lc ms原理

工业技术

104 2015年29期 LC-MS在组合化学合成及天然产物分离中的应用

王坚

华测检测认证集团股份有限公司，上海 201206

摘要：随着科学技术的进步，质谱联用在技术及应用方面取得了很大进展。正逐步发展成为—种常规应用的技术。天然产物是一个及其活跃的研究领域，从中可以发现和利用生物活性成分。会进一步推动LC—MS技术的发展，且随着该技术的不断完

善它在天然产物分析中必将发挥越来越重要的作用。

关键词：LC-MS；组合化学合成；天然产物分离 中图分类号：O657.63；O629 文献标识码：A 文章编号：1671-5810(2015)29-0104-02

1 LC-MC介绍 液相色谱质谱联用仪（liquid Chromatograph Mass

Spectrometer），简称LC-MS，是有机物分析市场中的高端仪

器。液相色谱（LC）能够有效的将有机物待测样品中的有机物成分分离开，而质谱（MS）能够对分开的有机物逐个的分

析，得到有机物分子量，结构（在某些情况下）和浓度（定

量分析）的信息。强大的电喷雾电离技术造就了LC-MS质谱图十分简洁，后期数据处理简单的特点。LC-MS是有机物分

析实验室，药物、食品检验室，生产过程控制、质检等部门

必不可少的分析工具。 2 LC-MS特点

液相色谱和质谱连接，可以增加额外的分析能力，能够

准确鉴定和定量像细胞和组织裂解液，血液，血浆，尿液和口腔液等复杂样品基质中的微量化合物。高效液相色谱质谱

系统（ABSciexEksigentLC-MS和LC-MS-MS）提供了一些独

特的优势，包括： （1）快速分析和流转所需的最少样品准备。

（2）高灵敏度并结合可分析多个化合物能力，甚至可

以跨越化合物的种类。 （3）高精确度，高分辨率鉴定和量化目标分析物。

3 LC—MS接口的基本原理

大气压电离（Atmosphericpressureionization，API）技术，API技术是当今质谱界最为活跃的领域，正是由于它

lc-ms原理

液相色谱质谱联用（liquid chromatography-mass spectrometry，LC-MS）是一种结合了液相色谱（LC）和质谱（MS）的分析技术。它通过将样品经过液相色谱分离后，再通过质谱进行物质的鉴定和定量分析。

在LC-MS中，样品首先通过液相色谱进行分离。液相色谱通过将样品溶解在移动相中，由于不同组分间的相互作用力不同，使得各组分以不同速度通过色谱柱。这样，样品中的组分就得以分离。分离后的组分进入质谱部分进行分析。

质谱部分是LC-MS的关键。质谱是一种对化学物质进行精确鉴定和定量分析的仪器。它通过将分离后的化合物通过电离源获得正电离，然后根据化合物的质量-电荷比（m/z）进行质谱分析。不同的化合物的质谱图有所区别，可以通过比对质谱图来确定待测物质的身份。

质谱的电离方式有多种，例如电喷雾电离（electrospray

ionization，ESI）和化学电离（chemical ionization，CI）等。这些电离方式可根据不同样品的性质来选择。通过质谱仪器的激光脱附电离（laser desorption ionization，LDI）还可以对固体样品进行分析。

LC-MS的应用范围广泛。它可以用于药物代谢研究、药物残留检测、环境分析、食品安全等领域。独特的分离和鉴定能力使得LC-MS成为许多科学研究和工业领域的重要分析工具。

Agilent 6490 QQQ操作规程

1. 使用条件：

使用安捷伦6400系列质谱仪时，要求使用220V（+5% ~ -10%，50 ~ 60Hz）单相交流电。注意！因为任何原因造成的断电，请关闭仪器面板左下角的开关，等待供电恢复10分钟以上再开启电源，否则有可能烧毁电路板。

2. 气体供应：

仪器运行时需提供纯度>99%的氮气作为喷雾与干燥气，输出压力为0.7 MPa

(100psi)。另外，仪器需要高纯氮气作为碰撞气，输出压力为0.15MPa (最大不要超过 0.2 MPa或30psi)。注意！过高的碰撞气分压有可能损坏仪器内部的电磁阀。

3. 仪器开机：

仪器从断电状态开机时，确认电源已经连接而且镇气阀处于关闭后，打开计算机，打开液相各模块电源，打开质谱前面左下角的电源开关，真空泵即开始工作，同时听到质谱里面溶剂切换阀切换的声音。大约2~3分钟后，听到第二声溶剂阀切换的声音即表明仪器自检完成，可以开启Masshunter软件与仪器通讯。

[如果MassHunter 工作站在之前曾经打开和关闭过，请确认在再次打开工作站之前，双击桌面的图标，以关闭MassHunter所有进程。若只需要用UPLC，不需要用到MS，也需要关闭MassHunter所有进程，点击图标，把Mass Spectrometer前面的“√”取消，再打开采集软件图标]

4. 仪器调谐：

仪器距离上次调谐超过一个月，或者重新开机预热后，建议调谐质谱仪以达到最佳使用状态。确认调谐液存量，以及管线已经连接到喷雾针之后，选择Masshunter的Tune界面，选择适当的极性，点击Check Tune, 系统会自动完成检查并给出报告。如果Check Tune报告不合格，则需要点击Auto Tune，系统会自动完成调谐并给出调谐报告。如果Auto Tune报告不合格，联系工程师。

5. 状态确认： 质谱仪正常工作时，前级真空1.8 ~ 3.5Torr；高真空5x10-5 ~ 5.8x10-5 Torr。在有喷雾时，毛细管电流应基本稳定，无跳跃式波动。

lc-ms

LC-MS/MS与色谱和多个四极质谱联用。 色谱系统首先分离不同的组分，浓缩量 到达质谱仪的每个单组分。 三重四极构型的第一个四极电离了分析物的分子。 选择的分子离子然后被碎裂 第二个四极，由第三个和最后一个四极选择性地隔离，用于探测器测量。 这一系列的分离、电离和选择性碎裂提供了高度的感觉 我发现了。 使用LC-MS/MS的检测水平可以像十亿分之几敏感，并且始终在百万分之几范围内。

McCrone Associates扩大了他们的质谱仪器套件。 一种新的液相色谱三四极质谱仪(LC-MS/MS)已上线，并符合美国的要求 硒。

LC-MS/MS允许检测低水平的污染物，具有高度的特异性和敏感性。

此外，对于一些样本矩阵，精确的定量是可能的。