抗氧化剂的抗氧化活性的测定方法及其评价

抗氧化物活性测定方法总结抗氧化物活性测定方法是通过对样品中的抗氧化物质含量和抗氧化活性进行定量分析，评估其对自由基的清除能力和抗氧化能力。

随着抗氧化研究的不断深入，测定方法也逐渐完善。

以下是对常见的抗氧化物活性测定方法的总结。

1. ORAC法（氧化应激反应活性测定法）：该方法通过测定样品清除自由基的能力来评估其抗氧化活性。

实验中，将样品与荧光试剂（如2,2'-azobis(2,4-dimethylvaleronitrile)）共同作用，观察其清除自由基的能力，并通过建立标准曲线计算样品的ORAC值。

2.DPPH法（1,1-二苯基-2-苦味基-苦味酸磷）：该方法是一种常用的快速测定抗氧化活性的方法。

实验中，将样品与DPPH稳定自由基共同作用，通过比色反应观察DPPH自由基被样品清除的程度，从而评估抗氧化活性。

3.ABTS法（2,2'-联氮双5-苯砜酸）：该方法通过ABTS离子自由基的生成和清除反应来测定样品的抗氧化活性。

实验中，ABTS与过氧化氢反应生成ABTS离子自由基，通过观察样品对其的清除能力来评估抗氧化活性。

4.FRAP法（亚铁离子还原能力）：该方法基于样品对人造抗坏血酸（Fe3+）的还原能力，通过测量还原后的Fe2+离子的生成量来评估抗氧化活性。

实验中，将样品与Fe3+离子反应生成Fe2+离子，通过比色反应来测定Fe2+的含量。

5. 碘标法（Iodine value）：该方法用于测定油脂、脂肪等样品的抗氧化活性。

实验中，将已知量的碘与样品中的不饱和化合物反应，在光反应下观察反应终点的颜色变化，并根据标准曲线计算样品的抗氧化活性。

6. 硝酸盐法（Nitrite method）：该方法用于测定样品中亚硝酸盐的含量，从而评估其抗氧化活性。

实验中，样品经过还原反应生成亚硝酸盐，然后与DANO（N-乙基-N-（2-苯基乙基）-对硝基苯胺）反应生成稳定的偶氮染料，通过比色测定反应终点的吸光度来计算样品中亚硝酸盐的含量。

抗氧化物活性测定方法总结抗氧化物活性 (antioxidant activity)描述了化学物质在抑制或减少氧化反应中所起的作用。

抗氧化物是一类具有亲电子的分子，它们容易被氧化，从而中和自由基。

抗氧化物具有重要的生物学和医学意义，因为氧化损害是许多疾病和老化的主要原因。

因此，抗氧化物活性测定方法是目前研究的热点之一，现将抗氧化物活性测定方法进行总结:1. DPPH法：该方法是一种常用的体外抗氧化测定方法。

含有DPPH（1,1-二苯基-2-三硝基苯肼）的溶液表现为紫色，DPPH自由基上的氢原子被抗氧化物夺取后，DPPH自由基变成无色，从而可以通过紫外可见光谱测定其吸光度的降低来表示抗氧化物活性。

2. ABTS法：该法通过测定2,2’-联氮双(3-乙基苯并咪唑啉硫酸铵) (ABTS)自由基的消除能力来测定抗氧化活性。

该法也是一种体外抗氧化测定方法，溶液发生颜色变化，从而通过紫外可见光谱测定其吸光度的降低来表示抗氧化物活性。

3. ORAC法：ORAC（氧化还原能力值）法对不同化学物质的体内抗氧化活性进行定量测定，其原理是将抗氧化剂加入与有氧气气氛接触的荧光染料溶液中，由于受到氧自由基的攻击，染料随着时间流逝会逐渐减少。

为了确定不同化学物质的抗氧化活性，十分重要的是应该不断输入氧自由基。

4. FRAP法：铁还原能力 (FRAP) 方法测量样品对Fe3+的还原能力，其原理是将含有Fe3+的试液与抗氧化剂反应后，Fe3+被还原为Fe2+，测试Fe2+的含量即可评估抗氧化剂的抗氧化性能。

5. TBARS法：该方法是用于评估脂质过氧化物含量，从而推断抗氧化剂的能力。

该评估方法是通过测定细胞膜上的脂质过氧化产物（丙二醛）来分析抗氧化剂活性。

6. Total Phenolic Content (TPC)法：该方法最初是用来测定葡萄酒和咖啡中酚类化合物含量的。

后来发现大多数植物成分含有大量的酚类化合物，故也用于测定植物中的酚类含量。

抗氧化剂的测定摘要：综述了抗氧化剂抑制脂质氧化、清除自由基、抑制自由基对底物的氧化降解以及还原能力4类测定抗氧化活性的方法，并讨论了评价或表征测定结果的方法和参数以及对测定方法的要求。

关键词：抗氧化剂，抗氛化活性，测定方法。

测量脂质氧化的方法很多，以过氧化值、共扼二烯、TBARS法和气相色谱法最为常用。

各种方法都有优缺点，实际测定中将各种方法结合使用。

1.ABTS法ABTS法最初是Marklund根据含有蛋白质的血红素过氧化物酶能使无色的ABTS[2,2'-azinobis-(3-ethylbenzthiazoline-6-sulfonic acid ) d iammoniumsalt,2,2-连氮-(3-乙基苯并唾哇琳-6-磺酸)二按盐]变成蓝绿色的ABTS·十，用于测定组织样品中血红蛋白的含量[1]。

后来这个方法被Miller等人加以改进，用于测定生物样品的抗氧化活性[2]，然后广泛应用于食品和天然水溶性酚类物质抗氧化活性的测定.ABTS法广泛用于评价抗氧化剂清除自由基的能力。

此法快速简单.可用于常规测定。

但对于同一物质，测得的TEAC值往往不同，例如，在不同的研究中，栋精的TEAC值分别为3.1和6.4。

这不仅与具体的测试方法有关，即使同一方法，TEAC值也有可能不同，例如，用同样的方法，栋精浓度为1.5和1.0μmol/L时的TEAC分别为5.6和6.4。

ABTS·十在与氢原子供体的反应中选择性差是此法又一个不足，它可与任何羟基化的芳香族化合物反应，这与它们实际抗氧化能力无关，TEAC值也包括对抗氧化不起作用的羟基。

2.DMPD +法Fogliano等人提出的清除自由基的方法与ABTS法类似:在酸性条件下，DMPD (N, N-dimethyl-pphenylenediamine)可被ABAP,Fe C13,CU C12,H202氧化，生成稳定的DMPD·+，它在505nm处有最大吸收峰。

3种抗氧化活性测定方法抗氧化活性测定是评估物质抗氧化能力的重要方法，常用于食品、药物和化妆品等领域。

下面将介绍三种常用的抗氧化活性测定方法。

一、DPPH自由基清除法DPPH(2,2-二苯基-1-苦味肼)是一种常用的抗氧化剂，它能采用紫色的自由基形式存在，并且在反应中会转变为无色的稳定形式。

DPPH自由基清除法是一种简单而直观的测定方法。

该方法的基本原理是将待测物添加到预先溶解的DPPH中，反应一段时间后，根据颜色变化程度来评估抗氧化活性。

通过测量样品溶液吸光度的降低来计算其清除率，清除率越高，抗氧化能力越强。

二、FRAP法FRAP(铁还原能力)法是一种评估抗氧化物质电子给予能力的方法。

抗氧化物质能够通过给予电子来中和自由基的电子，从而保护细胞免受氧化损伤。

FRAP法通过反应产生的铁（II）络合物的吸光度变化来评估样品的抗氧化能力。

具体操作中，将待测物加入到铁（III）试剂（通常为铁(III)氯化物）中，待反应一定时间后，读取吸光度。

样品的抗氧化能力可以通过吸光度的变化来计算。

三、TBARS法TBARS(硫代巴比妥酸反应物)法是一种评估脂质过氧化的方法。

脂质过氧化是一种自由基引起的反应，会导致脂质的氧化和脂质分解产生不稳定化合物。

TBARS法主要用于评估食品和药物等样品中脂质过氧化的程度。

该方法通过将待测样品与反应试剂（如硫代巴比妥酸）反应生成稳定的色素产物，然后测量这种产物的吸光度来评估脂质过氧化的程度。

吸光度越高，脂质过氧化程度越高。

综上所述，DPPH自由基清除法、FRAP法和TBARS法是常用的抗氧化活性测定方法。

每种方法都有其独特的原理和应用范围，选择适合的方法可以准确评估样品的抗氧化能力。

在实际应用中，可以根据实验需求选择合适的方法，或结合多种方法综合评估抗氧化活性。

食品成品中抗氧化活性的检测方法研究引言食品中的抗氧化活性是食品质量和营养价值的一个重要指标。

抗氧化活性不仅可以延缓食品的衰老和品质变化，还可以对抗自由基的损害，减少慢性疾病的发生风险。

因此，对食品抗氧化活性进行准确的检测具有重要意义。

本文将介绍常用的食品成品中抗氧化活性的检测方法，并对其优缺点进行分析。

一、化学法化学法是一种常见的食品抗氧化活性检测方法，常用的化学法有DPPH法、抗坏血酸法和总酚法等。

这些方法主要通过与氧化剂反应产生颜色变化或电子转移来评估食品中的抗氧化能力。

其中，DPPH法是一种简单易行的方法，通过检测食品成品中抗氧化剂与DPPH自由基发生反应时产生的颜色变化程度来判断样品的抗氧化活性。

抗坏血酸法则是通过检测食品样品中抗坏血酸的含量来评估其抗氧化活性。

总酚法是通过测量食品中的总酚含量来确定其抗氧化能力。

这些方法简便易行，且成本较低，是常用的食品抗氧化活性检测方法。

然而，化学法也存在一些局限性。

首先，这些方法只能评估样品中某一种抗氧化剂的抗氧化活性，不能全面评估样品的整体抗氧化能力。

其次，由于食品中存在多种复杂的化合物，这些方法往往无法准确区分其中的抗氧化剂。

因此，在实际应用中需要结合其他方法进行综合分析。

二、生物法生物法是近年来新兴的食品抗氧化活性检测方法，涉及到生物学方面的研究。

生物法的一种常见方法是细胞实验法，利用细胞对氧化应激的响应来评估食品中的抗氧化活性。

这种方法可以模拟人体内的环境，较好地反映食品对于人体健康的实际影响。

例如，使用人体肝细胞株进行细胞实验，通过测量细胞存活率、ROS产生水平等指标来评估样品的抗氧化能力。

生物法的主要优势在于可以全面评估样品的整体抗氧化能力，且具有较好的生物学意义。

然而，生物法也存在一些限制。

首先，该方法在实验操作上较为繁琐，需要较长的实验时间。

其次，细胞实验法所涉及的细胞株选择和实验条件的控制都会对结果产生影响，需要进行更多的标准化工作。

天然抗氧化剂抗氧化活性的测定及应用的开题报告导言近年来，由于人类的活动不断加剧，环境污染等因素不断加强，自由基的产生量显著增加。

自由基具有高度活性和不稳定性，能破坏细胞结构与功能，影响人体的健康。

因此，研究寻找天然抗氧化剂成为当今生命科学的热点之一。

天然抗氧化剂能够清除自由基，具备较强的抗氧化活性，对细胞损伤有保护作用。

本文以天然抗氧化剂为研究对象，通过实验研究，探讨了抗氧化剂的测定方法并分析其应用。

1. 抗氧化剂的测定方法1.1 ORAC法ORAC法（氧自由基抗氧化能力测定法）是一种用来测定化合物的能够清除自由基生成的耗氧量的方法。

该方法通过比较测试物所需的最小活性物质与标准物质Trolox之间的差异，来推断样品的抗氧化能力强度。

实验步骤：1. 提取物质样品，并冷冻离心。

2. 将样品加入荧光底物和相应的自由基发生剂到黑色微孔板中。

3. 将样品和荧光底物混合，并根据流程表执行程序。

4. 将样品的荧光读数和一个标准品的荧光读数进行比较，计算ORAC值。

1.2 ABTS法ABTS法是一种基于抗氧化剂溶液与自由基生成剂ABTS的显色度变化来确定其抗氧化能力的方法。

该方法主要关注抗氧化剂中电子转移反应催化剂的能力，作为反应级数的关键过程，通过颜色的变化可以分析出抗氧化剂的浓度。

实验步骤：1. 准备稳定的有机自由基发生剂，如2,2'-联氨基双-(3-乙基苯咪唑-6-磺酸)（ABTS）酸。

2. 制备抗氧化剂样品，可以使用不同的物质，包括天然物质如花色素或坚果中的天然酚类化合物等。

3. 混合抗氧化剂样品和ABTS溶液。

4. 等待反应完成，记录颜色的变化或吸收光谱的变化，计算出抗氧化剂的抗氧化活性。

2. 抗氧化剂的应用由于抗氧化剂的高度清除自由基和保护细胞的能力，因此被广泛应用于医药、食品、生物材料等多个领域。

2.1 医药领域抗氧化剂可以预防许多疾病的发生，如心脏病和某些种类癌症。

它们还可以延缓人体老化的过程，并促进人类生命的健康与长寿。

抗氧化物活性测定方法总结引言：抗氧化物活性测定在食品、医药、化妆品以及生命科学等领域具有重要应用。

目前，常用的抗氧化物活性测定方法主要包括化学法、生物法和物理法。

本文将对这几种方法进行总结。

一、化学法1.1.DPPH自由基法该方法是目前应用最广泛的抗氧化活性测定方法之一、通过DPPH自由基与抗氧化物发生反应，使DPPH自由基得以还原为无色溶液，测定溶液的吸光度来评估抗氧化活性。

1.2.ABTS自由基法该方法通过生成具有特定吸光度的ABTS自由基，评估抗氧化物对自由基的清除能力。

与DPPH自由基法相比，ABTS自由基法具有更高的灵敏度和稳定性。

1.3.羟自由基清除法该方法利用特定的化学反应，测定样品对羟自由基的清除能力，评估其抗氧化活性。

该方法适用于抗氧化物活性测定和体外抗氧化活性评价。

1.4.过氧化物清除法该方法测定样品对过氧化物的清除能力，通过测定生成的不稳定的自由基产物的分解速率，评估抗氧化活性。

该方法适用于测定生物样品的抗氧化活性。

二、生物法2.1.脂质过氧化抑制能力测定法该方法通过测定样品对脂质过氧化的抑制能力，评估其抗氧化活性。

常用的指标包括丙二醛生成量、硫代巴比妥酸反应物（TBA）生成量等。

2.2.DNA损伤保护能力测定法该方法通过测定样品对DNA损伤的保护能力，评估其抗氧化活性。

常用的指标包括DNA链断裂率、碱基损伤率等。

2.3.超氧化物歧化酶（SOD）活性测定法该方法测定样品中SOD的活性，评估其清除超氧自由基的能力。

常用的指标包括抑制率、相对酶活等。

2.4.过氧化氢酶（CAT）活性测定法该方法测定样品中CAT的活性，评估其清除过氧化氢的能力。

常用的指标包括催化剂浓度、酶单位等。

三、物理法3.1.相对电子自旋共振法该方法通过测定样品中的自由基产物的电子自旋共振信号的强度，评估抗氧化物的活性。

常用的指标包括g值、线宽等。

3.2.高温氧化法该方法利用样品在高温条件下的氧化反应，评估其抗氧化活性。

抗氧化活性测定方法抗氧化活性测定方法在食品、药物、化妆品以及生物学研究中具有重要的应用价值。

抗氧化活性是指物质对自由基的清除能力，其测定方法可以评估物质的抗氧化性能和保护细胞免受氧化损伤的能力。

本文将介绍一些常用的抗氧化活性测定方法。

一、DPPH自由基清除法DPPH自由基清除法是目前应用最广泛的抗氧化活性测定方法之一、该方法基于DPPH自由基的紫色溶液，在受到氧化损伤时会褪色。

通过测定样品对DPPH自由基的清除能力，可以评估其抗氧化活性。

实验步骤：1.准备0.1mM的DPPH溶液。

2.取一定量的样品，加入适量的溶剂溶解。

3.取不同浓度的样品溶液，加入相同量的DPPH溶液。

4.静置反应一定时间后，通过测量溶液的吸光度变化，计算出样品的抗氧化活性。

二、还原能力测定法还原能力测定法是一种常用的抗氧化活性测定方法。

该方法基于物质对氧化剂的还原能力，通过测定还原剂浓度与吸光度之间的关系，评估样品的抗氧化活性。

实验步骤：1.准备一系列不同浓度的还原剂溶液。

2.取一定量的还原剂溶液，加入适量的氧化剂溶液。

3.静置反应一定时间后，通过测量溶液的吸光度变化，计算出还原剂的浓度与吸光度之间的关系。

4.根据吸光度与还原剂浓度的关系，评估样品的抗氧化活性。

三、总抗氧化能力测定法总抗氧化能力测定法是一种综合评估样品抗氧化活性的方法。

该方法基于样品的抗氧化剂含量和抗氧化活性，通过测定样品对氧自由基的清除能力，评估其总抗氧化能力。

实验步骤：1.准备一定浓度的氧自由基溶液。

2.取一定量的样品，加入适量的溶剂溶解。

3.取不同浓度的样品溶液，加入相同量的氧自由基溶液。

4.静置反应一定时间后，通过测量溶液的吸光度变化，计算出样品的抗氧化活性。

以上是常用的抗氧化活性测定方法，还有其他一些方法如ORAC法、TEAC法等也被广泛应用。

不同的方法适用于不同的样品和测定目的，选择适合的方法进行测定可以更准确地评估样品的抗氧化活性。

3种抗氧化活性测定方法抗氧化活性测定方法是评估化合物或材料抗氧化性能的一种重要手段。

随着抗氧化活性的研究日益深入，目前已经发展出很多种测定方法。

以下将介绍三种常用的抗氧化活性测定方法：DPPH自由基清除法、Fe2+/Fe3+还原能力法和ABTS自由基清除法。

1.DPPH自由基清除法：DPPH（2,2-二苯基-1-苦味肼）是一种紫色的自由基，常用于评估化合物或材料的抗氧化活性。

该方法基于DPPH自由基与抗氧化物质发生反应后，颜色由紫色变为淡黄色或无色。

测定方法简单，操作方便。

其原理是待测样品与DPPH混合后，通过电子或氢的转移反应，DPPH自由基将被清除，溶液颜色由紫色转变为淡黄色。

根据吸光度变化可以计算出自由基清除率，进而评估抗氧化活性。

2.Fe2+/Fe3+还原能力法：该方法基于还原能力测定抗氧化物质对Fe3+离子的还原能力。

常用的试剂是FeCl3溶液和TPTZ（2,4,6-三聚吡啶甲酸）、酸性pH缓冲液。

其原理是待测样品能够还原Fe3+离子为Fe2+离子，Fe2+离子与TPTZ反应生成有颜色的络合物，通过分光光度计测定络合物的吸光度变化，进而计算出还原能力。

较高的吸光度变化表示较高的抗氧化活性。

3.ABTS自由基清除法：ABTS（2,2'-联氨基双(3-乙基苯并噻唑啉-6磺酸)）自由基是一种蓝绿色自由基，其浓度在紫外可见光区域有最大吸收。

该方法基于ABTS自由基清除率来评估抗氧化物质的抗氧化活性。

该方法较DPPH法和还原能力法更为灵敏。

其原理是待测样品与ABTS自由基反应后，ABTS自由基将被清除，溶液颜色由蓝绿色变为无色或浅黄色。

通过测定吸光度的变化，可以计算出自由基清除率，进而评估抗氧化活性。

除了上述常用的抗氧化活性测定方法外，还有很多其它方法也被广泛应用于抗氧化活性的评估，如氧化还原测定法、Fenton反应法、还原剂抑制能力法等。

每一种测定方法都有其独特的原理和适用范围，研究人员可以根据具体的研究目的和样品性质选择合适的测定方法。

抗氧化物活性测定方法（倾向于考虑DPPH法和ORAC法）1.FRAP法:铁离子还原抗氧化能力测定法[1]FRAP(ferric ion reducing antioxidant power)方法，在低pH值的溶液中，Fe3+-TPTz(Fe3+-三吡啶三嗪)被抗氧化剂还原成有色的Fe2+-TPTZ。

反应的结果常以Fe2+当量或标准物质的抗氧化能力表示。

该法快速简便、易于操作、重复性好，但FRAP反应属于电子转移(SET)反应，因此FRAP方法不能够测定氢转移反应(HAT)起作用的物质。

而且该法实际测定的是待测生物活性物质将Fe3+还原为Fe2+的能力，因此没有抗氧化能力的生物学相关性。

2.TEAC法(trolox equivalent antioxidant capacity)ABTS(2,2'-amino-di(2-ethyl-benzothiazoline sulphonic acid-6)ammonium salt,2,2'氨基-二(3-乙基-苯并噻唑啉磺酸-6)铵盐)与过氧化物酶和氢过氧化物在一起形成ABTS+阳离子自由基。

在抗氧化剂存在时，这种自由基混合物的光吸收值下降，下降程度取决于抗氧化剂的抗氧化能力，测得的结果以TEAC表示，即被测抗氧化剂清除ABTS·+的能力(吸光度大小的变化)与标准抗氧化剂trolox(VE的水溶性类似物)清除ABTS·+的能力的比值。

TEAC法十分简单，适用于大量样品的分析检测。

但是，ABTS·+并非生理自由基，缺乏生理相关性，而且与FRAP方法相似，ABTS·+与不同抗氧化剂问的氧化反应时间不同，因此，只能定性不能定量评价样品的抗氧化能力。

3.DPPH法[2，3](2，2-diphenyt-l-picrylhydrazyl radical scavenging capacity)DPPH·(二苯代苦味肼基自由基)法是较常用的方法之一。

抗氧化活性研究方法引言：氧化反应是指分子或原子失去电子，而还原反应是指分子或原子获得电子。

由于氧化反应产生的自由基具有高度活性，能够对细胞结构和功能造成损害，导致多种疾病的发生。

因此，研究抗氧化活性及其机制对于预防和治疗这些疾病具有重要意义。

本文将介绍几种常用的抗氧化活性研究方法。

一、DPPH自由基清除能力测定法DPPH自由基清除能力测定法是一种常用的抗氧化活性测定方法。

DPPH（2,2-二苯基-1-苦味肼）是一种紫色自由基，其颜色随着氧化程度的增加而减弱。

在该方法中，将待测样品与DPPH溶液混合，通过测定混合液的吸光度变化来评估样品的抗氧化活性。

抗氧化活性强的样品能够清除DPPH自由基，使其浓度降低，从而导致吸光度的下降。

二、还原能力测定法还原能力测定法是通过测定待测样品对还原剂的还原能力来评估其抗氧化活性。

常用的还原剂包括铁离子、铜离子等。

在该方法中，将待测样品与还原剂混合，通过测定混合液的吸光度变化或还原剂浓度的变化来评估样品的抗氧化活性。

抗氧化活性强的样品能够还原还原剂，使其浓度降低，从而导致吸光度的下降或还原剂浓度的降低。

三、氧化脂质抑制能力测定法氧化脂质抑制能力测定法是通过测定待测样品对氧化脂质的抑制能力来评估其抗氧化活性。

常用的氧化脂质包括脂肪酸、脂肪油等。

在该方法中，将待测样品与氧化脂质混合，通过测定混合液中脂质的氧化程度来评估样品的抗氧化活性。

抗氧化活性强的样品能够有效抑制氧化脂质的形成。

四、超氧阴离子清除能力测定法超氧阴离子是一种常见的自由基，具有较高的活性。

超氧阴离子清除能力测定法是通过测定待测样品对超氧阴离子的清除能力来评估其抗氧化活性。

常用的超氧阴离子产生体系包括NBT（硝基蓝盐）-NADH（尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸）体系、XTT（二苯基四唑盐）体系等。

在该方法中，将待测样品与超氧阴离子产生体系混合，通过测定混合液的吸光度变化来评估样品的抗氧化活性。

抗氧化活性强的样品能够有效清除超氧阴离子，使其浓度降低，从而导致吸光度的下降。

3种抗氧化活性测定方法抗氧化活性是指物质对氧化过程的抑制作用，能够减缓或阻断自由基对细胞和组织的损害。

目前，常用的抗氧化活性测定方法主要包括DPPH 自由基清除法、ABTS自由基清除法和铁还原能力测定法。

以下将对这三种方法进行详细介绍。

1.DPPH自由基清除法：DPPH（2,2-二苯基-1-若氧基-苯基-π-苦味噁唑）自由基清除法是一种常用的抗氧化活性测定方法。

该方法是通过测定样品对DPPH自由基的清除能力来评估其抗氧化活性。

DPPH自由基是一种紫色稳定的自由基，在接触到氢供体（抗氧化剂）后，会发生颜色变化从紫色转变为黄色。

可以通过测定样品溶液的吸光度来评估其抗氧化能力。

吸光度的降低表明样品对DPPH自由基的清除能力较强。

2.ABTS自由基清除法：ABTS（2,2'-联氨基双（3-乙基苯并噻唑））自由基清除法也是一种常用的抗氧化活性测定方法。

ABTS自由基是一种无色可溶性自由基，其生成主要通过氧化剂与ABTS反应而产生。

测定方法是将ABTS与过氧化氢反应，生成蓝色自由基溶液，然后将样品加入到溶液中，通过测定吸光度的变化来评估样品的抗氧化活性。

吸光度的降低表明样品对ABTS自由基的清除能力较强。

3.铁还原能力测定法：铁还原能力测定法是一种评估抗氧化活性的常用方法，通过测定样品对Fe3+还原为Fe2+的能力来评估其抗氧化能力。

在这个方法中，还原剂（如抗氧化剂）会与Fe3+反应，生成Fe2+，并且Fe2+的浓度可以通过测量其吸光度来确定。

浓度越高，吸光度越高，表明样品的抗氧化能力越强。

这三种抗氧化活性测定方法各有其优势和适用范围。

DPPH自由基清除法适用于评估样品对自由基的清除能力，但其结果受其他化合物的影响较大；ABTS自由基清除法对于水溶性和脂溶性样品均适用，但其结果也受其他化合物的影响；铁还原能力测定法适用于样品中还原型物质的测定，可评估样品对金属离子的还原能力。

因此，在实际应用中，可以根据需要选择适合的方法来评估样品的抗氧化活性。

抗氧化活性测定方法的比较本页仅作为文档封面，使用时可以删除This document is for reference only-rar21year.March抗氧化活性测定方法的比较人体衰老和多种疾病均与自由基有关，寻找天然抗氧化剂具有重要意义。

黄酮、多糖、多肽、酚类等生物活性成分均具有抗氧化活性，抗氧化活性的筛选方法可分为体外和体内2种测试体系。

体外：抗氧化活性可以用在特定条件下，样品对检测体系中自由基的清除能力、抗油脂过氧化能力及样品的还原能力、总抗氧化能力等来衡量和表征。

常用的方法有羟基自由基（·OH）清除能力法、1,1-二苯基苦基苯肼（DPPH法）、2,2-联氮基-双-(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二氨盐（ABTS法）、超氧阴离子自由基法（O2-·）、邻苯三酚自氧化法、β-胡萝卜素漂白法、硫代巴比妥酸法、铁离子还原能力测定（FRAP法）、总酚测定法、ORAC法等方法。

体内：主要有DNA氧化损伤法、蛋白质氧化损伤法、线粒体氧化损伤法。

其中DPPH法和ABTS法操作较简单便捷，不需要特殊的检测设备，只在需固定时间下记下其紫外分光光度测量值后计算其自由基清除率，缺点是不同物质具有组成和结构的差异，与 DPPH·、ABTS+·的反应速率不同，反应到达平衡的时间不同，将反应时间固定在某一值时，可能对抗氧化剂的抗氧化性评价带来错误的判断，且DPPH自由基会和其他自由基发生反应。

邻苯三酚自氧化法缺点是检测波长、缓冲液的组成及ｐＨ值、邻苯三酚浓度等关键测定条件存在着较大差异。

β-胡萝卜素漂白法的缺点是β-胡萝卜素本身有抗氧化活性，对样品活性的测定结果有影响。

FRAP法主要用于食品业，优点是简单易操作、可以重复，缺点是无法测定硫醇化合物的还原能力。

ORAC法是国际上通用的评价食品氧化的标准方法，缺点是仪器成分较复杂，检测成本较高。

目前普遍使用的体外抗氧化活性指标一般都采用分光光度法，使用分光光度计测量各种颜色成分含量的变化。

抗氧化物活性测定方法总结引言：一、化学法1.DPPH自由基清除法该方法利用DPPH（1,1-二苯基-2-三硝基苦基）自由基的特性，通过测定样品对DPPH自由基的清除能力来评估其抗氧化活性。

该方法简便、快速，适用于各种样品的抗氧化活性测定。

但该方法无法反映样品在生理条件下的真实抗氧化活性。

2.ABTS自由基清除法该方法利用ABTS（2,2'-联氨基双(3-乙酸苯并咪唑-6-磺酸)）自由基的特性，通过测定样品对ABTS自由基的清除能力来评估其抗氧化活性。

该方法操作简单、结果稳定，适用于各种样品的抗氧化活性测定。

但该方法在高浓度下可能存在偏差。

二、生物学法1.超氧化物歧化酶（SOD）活性测定法该方法通过测定样品对超氧自由基的抑制能力来评估其SOD活性。

该方法可以反映样品在生理条件下的真实抗氧化活性，适用于抗氧化物活性的研究。

但该方法操作复杂、耗时较长，且受到其他物质的干扰。

2.过氧化氢酶（CAT）活性测定法该方法通过测定样品对过氧化氢的分解能力来评估其CAT活性。

该方法操作简单、结果准确，适用于各种样品的抗氧化活性测定。

但该方法无法反映样品在生理条件下的真实抗氧化活性。

三、电化学法1.循环伏安法该方法通过测定样品在电极上的氧化还原行为，来评估其抗氧化活性。

该方法操作简单、结果准确，适用于各种样品的抗氧化活性测定。

但该方法需要特殊的电化学设备，且对于非水溶性样品不适用。

2.差示脉冲伏安法该方法通过测定样品在电极上的差示脉冲伏安曲线，来评估其抗氧化活性。

该方法操作简单、结果准确，适用于各种样品的抗氧化活性测定。

但该方法需要特殊的电化学设备。

结论：目前，抗氧化物活性测定方法多种多样，各有优缺点。

选择合适的测定方法应根据具体实验目的、样品性质、设备条件等综合考虑。

为了准确评估样品的抗氧化活性，可采用多种方法进行综合分析。

未来，随着科技的不断发展，抗氧化物活性测定方法将会更加精确、快速、简便，为抗氧化物活性的研究提供更多便利和准确的手段。

1.抗氧化剂是指在低浓度下能有效延缓或阻止底物氧化的物质。

被氧化的底物包括蛋白质、脂质、糖和DNA。

2.初始型抗氧化剂(AH)可通过与脂质自由基L.、过氧自由基LOO.或烷氧自由基LO.反应抑制脂质氧化链反应。

L.+ AH--- LH + A.LOO.+ AH--- LOOH + A.LO.+ AH--- LOH + A.抗氧化剂自由基A.也能与过氧自由基、烷氧自由基反应从而终止脂质氧化反应。

LOO.+ A.---LOOALO.+ A.---LOA次级型抗氧化剂可通过各种机理延缓脂质氧化,如螯合过渡金属、给初始型抗氧化剂补充氢、清除氧以及使活性物质失活等。

抗氧化剂的活性分为在生物体外( 如食品中) 的活性和在生物体内的活性。

本文综述了体外测定抗氧化剂抗氧化活性的方法,不包括在生物体中测定生物活性的方法。

3.评价或表征抗氧化活性的方法为了说明在特定条件下被测物抑制底物氧化的效力或清除自由基的能力实际测定时至少要说明在测试条件下被测物是抗氧化剂还是促氧化剂; 在指定浓度下比较不同测试材料( 如被测物与标准抗氧化剂或添加有被测物的测试体系与空白体系) 对底物的作用。

评价或表征抗氧化活性的方法有:(1) 在指定的时间测量氧化产物或官能团的浓度或吸光度值;( 2)测量反应的速率;( 3) 测量诱导期( 延滞期) 或氧化达到一定程度所需的时间;( 4) 测量速度的积分( 即动力学曲线下的面积) ;( 5) 测量被测物产生与标准抗氧化剂相当作用的浓度。

4. 参数4.1诱导期( induction period)诱导期tIND( 也叫延滞期, lag period) 常定义为化学反应的速度。

诱导期是一个相当不确定的值, 受检测方法、使用仪器的灵敏性以及一些其他因素的影响。

对于脂质氧化,诱导期通常是指链增长阶段动力学曲线的切线和时间轴的交点。

4.2抑制率( percentag e of inhibition) 和IC50抑制率和IC50 (抗氧化剂提供50%抑制作用时的浓度, 也可用EC50表示的) 常用来表征抗氧化能力。

粮油食品粮油食品科技第１７卷２００９年第６期抗氧化剂抗氧化活性测定方法及其评价韩飞１，周孟良１，－，钱健亚２，于婷婷１（１．国家粮食局科学研究院，北京１０００３７；２．扬州大学生物科学与技术学院，江苏扬州２２５００９）摘要：综述了目前常用的抗氧化活性的化学和生物学筛选方法，分析了当前化学和生物学评价方法的优点及局限性，为更好地评价样品的抗氧化活性提供依据。

关键词：抗氧化剂；抗氧化活性；分析；评价中图分类号：ＴＳ２０２．３文献标识码：Ａ文章编号：１００７—７５６１（２００９）０６—００５４—０４Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎａｎｄｅｖａｌｕａｔｉｏｎｏｆａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔａｃｔｉｖｉｔｙ地蝌Ｆｅｉｌ，ＺＨＯＵＭｅｎｇ—ｌｉａｎ９１’２，ＱＩＡＮＪｉａｎ—ｙａ２，ＹＵＴｉｎｇ－ｔｉｎ９１（１．ＡｃａｄｅｍｙｏｆＳｔａｔｅＡｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎｏｆＧｒａｉｎ，Ｂｅｉｊｉｎｇ１０００３７；２．ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅａｎｄＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，ＹａｎｇｚｈｏｕＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，ＹａｎｇｚｈｏｕＪｉａｎｇｓｕ２２５００９）Ａｂｓｔｒａｃｔ：１１ｌｅｃｏｍｍｏｎｃｈｅｍｉｃａｌａｎｄｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｍｅｔｈｏｄｓｔｏｄｅｔｅｒｍｉｎｅａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔａｃｔｉｖｉｔｙｗａｓｓｕｍｍａｒｉｚｅｄ．，１１１ｅａｄｖａｎｔａｇｅｓａｎｄｄｉｓａｄｖａｎｔａｇｅｓｏｆｅｖａｌｕａｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄｓｕｓｅｄｎｏｗａｄａｙｓｗｅｌ＂ｅａｎａｌｙｓｅｄｗｈｉｃｈｐｒｏｖｉｄｅｄｖａｌｕａｂｌｅｓｕｐ·ｐｏｒｔｆｏｒｅｖａｌｕａｔｉｎｇｔｈｅａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔａｃｔｉｖｉｔｙｏｆｓａｍｐｌｅｓ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ；ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔａｃｔｉｖｉｔｙ；ａｎａｌｙｓｅ；ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ机体内的抗氧化防御系统一旦失衡，就会产生氧化损伤【卜２Ｊ，研究表明，保持机体自由基的产生与消除的平衡，防止自由基对细胞和组织的损伤，是预防细胞活力下降、机体衰老、色素形成、血管病变、细胞癌变、糖尿病及糖尿病并发症等８０余种疾病的有效措施之一［１“Ｊ。

抗氧化剂抗氧化活性的测定方法(二)＊王　会1　郭　立2　谢文磊11(河南工业大学化学化工学院,郑州,450052)　2(河南省粮油机械工程有限公司,郑州,450003)摘　要　综述了抗氧化剂抑制脂质氧化、清除自由基、抑制自由基对底物的氧化降解以及还原能力4类测定抗氧化活性的方法,并讨论了评价或表征测定结果的方法和参数以及对测定方法的要求。

关键词　抗氧化剂,抗氧化活性,测定方法　第一作者:硕士研究生(谢文磊为通讯作者)。

＊此篇文章续本刊2006,32(3):92～96　收稿日期:2005-12-053.3　以抗氧化剂抑制自由基对底物的氧化降解为基础的方法此法与3.1.3.2方法不同之处在于测试体系中既有底物又有自由基,但底物自身不能生成自由基,它与外源自由基反应,形成有荧光或带颜色的特征物质,抗氧化剂的加入使生成的特征产物减少,由此可测得抗氧化活性。

3.3.1　ORAC 法ORAC (oxygen radical absorbance capacity ,氧自由基吸收能力)法是近年来由Cao 等人[31]在Glaz -er [32]研究的基础上发展起来的,原理如下:天然蛋白质β-藻红蛋白(β-phy coerythrin ,β-PE )在540nm 光波激发下可发射565nm 的荧光。

在有自由基或氧化剂时,β-PE 的荧光逐渐减弱;当有抗氧化剂存在时,β-PE 的荧光减弱被抑制。

自由基或氧化剂可用AAPH (产生过氧自由基)、H 2O 2-Cu 2+(主要产生HO ·)和Cu 2+。

使用AAPH 时,可测量所有公认的抗氧化剂,如抗坏血酸、α-生育酚、β-胡萝卜素。

使用Cu 2+-H 2O 2时,可测量甘露醇、葡萄糖、尿酸以及过渡金属螯合剂这类物质,不用于测定抗坏血酸、α-生育酚[33]。

测定结果以Trolox (标准抗氧化剂)当量表示。

此法是一种新的、独特的评价各种物质抗氧化活性的方法。

抗氧化活性测定方法抗氧化活性是指物质对抗氧化过程的干预能力，即能够延缓或阻止氧自由基的产生，并减少氧自由基对生物体产生的损害。

抗氧化活性测定方法用于评估物质的抗氧化能力，常用的测定方法主要包括体外试验和体内试验两类。

体外试验是通过模拟体外环境，测定物质对捕捉自由基或抗氧化酶活性的影响来评估抗氧化活性。

常用的体外试验方法包括自由基清除能力测定、铁螯合能力测定、抑制脂质过氧化试验等。

自由基清除能力测定是通过测定物质对自由基的清除能力来评估其抗氧化活性。

常用的自由基包括DPPH自由基、ABTS自由基等。

测定方法主要通过测定反应后自由基的消失程度来评估抗氧化能力。

铁螯合能力测定是通过测定物质对铁离子的螯合能力来评估其抗氧化活性。

铁离子在体内可能通过Fenton反应生成高活性的氢氧自由基，因此物质对铁离子的螯合能力可以减少氧自由基的生成。

脂质过氧化是氧自由基对脂质的直接损害，因此抑制脂质过氧化试验常用于评估物质的抗氧化活性。

该试验主要通过测定物质对氧自由基引起的脂质过氧化的抑制程度来评估其抗氧化能力。

体内试验是通过给动物或人类实验体内投与抗氧化物质，然后测定其体内的抗氧化能力来评估物质的抗氧化活性。

常用的体内试验方法包括血浆抗氧化能力测定、组织氧化损伤程度测定等。

血浆抗氧化能力测定是评估物质对血液中氧自由基的抑制能力。

该试验主要通过测定血浆中一系列抗氧化物质的浓度以及抗氧化酶活性来评估抗氧化能力。

组织氧化损伤程度测定是通过测定组织中氧自由基引起的损伤程度来评估物质的抗氧化活性。

常用的方法主要包括测定组织中氧自由基水平、脂质过氧化程度、蛋白质氧化程度等指标。

此外，近年来还出现了一些新的抗氧化活性测定方法，如典型抗氧化能力（TEAC）测定法、氧自由基吞没能力（ORAC）测定法等。

这些新的方法在测定速度快、准确性高、操作简单等方面具有优势。

总体而言，抗氧化活性测定方法的选择应根据需要评估的物质特性、目的和实验条件等进行选择。

抗氧化剂的抗氧化活性的测定方法及其评价
翁新楚;吴侯
【期刊名称】《中国油脂》
【年(卷),期】2000(25)6
【摘要】把影响抗氧化剂氧化活性测定的主要因素分为三个大的方面：Ａ．底物或基质体系；Ｂ．加速方法；Ｃ氧化诱导期终点测定方法。

系统研究和论述了抗氧化活性的测定及评价方法，并对不同方法进行了综合比较与评价。

【总页数】1页(P119)
【作者】翁新楚;吴侯
【作者单位】上海大学生命科学学院，２０１８００上海嘉定城;上海大学生命科学学院，２０１８００上海嘉定城
【正文语种】中文
【中图分类】TS202.2
【相关文献】
1.抗氧化剂抗氧化活性测定方法及其评价
2.抗氧化剂抗氧化活性的测定方法(一)
3.抗氧化剂抗氧化活性的测定方法(二)
4.用两种方法评价四种食品抗氧化剂的抗氧化活性
5.生物体系中脂质过氧化及抗氧化剂抗氧化活性的检测与评价
因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。