维蛋白提取液对成骨细胞MC3T3-E1增殖的影响 [J], 魏中武;刘双喜;陈灼庚;黄谢山
4.骨碎补总黄酮在肿瘤坏死因子α介导下对成骨细胞凋亡的影响 [J], 黄志明;欧阳桂林;肖涟波;李宁丽;高华利;何勇;黄正;黄新星
5.骨碎补、续断、西洋参对成骨细胞MC3T3-E1细胞增殖的影响 [J], 宋钦兰因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。