洛铂对鼻咽癌抗肿瘤作用的体外实验研究
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Ｊ ｏ ｕ ｒ ｎ ａ ｌ ｏ ｆ Ｃｈ ｉ ｎ ａ Ｐ ｒ ｅ ｓ ｃ ｒ ｉ ｐ ｔ ｉ ｏ ｎ Ｄｒ ｕ ｇ Ｖ ｏ １ ． １ ３ Ｎ ｏ ． ８
．
实验 研 究 ．
１ ２ ７
洛铂对鼻咽癌抗肿瘤作用的体外实验研究
苏静
（ 解放军第一五二 中心 医院肿瘤科 ， 河 南平顶 山 ４ ６ ７ ０ ０ ０ ）
采用 Ｃ Ｃ Ｋ 一 ８法 进 行 检 测 ， 将 正 在 对 数 生 长 的 细 胞 接 种
在９ ６孔板 培养 ２ ４ ｈ ， 然后 加入 洛铂 ， 浓 度分 别 为 ０ ． ０ ９ ８ 、 ０ ． １ ９ ５ 、
０ ． ３ ９ ０ 、 ０ ． ７ ８ ０ 、 １ ． ５ ６ ０ 、 ３ ． １ ２ ５ 、 ６ ． ２ ５ ０ 、 １ ２ ． ５ ０ ０ ｕｍｏ ｌ ／ Ｌ ， 对 照 组 加 入 等 量培养液 。４ ８ ｈ 后加入 Ｃ Ｃ Ｋ 一 ８ ， 在３ ７ ￣ Ｃ的条件下孵育 ３ ｈ ， 使用 ２ ． ２洛铂对鼻 咽癌 细胞 的周 期和凋亡影 响
具体结果报告如下 。
１资 料 与 方 法
１ ． １肿瘤细胞株 据结果见表 １ 。 鼻 咽癌 细胞株 Ｃ Ｎ Ｅ ２ 、 ＨＯ Ｎ Ｅ１ 、 Ｓ Ｕ Ｎ Ｅ１ 均取 自肿 瘤 防治 中 表 １ ： 不 同浓度的洛铂对鼻咽癌细胞 ４ ８ ｈ后的增 殖抑 制率（ ％） 心， 实验 中将 用到 正在对 数 生长 的细胞 ， 将 培养 液 Ｒ Ｐ ＭＩ 一 １ ６ ４ ０
１ ． ３ ． ２检 测 细胞 周 期
数据结果见表 ２ 。
疗具 有较 高的应 用价值 。
Ｉ 关键词 】 洛铂； 鼻咽癌 ； 抗肿瘤作用； 药物浓度
一
，
鼻 咽癌是 临床上常见 的肿瘤类 型， 是我 国高发恶 性肿瘤之 中 Ｄ Ｎ Ａ水 平 。 发病 率在耳 鼻咽喉 恶性肿瘤 中 占据 首位 ］ 。患者 常见 的临 １ ． ３ ． ３检 测 细胞 凋 亡
癌 中的作用效果 ， 本文进行体外洛铂对抗鼻 咽癌细胞株 的实验，
洛铂对 于鼻 咽癌细胞增 殖具有 明显的抑制作 用 ， 而且浓度 越 高， 增殖抑制率越高 ， 体现 出浓度依赖性 。药物 的半数抑制浓 度 Ｉ ｃ ５ ０ 分别 是 （ ４ ． １ ４ － ０ ． ５ ） 、 （ ４ ． ３ ４ － １ ． ２ ） 、 （ ２ ． ５ －０ ． ２ ）ｕ ｍ ｏ ｌ ／ Ｌ 。 数
床症 状主要 为鼻塞 、 头痛 、 涕 中带血 、 耳 闷堵 感、 听力下 降等 ， 由
将 细胞接种在 ６孔板， 培养 ２ ４ｈ 后加 入洛铂， 浓度为 Ｉ Ｃ 的 于该 疾病具有 隐蔽性和症 状多样性 ， 容易发 生肿瘤 细胞的转移 ０ ． ５倍、 １ 倍、 ２ 倍、 ４倍， 对照组加入等量培养液。４ ８ ｈ 后将细胞收 和复发 ， 因此 预后 差 【 ２ ＿ 。早期 患者采取放疗方式 ， 晚期患者则采 集并使用磷酸盐缓 冲液进行洗涤 ， 加入碘化丙啶和 Ａ ｎ ｎ ｅ ｘ ｉ ｎ Ｖ — Ｆ １ Ｔ Ｃ
（ 含１ ０ ％ 牛血清 ） 在 温度 为 ３ ７ ＂ Ｃ、 浓度为 ５ ％Ｃ Ｏ ， 中培养 。 １ ｌ ２仪器和试剂
实验 中用到 的试剂包 括洛铂 纯 品、 Ｃ Ｃ Ｋ 一 ８试剂盒 、 双染 检
测凋亡试剂盒 ， 以及 二抗 和 Ｅ Ｃ Ｌ显 色 系 统。 １ ． ３方法
１ ． ３ ． １检 测 细胞 活性
当洛铂 浓度较 低 时， 会诱 导 细胞发 生 阻滞 ， 在０ ． １ ２ ５～ ０ ． ５ 倍 的 Ｉ ｃ 。 范 围内， 阻滞作 用随药 物浓度 的增 加而 明显增 强 。药 酶标仪读 取 ４ ５ ０ ａ ｍ处 波长 的吸光值 。细胞抑制率 ＝ １ 一（ 实验 ． ５ 倍Ｉ ｃ 。 后， 细胞 出现凋亡 ， 且随着浓度 的增 加 组 吸光 值 ／ 对照 组吸光 值） ×１ ０ ０ ％， 并计算 药物 的半数 抑制 浓 物浓度 升高至 ０ 度 Ｉ Ｃ ５ ０ 。 早期凋亡和 晚期凋亡 出现不 同程度 的增 加， 体现 出浓度依赖性 。
取 同期放化疗 方式 ， 铂类药 物是化疗首选 。洛铂是第 ３代铂类 染液孵育 ３ ０ ｍ ｉ ｎ 。使用流式细胞仪对细胞凋亡率进行检测。 抗肿瘤药物 ， 优点是神经毒性 、 肾毒性 、 耳毒性较低 ， 已在多种 临 ２结 果 床试验 中证实具有抗肿瘤 活性 ］ 。为了进一 步探究洛铂在鼻 咽 ２ ． １洛铂对鼻咽癌细胞增殖的抑制作用
【 摘要 】 目的 探讨洛铂对鼻咽癌细胞 的体外抗肿瘤作用 ， 从 而为临床应用提供科学 的依据 。方 法 将不 同浓 度的洛铂分 别作用于体外的鼻咽癌
细胞 株 Ｃ Ｎ Ｅ ２ 、 Ｈ Ｏ Ｎ Ｅ １ 、 Ｓ Ｕ Ｎ Ｅ １ 上， 使用 Ｃ Ｃ Ｋ 一 ８ 法进行检测细胞活性 ， 使用碘化丙 啶染液法检测细胞周期 ， 使用碘化丙 啶和 Ａ ｎ ｎ ｅ ｘ ｉ ｎ Ｖ — Ｆ Ｉ Ｔ Ｃ双染法 检 测细胞凋亡率 。结果 洛铂对于鼻 咽癌 细胞具 有明显的增殖抑制作用 ， 而且浓度越 高， 增殖抑制率越高 ， 体现 出浓度依赖性 。当洛铂 浓度较低时， 会 诱导细胞发生 阻滞 ， 在０ ． １ ２ ５～ ０ ． ５ 倍的Ｉ Ｃ ５ ０ 范围 内， 阻滞作用 随药 物浓 度的增加而 明显 。药 物浓 度升高至 ０ ． ５ 倍Ｉ ｃ 。 后， 细胞 出现凋 亡， 且随着 浓度的增加早期 凋亡和晚期凋亡 出现不同程度的增加 ， 体 现出浓度依赖性 。结论 对于鼻 咽癌细胞 而言 ， 洛铂具有 明显 的细胞毒性 ， 能够对 细胞 增 殖产 生抑制作用 。其作用机制具有两方面 ， 一是药物浓度低 时的细胞 阻滞 作用 ， 二是药物浓度高时 的细胞凋亡作用 ， 因此 洛铂对 于鼻咽癌 的临床治
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实验 研 究 ．
１ ２ ７
洛铂对鼻咽癌抗肿瘤作用的体外实验研究
苏静
（ 解放军第一五二 中心 医院肿瘤科 ， 河 南平顶 山 ４ ６ ７ ０ ０ ０ ）
采用 Ｃ Ｃ Ｋ 一 ８法 进 行 检 测 ， 将 正 在 对 数 生 长 的 细 胞 接 种
在９ ６孔板 培养 ２ ４ ｈ ， 然后 加入 洛铂 ， 浓 度分 别 为 ０ ． ０ ９ ８ 、 ０ ． １ ９ ５ 、
０ ． ３ ９ ０ 、 ０ ． ７ ８ ０ 、 １ ． ５ ６ ０ 、 ３ ． １ ２ ５ 、 ６ ． ２ ５ ０ 、 １ ２ ． ５ ０ ０ ｕｍｏ ｌ ／ Ｌ ， 对 照 组 加 入 等 量培养液 。４ ８ ｈ 后加入 Ｃ Ｃ Ｋ 一 ８ ， 在３ ７ ￣ Ｃ的条件下孵育 ３ ｈ ， 使用 ２ ． ２洛铂对鼻 咽癌 细胞 的周 期和凋亡影 响
具体结果报告如下 。
１资 料 与 方 法
１ ． １肿瘤细胞株 据结果见表 １ 。 鼻 咽癌 细胞株 Ｃ Ｎ Ｅ ２ 、 ＨＯ Ｎ Ｅ１ 、 Ｓ Ｕ Ｎ Ｅ１ 均取 自肿 瘤 防治 中 表 １ ： 不 同浓度的洛铂对鼻咽癌细胞 ４ ８ ｈ后的增 殖抑 制率（ ％） 心， 实验 中将 用到 正在对 数 生长 的细胞 ， 将 培养 液 Ｒ Ｐ ＭＩ 一 １ ６ ４ ０
１ ． ３ ． ２检 测 细胞 周 期
数据结果见表 ２ 。
疗具 有较 高的应 用价值 。
Ｉ 关键词 】 洛铂； 鼻咽癌 ； 抗肿瘤作用； 药物浓度
一
，
鼻 咽癌是 临床上常见 的肿瘤类 型， 是我 国高发恶 性肿瘤之 中 Ｄ Ｎ Ａ水 平 。 发病 率在耳 鼻咽喉 恶性肿瘤 中 占据 首位 ］ 。患者 常见 的临 １ ． ３ ． ３检 测 细胞 凋 亡
癌 中的作用效果 ， 本文进行体外洛铂对抗鼻 咽癌细胞株 的实验，
洛铂对 于鼻 咽癌细胞增 殖具有 明显的抑制作 用 ， 而且浓度 越 高， 增殖抑制率越高 ， 体现 出浓度依赖性 。药物 的半数抑制浓 度 Ｉ ｃ ５ ０ 分别 是 （ ４ ． １ ４ － ０ ． ５ ） 、 （ ４ ． ３ ４ － １ ． ２ ） 、 （ ２ ． ５ －０ ． ２ ）ｕ ｍ ｏ ｌ ／ Ｌ 。 数
床症 状主要 为鼻塞 、 头痛 、 涕 中带血 、 耳 闷堵 感、 听力下 降等 ， 由
将 细胞接种在 ６孔板， 培养 ２ ４ｈ 后加 入洛铂， 浓度为 Ｉ Ｃ 的 于该 疾病具有 隐蔽性和症 状多样性 ， 容易发 生肿瘤 细胞的转移 ０ ． ５倍、 １ 倍、 ２ 倍、 ４倍， 对照组加入等量培养液。４ ８ ｈ 后将细胞收 和复发 ， 因此 预后 差 【 ２ ＿ 。早期 患者采取放疗方式 ， 晚期患者则采 集并使用磷酸盐缓 冲液进行洗涤 ， 加入碘化丙啶和 Ａ ｎ ｎ ｅ ｘ ｉ ｎ Ｖ — Ｆ １ Ｔ Ｃ
（ 含１ ０ ％ 牛血清 ） 在 温度 为 ３ ７ ＂ Ｃ、 浓度为 ５ ％Ｃ Ｏ ， 中培养 。 １ ｌ ２仪器和试剂
实验 中用到 的试剂包 括洛铂 纯 品、 Ｃ Ｃ Ｋ 一 ８试剂盒 、 双染 检
测凋亡试剂盒 ， 以及 二抗 和 Ｅ Ｃ Ｌ显 色 系 统。 １ ． ３方法
１ ． ３ ． １检 测 细胞 活性
当洛铂 浓度较 低 时， 会诱 导 细胞发 生 阻滞 ， 在０ ． １ ２ ５～ ０ ． ５ 倍 的 Ｉ ｃ 。 范 围内， 阻滞作 用随药 物浓度 的增 加而 明显增 强 。药 酶标仪读 取 ４ ５ ０ ａ ｍ处 波长 的吸光值 。细胞抑制率 ＝ １ 一（ 实验 ． ５ 倍Ｉ ｃ 。 后， 细胞 出现凋亡 ， 且随着浓度 的增 加 组 吸光 值 ／ 对照 组吸光 值） ×１ ０ ０ ％， 并计算 药物 的半数 抑制 浓 物浓度 升高至 ０ 度 Ｉ Ｃ ５ ０ 。 早期凋亡和 晚期凋亡 出现不 同程度 的增 加， 体现 出浓度依赖性 。
取 同期放化疗 方式 ， 铂类药 物是化疗首选 。洛铂是第 ３代铂类 染液孵育 ３ ０ ｍ ｉ ｎ 。使用流式细胞仪对细胞凋亡率进行检测。 抗肿瘤药物 ， 优点是神经毒性 、 肾毒性 、 耳毒性较低 ， 已在多种 临 ２结 果 床试验 中证实具有抗肿瘤 活性 ］ 。为了进一 步探究洛铂在鼻 咽 ２ ． １洛铂对鼻咽癌细胞增殖的抑制作用
【 摘要 】 目的 探讨洛铂对鼻咽癌细胞 的体外抗肿瘤作用 ， 从 而为临床应用提供科学 的依据 。方 法 将不 同浓 度的洛铂分 别作用于体外的鼻咽癌
细胞 株 Ｃ Ｎ Ｅ ２ 、 Ｈ Ｏ Ｎ Ｅ １ 、 Ｓ Ｕ Ｎ Ｅ １ 上， 使用 Ｃ Ｃ Ｋ 一 ８ 法进行检测细胞活性 ， 使用碘化丙 啶染液法检测细胞周期 ， 使用碘化丙 啶和 Ａ ｎ ｎ ｅ ｘ ｉ ｎ Ｖ — Ｆ Ｉ Ｔ Ｃ双染法 检 测细胞凋亡率 。结果 洛铂对于鼻 咽癌 细胞具 有明显的增殖抑制作用 ， 而且浓度越 高， 增殖抑制率越高 ， 体现 出浓度依赖性 。当洛铂 浓度较低时， 会 诱导细胞发生 阻滞 ， 在０ ． １ ２ ５～ ０ ． ５ 倍的Ｉ Ｃ ５ ０ 范围 内， 阻滞作用 随药 物浓 度的增加而 明显 。药 物浓 度升高至 ０ ． ５ 倍Ｉ ｃ 。 后， 细胞 出现凋 亡， 且随着 浓度的增加早期 凋亡和晚期凋亡 出现不同程度的增加 ， 体 现出浓度依赖性 。结论 对于鼻 咽癌细胞 而言 ， 洛铂具有 明显 的细胞毒性 ， 能够对 细胞 增 殖产 生抑制作用 。其作用机制具有两方面 ， 一是药物浓度低 时的细胞 阻滞 作用 ， 二是药物浓度高时 的细胞凋亡作用 ， 因此 洛铂对 于鼻咽癌 的临床治
