【课件】总磷的测定钼锑抗分光光度法PPT

钼锑抗分光光度法原理：在酸性条件下，正磷酸盐与钼酸铵、酒石酸锑氧钾反应，生存磷钼杂多酸，被还原剂、抗坏血酸还原，变成兰色的络合物，通常称磷钼蓝。

砷浓度高于2mg/l有干扰，可用硫代硫酸钠去除，硫化物浓度高于2mg/l有干扰，在酸性条件下通氮气可以降解，六价铬浓度大于50mg/l有干扰，用亚硫酸钠去处。

亚硝酸盐浓度大于1mg/l有干扰，用氧化消解或加氨磺酸都可以处除，铁浓度为20mg/l使结果便低5%，铜浓度达10mg/l不干扰，氟化物浓度低于70mg/l是允许的最低检出浓度为0.01mg/l上限0.6mg/l取适量水样于锥形瓶内,加水至50ml5%硫代硫酸钾,放置电热板上,调温度保持微沸30—40min,至最后溶液体积为10ml为至,冷却加1滴0.1N硫酸使红色退出,充分摇匀,如果溶液不清,用滤纸过滤到50ml比色管中,用水洗锥形瓶和滤纸,一并移到比色管中,加水至刻度,以下同上面分光光度法.在700nm波长处进行测定.水污染控制规划方案1.节约用水,建设节水型社会.2.推行清洁生产.3.实施污染物排放总量控制制度.4.加大水污染制度.实施保障1.建立资源共享制度.2.完善污染物监测制度.3.完善水域环境管理信息系统.4.推行水污染防治市场化运作.5.落实目标管理责任制度.原理：在中性条件下，过硫酸钾可将水中所含的磷全部氧化为正磷酸盐。

在锑盐存在下，在酸性介质中正磷酸盐和钼酸铵反应生存的磷钼杂多酸，立即被抗坏血酸还原生成蓝色的络合物，在700nm波长处测得吸光度与磷的含量成正比。

该方法的最小检出极限为0.01mg/l,最大检出极限为0.6mg/l. 仪器及试剂:1.分光光度计.2.医用手提式蒸汽消毒器或一般压力锅(1.1---1.4kg/cm2)3.50ml具塞(磨口)刻度管.4.1:1(v/v)H2SO4溶液:取适量浓硫酸加等体积水混匀.5.1mol/lNaOH溶液:将40gNaOH溶于水中并稀释1000ml.6.6mol/lNaOH溶液:将240gNaOH溶于水中并稀释1000ml.7.1mol/Lh2SO4溶液:将27mlH2SO4加入到973ml水中混匀.8.50g/l(m/v)过硫酸钾溶液:将5g过硫酸钾溶解于水,并稀释至100ml.9.100g/l(m/v)抗坏血酸溶液:将10g抗坏血酸溶解于水中,并稀释到100ml.储存于棕色试剂瓶中,在冷处保存可稳定几周.10.钼酸盐溶液:溶解13g钼酸铵于100ml水中,溶解0.35g酒石酸锑钾于100ml水中,在不断搅拌下把钼酸铵溶液徐徐的加入300ml1:1硫酸溶液中,加酒石酸锑钾溶液并混合均匀.储存于棕色瓶中,在冷处保存两个月.11.浊度—色度补偿液: 混合2体积1:1硫酸溶液和1体积100g/l抗坏血酸溶液,临用当天配制.12.50ug/ml磷酸标准贮备溶液: 称取于110℃干燥2h并在干燥器冷却到室温的磷酸二氢钾0.2197土0.0001g,用水溶解后转移至1000ml容量瓶中,加入大约800ml水,加1:1硫酸5ml用水稀释至标线摇匀.在玻璃瓶中可贮存至少6个月.13.2.0ug/ml磷酸标准使用液:取10.00ml50ug/ml磷酸标准贮备液于250ml容量瓶中,用水稀释到标线并摇匀.使用当天配制.14.10g/l酚酞溶液:将0.5g酚酞溶于95%乙醇中.采样和样品:1.采500ml水样后加入1ml硫酸使PH值小于等于1或不加任何试剂于冷处保存(玻璃瓶)2.试样制备:取摇匀的水样25ml于具塞刻度管中.若水样的含磷量较高,则少取.分析步骤:1.消解:向试样中加入4ml过硫酸钾,将具塞刻度管的盖塞紧后,用一小块布和线将玻璃扎紧(固定),放在大烧杯中置于高压蒸汽消毒器中加热,待压力达到1kg/cm2,相应温度为120℃时,保持30min后停止加热,待压力表读数降至0后,用水稀释标线并摇匀.加水10ml,加一滴酚酞溶液,滴氢氧化钠溶液至刚呈现微红色,在滴1mol/l硫酸使微红色刚退出.充分摇匀.移至具塞刻度管中,用水稀释至标线,摇匀.( 若有残渣必要过滤) 注:若用硫酸保存水样,当用过硫酸钾消解时,之前将水样调整到中性.2显色:分别向各份消解液中加入1ml抗坏血酸溶液.并摇匀.30s后加2ml钼酸盐溶液充分摇匀.注(1)如果试样中含有浊度或色度时,配制一个空白试样(消解后用水稀释至标线)然后向试料中加入3ml浊度-色度补偿液,但不加抗坏血酸溶液和钼酸盐溶液,后从试料的吸光度中扣除空白溶液的吸光度.(2)砷大于2mg/l干扰测定,用硫代硫酸纳去处.硫化物大于2mg/l干扰测定,通氮气去处.,铬大于50mg/l 干扰测定,用亚硫酸钠去处.3.吸光度测定:室温下放置15min后,以水作参比,用30mm比色皿于700nm波长处测定吸光度,扣除空白试样的吸光度从校准曲线上查处磷的含量.注意:如果显色时室温低于13℃,可在20--30℃水欲上显色15min即可.4.空白试验:用相同体积的水代替水样消解发色测出吸光度等操作.5.校准曲线绘制向7支具塞刻度管分别加入 2.0ug/l磷酸标准使用液0ml,0.5ml,1.00ml,3ml,5ml,10ml,15ml,加水到刻度25ml.后按分析步骤操作,以水做参比,用30mm比色皿于700nm波长处测定吸光度并扣去空白试验的吸光度后与对应的磷含量绘制标准曲线.结果计算:Cp=m/v m 从标准曲线查出磷的含量.ugV 试样的体积. ml。

总磷的测定钼酸铵分光光度法WTD standardization office【WTD 5AB- WTDK 08- WTD 2C】总磷的测定——钼酸铵分光光度法（GB 11893—89）一、目的和要求掌握总磷的测定方法与原理。

了解水体中过量的磷对水环境的影响。

二、原理在中性条件下用过硫酸钾（或硝酸－高氯酸）使试样消解，将所含磷全部氧化为正磷酸盐。

在酸性介质中，正磷酸盐与钼酸铵反应，在锑盐存在下生成磷钼杂多酸后，立即被抗坏血酸还原，生成蓝色的络合物。

本标准规定了用过硫酸钾（或硝酸—高氯酸）为氧化剂，将未经过滤的水样消解，用钼酸铵分光光度法测定总磷的方法。

总磷包括溶解的、颗粒的、有机的和无机磷。

本标准适用于地面水、污水和工业废水。

取25mL水样，本标准的最低检出浓度为L，测定上限为L。

在酸性条件下，砷、铬、硫干扰测定。

三、试剂硫酸，密度为1.84g/mL。

硝酸，密度为1.4g/mL。

高氯酸，优级纯，密度为1.68g/mL。

硫酸（V/V），1+1。

硫酸，约L，将27mL硫酸（）加入到973mL水中。

氢氧化钠溶液，1mol/L，将40g氢氧化钠溶于水并稀释至1000mL。

氢氧化钠溶液，6mol/L，将240g氢氧化钠溶于水并稀释至1000mL。

过硫酸钾溶液，50g/L，将5g过硫酸钾（K2S2O8）溶于水，并稀释至100mL。

抗坏血酸溶液，100g/L，将10g抗坏血酸溶于水中，并稀释至100mL。

此溶液贮于棕色的试剂瓶中，在冷处可稳定几周，如不变色可长时间使用。

钼酸盐溶液：将13g钼酸铵[(NH4)6MO7O24·4H2O]溶于100mL水中，将0.35g酒石酸锑钾[KSbC4HO7·]溶于100mL水中。

在不断搅拌下分别把上述钼酸铵溶液、酒石酸梯钾溶液徐徐加到300mL硫酸（）中，混合均匀。

此溶液贮存于棕色瓶中，在冷处可保存三个月。

浊度—色度补偿液，混合二体积硫酸（）和一体积抗坏血酸（）。

总磷的测定（钼锑抗分光光度法）实验目的１、了解磷（总磷、溶解性正磷酸盐和溶解性总磷）的测定方法２、掌握分光光度计的使用、标准曲线的绘制及计算方法３、熟悉水样预处理的方法４、熟悉钼锑抗分光光度法测定总磷的原理和过程实验原理水中磷的测定，通常按其存在的形式不同，分别测定总磷、溶解性正磷酸盐和可溶性总磷酸盐，下图为测定水中各种磷的流程图可溶性正磷酸盐可溶性总磷酸盐总磷水样消解用0.45μm 过滤消解１、消解的目的：将其他形式的磷转化为正磷酸盐磷有机磷无机磷不溶性（呈胶体、颗粒状）可溶性PO 32-PO 43-+K 2S 2O 8消解HPO 42-H 2PO 4-PO 43-P 2O 74--P 3O 105--２．钼锑抗分光光度法的原理PO43-+ 钼酸盐+ 抗坏血酸H+蓝色络合物（磷钼蓝）实验步骤１、预处理（１）水样取适量的进水和出水于50mL具塞比色管＋蒸馏水于25mL 标线＋4mLK2S2O8加塞后管口包一小块双层纱布并用线扎紧，置于高压蒸汽消毒器中消解（２）标准曲线取七支50mL具塞比色管，分别加入磷酸盐标准使用液0、0.50、1.00、3.00、5.00、10.0、15.0mL，加蒸馏水至25ml＋4mLK 2S2O8，加塞捆纱布后，同样放在高压蒸汽消毒器中消解30min后停止加热，待压力指针降至零后，取出放冷。

２．标准曲线的绘制将冷却后的校准系列＋蒸馏水至50mL +1mL抗坏血酸+2mL钼酸盐充分混匀,放置15min显色后，用10mm比色皿，于700nm处，以零浓度溶液为参比，测量吸光度绘制以磷含量（µg）对吸光度的校准曲线。

......Aug721分光光度计３、水样的测定将冷却后的水样＋蒸馏水至50mL+1mL抗坏血酸混匀+2mL钼酸盐充分混匀，放置15min显色。

用10mm比色皿，于700nm波长处，以零浓度溶液为参比，测量吸光度。

从校准曲线上查出含磷量。

AA XmXmC(PO 43-,mg/L)= m x / Vm x —由校准曲线查得的磷含量（ug）V —水样体积（mL）数据处理１、如试样中浊度或色度影响测量吸光度时，需做补偿校正２、室温低于13℃时，可在20～30℃水浴中，显色15min ３、操作所用的玻璃器皿，可用1+5的盐酸浸泡2h，或用不含磷酸盐的洗涤剂刷洗４、比色皿用后应以稀硝酸或铬酸洗液浸泡片刻，以除去吸附的磷钼蓝显色物五、注意事项１、过硫酸钾消解的作用？２、用分光光度计测吸光度时，如果比色皿中有气泡对结果有什么影响？六、思考题。

总磷的测定——钼酸铵分光光度法一、原理该检测方法利用碳酸钙一元催化的反应，将总磷以磷酸酯比形式转化为磷酸根，再根据钼酸铵溶液将磷酸根氧化成亚磷酸根，与分光光度法测定得到结果。

反应如下：Ca2+ + (H2PO4)2- → CaH2PO4 + 2H+亚磷酸根 + MoO^(2-_4)→Mo(5+) + PO4 3-二、反应物◆样品：水样或有机溶液，如果有机物中含磷的话，可以经过有机溶剂提取分离◆碳酸钙：用于分解磷酸酯，作用于磷酸根的变换◆波尔多液：一种比色分析液，以去除水中杂质◆HCl液：用于定位碳酸之后和ph值◆钼酸铵溶液：作为氧化剂将磷酸根转化为亚磷酸根三、器材及试剂（1）分光光度计：可以测量样品的浓度（2）稀释杯：用于稀释样品（3）滴定管：用于滴定定量的样品（4）10ml量筒：用于量取钼酸铵溶液（5）磷酸标准液：用作标准物质（7）pH计：用于检测反应结果中的 pH 值（8）波尔多液：用于去除水中杂质四、操作流程1. 将磷酸标准液量化到50ml测定管中，然后注入10ml波尔多液，并搅拌均匀；2. 将样品比标样定性或定量放入50ml测定管中，再加入相应浓度的滤液；3. 将碳酸钙加入测定管中，搅拌均匀，加热10min；4. 加入3ml 1mol/LHCl，再加入10ml波尔多液，搅拌均匀；5. 测定pH值，调节至 pH 约为6；6. 将5ml钼酸铵溶液加入测定管中，反应10min，分光光度法测定吸光度；7. 计算标准液吸光度与样品吸光度的比值，从而计算出总磷含量。

五、注意事项1. 每次实验必须使用新鲜的试剂；2. 对于不含水样品要采取有机溶剂提取的方法；3. 实验室中一定要保持干净整洁，以防污染样品和试剂；4. 对于滤过的样品必须保存在塑料容器中，以防水分过多影响结果；5. 每次实验要严格按照操作流程进行，以保证结果的准确性和可靠性；6. 测定时必须在测定范围内（0.2与2.0的比值），测得的值应重复多次以确定其稳定性；7. 样品在实验期间应该保持黑暗；8. 实验步骤中要求的时间不能太长，以免影响结果的准确性。

总磷的测定方法(总4页) -本页仅作为预览文档封面，使用时请删除本页-总磷的测定一、钼酸铵分光光度法㈠原理:在中性条件下，过硫酸钾溶液在高压釜内经120℃以上加热，产生如下反应：K2S2O4+H2O→2KHSO4+[O]从而将水中的有机磷、无机磷、悬浮物内的磷氧化成正磷酸。

在酸性介质中，水样中溶解性正磷酸与钼酸铵反应，在锑盐存在下尘成磷钼杂多酸后，立即被抗坏血酸还原，生成蓝色的络合物，在880nm和700nm波长下均有最大吸收度。

㈡仪器：医用手提式蒸汽消毒器或一般压力锅（—cm2）50ml具塞（磨口）比色管纱布和棉线分光光度计及10mm或30mm比色皿㈢注意事项:1、水中砷将严重干扰测定，使测定结果偏高。

2、含Cl化合物高的水样品在消解过程中会产生Cl2。

对测定产生负干扰，含有大量不含磷的有机物会影响有机磷的消解转化成正磷酸。

此类样品应选用其他消解方法。

例如：HNO3—HClO4方法消解样品。

3、过硫酸钾溶解比较困难，可于40℃左右的水浴锅上加热溶解，但切不可将烧杯直接放在电炉上加热，否则局部温度到达60℃过硫酸钾即分解失效。

（四）优缺点适用于地表水，生活污水，工业废水的测定。

二、钼锑抗分光光度法㈠原理：在酸性条件下, 正磷酸盐与钼酸铵、酒石酸锑氧钾反应, 生成磷钼杂多酸, 被还原剂抗坏血酸还原, 则变成蓝色络合物, 通常即称磷钼蓝。

在波长700 mm、光程10 mm 处, 光的吸收程度与磷钼蓝的浓度成正比。

计算方法: 磷酸盐( P, mg /L) = m /V式中, m - 由校准曲线查得的磷量( g) ;V- 水样体积( mL)。

本方法检出限为0. 01~ 0. 6 mg /L。

㈡主要仪器与试剂：仪器：7220分光光度计(上海第三仪器厂)试剂：空白溶液: 电导率< 1 S /cm 的实验用水, 要求平行测定的相对偏差 50%。

天然水样: 取具有代表性的水样, 放置一定时间, 使组成趋向稳定, 并且水样中总磷浓度不能为未检出。

总磷的测定——钼酸铵分光光度法（GB 11893—89）一、目的和要求1.1 掌握总磷的测定方法与原理。

1.2 了解水体中过量的磷对水环境的影响。

二、原理在中性条件下用过硫酸钾（或硝酸－高氯酸）使试样消解，将所含磷全部氧化为正磷酸盐。

在酸性介质中，正磷酸盐与钼酸铵反应，在锑盐存在下生成磷钼杂多酸后，立即被抗坏血酸还原，生成蓝色的络合物。

本标准规定了用过硫酸钾（或硝酸—高氯酸）为氧化剂，将未经过滤的水样消解，用钼酸铵分光光度法测定总磷的方法。

总磷包括溶解的、颗粒的、有机的和无机磷。

本标准适用于地面水、污水和工业废水。

取25mL水样，本标准的最低检出浓度为0.01mg/L，测定上限为0.6mg/L。

在酸性条件下，砷、铬、硫干扰测定。

三、试剂3.1 硫酸，密度为1.84g/mL。

3.2 硝酸，密度为1.4g/mL。

3.3 高氯酸，优级纯，密度为1.68g/mL。

3.4 硫酸（V/V），1+1。

3.5 硫酸，约0.5mol/L，将27mL硫酸（3.1）加入到973mL水中。

3.6 氢氧化钠溶液，1mol/L，将40g氢氧化钠溶于水并稀释至1000mL。

3.7 氢氧化钠溶液，6mol/L，将240g氢氧化钠溶于水并稀释至1000mL。

3.8 过硫酸钾溶液，50g/L，将5g过硫酸钾（K2S2O8）溶于水，并稀释至100mL。

3.9 抗坏血酸溶液，100g/L，将10g抗坏血酸溶于水中，并稀释至100mL。

此溶液贮于棕色的试剂瓶中，在冷处可稳定几周，如不变色可长时间使用。

3.10 钼酸盐溶液：将13g钼酸铵[(NH4)6MO7O24·4H2O]溶于100mL水中，将0.35g酒石酸锑钾[KSbC4HO7·0.5H2O]溶于100mL水中。

在不断搅拌下分别把上述钼酸铵溶液、酒石酸梯钾溶液徐徐加到300mL硫酸（3.4）中，混合均匀。

此溶液贮存于棕色瓶中，在冷处可保存三个月。

3.11 浊度—色度补偿液，混合二体积硫酸（3.4）和一体积抗坏血酸（3.9）。