葡萄糖氧化酶法(GOD-POD)试剂盒与己糖激酶法(HK)试剂盒测定血糖比较
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高尿酸水平对GOD-POD法和HK法测定血糖的干扰发表时间:2019-03-11T14:57:29.567Z 来源:《中国医学人文》2018年第12期作者:汤永云沈丽娟易本喜[导读] 目的探讨高尿酸水平对GOD-POD法和HK法测定血糖的影响。
(上海市金山区中西医结合医院检验科201501)【摘要】目的探讨高尿酸水平对GOD-POD法和HK法测定血糖的影响。
方法用葡萄糖氧化酶法和己糖激酶法在日立7600生化分析仪上分别测定70例高尿酸血症患者和50例健康人血糖水平,比较两种方法的差异及相关性。
结果高尿酸血症组葡萄糖氧化酶法和己糖激酶法两种方法的血糖结果存在差异,葡萄糖氧化酶法受血尿酸影响,结果低于真值,两法的结果差值与血尿酸浓度正相关。
结论应用葡萄糖氧化酶法检测高尿酸血症患者血糖水平会导致结果偏低,需要修正或换用己糖激酶法进行测定。
【关键词】高尿酸血症;葡萄糖氧化酶法;己糖激酶法;血糖测定【中图分类号】R2 【文献标号】A 【文章编号】2095-9753(2018)12-0107-01高尿酸血症(HUA)是嘌呤代谢障碍引起的疾病,常与糖、脂代谢紊乱同时发生。
血糖测定的主要方法有葡萄糖氧化酶法(GOD)和己糖激酶法(HK)[1]。
HK法作为参考方法其特异性较高[2]。
GOD法成本低廉,是目前实验室血糖测定的常用方法。
但血液中的还原性物质会对其结果产生影响,尿酸亦具有还原性,但相关的报道少见,本文以高尿酸血症患者为研究对象,探讨HK法和GOD法在高尿酸条件下测定血糖的结果差异。
1资料和方法1.1 研究对象选取2018 年7月至2018年11月在我院就诊的HUA患者(包括400-600umol/L 40例及>600umol/L 30例)作为高尿酸组。
所选病例的血清尿素氮、肌酐在正常范围,排除肝病、糖尿病肾病患者以及使用促进肾小管重吸收和分泌尿酸的利尿药的患者。
正常对照组50例均来自我院体检中心的健康者。
血糖测定的影响因素研究王连明;辛晓敏;刘晓民;于永光【期刊名称】《中国实验诊断学》【年(卷),期】2006(010)011【摘要】目的研究己糖激酶法和葡萄糖氧化酶法测定血液血糖含量时的干扰因素及其影响程度.方法应用己糖激酶法和葡萄糖氧化酶法试剂盒对临床标本进行血糖的测定,观察其时间反应曲线,同时测定其它24项常用生化示,分析对血糖测定产生干扰的物质及其影响程度. 结果通过对临床标本的测定,我们发现体内的代谢产物对己糖激酶法血糖测定产生两种干扰,一种是在胆红素增高时伴随的快速干扰,一种是在革些病理情况下产生的慢反应干扰.结论血糖测定是临床最常用的检测指标,准确测定血糖浓度对指导临床治疗非常重要,所以研究血糖测定的干扰因素是非常有意义的.【总页数】3页(P1345-1347)【作者】王连明;辛晓敏;刘晓民;于永光【作者单位】哈尔滨医科大学第一临床医学院,实验诊断教研室,黑龙江,哈尔滨150001;哈尔滨医科大学第一临床医学院,实验诊断教研室,黑龙江,哈尔滨150001;哈尔滨医科大学第一临床医学院,实验诊断教研室,黑龙江,哈尔滨150001;哈尔滨医科大学第一临床医学院,实验诊断教研室,黑龙江,哈尔滨150001【正文语种】中文【中图分类】R4【相关文献】1.氟化钠抗凝管离心前、后放置时间对血糖测定值的影响 [J], 王路;刘徐承;孙雪娇;刘畅;程江2.两种采血方法对便携式血糖测定仪血糖测定的影响研究 [J], 吴琦亮3.影响快速血糖测定准确性的因素探讨 [J], 李红焱4.采血方法对快速血糖测定仪测量值的影响 [J], 赵东荣5.全血标本红细胞浓度对不同放置时间后血糖测定结果影响研究 [J], 管丽红;陈卓敏;王占科;黄杰;李丽萍;周媛;王康;关晓辉因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
godpod法测血糖实验报告一、实验目的本实验旨在探究 godpod 法在血糖检测中的准确性、可靠性以及操作便利性,为临床血糖监测和糖尿病患者的自我管理提供有效的检测方法参考。
二、实验原理Godpod 法是一种基于葡萄糖氧化酶(GOD)和过氧化物酶(POD)的酶促反应来测定血糖浓度的方法。
葡萄糖在葡萄糖氧化酶的作用下生成葡萄糖酸和过氧化氢,过氧化氢在过氧化物酶的催化下与显色剂发生反应,生成有颜色的化合物,通过比色测定吸光度,从而计算出血糖浓度。
三、实验材料与设备1、血糖仪及配套的 godpod 法血糖测试条。
2、采血针。
3、消毒棉片。
4、标准葡萄糖溶液(不同浓度)。
5、移液器及配套枪头。
6、离心机。
7、分光光度计。
四、实验方法1、血糖仪校准使用血糖仪配套的校准液对血糖仪进行校准,确保血糖仪的准确性。
2、样本采集选取健康志愿者和糖尿病患者作为研究对象。
使用采血针在手指末梢采集血液样本,将血液滴在血糖测试条上,按照血糖仪的操作说明进行检测,记录血糖值。
3、标准曲线绘制配制不同浓度的标准葡萄糖溶液,使用分光光度计在特定波长下测定吸光度,绘制标准曲线。
4、准确性验证将采集的血液样本离心分离出血浆,使用实验室生化分析仪测定血糖浓度作为参考值,与 godpod 法血糖仪测定的血糖值进行比较,计算偏差。
5、重复性实验对同一血液样本进行多次 godpod 法测定,计算测定结果的变异系数,评估方法的重复性。
6、干扰实验在血液样本中加入常见的干扰物质,如维生素 C、胆红素、甘油三酯等,测定血糖浓度,观察干扰物质对 godpod 法测定结果的影响。
五、实验结果1、血糖仪校准结果血糖仪校准成功,显示值与校准液的标准值相符。
2、样本采集情况共采集了健康志愿者 20 例和糖尿病患者 30 例的血液样本,样本采集过程顺利,无明显不良反应。
3、标准曲线绘制的标准曲线线性良好,相关系数 R²达到 099 以上。
4、准确性验证与实验室生化分析仪测定的参考值相比,godpod 法血糖仪测定的血糖值偏差在允许范围内,平均偏差为具体偏差值%。
血清中葡萄糖含量检测的方法研究进展【摘要】血清葡萄糖含量是临床生化检验中重要的指标,其的准确测定对糖尿病等疾病的诊断、治疗都有重大意义。
本文介绍了近几年血清中葡萄糖含量检测的主要方法以及这些方法的一些研究结果。
【关键词】血清;葡萄糖;检测方法血清中葡萄糖是人体内各组织细胞活动所需的物质。
人体内的血糖必须保持一定的水平才能维持体内各器官和组织的需要。
正常人在空腹血糖浓度为3.9~6.0mmol/L。
空腹血糖浓度超过6.0mmol/L称为高血糖而血糖浓度低于3.9mmol/L 称为低血糖。
血清中葡萄糖是临床生化检验中的重要指标,可以为糖尿病、高血压以及心脑血管系统等疾病的诊断、治疗用药、病情监测以及疾病预防等方面提供客观依据。
因此,对其进行准确的测定具有极其重要的意义。
1血清中葡萄糖的主要检测方法目前,血清中葡萄糖的检测方法主要有:葡萄糖氧化酶(GOD-POD)法、己糖激酶法(HK法)、葡萄糖脱氢酶法(GDH法)、气相色谱-同位素稀释质谱法(GC-IDMS法)以及无创血糖测量法等。
下面就对以上方法进行简要的介绍。
1.1葡萄糖氧化酶(GOD-POD)法葡萄糖氧化酶(glucose oxidase,GOD)将葡萄糖氧化成葡萄糖酸,同时释放过氧化氢。
过氧化物酶(peroxidase,POD)在色原性氧受体存在时将过氧化氢分解为水和氧,并使色原性氧受体4-氨基安替比林和酚去氢缩合为红色醌类化合物,即Trinder反应。
红色醌类化合物的生成量与葡萄糖含量成正比。
通过测定吸光度就能计算出血液中葡萄糖的含量。
该法的优点有:操作简便,用血量少,成本低,多见于便携式血糖仪,是我国卫生部推荐的血糖测定的常规方法。
但缺点是:过氧化酶的特异性较差,尿酸、维生素C、胆红素等可与色原性物质竞争过氧化氢而抑制反应,引起结果偏低。
且该法线性范围较窄(0.1~20.0mmol/L)。
同时,葡萄糖氧化酶对β-D-葡萄糖高度敏感,而新配制的葡萄糖标准溶液主要为α-D-葡萄糖,为使检测结果准确,需静置溶液2h以上(最好过夜)待其完全转化为β-D-葡萄糖再使用。
己糖激酶法葡萄糖氧化酶法
己糖激酶法和葡萄糖氧化酶法是两种测定血糖的方法。
1. 己糖激酶法
己糖激酶法是一种基于酶促反应的血糖测定方法。
它利用己糖激酶,
在适宜pH值下,将己糖和ATP催化成己酮糖-6-磷酸和ADP,同时
释放出一定量的NADPH。
NADPH的量与己酮糖-6-磷酸的量成正比。
而己酮糖-6-磷酸的生成量又与待测的血糖含量成正比,因此可以根据NADPH的生成量,反推出血糖含量。
己糖激酶法的优点在于操作简便、灵敏度高、特异性强和结果可靠。
但也有一些缺陷,如该方法在高温、pH异常或血红蛋白高时易受影响。
此外,该法不能区分血浆和血红蛋白中的己糖,因此不适用于测定严
重贫血患者的血糖水平。
2. 葡萄糖氧化酶法
葡萄糖氧化酶法是另外一种测定血糖的方法。
这种方法利用葡萄糖氧
化酶在血浆中氧化血糖生成葡萄糖酸和过氧化氢,过氧化氢反应使荧
光缀合物发出荧光信号,荧光强度与血糖含量成正比。
该方法操作简
单,精度和灵敏度都很好,可以对严重贫血患者的血糖水平进行测定。
然而,葡萄糖氧化酶法与己糖激酶法相比,抗干扰性稍差,不适用于
某些荧光物质对光有比较强的要求,而且对葡萄糖以外的其他化合物
也有一定的氧化反应,因此在测量的过程中需要进行校正。
总体而言,这两种血糖测定方法各有优缺点,应选择适合实际应用需
求的方案进行测定。
竭诚为您提供优质文档/双击可除葡萄糖氧化酶法的实验报告篇一:葡萄糖测定-葡萄糖氧化酶法葡萄糖氧化酶法测定血清(浆)葡萄糖【原理】葡萄糖氧化酶(glucoseoxidase,goD)利用氧和水将葡萄糖氧化为葡萄糖酸,并释放过氧化氢。
过氧化物酶(peroxidase,poD)在色原性氧受体存在时将过氧化氢分解为水和氧,并使色原性氧受体4-氨基安替比林和酚去氢缩合为红色醌类化合物,即Trinder反应。
红色醌类化合物的生成量与葡萄糖含量成正比。
【试剂】1.0.1mol/L磷酸盐缓冲液(ph7.0)称取无水磷酸氢二钠8.67g及无水磷酸二氢钾5.3g溶于蒸馏水800ml中,用1mol/L氢氧化钠(或1mol/L盐酸)调ph至7.0,用蒸馏水定容至1L。
2.酶试剂称取过氧化物酶1200u,葡萄糖氧化酶1200u,4-氨基安替比林10mg,叠氮钠100mg,溶于磷酸盐缓冲液80ml 中,用1mol/Lnaoh调ph至7.0,用磷酸盐缓冲液定容至100ml,置4℃保存,可稳定3个月。
3.酚溶液称取重蒸馏酚100mg 溶于蒸馏水100ml中,用棕色瓶贮存。
4.酶酚混合试剂酶试剂及酚溶液等量混合,4℃可以存放1个月。
5.12mmol/L苯甲酸溶液溶解苯甲酸1.4g于蒸馏水约800ml中,加温助溶,冷却后加蒸馏水定容至lL。
6.100mmol/L葡萄糖标准贮存液称取已干燥恒重的无水葡萄糖1.802g,溶于12mmol/L苯甲酸溶液约70ml中,以12mmol/L苯甲酸溶液定容至100ml。
2h以后方可使用。
7.5mmol/L葡萄糖标准应用液吸取葡萄糖标准贮存液5.0ml放于100ml容量瓶中,用12mmol/L苯甲酸溶液稀释至刻度,混匀。
【操作步骤】1.自动分析法按仪器说明书的要求进行测定。
2.手工操作法取试管3支,按下表操作。
读取标准管及测定管吸光度。
【计算】【参考范围】空腹血清葡萄糖为3.89~6.11mmol/L。
葡萄糖测定摘要】体液中葡萄糖含量的高低是标志着人体健康状况的重要指标,尤其是糖尿病人的血液葡萄糖监控。
葡萄糖浓度的突然升高与降低都预示着一种异常情况的发生。
许多葡萄糖测定的电化学和光化学方法已经被报道并应用于不同样品的分析。
【关键词】葡萄糖采血管检验(一)葡萄糖氧化酶法1.原理葡萄糖氧化酶(GOD)能催化葡萄糖氧化成葡萄糖酸,并产生一分子过氧化氢。
在过氧化物酶(POD)和色原性氧受体(如联大茴香胺,4-氨基安替比林偶联酚)的存在下,过氧化氢分解,释放出初生态氧,氧化色素原,生成有色化合物。
2.试剂推荐使用有批准文号的优质市售试剂盒。
配制方法如下(仅供参考):(1)0.1 mol/L(pH 7.0)磷酸盐缓冲液:溶解无水磷酸氢二钠8.67 g及无水磷酸二氢钾5.3 g于800 ml蒸馏水中,用1 mol/L氢氧化钠或盐酸调节pH至7.0,然后用蒸馏水稀释至1 L。
(2)酶试剂:取葡萄糖氧化酶l 200 U、过氧化物酶1 200 U、4-氨基安替比林10 mg、叠氮钠100 mg,加上述磷酸盐缓冲液至80 ml左右,调节pH至7.0,加磷酸缓冲液至100 ml。
置冰箱保存,至少可稳定3个月。
(3)酚试剂:重蒸馏酚100 mg溶于100 ml蒸馏水中(酚在空气中氧化成红色,可先配成500 g/L的溶液,用时稀释)。
贮存于棕色瓶中。
(4)酶酚混合试剂:酶试剂及酚试剂等量混合,在冰箱内可以存放1个月。
(5)葡萄糖标准贮存液(100 mmol/L):无水葡萄糖(预先置80℃烤箱内干燥恒重,移置于干燥器内保存)。
称取1.802 g,以12 mmol/L苯甲酸溶液溶解并移入100 ml容量瓶内,再以12 mmol/L苯甲酸溶液稀释至100 ml刻度处,放置2小时后方可应用。
(6)葡萄糖标准应用液(5 mmol/L):吸取葡萄糖标准贮存液5 ml,于100 ml容量瓶中,用12 mmol/L苯甲酸溶液稀释至刻度,混匀。
一、题目:葡萄糖氧化酶法测定血糖浓度血糖测量仪:糖尿病患者需要经常独取静脉血以测定血糖,给患者造成一定的不便。
有条件的患者可以自备l台血糖检验仪,所测指血或耳血为毛细血管的血糖值,略高于静脉血糖值。
但要注意,当寒冷、水肿及血管痉挛时,稍受影响,其测定范围为〔0.5~27.7毫摩尔/升(10~500毫克/分升)〕。
目前市场上常见的血糖仪按照测糖技术可以分为电化学法测试和光反射技术测试两大类。
前者是酶与葡萄糖反应产生的电子再运用电流记数设施,读取电子的数量,再转化成葡萄糖浓度读数。
后者是通过酶与葡萄糖的反应产生的中间物(带颜色物质),运用检测器检测试纸反射面的反射光的强度,将这些反射光的强度,转化成葡萄糖浓度,准确度更高。
目前市场上尚有笔式及其他型号微量血糖测试仪供使用。
90年代以来国外研制出无损伤血糖检测仪,是用电脑化的近红外线透过皮肤面测量其吸收变化,可在5秒钟内测出2.22~22.2毫摩尔/升(40~400毫克/分升)血糖。
二、实验目的教学目的学习葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法测定血糖浓度的基础上,掌握血糖的正常参考值,掌握肾上腺素对血糖浓度的影响,熟悉尿糖的半定量检测。
教学要求(一)掌握血糖的正常参考值,复习血糖的来源与去路;掌握肾上腺素对血糖浓度的影响机理。
(二)熟悉葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法测定血糖的操作步骤及注意事项。
(三)熟悉葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法测定血糖的原理,血清的制备,血糖浓度及血糖增高率的计算,尿糖的原因及尿糖半定量检测的原理及方法。
(四) 了解动物耳缘静脉取血法,血糖调节的几种因素及血糖测定的临床意义。
教学内容(一)实验原理:血糖的正常参考值,血糖的来源与去路,血糖调节的几种因素,肾上腺素对血糖浓度的影响机理,血糖测定的临床意义,葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法测定血糖的原理;尿糖的原因及尿糖半定量检测的原理。
(二)实验操作:血糖测定及肾上腺素对血糖浓度的影响(收集注射肾上腺素前后耳缘静脉血,制备血清,葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法测定血糖浓度);尿糖半定量检测。
葡萄糖氧化酶法(GOD-POD)试剂盒与己糖激酶法(HK)试
剂盒测定血糖比较
摘要:通过对本实验室常规使用的己糖激酶法试剂盒的比较,分析葡萄糖氧化酶
法试剂盒检测血糖的可靠性和应用性。
对本实验室使用的血糖测定参考方法HK
法试剂盒与GOD-POD法试剂盒从重复性、试剂稳定性、特异性等方面进行比较。
结果显示GOD-POD法在重复性、试剂稳定性等方面均能满足一般实验室要求,
且与HK法相关性良好。
关键词:GOD-POD、HK、血糖测定、方法比较1 引言。
血糖测定是诊断糖尿病的重要依据,血糖的准确测定对诊断和处理高血糖
和低血糖症十分重要测定方法主要有化学法和酶法,而酶法有分为葡萄糖氧化酶
与过氧化物酶偶联的的GOD-POD法及己糖激酶与葡萄糖-6-磷酸脱氢酶偶联的HK 法。
酶法中的GOD-POD法,因具有操作简单,无毒、无害,试剂已商品化、易
于质控、价格低等优点,现已广泛用于临床。
为此,将GOD-POD法与血糖参考
方法HK法从重复性、试剂稳定性、特异性及两种方法的相关性方面作比较,现
报告如下:
2 材料与方法
2.1仪器与试剂
己糖激酶试剂盒四川迈克生物科技有限公司批号:20110310
葡萄糖氧化酶试剂盒四川迈克生物科技有限公司批号:20110310
胆红素校准品(430 umol/l)四川迈克生物科技有限公司批号:20101120
血糖中值质控品(4.80 mmol/l)四川迈克生物科技有限公司批号:20101008
血糖高值质控品(11.20mmol/l)四川迈克生物科技有限公司批号:20101008
日立-7180全自动生化分析仪
2.2方法
按试剂盒使用说明设置参数和操作。
2.2.1重复性试验取两个血糖浓度的定值质控血清用两种方法分别平行测20次,计算批
内误差。
另取两个血糖浓度同一批号定值质控血清用两种方法每天各做两次,累计20个结果,计算天间误差。
2.2.2回收试验取若干健康体检人群血清混合,分装,按9:1的比例分别加入浓度为4.80 mmol/L和11.20 mmol/l的糖标准溶液,用两种方法分别测定,每种方法的每一浓度平行测定
三次,分别计算回收率。
2.2.3 干扰试验取胆红素含量为4
3.00umol/L左右的血清用两种方法分别测定血糖浓度,
比较胆红素对两种方法的干扰。
2.2.4方法比较实验用两种方法分别测定100例体检人员血清中的血糖浓度(每天测20份,共做5天),进行相关和回归处理,观察两方法的相关性。
2.2.5 统计学方法 D检验、T检验、F检验
2.3 GOD-POD法、HK法检测依据:根据《全国临床操作规程》第三版中的糖类测定执行。
3 结果
3.1 重复性试验
结果见表1和表2。
在两试剂盒共同线性范围0.02-22.30mmol/L范围内,线性相关结果y=0.8668x+0.4842,
相关系数r=0.9038有一定相关性,作两样本均数t检验t值为2.16(查表P<0.05),说明两
组试剂盒测定结果在统计学上有一定差异性。
4 讨论
重复性实验是反映精密度大小,精密度是在一定条件下进行多次检测所得检测结果彼此
之间符合程度,它是检测结果中随机误差分散程度大小的反映,一般实验室要求批内CV<3%,批间CV<5%,葡萄糖氧化酶法和己糖激酶法的检测结果均符合以上要求,批内CV均在1%左右,批间CV均在2.4%左右,并且两种试剂盒都很接近。
如此说明两种试剂盒的影响因素相近,随机误差较小且较恒定。
回收实验是比较两种分析方法系统误差的有效评价方法,一般检验方法要求回收率在95%—105%。
因HK试剂盒已开瓶一个多月,试剂稳定性有一定影响,平均回收率在105.19%,因时间的限制,在以后的工作中在做进一步求证。
而葡萄糖氧化酶法是新开瓶试剂盒,在中、高值都能达到要求。
干扰实验是用于检测某方法特异性,也用于检测干扰物质对方法干扰作用,以评价分析
方法准确性,一般试验要求干扰率<5%。
理论上,葡萄糖在葡萄糖氧化酶的作用下产生的过
氧化氢要与还原性物质如胆红素、尿酸、抗坏血酸等反应,从而使检测值偏低,而己糖激酶
法不受还原性物质的影响。
表4显示,葡萄糖氧化酶法和己糖激酶法的检测结果均明显高于
一般实验要求,但室内质控均在在控状态。
分析其原因可能与我们使用的成品胆红素标准品
的基质效应有关,通过与厂家联系,标准品中使用的是猪胆红素
方法比较显示,做回归分析回归系数r=9038 ,表明两种方法有一定相关性,但同我们实
验室要求r=0.99有差异,再对两种方法的检测结果做两样本均数t检验,结果显示t=2.16
(查表P<0.05),表明两种方法的测定均数在统计学上有一定的差异。
但t检验不能给出总体参数间的差别大小,总体参数间的差别的推断需计算95%可信区间[1]。
做两样本均数差的95%可信区间为[0.0213,0.3672],满足CLIA’88[2] (美国在1988年提出的临床试验室改进修正案)对临床实验室的要求,血糖的允许误差范围±7%。
所以葡萄糖氧化酶法试剂盒的检验结果
是符合实验室要求的。
5 结论
GOD-POD法试剂盒的的检测结果在重复性、稳定性方面均与HK法相近,特异性均满足
一般临床实验室要求,与HK法相关性良好,且具有操作简单、快速,试剂盒较HK法便宜等
优点,通过多年试剂厂家不断改进和完善,现已适宜推广和使用。
日立-7180全自动生化分
析仪、试剂、校正品和质控品构成标准的检测体系,其中任何一要素的改变均可以认为是不
同检测体系,均可影响检测结果。
因此,在日常的工作中,选择与仪器匹配的试剂极其重要,评价的目的在于确定两种试剂盒的检测结果在允许范围内是否可靠,其结果有无可比性。
参考文献:
[1]颜虹.医学统计学.北京.人民卫生出版社.2005:92
[2]叶应妩,王毓三.全国临床检验操作规程.第4版.北京.人民卫生出版社.2015:1014。