常用微生物培养基手册大全
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培养基大全1. 营养琼脂培养基 (Nutrient Agar)成分:胨粉、蛋白胨、NaCl、琼脂2. 大肠杆菌培养基 (E. coli Agar)成分:胨粉、蛋白胨、NaCl、琼脂、蔗糖、蓝色染料3. 蛋白胨琼脂培养基 (Peptone Agar)成分:胨粉、NaCl、琼脂4. 营养琼脂肉汤培养基 (Nutrient Agar Meat Broth)成分:胨粉、蛋白胨、NaCl、琼脂、肉汤5. 血琼脂培养基 (Blood Agar)成分:胨粉、蛋白胨、NaCl、琼脂、血液6. 巴氏液体培养基 (BHI Broth)成分:蛋白胨、肉汤、葡萄糖7. Luria Bertani培养基 (LB Broth)成分:胨粉、酵母浸出物、NaCl8. 硫酸铵琼脂培养基 (Ammonium Sulfate Agar)成分:硫酸铵、胨粉、NaCl、琼脂9. 硫酸镁琼脂培养基 (Magnesium Sulfate Agar)成分:硫酸镁、胨粉、NaCl、琼脂10. 铁琼脂培养基 (Iron Agar)成分:硫酸铵、硫酸镁、硫酸亚铁、胨粉、NaCl、琼脂11. 酵母浸出物琼脂培养基 (Yeast Extract Agar)成分:酵母浸出物、胨粉、NaCl、琼脂12. 蔗糖琼脂培养基 (Sucrose Agar)成分:胨粉、NaCl、琼脂、蔗糖13. 氯化钠琼脂培养基 (Sodium Chloride Agar)成分:胨粉、NaCl、琼脂14. 草莓琼脂培养基 (Strawberry Agar)成分:胨粉、NaCl、琼脂、草莓提取物15. 酵母葡萄糖琼脂培养基 (Yeast Glucose Agar)成分:酵母浸出物、葡萄糖、胨粉、NaCl、琼脂16. 葡萄糖琼脂培养基 (Glucose Agar)成分:胨粉、NaCl、琼脂、葡萄糖17. 咖啡琼脂培养基 (Coffee Agar)成分:胨粉、NaCl、琼脂、咖啡提取物18. 酵母琼脂培养基 (Yeast Agar)成分:酵母浸出物、胨粉、NaCl、琼脂19. 硝酸钠琼脂培养基 (Sodium Nitrate Agar)成分:硝酸钠、胨粉、NaCl、琼脂20. 柠檬酸盐琼脂培养基 (Citrate Agar)成分:柠檬酸、氢氧化钠、胨粉、NaCl、琼脂21. 硫酸亚铁琼脂培养基 (Ferrous Sulfate Agar)成分:硫酸亚铁、胨粉、NaCl、琼脂22. 硝酸盐琼脂培养基 (Nitrate Agar)成分:硝酸钠、硝酸钾、硫酸镁、胨粉、NaCl、琼脂23. 硝酸钠硝酸钾琼脂培养基 (Sodium Nitrate Potassium Nitrate Agar)成分:硝酸钠、硝酸钾、胨粉、NaCl、琼脂24. 氯化钠葡萄糖琼脂培养基 (Sodium Chloride Glucose Agar)成分:氯化钠、葡萄糖、胨粉、琼脂25. 氯化钠硝酸盐琼脂培养基 (Sodium Chloride Nitrate Agar)成分:氯化钠、硝酸钠、硝酸钾、胨粉、琼脂26. 硫酸铵硫酸亚铁琼脂培养基 (Ammonium Sulfate Ferrous Sulfate Agar)成分:硫酸铵、硫酸亚铁、胨粉、NaCl、琼脂27. 硫酸铵硝酸钠琼脂培养基 (Ammonium Sulfate Sodium Nitrate Agar)成分:硫酸铵、硝酸钠、胨粉、NaCl、琼脂28. 硫酸铵硝酸钾琼脂培养基 (Ammonium Sulfate Potassium Nitrate Agar)成分:硫酸铵、硝酸钾、胨粉、NaCl、琼脂29. 硫酸铵硫酸镁琼脂培养基 (Ammonium Sulfate Magnesium Sulfate Agar)成分:硫酸铵、硫酸镁、胨粉、NaCl、琼脂30. 硫酸铵硫酸钠硝酸钾琼脂培养基 (Ammonium Sulfate Sodium Nitrate Potassium Nitrate Agar)成分:硫酸铵、硫酸钠、硝酸钾、胨粉、NaCl、琼脂31. 硫酸铵硫酸亚铁硫酸镁琼脂培养基 (Ammonium Sulfate Ferrous Sulfate Magnesium Sulfate Agar)成分:硫酸铵、硫酸亚铁、硫酸镁、胨粉、NaCl、琼脂32. 硫酸铵硫酸亚铁硫酸钠琼脂培养基 (Ammonium Sulfate Ferrous Sulfate Sodium Nitrate Agar)成分:硫酸铵、硫酸亚铁、硫酸钠、胨粉、NaCl、琼脂。
常用微生物培养基分离真菌:注:抗生素所有培养基灭菌放置不烫手背时(温度约为40°C左右),同时加入氯霉素和链霉至终浓度为0.5 mg/mL(提前配置好,用0.22 µm微孔滤膜过滤,-20℃存储),混匀后倒平板,用于抑制细菌生长。
1.GPY培养基:葡萄糖20 g,蛋白胨10 g,酵母提取物10 g,海盐15 g,琼脂20 g,蒸馏水1 L,pH 7.5,115℃,30 min灭菌2.PDA培养基:Potato Dextrose Agar干粉39 g/L,海盐15 g,蒸馏水1 L,pH 6.5-7.0,121℃,15 min灭菌3.马丁培养基:葡萄糖10 g,蛋白胨5 g,磷酸二氢钾1 g,七水合硫酸镁0.5 g,孟加拉红0.03 g,海盐15 g,琼脂20 g,蒸馏水1 L,115℃、30 min灭菌4.MEA培养基:麦芽浸粉17g,蛋白胨3g,海盐15g,蒸馏水1L,121℃,20 min 灭菌5.YPD培养基:酵母提取物10 g/L,蛋白胨20 g/L,葡萄糖20 g/L,琼脂20 g/L,115℃,30 min灭菌6.沙氏葡萄糖琼脂培养基(SDA,每升培养基):蛋白胨(peptone)10.0 g,葡萄糖(glucose)40.0 g,琼脂(agar)15.0 g,pH 4.0 - 6.0;7.酵母汁麦芽提取物琼脂培养基(YM,每升培养基):麦芽浸粉(malt extract)3.0 g,酪蛋白胨(casein peptone)5.0 g,酵母提取物(yeast extract)3.0 g,葡萄糖(glucose)10.0 g,琼脂(agar)15 g,pH 6.0 - 6.5;8.察氏培养基(CDA,每升培养基):硝酸钠(NaNO3)3. 0 g,氯化钾(KCl)0.5 g,蔗糖(sucrose)30. 0 g,七水合硫酸镁(MgSO4·7H2O)0.5 g,七水合硫酸亚铁(FeSO4·7H2O)0. 01 g,磷酸氢二钾(K2HPO4)1.0 g,琼脂(agar)15.0 g,pH 6.0 - 6.5;分离放线菌:注:抗生素所有培养基灭菌放置不烫手背时(温度约为40℃左右),同时加入制霉菌素(终浓度为100.0 μg/ml)和萘啶酮酸(终浓度为25.0 μg/ml)(提前配置好,用0.22µm 微孔滤膜过滤,于-20℃冻存),混匀后倒平板,分别用于抑制真菌和细菌生长。
微生物培养基手册大全临床微生物培养基手册大全1、营养琼脂(普通琼脂)成份:牛肉浸液(或其它浸液,消化液或肉膏汤) 100毫升琼脂(视天气,琼脂质量而定)制法:将上物加热溶解,补足水,调ph至7.6,过滤分装121℃,高压灭菌15分钟。
用途:作普通琼脂平皿。
2、血琼脂平板(BA)制法:取营养琼脂(PH7.6),加热使其溶解待冷至45-50℃,以灭菌操作于每100毫升营养琼脂加灭菌脱纤维羊血或兔血5-10毫升,轻轻摇匀,立即倾注于平板或分装试管,制成斜面备用。
用途:1.一般棉拭子均接种此培养基。
2.尿液,脓液3.分离细菌标本用。
3、基础培养基(肉膏汤BB)成份:蛋白胨10克牛肉膏 5克氯化钠 5克水 1000毫升制法:将以上各物称好,加水煮沸溶解,用1NNOH校正PH至7.6,过滤分瓶,121℃高压灭菌,20分钟备用。
用途:1 作耐药试验,增菌用分装小管。
2 作普通琼脂斜面。
4、血液培养基(大管肉汤培养基)成份:1 新鲜牛肉浸液 1000毫升2 PABA(对氨基苯甲酸〔相当于10mg/毫升〕) 1g% 1毫升3 MgSO4 [相当于0.493/100毫升] 49.3% 1毫升4 枸椽酸钠0.3g制法:1 将1号,4号混合液,2号,3号液分装高压灭菌。
2 取灭菌1,4号混合液用无菌法加入PABA,MgSO4,再分管,行无菌试验三天方可使用。
用途:作血,骨髓培养用。
5、肠道杆菌培养基(伊红美兰琼脂)成份:蛋白胨 10克乳糖 10克氯化钠 5克琼脂 25(22)克水1000毫升 2%伊红溶液20毫升0.5%美兰溶液 20毫升制法:将蛋白胨,氯化钠琼脂称好,加水1000毫升使溶解,校正PH7.4过滤,补足失水,加入2%伊红溶液20毫升,0.5%美兰溶液20毫升,(115℃高压20分钟),冷却至50℃左右倾注平板,凝固后存冰箱备用。
(高压以后方可再加乳糖)用途:用作分离沙门氏,志贺氏菌属,也作菌群调查。
16、罗文斯坦培养基成份:磷酸二氢钾 2.4克硫酸镁 0.24克枸椽酸钠0.6克天门冬素3.6克纯甘油(丙三醇)12毫升水 600毫升马铃薯粉30克鸡蛋 1000毫升(约3公斤)2%孔雀绿水溶液20毫升制法:1 除鸡蛋外(还有孔雀绿)。
146种培养基配方在微生物学研究中,培养基是非常重要的工具,用于维持和培养各类微生物的生长。
不同的微生物对培养基成分有着不同的需求,因此,有很多种不同的培养基配方被设计出来以满足微生物的需求。
下面是一些常用的微生物培养基配方。
1. 素琼脂葡萄糖培养基(Tryptone glucose yeast extract agar):- 牛肉提取物(Tryptone) 10g- 酵母提取物(Yeast extract) 5g- 葡萄糖(Glucose) 10g- Agar 15g-pH7.22. 红色半固体培养基(Red semi-solid medium):- 蛋白胨(Peptone) 10g- 水解酵母(Yeast extract) 5g- Agar 7.5g- 酚红(Phenol red) 0.02g-pH7.23. 马铃薯葡萄糖琼脂培养基(Potato glucose agar):- 马铃薯提取物(Potato extract) 4g- 葡萄糖(Glucose) 20g- Agar 20g-pH7.04. 大肠杆菌营养琼脂培养基(Escherichia coli nutrient agar): - 羊肉肉脏提取物(Peptone from meat infusion) 5g- 水解酵母(Yeast extract) 3g-NaCl5g- Agar 15g-pH7.05. 硫磺琼脂培养基(Sulfur agar):- 素蛋白(Casein peptone) 10g- 水解酵母(Yeast extract) 5g- 硫磺粉末(Sulfur powder) 0.1g- Agar 15g-pH7.56. 罗氏琼脂培养基(Rogosa agar):- 葡萄糖(Dextrose) 20g- 麦粉汁(Malt extract) 10g- 柠檬酸(Citric acid) 5g- Agar 15g-pH5.27. 环境样品微生物菌落计数菌落计数琼脂培养基(Microbial Colony Count Agar):- 水解酵母(Yeast extract) 5g- 蛋白胨(Peptone) 5g-NaCl9g- Agar 15g-pH7.28. 活性炭琼脂培养基(Activated charcoal agar):- 木质纤维素(Cellulose) 5g- 活性炭(Activated charcoal) 1g- Agar 10g-pH7.29. 高盐基琼脂培养基(High salt base agar):- 兰氏海盐(Sea salt) 20g- 水解酵母(Yeast extract) 5g- 蛋白胨(Peptone) 5g- Agar 15g-pH7.510. 大豆酪蛋白琼脂培养基(Soy peptone agar):- 大豆酪蛋白(Soy peptone) 5g- 水解酵母(Yeast extract) 5g- Agar 15g-pH7.0这只是一小部分微生物培养基的配方,实际上有很多种不同的培养基适用于不同类型的微生物。
146种培养基配方1、牛肉膏蛋白胨培养基(培养细菌用)牛肉膏3g蛋白胨5g氯化钠10g琼脂15~20gpH 7.0~7.2水1000mL2、高氏(Gause)1号培养基(培养放线菌用)可溶性淀粉20g硝酸钾1g氯化钠0.5g磷酸氢二钾0.5g硫酸镁0.5g硫酸亚铁0.01g琼脂20g水1000mLpH 7.2~7.4配制时,先用少量冷水将淀粉调成糊状,倒入煮沸的水中,在火上加热,边搅拌边加入其他成分,溶化后,补足水分至1000mL。
121℃灭菌20min。
3、查氏(Czapek)培养基(培养霉菌用)硝酸钠2g磷酸氢二钾1g氯化钾0.5g硫酸镁0.5g硫酸亚铁0.01g蔗糖30g琼脂15~20g水1000mLpH 自然121℃灭菌20min。
4、马丁氏(Martin)琼脂培养基(分离真菌用)葡萄糖10g蛋白胨5g磷酸二氢钾1g七水合硫酸镁0.5g1/3000孟加拉红(rose bengal,玫瑰红水溶液)100mL琼脂15—20gpH 自然蒸馏水800mL112℃灭菌30min。
临用前加入0.03%链霉素稀释液100mL,使每毫升培养基中含链霉素30μg。
5、马铃薯培养基(简称PDA)(培养真菌用)马铃薯200g蔗糖(或葡萄糖)20g琼脂15—20gpH 自然培养基的配制:马铃薯去皮,切成块煮沸30min,然后用纱布过滤,再加糖及琼脂,熔化后补足水至1000mL。
121℃灭菌30min。
6、麦芽汁琼脂培养基培养基的配制:(1)、取大麦或小麦若干,用水洗净,浸水6—12小时,至15℃阴暗处发芽,上面盖纱布一块,每日早、中、晚淋水一次,麦根伸长至麦粒的两倍时,即停止发芽,摊开晒干或烘干,贮存备用。
(2)、将干麦芽磨碎,一份麦芽加四份水,在65℃水浴中糖化3—4小时,糖化程度可用碘滴定之。
加水约20mL,调匀至生泡沫时为止,然后倒在糖化液中搅拌煮沸后再过滤。
(3)、将糖化液用4—6层纱布过滤,滤液如混浊不清,可用鸡蛋白澄清,方法是将一个鸡蛋白加水约20mL,调匀至生泡沫时为止,然后倒在糖化液中搅拌煮沸后再过滤。
微生物实验室培养基配方大全一、糖发酵管成分:牛肉膏 5g蛋白胨 10g氯化钠 3g磷酸氢二钠2g0.2%滇麝香草酚蓝溶液 12mL蒸馏水 1000mLPH 7.4制法1. 葡萄糖发酵管按上述成分配好后,按0.5%加入葡萄糖,分装于有一个倒置小管的小试管内,121℃高压灭菌15min。
2. 其他各种糖发酵管可按上述成分配好后,分装每瓶1000 mL,121℃高压灭菌15min。
另将各种糖类分别配好10%溶液,同时高压灭菌。
将5mL糖溶液加入于100 mL培养基内,以无菌操作分装小试管。
蔗糖不纯,加热后会自行水解者,应采用过滤法除菌。
从琼脂斜面上挑取小量培养物接种,于36℃±1℃培养,一般观察2~3d。
迟缓反应需观察14~30d。
二、乳糖胆盐发酵管成分:蛋白胨 20g猪胆盐(或牛、羊胆盐)5g乳糖 10g0.04%滇甲酚紫水溶液 25mL蒸馏水 1000mL制法:将蛋白胨,胆盐及乳糖溶于水中,校正pH,加入指示剂,分装每管10 mL,并放入一个小倒管,115℃高压灭菌15min。
双料乳糖胆盐发酵管除蒸馏水外,其他成分加倍。
三、5%乳糖发酵管成分:蛋白胨 0.2g氯化钠 0.5g乳糖 5g2%溴麝香草酚蓝水溶液 1.2mL蒸馏水 100mLpH 7.4制法:除乳糖以外的各成分:溶解于50mL蒸馏水内,校正pH。
将乳糖溶解于另外50mL蒸馏水内,分别灭菌121 ℃ 15min,将两液混合,以无菌操作分装于灭菌小试管内。
在此培养基内,大部分乳糖迟缓发酵的细菌可于ld内发酵。
四、缓冲葡萄糖蛋白胨水(MR和VP试验用)成分:磷酸氢二钾 5g多胨 7g葡萄糖 5g蒸馏水 1000mL制法:溶化后校正pH,分装试管,每管1mL ,121℃高压灭菌15min。
甲基红(MR)试验:自琼脂斜面挑取少量培养物接种本培养基中,于36±1℃培养2~5d,哈夫尼亚菌则应在22~25℃培养。
滴加甲基红试剂一滴,立即观察结果。
常见微生物培养基Medium含有碳水化合物、含氮应用化学药品配成并标液体培养基不易长期保有不同。
一般培养基在对一些需严格灭菌的培2~6。
C的冰箱内。
1、细菌培养基配方一牛肉膏琼脂培养基牛肉膏0.3克 1.00.5 1.5水100毫升在烧杯内加水100火上加热。
待烧杯内各10%盐酸或10%的氢氧化钠调整pH值到7.27.6,30分钟。
配方二马铃薯培养基250500毫升蒸馏水和5克蛋白胨。
在烧杯上做好2pH值调到7.5左右。
每支试管内加入10毫升配方三根瘤菌培养基葡萄糖10克磷酸氢二钾0.5克碳酸钙3克硫酸镁0.2克酵母粉0.4克琼脂20克水1000毫升1%结晶紫溶液1毫升2、放线菌培养基配方一可溶性淀粉2克硝酸钾0.1克磷酸氢二钾0.05克氯化钠0.05克硫酸镁0.05克硫酸亚铁0.001克琼脂2克水100毫升595使它溶解。
在烧杯外做好pH值到7.27.4备用。
配方二面粉琼脂培养基面粉60克琼脂20克水1000毫升50030分钟。
另取500pH值到7.43、真菌培养基配方一Sabouraud’s蛋白胨10克琼脂20克麦芽糖40克水1000毫升40本培养菌是培养许多种类真菌所常用的。
配方二马铃薯糖琼脂培养基2001000液中加入10煮沸溶解后加糖20用。
把这培养基的pH值调到7.27.4杆菌。
配方三黄豆芽汁培养基黄豆芽100克琼脂15克葡萄糖20克水1000毫升301000把这培养基的pH值调到7.27.4配方四豌豆琼脂培养基豌豆80粒琼脂5克水200毫升取801小4、食用菌菌种培养基配方一马铃薯—蔗糖--琼脂培养基20%马铃薯煮汁1000毫升蔗糖20克琼脂18克200100020分钟足水分到100020%pH配方二综合马铃薯培养基20%马铃薯煮汁1000 毫升磷酸二氢钾3克硫酸镁1.5克葡萄糖20克维生素10毫克琼脂18克先配制20%整pH值到6该培养基用于培养和保存灵芝、平菇、香菇等食用菌菌种。
常见微生物培养基1. 肉汤培养基(Nutrient Broth):这是一种常用的基础培养基,适用于多种微生物的生长。
它含有牛肉浸膏、酵母提取物和蛋白胨等成分,提供了丰富的氮源、维生素和生长因子。
2. 肉汤琼脂(Nutrient Agar):在肉汤培养基的基础上添加琼脂,使其成为固体培养基。
这种培养基常用于分离和鉴定微生物,因为固体培养基可以形成单个菌落,便于观察和计数。
3. 血琼脂(Blood Agar):在肉汤琼脂中加入5%的脱纤维羊血或马血。
这种培养基对于需要氧气和营养丰富的环境的微生物(如链球菌和肺炎球菌)特别有效。
4. 麦康凯琼脂(MacConkey Agar):这是一种选择性培养基,用于分离和鉴定肠道杆菌。
它含有胆盐和结晶紫,可以抑制革兰氏阳性菌的生长,同时促进革兰氏阴性菌的生长。
5. 沙保罗琼脂(Sabouraud Agar):这是一种用于培养真菌的培养基,含有葡萄糖、蛋白胨和琼脂。
它还含有抗生素氯霉素,可以抑制细菌的生长。
6. 鲁哥氏碘液(Lugol's Iodine):这是一种用于检测细菌的染色剂,通常与革兰氏染色法一起使用。
它可以帮助区分革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。
7. 马铃薯葡萄糖琼脂(Potato Dextrose Agar):这是一种用于培养真菌的培养基,含有马铃薯提取物和葡萄糖。
它为真菌提供了丰富的碳水化合物和氮源。
8. 三糖铁琼脂(Triple Sugar Iron Agar):这是一种用于鉴定肠道杆菌的培养基,含有乳糖、蔗糖和葡萄糖。
通过观察细菌在培养基上的生长情况和产酸情况,可以区分不同的肠道杆菌。
9. 革兰氏染色法(Gram Stain):这是一种用于区分细菌的染色法,通过观察细菌在染色后的颜色,可以区分革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。
10. 荧光染色法(Fluorescent Stain):这是一种用于检测细菌的染色法,通过观察细菌在染色后的荧光颜色,可以区分不同的细菌种类。
(1)分离细菌时,在培养基中加入浓度为50U/ml制霉菌素,可以抑制霉菌和菌的生长。
(2)(2)分离放线菌时,在样品中加入0.05%十二烷基磺酸钠(SDS)不仅可以抑制细菌的生长,还能激活放线菌孢子的萌发。
加入氟哌酸(5mg/L)+制霉菌素(50mg/L)+青霉素(0.8mg/L)也可以有效地抑制细菌和真菌,而不影响放线菌的生长。
(3)(3)分离霉菌和菌时,在培养基中加入青霉素、链霉素和四环素各30U/ml,可以抑制细菌和放线菌生长。
(4)(4)分离根霉和毛霉时,由于这些微生物的菌丝易蔓延成片,难以得到纯化的菌落,通常在培养基中添加0.1%去氧胆酸钠或山梨醇防止菌丝蔓延,使菌落长得小而紧密。
(5)一般用于分离单一目的微生物的培养基中均含有抑制其他微生物的抑制剂,这些专用的抑制剂在小型实验室配制较麻烦,现已有成品供应,只要直接加入基础培养基即可。
如氨苄西林,主要用于分离亲水气单孢菌。
(6)1、细菌培养基配方一牛肉膏琼脂培养基牛肉膏0.3克,蛋白胨1.0克,氯化钠 0.5克,琼脂 1.5克,水 1000毫升在烧杯内加水100毫升,放入牛肉膏、蛋白胨和氯化钠,用蜡笔在烧杯外作上记号后,放在火上加热。
待烧杯内各组分溶解后,加入琼脂,不断搅拌以免粘底。
等琼脂完全溶解后补足失水,用10%盐酸或10%的氢氧化钠调整pH值到7.2~7.6,分装在各个试管里,加棉花塞,用高压蒸汽灭菌30分钟。
配方二马铃薯培养基取新鲜牛心(除去脂肪和血管)250克,用刀细细剁成肉末后,加入500毫升蒸馏水和5克蛋白胨。
在烧杯上做好记号,煮沸,转用文火炖2小时。
过滤,滤出的肉末干燥处理,滤液pH值调到7.5左右。
每支试管内加入10毫升肉汤和少量碎末状的干牛心,灭菌,备用。
配方四根瘤菌培养基葡萄糖 10克磷酸氢二钾 0.5克碳酸钙 3克硫酸镁 0.2克酵母粉 0.4克琼脂 20克水 1000毫升 1%结晶紫溶液 1毫升先把琼脂加水煮沸溶解,然后分别加入其他组分,搅拌使溶解后,分装,灭菌,备用。
牛肉膏蛋白胨培养基(培养细菌用)121℃灭菌20min。
2、高氏(Gause)1号培养基(培养放线菌用)配制时,先用少量冷水将淀粉调成糊状,倒入煮沸的水中,在火上加热,边搅拌边加入其他成分,溶化后,补足水分至1000mL。
121℃灭菌20min。
3、查氏(Czapek)培养基(培养霉菌用)121℃灭菌20min。
4、马丁氏(Martin)琼脂培养基(分离真菌用)112℃灭菌30min。
临用前加入0.03%链霉素稀释液100mL,使每毫升培养基中含链霉素30μg。
5、马铃薯培养基(简称PDA)(培养真菌用)培养基的配制:马铃薯去皮,切成块煮沸30min,然后用纱布过滤,再加糖及琼脂,熔化后补足水至1000mL。
121℃灭菌30min。
6、麦芽汁琼脂培养基培养基的配制:(1)、取大麦或小麦若干,用水洗净,浸水6—12小时,至15℃阴暗处发芽,上面盖纱布一块,每日早、中、晚淋水一次,麦根伸长至麦粒的两倍时,即停止发芽,摊开晒干或烘干,贮存备用。
(2)、将干麦芽磨碎,一份麦芽加四份水,在65℃水浴中糖化3—4小时,糖化程度可用碘滴定之。
加水约20mL,调匀至生泡沫时为止,然后倒在糖化液中搅拌煮沸后再过滤。
(3)、将糖化液用4—6层纱布过滤,滤液如混浊不清,可用鸡蛋白澄清,方法是将一个鸡蛋白加水约20mL,调匀至生泡沫时为止,然后倒在糖化液中搅拌煮沸后再过滤。
(4)、将滤液稀释到5—6波美度,pH约6.4,加入2%琼脂即成。
121℃灭菌30min。
7、无氮培养基(自生固氮菌、钾细菌)113℃灭菌30min。
8、半固体肉膏蛋白胨培养基121℃灭菌20min。
9、合成培养基加12 mL0.04%的溴钾酚紫(pH5.2—6.8,颜色由黄变紫,作指示剂)。
121℃灭菌20min。
10、豆芽汁蔗糖(或葡萄糖)培养基培养基的配制:称新鲜豆芽100g,放入烧杯中,加入水1000mL,煮沸约30min,用纱布过滤。
用水补足原量,再加入蔗糖(或葡萄糖)50g,煮沸熔化。
微生物实验室常见20种培养基配方大全1.肉汤培养基成分:牛肉膏或牛肉汤500克,葡萄糖10克,胰蛋白胨10克,NaCl5克,蒸馏水1000毫升。
用途:适用于各种需有机氮源的细菌的培养。
2.十倍腌盐水成分:NaCl300克,蒸馏水1000毫升。
用途:适用于耐盐真菌和嗜盐细菌的培养。
3.果胶培养基成分:果胶5克,葡萄糖5克,NaNO32克,K2HPO40.2克,MgSO4·7H2O0.1克,CaCO30.02克,FeSO4·7H2O0.01克,蒸馏水1000毫升。
用途:适用于果胶酶产生菌的培养。
4.大肠杆菌选择性培养基成分:土豆提取物4克,蛋白胨2克,乳糖10克,NaCl10克,胆盐0.75克,碱性蓝2克,琼脂15克,蒸馏水1000毫升。
用途:适用于分离大肠杆菌的选择性培养。
5.卡波培养基成分:石蜡300克,肉浸膏100克,大豆酪蛋白胨20克,NaCl5克,琼脂15克,蒸馏水1000毫升。
用途:适用于致病真菌的培养。
6. Nutrient Broth培养基成分:肉膏1克,酵母提取物2克,葡萄糖2克,NaCl5克,琼脂15克,蒸馏水1000毫升。
用途:适用于细菌和真菌的常规培养。
7. Luria-Bertani(LB)培养基成分:酵母提取物5克,酪蛋白胨10克,NaCl10克,琼脂15克,蒸馏水1000毫升。
用途:适用于E. coli等细菌的培养。
8. Sabouraud葡萄糖琼脂培养基成分:葡萄糖40克,醇20克,琼脂15克,蒸馏水1000毫升。
用途:适用于真菌的培养。
9. MacConkey琼脂培养基成分:鱼精膏20克,胆盐胆红素15克,玛琪琼脂25克,NaCl5克,蒸馏水1000毫升。
用途:适用于肠道杆菌的培养、分离。
10.马加提琼脂培养基成分:马加提琼脂50克,蒸馏水1000毫升。
用途:适用于细菌、酵母和霉菌的常规培养。
11.酵母醇葡萄糖琼脂培养基成分:葡萄糖20克,醇30克,琼脂20克,蒸馏水1000毫升。
实验室36种微生物培养基配制方法实验室养菌基是为微生物的培养和研究提供合适营养和条件的培养基质。
不同微生物对培养基的要求各不相同,因此实验室通常需要配制多种不同的培养基。
下面是36种常用的微生物培养基的配制方法。
一、通用培养基1. 营养琼脂培养基(Nutrient Agar)营养琼脂培养基是一种通用的培养基,适用于大多数微生物的培养。
其配方为:蛋白胨10克、葡萄糖5克、琼脂20克、蒸馏水1000毫升。
将以上成分溶解、调节pH至7.0-7.2,加入琼脂,高压灭菌,倒入平皿中,待凝固后用。
2. 营养肉膏培养基(Nutrient Broth)营养肉膏培养基是一种通用的液体培养基,适用于大多数微生物的培养。
其配方为:蛋白胨10克、牛肉提取物5克、葡萄糖5克、蒸馏水1000毫升。
将以上成分溶解、调节pH至7.0-7.2,高压灭菌,分装,即可使用。
3. 大肠杆菌选择性培养基(MacConkey Agar)大肠杆菌选择性培养基是一种常用的培养基,用于选择和鉴定大肠杆菌。
其配方为:蛋白胨17克、葡萄糖1.5克、恶瓜胆汁5克、硼酸紫0.5克、亮矾0.09克、蒸馏水1000毫升。
将以上成分溶解、调节pH至7.0-7.2,加入琼脂,高压灭菌,倒入平皿中,待凝固后用。
4. Sabouraud脱氧胆汁蔗糖琼脂培养基(Sabouraud Dextrose Agar)Sabouraud脱氧胆汁蔗糖琼脂培养基是用于真菌的培养和鉴定。
其配方为:脱氧胆汁10克、蔗糖40克、琼脂20克、蒸馏水1000毫升。
将以上成分溶解、调节pH至5.6-6.4,高压灭菌,倒入平皿中,待凝固后用。
二、选择性培养基1. VC菌属选择性平皿培养基(Vogel-Johnson Agar)VC菌属选择性平皿培养基是用于选择和鉴定Voges-Proskauer菌属(如克雷伯菌)的培养基。
其配方为:葡萄糖1克、琼脂15克、盐酸75克、蒸馏水1000毫升。
将以上成分溶解、加热煮沸,冷却至55-60°C,加入胆盐酯高压灭菌,倒入平皿中,待凝固后用。
36种微生物常用培养基配制1.牛肉膏蛋白胨培养基(用于细菌培养)牛肉膏3g,蛋白胨10g,NaCl 5g,水1000mL,pH7.4~7.6。
2.高氏1号培养基(用于放线菌培养)可溶性淀粉20g,KNO3 1g,NaCl 0.5g,K2HPO4•3H2O 0.5g,MgSO4•7H2O0.5g,FeSO4•7H2O0.01g,水1000mL,pH7.4~7.6。
配制时注意:可溶性淀粉要先用冷水调匀后再加入到以上培养基中。
3.马丁氏(Martin)培养基(用于从土壤中分离真菌)K2HPO41g,MgSO4•7H2O0.5g,蛋白胨5g,葡萄糖10g,1/3000孟加拉红水溶液100mL,水900mL,自然pH,121℃湿热灭菌30min。
待培养基融化后冷却55~60℃时加入链霉素(链霉素含量为30μg/mL)。
4.马铃薯培养基(PDA)(用于霉菌或酵母菌培养)马铃薯(去皮)200g,蔗糖(或葡萄糖)20g,水1000mL,配制方法如下:将马铃署去皮,切成约2cm2的小块,放入1500mL的烧杯中煮沸30min,注意用玻棒搅拌以防糊底,然后用双层纱布过滤,取其滤液加糖,再补足至1000mL,自然pH,霉菌用蔗糖,酵母菌用葡萄糖。
5.察氏培养基(蔗糖硝酸钠培养基)(用于霉菌培养)蔗糖30g,NaNO3 2g,K2HPO4 1g,MgSO4•7H2O0.5g,KCl 0.5g,FeSO4•7H2O0.1g,水1000mL,pH7.0~7.2。
6.Hayflik培养基(用于支原体培养)牛心消化液(或浸出液)1000mL,蛋白胨10g,NaCl 5g,琼脂15g,pH7.8~8.0,分装每瓶70mL,121℃湿热灭菌15min,待冷却至80℃左右,每70mL中加入马血清20mL,25%鲜酵母浸出液10mL,15醋酸铊水溶液2.5mL,青霉素G钾盐水溶液(20万单位以上)0.5mL,以上混合后倾注平板。
*注意:醋酸铊是极毒的药品,需特别注意安全操作。
36种常用微生物培养基配制汇总微生物培养基是一种用于培养和繁殖微生物的营养介质,通常包含碳源、氮源、无机盐、维生素和辅助物质。
不同微生物对培养基的要求不同,因此配制不同的培养基可以满足不同微生物的需求。
下面是常用的36种微生物培养基的配制方法。
1. Luria-Bertani培养基:取1L蒸馏水,加入10g蛋白胨、5g酵母粉、10g海藻糖,调pH至7.0,加入蒸馏水补足至1L。
2. 马铃薯葡萄糖培养基:取马铃薯50g,洗净去皮切块,加入1000ml蒸馏水中,煮沸15分钟,过滤得到1000ml的马铃薯汁液,加入20g葡萄糖,调pH至7.0,加入蒸馏水补足至1L。
3.BHIA培养基:取1L蒸馏水,加入37gBHIA粉,调pH至7.2-7.4,加入蒸馏水补足至1L。
4. 番茄汁琼脂培养基:取200ml番茄汁、20g琼脂,加入800ml蒸馏水中,煮沸溶解琼脂,过滤得到1L的番茄汁琼脂培养基。
5. Sabouraud培养基:取1L蒸馏水,加入20g葡萄糖、10g蛋白胨、40g沙门氏糖,调pH至5.6-5.8,加入蒸馏水补足至1L。
6.TSB培养基:取1L蒸馏水,加入17gTSB粉,调pH至7.3-7.5,加入蒸馏水补足至1L。
7.LB培养基:取1L蒸馏水,加入10g蛋白胨、5g酵母提取物、10g氯化钠,调pH至7.0,加入蒸馏水补足至1L。
8.爱德华培养基:取1L蒸馏水,加入20g牛肉精、10g酵母提取物、5g胆汁、10g胆石脂、5g葡萄糖,调pH至7.4-7.6,加入蒸馏水补足至1L。
9.VC培养基:取1L蒸馏水,加入10g蔗糖、10g大豆蛋白酸水解物、2g柠檬酸钠、0.1g亚铁氯化物、0.1g亚铜硫酸盐、0.1g亚锰酸盐、0.02g硼酸、0.1g维生素B1、0.02g抗坏血酸,调pH至7.0,加入蒸馏水补足至1L。
10. 铁琼脂培养基:取200ml铁琼脂粉,加入800ml蒸馏水中,煮沸溶解琼脂,过滤得到1L的铁琼脂培养基。
微生物培养基及其成分(147种)培养基及组分:THE COMPOSITION OF MEDIA培养基及成分1. Acetobacter Medium (醋酸菌培养基)Glucose (葡萄糖) 100g Yeasst extract (酵母膏) 10gCaCO3 20g Agar (琼脂) 15gDistilled water (蒸馏水) 1000ml Adjust (调) pH to 6.8适用范围:恶臭醋酸杆菌混浊变种2. Nutrient Agar (营养肉汁琼脂)Pepton (蛋白胨) 5g Beef extract (牛肉膏) 30gNaCl 5g Agar (琼脂) 15gDistilled water (蒸馏水) Adjust (调) pH to 7.0-7.2[Note]:When cultivation of Bacillus,5mg of to MnSO4.H2O may be added .It is favorable to promote spore formation .适用范围:产气气杆菌、粪产碱杆菌、蜡状芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌蕈状变种、地衣形芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、多粘芽孢杆菌、尘埃芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、嗜热脂肪芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌深黑变种、苏云金芽孢杆菌、苏云金芽孢杆菌蜡螟亚种(青虫菌)、苏云金芽孢杆菌戈尔斯德变种、苏云金芽孢杆菌猝倒亚种、产氨短杆菌、黄色短杆菌、谷氨酸棒状杆菌、北京棒杆菌、大肠埃希氏菌(大肠杆菌)、铜绿假单胞菌(绿脓杆菌)、凸形假单胞杆菌、荧光假单胞菌、弯曲假单胞菌、恶臭假单胞菌、假单胞杆菌、藤黄八叠球菌、亚黄八叠球菌、尿素八叠球菌、金黄色葡萄球菌、运动发酵单孢菌3. Azotobacter Medium (固氮菌培养基)KH2PO4 0.2g K2HPO4 0.8gMgSO4.7H2O 0.2g CaSO4.2H2O 0.1gNa2MoO4.2H2O Trace(微量) Yeast axtract(酵母膏) 0.5gMannitol(甘露醇) 20g FeCl3 Tract(微量)Distilled water (蒸馏水) 1000ml Agar (琼脂) 15gAdjust (调) pH to 7.2适用范围:固氮菌、胶质芽孢杆菌4. Corn Meal Medium (玉米粉培养基)Maize flour (玉米粉) 5g Peptone (蛋白胨) 0.1gGlucose (葡萄糖) 1g Tap water (自来水) 1000ml[Note]:Boil the mixture in autoclave at 121℃ for 1 hr. distribute the medium into 18ⅹ18 m m tubes , each contains 10 ml of the liquid , then autoclave at 121℃ for 1 hr . again (15磅蒸煮1小时,分装入18ⅹ18毫米试管,每管深度达6厘米。
146种常见培养基的配方培养基是微生物学实验中常用的一种重要实验工具,通过调配合适的培养基,可以提供微生物生长所需的营养物质,从而促进微生物菌落的繁殖和生长。
下面将介绍一些常见的培养基配方,涵盖了常用的总结培养基、选择性培养基和不同微生物类群的专用培养基。
1.琼脂肉汤培养基(NB)-牛肉脱脂粉5g-酵母提取物2.5g-琼脂12g- 蒸馏水 1000ml2.大肠杆菌复合培养基(LB)-液体培养基-蛋白胨10g-酵母提取物5g-NaCl5g- 蒸馏水 1000ml-琼脂板-蛋白胨10g-酵母提取物5g-NaCl5g-琼脂15g- 蒸馏水 1000ml3. 肠杆菌选择性琼脂培养基(MacConkey琼脂培养基)-蛋白胨17g-紫胆汁盐1.5g-普鲁士蓝盐1.5g-琼脂12g- 蒸馏水 1000ml4. 脱氧胆盐琼脂培养基(Deoxycholate Agar)-脱氧胆酸钠20g-普鲁士蓝盐0.8g-蛋白胨7.5g-琼脂12g- 蒸馏水 1000ml5.阿米巴选择性琼脂培养基(KV培养基)- 鸡蛋清 20ml- 中性红溶液 12ml-NaCl0.5g-纤维素0.25g- 盐酸 1ml-琼脂15g- 蒸馏水 1000ml6. 革兰氏阳性菌选择性琼脂培养基(Mannitol Salt Agar)-蔗糖10g-氯化钠75g-酵母提取物5g-麦芽提取物1g-琼脂15g- 蒸馏水 1000ml7. 维生素富集琼脂培养基(Burkholder's Basal Salt Medium)-NaNO31g-KCl0.5g-MgSO4·7H2O0.2g-CaCl2·2H2O0.02g-FeSO4·7H2O0.01g-琼脂14g- 蒸馏水 1000ml8. 三氯化铁琼脂培养基(Cetrimide Agar)-硫酸镁0.8g-氯化钴0.05g-氯化锌0.01g-氯化亚铁0.03g-三氯化铁0.03g-比色琼脂糖15g- 过滤蒸馏水 1000ml9. 库氏四甲基铵琼脂培养基(Chapman Agar)-高氯酸钠5g-脲7.5g-酵母提取物2g-海藻酸钠20g-紫胆汁盐0.25g-琼脂12g- 蒸馏水 1000ml10. 还原格兰氏琼脂培养基(Reduced Gram-negative Broth)-蛋氨酸0.5g-异亮氨酸0.5g-半胱氨酸0.5g-菜碱0.5g-胀氨酸0.5g-琼脂7g- 蒸馏水 1000ml这些是其中的一部分常见的培养基配方,涵盖了常用的总结培养基、选择性培养基和不同微生物类群的专用培养基。
1、营养琼脂(普通琼脂)成份:牛肉浸液(或其它浸液,消化液或肉膏汤) 100毫升琼脂(视天气,琼脂质量而定)制法:将上物加热溶解,补足水,调ph至7.6,过滤分装121℃,高压灭菌15分钟。
用途:作普通琼脂平皿。
2、血琼脂平板(BA)制法:取营养琼脂(PH7.6),加热使其溶解待冷至45-50℃,以灭菌操作于每100毫升营养琼脂加灭菌脱纤维羊血或兔血5-10毫升,轻轻摇匀,立即倾注于平板或分装试管,制成斜面备用。
用途:1. 一般棉拭子均接种此培养基。
2.尿液,脓液3.分离细菌标本用。
3、基础培养基 (肉膏汤BB)成份:蛋白胨 10克 牛肉膏 5克氯化钠 5克 水 1000毫升制法:将以上各物称好,加水煮沸溶解,用1NNOH校正PH至7.6,过滤分瓶,1121℃高压灭菌,20分钟备用。
用途:1 作耐药试验,增菌用分装小管。
2 作普通琼脂斜面。
4、血液培养基(大管肉汤培养基)成份:1 新鲜牛肉浸液 1000毫升2 PABA(对氨基苯甲酸〔相当于10mg/毫升〕) 1g% 1毫升3 MgSO4 [相当于0.493/100毫升] 49.3% 1毫升4 枸椽酸钠 0.3g制法:1 将1号,4号混合液,2号,3号液分装高压灭菌。
2 取灭菌1,4号混合液用无菌法加入PABA,MgSO4,再分管,行无菌试验三天方可使用。
用途:作血,骨髓培养用。
5、肠道杆菌培养基(伊红美兰琼脂)成份: 蛋白胨 10克 乳糖 10克氯化钠 5克 琼脂 25(22)克水 1000毫升 2%伊红溶液20毫升0.5%美兰溶液 20毫升2制法:将蛋白胨,氯化钠琼脂称好,加水1000毫升使溶解,校正PH7.4过滤,补足失水,加入2%伊红溶液20毫升,0.5%美兰溶液20毫升,(115℃高压20分钟),冷却至50℃左右倾注平板,凝固后存冰箱备用。
(高压以后方可再加乳糖)用途:用作分离沙门氏,志贺氏菌属,也作菌群调查。
6、罗文斯坦培养基成份:磷酸二氢钾 2.4克 硫酸镁 0.24克枸椽酸钠 0.6克 天门冬素 3.6克纯甘油(丙三醇) 12毫升 水 600毫升马铃薯粉 30克 鸡蛋 1000毫升(约3公斤)2%孔雀绿水溶液 20毫升制法:1 除鸡蛋外(还有孔雀绿)。
可将其它物品称好,放入大三角瓶包扎好,高压灭菌。
2 鸡蛋用75%酒精泡30分钟,灭菌法打蛋,倒入盛有玻璃珠的灭菌三角烧瓶内充分将鸡蛋摇散。
3 将各成份按比例配好,分装每管约5毫升。
4 间歇灭菌第一次90℃1小时,第二次80℃半小时,第三次80℃半小时(或放85℃烤箱内连续二次)。
3质控标准: 1 灭菌试验合格。
2 接种结核杆菌要求两星期生长良好。
用途:作结核分枝杆菌培养用。
7、结核半固体培养基成份:磷酸氢二钠 19克 硫酸镁 0.6克磷酸二氢钾 2.5克 天门冬素 5克1%孔雀绿 1.5克 甘油 20毫升吐温80(10%) 5毫升 水 1000毫升枸椽酸钠 2.5克 动物血清 100毫升琼脂 1.5克(80小时用甲醇去脂)1%孔雀绿 0.78毫升 吐温80(10%) 5毫升加动物血清 100毫升制法: 1 除血清外将上述药品均称好,放入煮沸溶解,调PH7。
22 分管(每管约10毫升)包扎好,高压,121℃半小时灭菌。
3 待冷后无菌法加无菌血清(绵羊血或兔血)每管约1毫升备用。
4 去除琼脂方法:取琼脂若干或于三角烧瓶中加甲醇于琼脂1毫升用塞密封,放37℃温浴80小时,每天摇动一次,冷却后到时取出用滤纸过滤,待琼脂自然冷却后备用。
4质控标准:1无菌实验合格。
2琼脂硬度合适而清亮。
3接种标准结核杆菌用,强度合适即可用。
用途:培养结核杆菌用。
8、亚碲酸钾血琼脂平板成份:琼脂基础 100毫升 1 0%葡萄糖 2毫升1%亚碲酸钾 4.5毫升 绵羊血 10毫升制法:1将琼脂基础溶解好,加入羊血。
2马上加热使成咖啡色后,稍冷再加入10%葡萄糖2毫升与1%亚碲酸4.5毫升混合后倒入无菌平板,凝固后存冰箱备用。
质控标准:接种白喉杆菌生长良好,其它革兰氏阴性菌均抑制生长。
用途:供培养及鉴别白喉杆菌用。
9、米培养基成份:白米 20克 水 1000毫升琼脂 20克 吐温80 10毫升制法:1将20克米加水200毫升煮沸45分钟,煮时将容器盖好。
2用纱布过滤,只要米汤,不要饭,加水至1000毫升。
53加琼脂20克,吐温-80 10毫升煮溶,分装中型管(每管约3毫升),包扎好,高压,121℃半小时,消毒备用。
质控标准:1灭菌。
2要求清亮。
3接种白色念珠菌17-24小时生长良好,并产生厚膜孢子。
用途:培养白色念珠菌用。
10、蛋白胨水培养基成份:蛋白胨 1克 氯化钠 0.5克水加至 100毫升 PH调至 7.8制法:把以上各物称好溶于水,调节PH7.6分装消毒备用。
质控标准:1 放置37℃无菌生长。
2 接种大肠杆菌24小时生长良好。
3 可作中国兰平板基础液。
可作靛基质基础液(作此试验需要色氨酸蛋白胨)。
11、血培养基成份:蛋白胨 10克 牛肉膏 5克氯化钠 5克 葡萄糖 3克6枸椽酸钠 3克 MgSO4。
7H2O 20毫升0.5%PABA 10毫升 酵母浸液 10毫升 0.2克(2%过滤)*酚红0.4% 6毫升 水 1000毫升琼脂 0.5克*:作大BB,小BB时,不要加酚红和琼脂。
制法:1、除PABA、硫酸镁、酚红外均称好煮化调PH7.42、调好PH后再加酚红。
3、硫酸镁、PABA另外无菌再加入(亚细,小BB)12、沙氏培养基成份:蛋白胨 1克 水 100毫升琼脂 1.5克(琼脂粉1克%) 葡萄糖或麦芽糖 4克制法:1将上述物质称好,放入水中煮沸溶解(不必调PH即有5左右)分中号试管(约4毫升)包扎,高压115℃20分钟。
2 趁热斜好,凝固备用。
质控标准:1无菌试验合格。
2接种霉菌比在其它培养基上生长良好,其它菌生长不好。
用途:作分离培养霉菌用。
7注意:1 接种临床新鲜标本可先加1-2滴70%酒精让干后再接种于含12.5%氯霉素沙氏斜面培养基上。
2 也可用蜂蜜8克代替葡萄糖或麦芽糖。
13、肉渣培养基成份: 牛肉渣 牛肉浸液(牛肉膏)制法:将做牛肉浸液的牛肉渣,装入试管,高约3毫米,加入牛肉浸液或牛肉膏汤(PH7.6)约5毫升,比肉渣高一倍,液面上加入已溶解的凡士林,高约0.5厘米(不加也可),121℃高压灭菌20-30分钟后保存于冰箱内备用 。
用途:用于厌氧菌培养。
注意:如无肉渣也可用牛、羊血等代替,将血块先放入水内煮沸,取出成小块,血块在加热后摇匀成碎颗粒状。
14、单糖发酵管培养基(半固体)成份: PH7.6-7.8蛋白胨水 1000毫升(0.3克/100毫升)1.2%酚红液 0.4毫升琼脂 0.4 - 0.5克10%糖或醇 10毫升制备:把蛋白胨水,琼脂加热溶解,然后加1.2%酚红液0.4毫升,10%糖108毫升,混匀,分装试管,每管约2-3毫升,经115℃高压灭菌20分钟后,分置于试管架上,贴上各类糖或醇类标签备用。
质控标准:细菌发酵糖类或醇而产生酸,能使培养基PH改变,指示剂由红变黄色,如因发酵产生气体则半固体内产生气泡,如有动力则半固体由清亮变混浊。
15、明胶培养基成份:肉浸液 1000毫升(牛肉浸膏5克)明胶 12克制法:100毫升肉浸液中,加入明胶12克,隔水加热煮化,校正PH7.2,分装小号试管,用阿诺氏间歇灭菌80℃30分钟,连续3日,或者108℃高压20分钟,冷却,贮存备用。
15-1、碱性蛋白胨水成份:蛋白胨 20克 氯化钠 5克硝酸钾 0.1克 结晶碳酸钠(NaclCO3.12H2O) 0.2克水 1000毫升制法:将蛋白胨,Nacl,硝酸钾,结晶碳酸钠称好,溶于1000DW中,校正PH8.49分装试管,121℃高压灭菌15分钟后备用 。
用途:用于霍乱弧菌培养。
16、葡萄糖蛋白胨水(M。
V用)成份:蛋白胨 5克 葡萄糖 5克K2HPO4 5克 水 1000毫升制法:将上述称好溶解分装试管,调PH7.4高压灭菌115℃ 灭菌20分钟 ,或者葡萄糖加热煮沸后再倒试管标准:灭菌试验合格。
接种大肠杆菌VP阴性,M阳性;接种产气杆菌VP阳性,M阴性。
用途:作鉴别肠道杆菌用。
17、枸椽酸盐培养基成份:磷酸二氢铵 0.1克 硫酸镁 0.02克磷酸氢二钾 0.1克 枸椽酸钠 0.23--0.5克(0.36)氯化钠 0.5克 琼脂 1.5克0.5%溴麝香草酚兰2毫升 (调PH6.8再加)制法:将上述称好,放入水中煮沸溶解,调PH6.8,然后分装中号试管,高压灭菌,趁热倒呈斜面,凝固10后备用。
标准:1、灭菌试验合格,培养基呈果绿色适宜。
2、接种大肠杆菌,培养基上不生长,也不变色。
3、接种产气杆菌,培养基呈深兰色。
用途:作鉴别大肠杆菌用。
18、双糖铁培养基成份:下层:蛋白胨 1克 氯化钠 0.5克葡萄糖 0.2克 琼脂 0.3-0.5克水 100毫升将上述物质混匀调PH7.6后加1.2%酚红0.4毫升上层:蛋白胨 1克 氯化钠 0.5克乳糖 1克 硫代硫酸钠 0.03克硫酸亚铁 0.02克 琼脂 1克水 100毫升制法: 1将下层配好,分装中号试管(1毫升),塞好包扎,15磅高压灭菌半小时,使凝固后备用。
2制上层时,先将蛋白胨水制好,加入硫酸亚铁,硫代硫酸钠,加热溶11解PH8.1,再加入酚红分瓶,(每瓶300毫升,称取琼脂包扎灭菌,趁热加入乳糖隔水煮沸30分钟或112℃消毒15分钟)。
3取已制的下层管,每管用无菌法倒入上层液约1。
5毫升,边斜放置使成斜面,凝固后备用。
标准:无菌试验合格,接种大肠杆菌下层产酸产气,上层产酸。
19、尿素培养基成份:蛋白胨 0.1克 氯化钠 0.5克磷酸二氢钾 0.2克 尿素 0.2克(或10%2毫升)葡萄糖 0.01克(或10%葡萄糖0.1毫升)H2O 100毫升 酚红(0.2%) 0.4毫升制法:1除葡萄糖,尿素外把其它药品称好放入水中煮沸,使溶解,调PH7.2过滤,15磅高压灭菌15分钟.2配制尿素(灭菌)液:每100毫升基液内加2毫升.3配制10%葡萄糖(灭菌)每100毫升加0.1毫升.4分装小试管待用.标准:1灭菌试验合格.2接种变形杆菌24小时呈红色.12用途:鉴定变形杆菌用.20、胆盐中性红琼脂成份:蛋白胨琼脂PH7.2-7.4 5000毫升胆 盐 2.5克乳糖 5.0克对氨基苯甲酸 25毫克1%中性红溶液 25毫升制法:将胆盐,对氨基苯甲酸,乳糖趁热加入已灭菌之蛋白胨琼脂中,待冷至50-60℃时,加入1%中性红液2.5毫升,混合后即倾注平皿,凝固待用.*:1%中性红:1克中性红加酒精60毫升,加水40毫升21、丙二酸盐培养基(缩苹果酸钠)成份:丙二酸钠 0.3克 酵母浸膏 0.1克Nacl 0.2克 硫酸铵 0.2克K2HPO4 0.06克 KH2PO4 0.04克水 100毫升PH6.8,高压灭菌备用.130.2%溴麝香酚兰乙醇 1.25毫升制法:与枸椽酸盐利用试验相类似,是测定细菌能否利用丙二酸盐与碳源.无机铵盐为氨源而生长,生长者使培养基变成碱呈兰色.鉴定: 克氏杆菌 (+) 赫夫尼亚 (+)沙门氏菌 (—) 痢疾杆菌 (—)14。