--临床常见标本的微生物学检验

带你了解什么是临床微生物检验临床微生物检验也被称作诊断微生物学，它属于医学微生物学的范畴，重点是对感染性疾病能够快速、准确地检验出病原体的策略与方法进行研究，为临床诊断提供依据，并对进一步合理用药和防止感染继续扩散进行指导的学科。

今天，我们将对临床微生物检验做一个简要的介绍。

1什么是临床微生物检验临床微生物检验是对人体的各种物质进行微生物检验，为临床诊断和治疗提供依据。

整个检验过程包括病人样品的采集、运送、处理，样品中致病微生物的分离、培养、鉴定、药物敏感试验，出具检验报告。

2临床微生物检验的项目微生物室检验是医学检验中的一个重要分支，主要用于检测人体内的微生物感染情况。

微生物室检验的项目包括细菌培养、真菌培养、病毒检测、抗生素敏感性试验等。

细菌培养是微生物室检验中最常见的项目之一。

通过对患者样本进行细菌培养，可以确定患者是否感染了细菌，并且可以确定细菌的种类。

细菌培养的方法包括血液培养、尿液培养、脑脊液培养等。

在细菌培养过程中，需要注意无菌操作，避免污染。

3临床微生物检验的目的：可靠的微生物检验结果，可以对临床的诊断治疗产生一定的指导作用，为临床科学用药和成功控制感染提供依据，是正确、合理地使用抗菌药物，延缓细菌耐药性的发生，减少抗菌药物滥用和监测医院感染最重要的一步。

4临床微生物检验的要求：临床微生物检测要求快速准确地出具检测报告；化验员应具备较好的微生物学基础，能熟练掌握操作技术，并培养良好的无菌观。

在检测过程中，要进行全面的质量管理，并接受质量监督检查。

同时要高度重视实验室的消毒和灭菌。

诊断试验的选择原则：选择有鉴别价值的试验来鉴别两种细菌，必须选择一项两种菌表现出完全不同的试验，也就是一种菌表现出阳性，一种菌表现出阴性，该试验才有鉴别价值。

否则，就没有鉴别价值。

（1）鉴定一种细菌可能有多种特异的方法，但没有必要逐一进行试验，只选择其中一种或两种达到目的即可，多选无意义。

（2）选择简单快捷的检测方法。

临床微生物学检验的标本采集一、血液和骨髓细菌学检验标本的采集（一）适应症菌血症、败血症和感染性骨髓炎等感染菌的培养鉴定和药物敏感试验。

（二）病人准备1．凡怀疑菌血症和败血症的患者，采血培养时，应尽量在未使用抗菌素前采血，如已使用过抗菌素，应尽量选择抗菌素在体内浓度最低时采血，或在病人第二次使用抗菌素之前采集血培养标本。

2．应在病人发热期或寒颤时采集（三）标本采集1．血培养瓶领取：凭医嘱和检验申请单到检验科细菌室领取。

按照实际情况选择相应类型的血培养瓶：如灰色瓶盖为普通成人培养瓶；粉红色盖为儿童需氧菌培养瓶；紫色盖为厌氧菌培养瓶。

2．将患者信息录入相应的血培养瓶条码中，并在作好病人姓名、科别、床号等标识。

2．采集方法：严格消毒病人采血部位和血培养瓶口，抽一定量血液或骨髓后，无菌注入血培养瓶内，轻轻摇匀。

3．标本量：成人每次采血5~10ml，小儿采血3~5ml，骨髓2~3ml，采血量足够则阳性率高，反之阳性率减低。

（四）注意事项1．抽血、抽骨髓和接种时，须严格注意无菌操作，避免污染杂菌。

2．从抽血、抽骨髓到接种入瓶，动作要快，防止血液凝固。

3．成人不明原因发热、怀疑血流细菌感染时宜在不同部位抽血2套，每套2瓶（需氧、厌氧各一瓶）。

4．怀疑伤寒、亚急性细菌性心内膜炎及布鲁氏菌病的病人等，一般一日抽血三次培养，必要时需追加次数。

（五）标本送检和保存1．标本采集后应及时送检，一般不超过1h送交细菌室。

2．送检过程中应注意防止培养瓶打破或其它潜在性污染可能。

二、痰液或下呼吸道分泌物细菌学检验标本的采集（一）适应症肺炎、肺气肿、支气管炎、鼻窦炎、肺结核等感染菌的培养鉴定、药物敏感试验和抗酸菌检查。

（二）病人准备1．尽量在未使用抗菌素前留取标本。

准备好无菌标本容器，贴上条码、标明标识。

2．住院病人应留取清晨起床第一口痰。

为减少正常菌群的污染，嘱患者早上起床后用清水或生理盐水漱口，不要刷牙，除去鼻咽分泌物。

（三）标本采集1．一般病人用力咳出气管深处或肺部痰液，留于无菌标本容器内。

检验科常见病原微生物检测方法近年来，随着科技的不断发展和医疗水平的提高，病原微生物的检测方法也得到了极大的改进和完善。

在检验科中，常见的病原微生物检测方法主要包括细菌培养法、分子生物学方法和免疫学方法等。

本文将针对这些常见的方法进行介绍和分析。

一、细菌培养法细菌培养法是检验科中最常用的一种病原微生物检测方法。

它通过将患者标本（如血液、尿液等）接种于含有适当营养物质的培养基上，使病原微生物得以生长和繁殖。

然后，通过观察培养物的形态、颜色以及菌落的特征，再进行进一步的鉴定和分析。

典型的细菌培养方法主要有血液培养、尿液培养、粪便培养等。

在实验室操作时，我们需要严格按照标本类型、处理方法和培养条件来进行。

同时，培养过程需要严格遵守无菌操作，以避免细菌交叉污染和误判。

二、分子生物学方法分子生物学方法是近年来快速发展的一种病原微生物检测技术。

与传统的细菌培养法相比，它具有更高的敏感性和特异性。

分子生物学方法主要包括聚合酶链反应（PCR）、DNA测序和核酸探针等。

聚合酶链反应是一种常用的分子生物学技术，在快速检测病原微生物方面具有很大优势。

它通过扩增病原微生物的特定DNA片段，从而提高检测的准确性和灵敏度。

此外，PCR还可以进行多重扩增和实时扩增，进一步提高了检测效果。

DNA测序是一种更加精确的病原微生物检测方法。

通过将扩增得到的DNA片段进行测序，可以准确地确定其序列，进而进行比对和分析。

这种方法在对未知病原微生物的鉴定和新病原体的发现上具有重要的意义。

核酸探针是一种利用亲核反应原理进行病原微生物检测的方法。

它通过将已知病原微生物特异性序列的亲核核酸标记上特定荧光物质，通过特异性结合来检测目标病原微生物的存在。

三、免疫学方法免疫学方法是利用人体自身免疫系统对抗病原微生物的原理进行病原微生物检测的一种方法。

它主要包括血清学检测、免疫组化法、免疫电镜等。

血清学检测是一种通过检测患者血清中的抗体来判断病原微生物感染情况的方法。

《医学微生物学》三大常规的微生物学检查从临床标本中分离细菌的目的是为疾病的病原学做诊断，或查找与疾病相关的微生物，以及对抗生素的敏感性，这对于临床诊断、治疗、预后和进行流行病学调查是很有价值的。

因此，对临床标本的处理和检测应掌握以下原则。

1．临床标本的正确采集和处理对于疾病的正确诊断关系很大。

病人标本一般应在应用抗菌药物前采集。

对血液、脑脊液或穿刺液等标本，应严格按照无菌技术进行采集；对鼻咽拭子、肛拭子、粪便等标本，虽无须严格无菌操作，但也应尽量避免杂菌混入。

2．采集容器上应贴好送检号及病人姓名的标签，连同检验单一起尽早送检验室。

若路途较远，应冷藏保存送检；对脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌等特殊标本，送检时应35℃～37℃保温。

3．人体很多部位与外界相通，存在有正常菌群，但不致病，故在涂片检查或分离培养时，应区别标本中是常居菌群的污染还是致病菌。

另外，对某些无菌的部位，如血液、骨髓、脑脊液等，如检查出细菌应视为致病菌，但必须要排除采样及操作中的污染。

4．根据标本来源和可能存在的病原菌，选定各种分离培养基和孵育环境。

如痰标本一般选用血平板，用于化脓性链球菌、无乳链球菌、肺炎链球菌、白喉棒状杆菌等的分离。

【血液标本检查】正常人的血液是无菌的。

当细菌侵入血流并在其中生长繁殖，产生毒素等，可引起菌血症或败血症。

细菌学检验对其诊断和治疗具有极其重要的意义。

一、标本采集l．标本采集必须严格遵守无菌操作，即应去除皮肤上的细菌，又应注意空气中的细菌。

穿刺部位以碘酒、酒精棉球消毒，用干燥的灭菌注射器抽取血液，立即注入选定的液体培养基瓶内，充分混匀以防凝固。

2．采血一般应在治疗前，并在高热、寒战时作培养。

伤寒在发病一周内即菌血症期间采血；化脓性脑膜炎，鼠疫应在发热1～2d内采血；亚急性细菌性心内膜炎也宜于发热高峰采血或多次采血，且每隔1～2h采血一次，连续3～4次，可获较高的阳性率。

3．采血量应相当于培养液的1／10，通常是50ml培养液采血5ml，这样可使存在于血液中的补体、抗体、调理素、溶菌酶等抑制因子被稀释，使之减弱或失去抑制作用。

临床诊断学微生物学检查的方法临床微生物学实验室接到标本后应立即进行微生物学检验。

主要包括直接镜检、检测特异性抗原或病原体成分、进行分离培养和鉴定、体外药敏试验（一）直接镜检标本经涂片染色或制备湿片镜检，有些标本如尿液、脑脊液等经过离心浓缩后镜检出其初步结果对有些病人标本有诊断参考价值。

直接镜检对于确定进一步检出步骤及鉴定方法也很有帮助。

另外，直接镜检还可评价标本是否符合检验要求。

（二）快速诊断快速检测病原体成分主要是指特异性抗原和核酸检测。

特异性抗原检测包括免疫荧光技术、胶乳凝集试验、酶免疫技术、对流免疫电泳、化学发光免疫测定等。

核酸检测包括核酸探针杂交、PCF技术。

其他快速检测法还有气-液相色谱法、化学发光、生物发光测定法和基因或蛋白微型阵列芯片技术等。

（三）直接药敏试验直接药敏试验即在分离培养病原体的同时，直接将临床标本接种于平板，用抗生素纸片作药物敏感性试验，在18〜24h内可获得结果。

但因其在试验时接种量难以标准化，且对混有杂菌和混合感染的标本不易明确其结果，故分离出纯培养物后应再作体外药物敏感试验。

（四）常规检验1.分离培养：通常由正常无菌部位采取的标本接种血平板，置于空气或含5%〜10 % CO2的气缸中培养，大部分细菌可于24〜48h生长良好。

若原始培养为阴性，但据镜检结果和临床信息提示可能有病原菌存在，则应再采集大量标本，离心浓缩或溶解离心法处理，取沉淀接种营养丰富的需氧或厌氧培养基来培养。

对于存在正常菌群部位采集的标本，分离时应采用选择培养基以利于病原菌生长，也可加某些抗生素抑制污染菌的生长。

对于某些感染标本中发现的细菌，如尿路感染的尿液中检出大肠埃希菌，可能是病原菌，也可能是污染菌或正常菌群，其临床意义的确定有赖于定量培养法。

即取一定量的标本如液体标本用液体培养基作一系列稀释；组织标本称量后制成悬液，并稀释成l0-1，10-2,10-3等，分别取0.1ml涂布于血琼脂平板或倾注培养，35 C 24h后计算每克标本所含细菌数。

临床标本微生物检验概述● 考点临床标本微生物学检验（血液、脑脊液、痰、尿液、粪便、性传播疾病、创伤）（1）常见病原菌（2）标本采集及运送（3）检验方法（4）临床意义一、临床标本细菌检验的基本程序二、血液感染◆正常人的血液是无菌的。

◆菌血症是指在血液中可检测到细菌，包括一过性和持续性在血中存在。

◆败血症是指病原菌侵入血流后，在其中大量繁殖并产生毒性产物，引起全身中毒症状。

◆脓毒血症是指化脓性细菌败血症时，细菌通过血流扩散至全身其他组织或器官，产生新的化脓性病灶。

（一）常见病原菌（二）标本采集1.采血时间和频率◆病人发热初期或高峰期采集，或在未用抗生素前采集。

但怀疑细菌性心内膜炎时，血培养不少于三次。

2.采血量◆一般为静脉采血，成人采血量10～20ml，儿童3～5ml，婴儿1～2ml。

3.床边直接注入血液培养基，否则用SPS抗凝剂送检，不得用EDTA，枸橼酸钠抗凝。

4.检查血管内导管有无细菌污染，可无菌操作，剪下导管5cm远侧段，置无菌容器内送检。

（三）微生物分离培养和鉴定1.培养基的选择◆用自动血培养分析仪时选用相应的血培养瓶，如需氧＋厌氧，需氧＋高渗等。

2.分离和鉴定当观察有细菌生长时或血培养仪阳性报警时，应及时作如下检验：◆（1）涂片染色镜检，结果及时与临床联系；◆（2）转种血平板、巧克力平板、厌氧血平板或其他特殊培养基等分离培养纯菌再进行鉴定；◆（3）同时做药敏试验，结果及时报告临床作治疗参考。

（四）报告方式阴性结果：◆7d报告无细菌生长。

◆疑为亚急性细菌性心内膜炎、布鲁菌病、厌氧菌血症、真菌血症时，血培养至少连续培养2～3周，仍无细菌生长者可报告为阴性。

阳性结果——三级报告方式：◆第一级报告告知标本已出现阳性并报告直接细菌涂片结果，同时做初步药敏试验；◆第二级是报告初步药敏结果，同时做正式鉴定和药敏试验；◆第三级报告正式鉴定和药敏试验结果。

（五）临床意义◆葡萄球菌菌血症常由疖、痈、脓肿及烧伤创面等原发感染灶继发，也可由呼吸道感染引起。

检验科微生物学常见检测项目解读微生物学是生物学的一个重要分支，研究微生物的结构、生理、遗传、生态等方面的基本规律。

在临床检验中，微生物学的应用非常广泛，通过对微生物的检测可以准确判断疾病的病因以及治疗方案。

本文将详细介绍检验科微生物学常见的检测项目及其解读。

一、培养和鉴定1.细菌培养和鉴定细菌培养和鉴定是微生物学常见的一项检测项目。

通过对病原体细菌的培养和鉴定，可以确定致病菌的种类以及对抗生素的敏感性。

在细菌培养过程中，检验者需要取得适量的临床标本，如胸水、尿液、血液等，并进行相应的培养试验，最终通过鉴定技术确定致病菌的种类及其抗生素敏感性。

2.真菌培养和鉴定真菌培养和鉴定也是微生物学中常见的检测项目之一。

真菌是一类单细胞或多细胞真核生物，它们广泛存在于自然界中，有些真菌对人体造成感染。

在真菌培养和鉴定中，检验者同样需要获取合适的临床标本，并经过一系列培养和鉴定试验，最终确定致病真菌的种类和药敏结果。

二、微生物快速检测1.微生物快速培养技术随着科技的发展，微生物快速培养技术逐渐应用于临床检验。

相比传统的培养方法，快速培养技术可以在较短的时间内得到细菌或真菌的培养结果，从而提高了疾病的诊断速度和准确性。

常见的微生物快速检测技术包括PCR、MALDI-TOF等。

2.微生物RNA检测微生物RNA检测是一种通过检测细菌或真菌RNA分子来确定病原微生物种类的技术。

该技术具有高灵敏度和特异性，能够帮助医生迅速确定病原微生物，从而指导临床治疗。

在一些特殊感染疾病的诊断中，微生物RNA检测技术发挥了重要作用。

三、药敏试验1.药敏试验药敏试验是一种检测细菌对抗生素敏感性的方法。

在治疗感染性疾病时，合理选用敏感的抗生素对病原微生物进行针对性治疗至关重要。

通过药敏试验可以明确细菌对不同抗生素的敏感性，为临床用药提供科学依据。

2.耐药检测除了敏感性检测，耐药检测也是非常重要的项目。

近年来，随着抗生素的滥用和耐药菌株的增多，耐药检测显得尤为重要。