生物化学 常用试剂配制

生物化学实验常用试剂的配制方法使用Ctrl+F 组合键可以快速的查找所需的配方。

1.0.5mol/L氢氧化钠溶液组份浓度0.5mol/L ；配制量2L配置方法1.准确称取氢氧化钠40g。

2.用去离子水溶解并稀释至2L。

2.0.5mol/L盐酸溶液组份浓度0.5mol/L ；配制量2L配置方法1.准确量取盐酸83.4mL。

2.用去离子水稀释至2L。

3.含0.5mol/L氯化钠的0.5mol/L氢氧化钠溶液组份浓度0.5mol/L氯化钠、0.5mol/L氢氧化钠；配制量1L配置方法1.准确量取氯化钠29.3g。

2.准确量取氢氧化钠20g。

3.用去离子水稀释至1L。

注意: 此溶液供回收纤维素时使用。

4、0.2％葡萄糖标准溶液组份浓度0.2％；配制量1L配置方法1.称取葡萄糖2.5g置于称量瓶中, 在70℃干燥2小时。

2.干燥器中冷却至室温, 重复干燥, 冷却至恒重。

3.准确称取葡萄糖2.000g。

4.用去离子水溶解并定容至1L 5.于4℃保存。

5.250μg/mL牛血清白蛋白标准液组份浓度250μg/mL ；配制量2L配置方法1.准确称取250mg标准牛血清白蛋白。

2.用0.03mol/LpH7.8的磷酸缓冲液溶解并定容至1L。

3.4℃保存。

6、Folin试剂.配置方.1.称取10g氢氧化钠溶于400mL去离子水中，加入50g无水碳酸钠，溶解，待用。

2.称取0.5g酒石酸钾钠，溶于80mL去离子水中，加入0.25g硫酸铜?5水，溶解。

3.将1：2：去离子水按20：4：1的比例混合即可.4.4℃保存，可用一周.7、Folin试剂乙配置方法:1.在500mL的磨口回流装置内加入钨酸钠?2水25.0359g, 钼酸钠?2水6.2526g, 去离子水175mL, 85％磷酸12.5mL, 浓盐酸25mL, 充分混合。

2.回流10小时, 再加硫酸锂37.5g, 去离子水12.5mL及数滴溴。

3.然后开口沸腾15min, 以驱除过量的溴, 冷却后定容到250mL。

常用试剂配制方法试剂是科学实验和研究中不可或缺的工具，常用的试剂包括溶液、稀释液、缓冲液、媒体液等。

在实验室中，通常需要根据具体的实验要求来配制各种试剂，合理的试剂配制方法能够确保试剂的质量和稳定性，保证实验结果的准确性和可重复性。

接下来将介绍一些常用试剂的配制方法。

1. 溶液的配制方法溶液是实验室中最常用的试剂之一，常见的溶液包括盐酸溶液、硫酸溶液、碳酸溶液、氢氧化钠溶液等。

溶液的配制主要是根据溶质的重量或体积浓度和所需的溶液体积来计算所需的溶质量或体积，并将溶质溶解在适量的水中。

以盐酸为例，盐酸的浓度通常以摩尔浓度（M）或质量浓度（%）来表示，假设需要制备500ml 1M的盐酸溶液，则按照下面的步骤进行：- 根据盐酸的摩尔质量和摩尔浓度计算出所需的盐酸质量。

- 取适量的去离子水，加入容器中。

- 缓慢地加入计算好的盐酸质量，并充分溶解。

- 加入适量的去离子水至最终体积为500ml。

2. 稀释液的配制方法稀释液通常用于稀释浓度较高的溶液，以得到所需的浓度。

稀释液的浓度计算方法非常简单，只需要使用C1V1=C2V2的公式即可，其中C1为原液的浓度，V1为原液的体积，C2为稀释液的浓度，V2为稀释液的体积。

以盐酸溶液为例，如果需要从浓度为6M的盐酸溶液稀释出100ml 1M的盐酸溶液，则按照下面的步骤进行：- 根据C1V1=C2V2的公式，计算出需要的盐酸的体积。

- 取适量的去离子水，加入容器中。

- 缓慢地加入计算好的盐酸体积，并充分溶解。

- 加入适量的去离子水至最终体积为100ml。

3. 缓冲液的配制方法缓冲液是用来维持溶液的pH稳定性的溶液，常用的缓冲液包括Tris缓冲液、磷酸缓冲液、乙酸缓冲液等。

缓冲液的配制需要根据所需的pH值来选择相应的缓冲剂和其酸性或碱性分量，并按照一定的比例混合制备。

以Tris缓冲液为例，Tris缓冲液的pH值通常在7-9之间，如果需要制备1L pH 7.4的Tris缓冲液，则按照下面的步骤进行：- 根据Tris缓冲液的pKa值和所需的pH值计算出所需要的Tris和酸性成分的摩尔比。

生物实验中常用的化学试剂配制方法1．乳酸苯酚固定液乳酸10g, 结晶苯酚10g, 甘油20g, 蒸馏水10mL。

2. 1.6%溴甲酚紫溴甲酚紫1.6g溶于100mL乙醇中，贮存于棕色瓶中保存备用。

用作培养基指示剂时，每1000mL培养基中参加lmL 1.6%溴甲酚紫即可。

3. V.P.试剂CuSO4 1g，蒸馏水l0mL，浓氨水40mL，10% NaOH 950mL。

先将CuSO4溶于蒸馏水中，然后加浓氨水，最后参加10%NaOH。

4. 0.02%甲基红试剂甲基红0.1g，95% 乙醇760mL，蒸馏水100mL。

5. 吲哚反响试剂对二甲基氨基苯甲醛8g, 95%乙醇760mL，浓HCl160mL。

6. Alsever’s血细胞保存液葡萄糖2.05g, 柠橡酸钠0.8g, NaCl 0.42g，蒸馏水l00mL。

以上成分混匀后，微加温使其溶解后，用柠檬酸调节pH 6.1，分装于三角瓶中(30～50mL/瓶), 113℃湿热灭菌15min，备用。

7. Hank’s液(l)贮存液A 液：(I)NaCl80g, KCl4g, MgSO4·7H2O1g，MgCl2·6H2O1g，用双蒸馏水定容至450mL：(II)CaCl2 1.4g (或CaCl2·2H2O 1.85g) 用双蒸馏水定容至50mL。

将I和II液混合，加氯仿1mL即成A液。

(2)贮存液B液：Na2HPO4·12H2O 1.52g，KH2PO4 0.6g, 酚红0.2g, 葡萄糖10g,用双蒸馏水定容至500mL，然后加氯仿1mL，酚红应先置研钵内磨细，然后按配方顺序一一溶解。

(3)应用液：取上述贮存液的A和B液各25mL，加双蒸馏水定容至450mL，113℃湿热灭菌20min。

置4℃下保存。

使用前用无菌的3% NaHCO3调至所需pH。

注意：药品必须全部用A.R试剂，并按配方顺序参加，用适量双蒸馏水溶解，待前一种药品完全溶解后再参加后一种药品，最后补足水到总量。

30%聚丙烯酰胺溶液-----30%（w/v）Acrylamide 100mL将29克丙烯酰胺和1克N,N’-亚甲丙烯酰胺溶于总体积为60ml温热（37℃左右）的去离子水中，充分搅拌溶解，补加水至终体积为100ml。

0.45µm微孔滤膜过滤除菌和杂质，储于棕色瓶，4℃避光（用铝箔纸包扎起来）保存。

严格核实PH不得超过7.0，因可以发生脱氨基反应是光催化或碱催化的。

使用期不得超过两个月，隔几个月须重新配制。

如有沉淀，可以过滤。

【保存条件】4℃避光（用铝箔纸包扎起来）保存【注意事项】丙烯酰胺具有很强的神经毒性并可通过皮肤吸收，其作用具有累积性。

称量丙烯酰胺和N,N’-亚甲丙烯酰胺时应戴手套和面具。

可认为聚丙烯酰胺无毒，但也应谨慎操作，因为它还可能含有少量未聚合材料。

5×Tris-甘氨酸电泳缓冲液----- 5×Tris-Glycine buffer （SDS-PAGE电泳缓冲液）称取15.0gTris，94.0g甘氨酸（glycine），5.0gSDS，用800ml蒸馏水或去离子水溶解，充分搅拌溶解，定容至1000ml，室温保存。

得0.125mol/L Tris-1.25mol/L甘氨酸电极缓冲液。

临用前稀释5倍。

【保存条件】室温保存，两年有效。

【注意事项】配制好的电泳液使用时间不宜超过两周。

电泳缓冲液可以回收，回收后可再使用1-2次，但为了取得最佳的电泳效果，应使用新电泳液。

摘自Takara 商品目录--实验室常规试剂配制方法10%十二烷基硫酸钠SDS溶液-----10%(w/v)SDS 配制20mL【组分浓度】10%(w/v)SDS【配制方法】称取2g高纯度的SDS置于100~200ml烧杯中，加入约16ml的去离子水，68℃加热溶解，滴加浓盐酸调节PH至7.2，定容至20ml后，室温保存【保存条件】室温保存【注意事项】对人体有害，请注意防护。

摘自Takara 商品目录--实验室常规试剂配制方法膜转移缓冲液(Transfer Buffer)配方一：takara称取2.9g甘氨酸（glycine），5.8gTris碱，0.37g SDS溶于约600mL的去离子水，充分搅拌溶解，定容至800mL后，并加入200ml甲醇，摇晃混匀，室温保存。

试剂配制方法一、实验室常用储备液（1）0.5mol/L EDTA（乙二胺四乙酸）在700ml 超纯水中溶解186.1g Na2EDT A·2H2O，在磁力搅拌器上剧烈搅拌。

用10mol/L NaOH调至PH8.0（约用10mol/L NaOH 50ml），补加超纯水至1L。

分装后高压蒸汽灭菌。

室温贮存。

注意：EDTA二钠盐需加入NaOH将溶液的PH值调至接近8.0，才会溶解。

（2）1mol/L Tri s·Cl将121.1g Tris碱溶于800ml超纯水中，用浓盐酸将PH值调至设定值。

PH值HCl7.4 70ml7.6 60ml8.0 42ml应使溶液冷却至室温后，方可最后调定PH值。

加超纯水定容至1L，分装后高压蒸汽灭菌。

如果配制的溶液呈现黄色，应予丢弃。

并使用质量更好的Tris。

Tris溶液的PH值因温度而异，温度每升高1℃，PH值大约降低0.03个单位。

（3）10mol/L 乙酸铵(NH4C2H3O2)将771g乙酸铵溶于800ml蒸馏水中，磁力搅拌至完全溶解，用蒸馏水定容至1L，过滤除菌，室温贮存。

乙酸铵在热水中分解，含有乙酸铵的溶液不能高压蒸汽灭菌。

（4）甘油（10％，V/V）用9体积的灭菌纯水稀释1体积的分子生物学级的甘油。

用0.22μm过滤器过滤除菌。

分装成1ml每份，-20℃贮存。

（5） 10mg/ml溴化乙啶(EtBr)在20ml双蒸水中溶解0.2g溴化乙啶，磁力搅拌数小时，以确保其完全溶解。

然后用铝箔包裹容器或将溶液转移至棕色瓶中，于4℃避光保存。

注意：溴化乙啶是一种诱变剂，必须小心操作。

（6） 70％乙醇（C2H5OH）100ml70ml无水乙醇溶于30ml蒸馏水。

（7） 50×葡萄糖Glucose（150ml储备液）将54g D-葡萄糖溶于超纯水，磁力搅拌至完全溶解，并将体积调至150ml，过滤除菌，室温贮存。

（8） 10mol/L氢氧化钠（NaOH）将400g NaOH颗粒，加入到一个约含有0.9L蒸馏水的烧杯中，磁力搅拌至完全溶解。

生物化学实验室常见溶液的配制方法在生物化学实验室中，常见的溶液配制方法包括质量法、体积法和浓度法。

一、质量法配制溶液1.配制质量浓度溶液：质量浓度即溶质质量与溶液体积的比值，通常用“%”表示。

配制质量浓度为C%的溶液的方法是将Cg的溶质溶解在100mL溶剂中，即可得到质量浓度为C%的溶液。

2.配制质量体积比溶液：质量体积比即溶质质量和溶剂体积的比值，常用比值表示。

例如，配制质量体积比为1:100的NaCl溶液的方法是在一个容器中称取1gNaCl，加入100mL溶剂搅拌溶解。

3. 配制稀释溶液：当我们已经有一定浓度的溶液时，需要得到较低浓度的溶液时，可以通过稀释的方法得到。

例如，如果需要从1mol/L的盐酸溶液中得到0.1mol/L的盐酸溶液，先取一定体积的1mol/L盐酸溶液，再用适量的溶剂稀释至目标浓度即可。

二、体积法配制溶液1. 配制体积浓度溶液：体积浓度即溶质体积与溶液体积的比值。

例如，配制体积浓度为C mol/L的盐酸溶液的方法是将浓度为C mol/L的盐酸用适量溶剂稀释，使体积变为1L。

2.配制体积体积比溶液：体积体积比即溶质体积与溶剂体积的比值，常用“v/v”表示。

例如，配制体积体积比为1:100的甲醇溶液的方法是先取1mL甲醇，再加入适量的溶剂，使体积变为100mL。

三、浓度法配制溶液在实验室中，常常需要根据所需浓度和溶液体积配制溶液，这时可以使用浓度法。

浓度法计算公式：C1V1=C2V2其中，C1为原溶液浓度，V1为原溶液体积，C2为目标溶液浓度，V2为目标溶液体积。

根据浓度法，可以灵活地根据实验需求来配制所需浓度的溶液。

需要注意的是，实验室配制溶液时应该遵循以下操作规范：1.所用容器和器皿应为洁净无尘，并用纯水冲洗干净。

2.配制质量浓度溶液时，应严格按照称重量配制，避免误差。

3.配制质量体积比溶液时，溶质应尽量完全溶解，可加热加速溶解过程。

4.配制体积浓度溶液时，使用体积瓶等精确仪器，并注意正确读取体积。

试剂的配制（1） 2,4—二硝基苯肼溶液Ⅰ．在15 mL浓硫酸中，溶解3g 2,4—二硝基苯肼。

另在70 mL 95%乙醇里加20 mL水。

然后把硫酸苯肼倒入稀乙醇溶液中，搅动混合均匀即成橙红色溶液。

（若有沉淀应过滤）Ⅱ．将1.2g 2,4—二硝基苯肼溶于50 mL 30%高氯酸中。

配好后储于棕色瓶中，不易变质。

I法配制的试剂2,4—二硝基苯肼浓度较大，反应时沉淀多便于观察。

Ⅱ法配制的试剂，由于高氯酸盐在水中溶解度很大，因此便于检验水溶液中的醛且较稳定，长期贮存不易变质。

（2）饱和亚硫酸氢钠水溶液先配制40 %亚硫酸氢钠水溶液。

然后在每100 mL的40 %亚硫酸氢钠水溶液中，加不含醛的无水乙醇25 mL，溶液呈透明清亮状。

由于亚硫酸氢钠久置后易失去二氧化硫而变质，所以上述溶液也可按下法配制：将研细的碳酸钠晶体（Na2CO3·10H2O）与水混合，水的用量使粉末上只覆盖一薄层水为宜。

然后在混合物中通入二氧化硫气体，至碳酸钠近乎完全溶解，或将二氧化硫通入1份碳酸钠与3份水的混合物中，至碳酸钠全部溶解为止。

配制好后密封放置，但不可放置太久，最好是用时新配。

（3）Schiff（希弗）试剂在100 mL热水里溶解0.2 g品红盐酸盐（也有叫碱性品红或盐基品红），放置冷却后，加入2g亚硫酸氢钠和2 mL浓盐酸，再用蒸馏水稀释到200 mL。

或先配制10 mL二氧化硫的饱和水溶液，冷却后加人0．2g品红盐酸盐，溶解后放置数小时使溶液变成无色或淡黄色，用蒸馏水稀释至200 mL。

此外，也可以将0.5 g品红的盐酸盐溶于100 mL热水中，冷却后用二氧化硫气体饱和至粉红色消失，加人0.5 g活性炭，振荡过滤，再用蒸馏水稀释至500 mL。

本试剂所用的品红是para-rossaniline（或称para-fuchsin,又称假红）。

此物与另一类似物rossaniline（或称fuchsin,称洋红）不同，现以它们的盐酸盐为例，对比结构式如下：C NH2 NH2NH2CH2IH-CNH2NH2CI-++3NH2品红溶液原是桃红色，被二氧化硫饱和后变成无色的Schiff试剂，其变化过程如下：C NH2 NH2NH2C NH2NH2+3NH2CI-+H2SO4SO3H+HCI NH2NH2 CSO3H +NHNHHC2SO2HSO2H 2SO2NH2Schiff试剂应密封贮存于暗冷处，倘若受热见光或露置空气中过久，试剂中的二氧化硫易失，结果又显桃红色，遇此情况，应再通入二氧化硫，使颜色消失后使用。

实验室常用试剂和缓冲液配方PBS（磷酸盐缓冲液）是一种常用的生物化学缓冲液，用于洗涤和稀释生物化学试样。

配方：-NaCl：8g-KCl：0.2g-Na2HPO4：1.42g-KH2PO4：0.24g将上述物质溶解在1升蒸馏水中，调节pH值至7.4、用1M（摩尔浓度）盐酸或1M氢氧化钠进行调节。

2. Luria-Bertani (LB) 培养基配方LB培养基是微生物学研究中常用的培养基，适用于大多数细菌和酵母菌的培养。

配方：- 水解酪蛋白（tryptone）：10 g- 酵母粉（yeast extract）：5 g-NaCl：10g将上述物质溶解在1升蒸馏水中，用1M盐酸或1M氢氧化钠调节pH 至7.0。

可以选择添加洗涤剂Tween-20（0.1%）以提高溶解度。

SSC缓冲液广泛用于核酸杂交实验等生物学研究中。

配方：-NaCl：175.3g- Na3Citrate·2H2O：88.2 g-EDTA：37.2g将上述物质溶解在1升蒸馏水中，调节pH值至7.0-7.2、可以选择添加DEPC（二硫酰二甲酯）处理，增强其功能。

4.甲醛溶液甲醛溶液常用于生物样品固定以及染色实验。

配方：-甲醛：37%-PBS或水将适量的甲醛加入PBS或水中，制备所需浓度的甲醛溶液。

5. β-羟丁酸钠（β-Hydroxybutyrate）溶液β-羟丁酸钠是一种常用的减少剂，用于生物化学实验中。

配方：-β-羟丁酸钠：1M根据需求将适量的β-羟丁酸钠溶解在合适的溶剂中。

这里只是列举了几个常见的试剂和缓冲液配方，实验室试剂和缓冲液种类丰富多样，具体使用取决于研究目的和实验要求。

在进行实验之前，建议仔细阅读相关文献和制造商提供的说明书，并按照正确的比例和步骤配制试剂和缓冲液。

第1篇一、实验目的1. 掌握常用生化试剂的配制方法。

2. 熟悉实验操作规范，提高实验技能。

3. 了解不同生化试剂的用途和注意事项。

二、实验原理生化试剂在生物化学实验中起着至关重要的作用，它们可以用于检测、分析、分离和鉴定生物分子。

本实验旨在通过配制不同类型的生化试剂，加深对实验原理和操作步骤的理解。

三、实验仪器与试剂1. 仪器：分析天平、移液器、容量瓶、烧杯、玻璃棒、滴定管、滴定台、试管等。

2. 试剂：氯化钠、氢氧化钠、硫酸铜、硼酸、葡萄糖、丙酮、苯酚等。

四、实验步骤1. 氯化钠溶液的配制a. 称取5.85g氯化钠，置于烧杯中。

b. 加入少量蒸馏水，用玻璃棒搅拌使其溶解。

c. 将溶液转移至100ml容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度线。

d. 摇匀溶液，备用。

2. 氢氧化钠溶液的配制a. 称取4.0g氢氧化钠，置于烧杯中。

b. 加入少量蒸馏水，用玻璃棒搅拌使其溶解。

c. 将溶液转移至100ml容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度线。

d. 摇匀溶液，备用。

3. 硫酸铜溶液的配制a. 称取0.5g硫酸铜，置于烧杯中。

b. 加入少量蒸馏水，用玻璃棒搅拌使其溶解。

c. 将溶液转移至100ml容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度线。

d. 摇匀溶液，备用。

4. 硼酸溶液的配制a. 称取5.2g硼酸，置于烧杯中。

b. 加入少量蒸馏水，用玻璃棒搅拌使其溶解。

c. 将溶液转移至100ml容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度线。

d. 摇匀溶液，备用。

5. 葡萄糖溶液的配制a. 称取5.0g葡萄糖，置于烧杯中。

b. 加入少量蒸馏水，用玻璃棒搅拌使其溶解。

c. 将溶液转移至100ml容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度线。

d. 摇匀溶液，备用。

6. 丙酮溶液的配制a. 称取5.0g丙酮，置于烧杯中。

b. 加入少量蒸馏水，用玻璃棒搅拌使其溶解。

c. 将溶液转移至100ml容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度线。

d. 摇匀溶液，备用。

7. 苯酚溶液的配制a. 称取5.0g苯酚，置于烧杯中。

实验室常用试剂缓冲液的配制方法实验室中常常需要使用各种试剂和缓冲液，以下是一些常用试剂和缓冲液的配制方法及其用途。

1.NaCl溶液配制：NaCl作为实验室常用的盐类试剂，可用于生化、分子生物学等多个实验室操作中。

常用浓度为0.9%（w/v）的生理盐水。

配制方法如下：称取对应质量的NaCl加入蒸馏水中，搅拌溶解，用蒸馏水调整至最终体积。

2.血红蛋白溶液配制：血红蛋白溶液可用于实验室的一些生化、免疫学等实验。

常用方法如下：从新鲜血液中分离出血红蛋白，加入适量的生理盐水或缓冲液，控制pH值为7.4-7.6，并用密闭容器保存。

3. Tris-HCl缓冲液配制：Tris-HCl缓冲液在生物化学实验中广泛应用于DNA/RNA电泳、蛋白质电泳等实验。

常用方法如下：按需求称取Tris固体加入一定量的去离子水中，搅拌溶解，用强碱（比如氢氧化钠）或强酸（比如盐酸）调整pH值至所需范围。

1. Tris缓冲液配制：Tris缓冲液常用于酶反应、凝胶电泳等实验中，配制方法如下：称取适量的Tris固体加入适量的去离子水中，搅拌溶解，用浓盐酸或盐酸调节pH值至所需范围，并用去离子水稀释至最终体积。

2.PBS缓冲液配制：PBS缓冲液在生物学实验中用于细胞培养、免疫染色等操作中。

配制方法如下：称取适量的NaCl、KCl、Na2HPO4、KH2PO4固体加入适量的去离子水中，搅拌溶解，并用去离子水稀释至最终体积，调整pH值至所需范围。

3. Tris-Borate-EDTA（TBE）缓冲液配制：TBE缓冲液常用于核酸凝胶电泳中，配制方法如下：称取适量的Tris固体加入适量的去离子水中，搅拌溶解，用浓盐酸或盐酸调节pH值至所需范围，然后加入Boric acid和EDTA固体，继续搅拌溶解，并用去离子水稀释至最终体积。

以上仅是一些常见的试剂和缓冲液的配制方法，实验室中还会使用到很多其他试剂和缓冲液。

在配制试剂和缓冲液时，需要注意选择合适的纯度的试剂、使用无菌器具和操作台，并遵循相应的实验操作规范和安全要求。

PBS:我们去买复合片，直接配制。

试剂名称：4%多聚甲醛-磷酸二氢钠/氢氧化钠：40ml500ml 配方操作过程A 液最好在500ml 的三角烧瓶中加热配制（低温比较难溶），至多聚甲醛完全溶解后冷却待 用。

注意，在溶解多聚甲醛时，要尽量避免吸入气体或溅入眼内。

B 液和C 液配制好后， 将B 液倒入。

液中，混合后再加入A 液，将pH 调至7.2〜7.4，最后，补充蒸馏水至500ml 充分混合。

或者将多聚甲醛 20g 、Na 2HPO4・2H 2O 3.44g 、NaOH 1.93g 直接溶于500ml 蒸馏水，将pH调至7.2〜7.4即可。

5>Tris-硼酸（TBE ）缓冲液（配制1L 溶液各成分的用量）Tris 碱54 g 硼酸27.5 g EDTA 2.92 g实际配 500ml ，那么 Tris 碱 27g ，硼酸 13.75g ，EDTA 1.46gWestern bloting 10%分离胶（两块胶，15ml ) 4%浓缩胶（两块胶 ，5 ml ) 超纯水6ml 超纯水 3.2ml 40%Acr/Bic5.25ml 40%Acr/Bic 0.55ml (37.5： 1)(37.5： 1) LT3.75 HT 1.25 10%AP80 m 10%AP 50 m TEMED 7.6 m TEMED 12.5 mRunning buffer (IX): Trisbase 3.03g;Glycine 18.8g;SDS1.0g 加水至1L所需药品及剂量：A 液：多聚甲醛20g溶于200ml 蒸馏水 B 液：N a HPO4-2H O 3.44g 溶于150ml 蒸馏水 C 液: NaOH1.93g 200ml 蒸馏水可以配成5X（5X电泳缓冲液配方：总量为1L； 15.1g Tris碱；72.0g甘氨酸；5.0gSDS）Transfer Buffer （IX）：甘氨酸 2.9gTris （MW121.14） 5.8gSDS 0.37g甲醇200ml，加蒸馏水至1000ml溶解后4°C保存，溶液可重复使用2-3次。

常用试剂配置方法常用试剂1.0 20 mM Tris-HCl（pH 7.1）缓冲液Tris碱 2.42 g0.02 mol/L盐酸91.2 mL加双蒸水至1000 mL酸度计检测pH，棕色瓶4℃保存。

*0.02 mol/L盐酸的配制：用洁净的2mL吸管吸取0.9mL浓HCl，加至预先装有300mL左右双蒸水的500mL烧杯中，然后倒入500mL 容量瓶中，用双蒸水稀释至500mL，盖上瓶塞，摇匀。

中华绒螯蟹血液抗凝剂2.0 罗氏沼虾血液抗凝剂罗氏沼虾血液抗凝剂（（1）柠檬酸三钠·2H2O 100mM（7.35g）EDTA-Na210 mM（0.93g）无水葡萄糖82mM（3.69g）NaCl 20mM（0.29g）10mM Tris-HCl 20mM Tris-HCl（pH7.1）（125mL）将Tris-HCl以外的各成分置于250mL烧杯中，用少量（约50mL）的DD水溶解，然后加入20mM Tris-HCl （pH7.1）125mL，用酸度计测pH，再用0.02 mol/L盐酸将pH调至7.56，倒入容量瓶中加入DD水至250mL。

罗氏沼虾血液抗凝剂（（2）3.0 罗氏沼虾血液抗凝剂柠檬酸三钠·2H2O 0.114M（8.38g）NaCl 0.1M（1.46g）用0.1N HCl调pH至7.45，加DD水至250mL▲淡水虾普遍使用改良的Alsever溶液溶液：：MAS））（改良的4.0 罗氏沼虾血液抗凝剂罗氏沼虾血液抗凝剂（（3）（柠檬酸钠（无水）30mM（0.8g）EDTA 11.6mM（0.34g）Tween80 10μl双蒸水100mlpH7.45血液抗凝剂（（AB，Smith and S?derh?ll,1983）氏原螯虾血液抗凝剂5.0 柯氏原螯虾血液抗凝剂NaCl 0.14M（0.82g）葡萄糖0.1M（1.8g）柠檬酸三钠（无水）30mM（0.8g）柠檬酸·H2O 26mM（0.55g）EDTA 10mM（0.29g）双蒸水100mlpH4.66.0 甲壳类抗凝剂NaCl 0.45M（2.63g）葡萄糖0.1M（18g）柠檬酸钠30mM（0.8g）柠檬酸·H2O 26mM（0.55g）EDTA 20mM（0.58g）双蒸水100mlpH4.5氏抗凝剂（中国对虾、日本鲟、菲律宾蛤仔使用效果较好）7.0 Alsever氏抗凝剂葡萄糖0.114M（2.05g）柠檬酸钠30mM（0.8g）NaCl 72mM（0.42g）双蒸水加至100ml8.0 CAD抗凝剂（配制方法参见蔡武城等《生物化学实验技术教程》，复旦大学生出版社，1983，47）柠檬酸三钠（Na3C6H5O7·2H2O）（分析纯） 1.32g柠檬酸（C6H5O7·H2O）（分析纯）0.44g无水葡萄糖（C6H12O6）（分析纯） 1.47g（或C6H12O6·H2O）1.32g置于三角烧瓶内，先用70~80℃新鲜蒸馏水或去离子水100ml溶解，再加入0.1~0.2g活性炭，搅拌后静置10min过滤，所得滤液即是。

常规试剂配制和测定方法一、溶液的配制1. Mandels营养盐溶液（1000 mL）名称重量（g）硫酸铵（(NH4)2SO4）14磷酸二氢钾（KH2PO4）20尿素（H2NCONH2） 3硫酸镁（MgSO4·7H2O） 3氯化钙（CaCl2·2H2O） 4 注：用煮沸10 min后的蒸馏水配制。

2. Mandels微量元素溶液（1000 mL）名称重量（g）氯化钴（CoCl2·6H2O） 3.7硫酸锌（ZnSO4·7H2O） 1.4硫酸锰（MnSO4·H2O） 1.6硫酸亚铁（FeSO4·7H2O） 5.0 注：用煮沸10 min后的蒸馏水配制。

3. DNS试剂的配制（1000 mL）（1）取：3,5-二硝基水杨酸（C7H4N2O7）7.5 g氢氧化钠（NaOH ）14.0 g充分溶解于1000 mL 水中（水预先煮沸10 min）（2）加入：酒石酸钾钠（C4H4O6KNa·4H2O）216.0 g苯酚（在50 ℃水浴中融化） 5.5 mL偏重亚硫酸钠（Na2S2O5） 6.0 g（3）充分溶解后盛于棕色瓶中，放置5天后便可使用，平时盛一小瓶(250 mL)使用，要放在冰箱中冷藏。

此溶液每月配制一次。

注意：倒入瓶中时要尽量装满！！4. 考马斯亮蓝G-250的配制（1000 mL）称考马斯亮蓝G-250 100 mg即0.1g溶于50mL 95%乙醇中，加入100 mL 85 %磷酸，用蒸馏水稀释至1000 mL ，滤纸过滤。

最终试剂中含0.01 %（w/v）考马斯亮蓝G-250，4.7 %（w/v）乙醇，8.5 %（w/v）磷酸。

5. 1.0 M柠檬酸缓冲溶液的配制（1000 mL）名称分子量Mn 重量(g) 柠檬酸（C6H8O7·H2O）210 210NaOH 40 74.5准确称取柠檬酸210 g，溶于约750 mL煮沸（10 min）蒸馏水中，待柠檬酸充分溶解后加入氢氧化钠74.5 g，完全溶解后将上述溶液转移到1000 mL容量瓶中，冷却后将容量瓶定容到1000 mL（原始pH4.45）。

实验室常用生化试剂配方实验室中常用的生化试剂有很多种，下面是一些常见的生化试剂及其配方的介绍：1.磷酸缓冲液（PBS）PBS是一种常用的缓冲液，用于洗涤细胞和组织，以及稀释试剂等。

它的配方通常包括：-NaCl：8g-KCl：0.2g-Na2HPO4：1.44g-KH2PO4：0.24g将以上试剂溶解于1L去离子水中，调节pH至7.42. Tris缓冲液Tris缓冲液用于调节溶液的pH值，常用于分子生物学实验。

其配方为：- Tris-HCl：12.11 g将Tris-HCl溶解于1L去离子水中，调节pH至所需值。

3.氢氧化钠（NaOH）溶液NaOH是一种常用的碱试剂，可用于调节pH、溶解蛋白质等。

其常见配方为：-NaOH：4g将NaOH溶解于1L去离子水中。

4.氯仿／异丙醇提取液氯仿／异丙醇提取液常用于分离DNA或RNA。

其配方为：-氯仿：24mL-异丙醇：25mL-TE缓冲液：1mL将以上试剂混合，并轻轻摇匀。

5.碳酸氢钠（NaHCO3）缓冲液NaHCO3是一种常用的缓冲液，可用于调节溶液的pH值。

其配方为：-NaHCO3：8.4g将NaHCO3溶解于1L去离子水中，调节pH至所需值。

6.绿色荧光蛋白（GFP）提取液GFP提取液用于提取含有GFP标记的蛋白质。

其配方为：- Tris-HCl（pH 7.5）：50 mM-NaCl：150mM-EDTA：1mM- Triton X-100：1%将以上试剂混合，并用PBS稀释至所需浓度。

7.锌离子（Zn2+）溶液锌离子溶液可用于一些酶活性实验。

其配方为：-ZnSO4·7H2O：2.19g将ZnSO4·7H2O溶解于1L去离子水中。

8.溶血液溶血液常用于红细胞计数等实验。

其配方为：-生理盐水：9mL-甲苯：1mL将以上试剂混合，即可得到溶血液。

这只是一小部分生化试剂配方的介绍，实验室中常用的试剂配方非常多，根据具体实验的需要，需要选择合适的试剂及其配方。

实验常用试剂缓冲液的配制方法试剂是进行科学实验和研究所必需的物质。

常用试剂包括化学品、酶、抗体等。

缓冲液则是在实验中用于稳定溶液pH值的溶液。

下面将介绍几种常用试剂和缓冲液的配制方法。

1.硫酸铜溶液硫酸铜溶液常用于定量分析和化学反应。

其配制方法如下：(1) 准备100ml容量瓶，称取1.27g的硫酸铜并将其溶解于去离子水中。

(2)加入去离子水至容量瓶刻度线，均匀摇匀。

2.盐酸盐酸常用于酸碱中和实验及有机合成。

其配制方法如下：(1) 准备500ml容量瓶，称取36.5-37.5%的盐酸浓缩液25ml。

(2)加入去离子水至容量瓶刻度线，均匀摇匀。

3.硝酸银溶液硝酸银溶液常用于检测氯离子的存在。

其配制方法如下：(1) 准备100ml容量瓶，称取2.91g的硝酸银固体并将其溶解于去离子水中。

(2)加入去离子水至容量瓶刻度线，均匀摇匀。

4.碘液碘液常用于检测淀粉的存在。

其配制方法如下：(1) 准备100ml容量瓶，称取0.25g的碘固体，并将其溶解于去离子水中。

(2)加入去离子水至容量瓶刻度线，均匀摇匀。

缓冲液是在实验中用于稳定溶液pH值的溶液，常用于生物化学、细胞生物学和分子生物学实验中。

以下是几种常用缓冲液的配制方法：1. Tris缓冲液(1) 准备所需的Tris酸和盐酸。

(2)打开pH计，将电极插入去离子水中进行校准。

(3) 在磁力搅拌器上加热约800ml去离子水至70-80℃。

(4) 将7.94g Tris酸加入加热的去离子水中，搅拌溶解。

(5) 加入约5ml盐酸，搅拌均匀，并用盐酸调节溶液至所需pH值。

2.PBS缓冲液(1)准备所需的磷酸二氢盐、氯化钠和氯化钾。

(2) 在磁力搅拌器上加热约800ml去离子水至70-80℃。

(3)将0.2g磷酸二氢盐、8g氯化钠和0.2g氯化钾加入加热的去离子水中，搅拌溶解。

(4)用盐酸或氢氧化钠调节溶液至所需pH值。

3. Tris-HCl缓冲液(1) 准备所需的Tris酸和盐酸。

实验常用试剂、缓冲液的配制方法当溶液的浓度表示为物质的量浓度时，单位为摩尔每升(mol/L)，量的符号为c[例如c (HNO3)=1mol/L]；当溶液的浓度表示为质量浓度时，单位为克每升（g/L）、微克每毫升（μg/ml）等，量的符号为ρ[例如ρ（U）=10.0μg/ml ]；如果溶液浓度以质量分数给出量的符号为ω[例如ω(NaCl)=10% ，表示100g 该溶液中含有10g 氯化钠，即10g氯化钠溶于90g 水中] ，单位无量纲；如果溶液浓度以体积分数给出，量的符号为ψ[例如ψ(HCl)=5% ，表示100mL 该溶液中含有浓盐酸5mL] ，单位无量纲。

1、1M Tris-HCl□组份浓度1 M Tris-HCl （pH7.4，7.6，8.0）□配制量1L□配置方法1. 称量121.1gTris置于1L烧杯中。

2. 加入约800mL的去离子水，充分搅拌溶解。

3. 按下表量加入浓盐酸调节所需要的pH值。

pH值浓HCl7.4 约70mL7.6 约60mL8.0 约42mL4. 将溶解定容至1L。

5. 高温高压灭菌后，室温保存。

注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH值随温度的变化差很大，温度每升高1℃，溶液的pH 值大约降低0.03个单位。

2、1.5 M Tris-HCl□组份浓度1.5 M Tris-HCl （pH8.8）□配制量1L□配置方法1.称取181.7gTris置于1L烧杯中。

2. 加入约800mL的去离子水，充分搅拌溶解。

3. 用浓盐酸调pH值至8.8。

4. 将溶液定容至1L。

5. 高温高压灭菌后，室温保存。

注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大，温度每升高1℃，溶液的pH值大约降低0.03个单位。

3. 将溶液定至1L后，高温高压灭菌。

4. 室温保存。

4、3 M 醋酸钠□组份浓度3 M 醋酸钠（pH5.2）□配制量100mL□配置方法1. 称取40.8gNaOAc•3H2O置于100～200mL烧杯中，加入约40mL的去离子水搅拌溶解。