实验设计
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实验设计
实验材料:实验用的轮虫休眠卵取自xxxxxxx池塘的底泥,
采泥时间为2006 年 3 月21 日, 将采集的底泥分两部分在冰箱中低温缺氧避光保存[ 10]; 一部分在冷藏室( 温度为3~ 5? ) 保存, 另一部分冷冻保存, 一个月后用于轮虫萌发实验研究, 实验时取出适量的底泥置于1000mL 的烧杯中( 冷冻保存的底泥需要先解冻) 加糖盐高渗液[ 2]并充分均匀, 静置30min 后用350 目的筛绢过滤收集上浮的休眠卵, 迅速用充分曝气的自来水冲洗掉糖盐高渗液以免影响萌发并收集休眠卵
一、实验步骤:
(一)、温度对轮虫休眠卵萌发实验设计
1、将充分曝气后的自来水倒入洗净干燥的青霉素小瓶中, 每瓶分别加入100 粒左右的休眠卵;
2、青霉素小瓶用350 目筛绢覆盖加胶塞, 倒置于不同温度水中( 在水浴锅中) 水浴让其萌发;
3、设5 个温度梯度即17? 、20? 、23? 、26? 、29? , 每个梯度设10 平行,;
4、定期抽样检测观察不同温度下的萌发率, 直至个别轮虫带夏卵, 用碘液固定[ 11], 在显微镜下观察计数;
5、萌发率按下式[ 10]计算
H= R/ ( E+ R) ! 100%
H- 萌发率( %) ? ? E- 未萌发的休眠卵( 个) ? ? R- 轮虫( 个)
(二)、PH对轮虫休眠卵萌发实验设计
pH 对休眠卵萌发的影响实验是在23?条件下进行, pH 用稀NaOH, 稀HCl 溶液来配制1、设5 个pH 梯度即5、6、7、8、9, 每组10 个平行, 每个青霉素小瓶放100 个左右
的休眠卵,
2、同温度计算公式,计算各瓶中休眠卵的萌发率
二、实验结果
(一)不同温度条件下,轮虫休眠卵萌发率
(二)不同PH条件下,轮虫休眠卵萌发率。