荧光法测定乙酰水杨酸和水杨酸

分子荧光法测定水杨酸和乙酰水杨酸一、实验目的1、学习荧光分析法的基本原理。

2、掌握应用分子荧光法测定乙酰水杨酸、水杨酸的分析方法。

3、了解F-3501型荧光分光光度计的主要结构及工作原理，掌握其正确的使用方法。

二、实验原理某些物质经紫外光或波长较短的可见光照射后，会发射出较入射波长更长的荧光。

荧光光谱反映了物质的特性，建立在测量荧光光谱基础上的分析方法称为荧光分析法。

当进行荧光测定时，总要选择不同波长的光波进行测定，即一个为激发光——物质所吸收的光；另一个为物质吸收后发出的光称为发射光或荧光。

对同一物质而言，在稀溶液（即A = abc < 0.05）中，荧光的强度F与该物质的浓度C 有以下关系：F = 2.3φabcI0式中φ为荧光过程的量子效率，a为荧光分子的吸光系数，b为试样的吸收光程，I0为入射光的强度。

当I0及b 不变时，上式变为：F= KC其中，K为常数。

荧光分析法具有灵敏度高（一般超过分光光度法2~3个数量级）、取样少、方法快速等特点，现已成为食品、生物医药、天然产品、农业、环境保护、化工等领域中的重要分析方法之一。

但由于许多物质本身不会发生荧光，故在使用范围上受到一定的限制。

乙酰水杨酸（ASA，即阿司匹林）水解能生成水杨酸（SA），而在乙酰水杨酸中，或多或少都存在着水杨酸。

由于两者都有苯环，也有一定的荧光效率，因而在以三氯甲烷为溶剂的条件下，可用荧光法进行测定。

从乙酰水杨酸和水杨酸的激发光谱和荧光光谱中可以发现：乙酰水杨酸和水杨酸的激发波长和发射波长均不同，利用此性质，可在各自的激发波长和发射波长下分别测定。

三、仪器与试剂1、仪器F-3501型荧光分光光度计、电子天平、离心机、真空泵、石英比色皿、移液管、棕色容量瓶、比色管、烧杯、砂芯抽滤装置、量筒、洗耳球、洗瓶等。

荧光光度法测定阿司匹林中乙酰水杨酸的含量一、实验目的1.掌握用荧光法测定药物中的乙酰水杨酸含量的方法。

2.掌握970CRT 型荧光分光光度计的操作方法。

3.加深对荧光光度法原理的理解。

二、实验原理1.荧光光度法原理（1）常温下，处于基态的分子吸收一定的紫外可见光的辐射能成为激发态分子，激发态分子通过无辐射跃迁至第一激发态的最低振动能级，再以辐射跃迁的形式回到基态，发出比吸收光波长长的光而产生荧光。

在稀溶液中，当实验条件一定时，荧光强度I F 与物质的浓度c 成线性关系：即Kc I F （这是荧光光谱法定量分析的理论依据）。

（2）荧光光谱激发光谱：固定测量波长(选最大发射波长)，化合物发射的荧光强度与照射光波长的关系曲线。

激发光谱曲线的最高处，处于激发态的分子最多，荧光强度最大。

荧光强度波长发射光谱：固定激发光波长(选最大激发波长), 化合物发射的荧光强度与发射光波长关系曲线。

固定发射光波长进行激发光波长扫描，找出最大激发光波长，然后固定激发光波长进行荧光发射波长扫描，找出最大荧光发射波长。

激发光波长和发射荧光波长的选择是本实验的关键。

2. 荧光光度法测定阿司匹林中乙酰水杨酸的含量通常称为ASA 的乙酰水杨酸（阿司匹林）水解即生成水杨酸（SA ）（如下式）。

而在阿司匹林中或多或少存在一些水杨酸，用醋酸—氯仿作为溶剂，然后用荧光法可以分别测定其含量，少许醋酸还可以增加二者的荧光强度（本次实验只测定阿司匹林中乙酰水杨酸的含量）。

在1%的乙酸—氯仿中乙酰水杨酸的激发光谱和荧光光谱如图所示：（为了消除药片之间的差异，可以取几片一起研磨，然后取部分由代表性的样品进行分析）三、仪器与试剂：仪器：970CRT 型荧光分光光度计及附件；容量瓶：1000mL 2只，100 mL 2只，50mL 8只；l0mL 吸管2支；铁架台；研钵；称量瓶；玻璃棒；烧杯；定量滤纸；电子天平。

试剂：冰醋酸；氯仿；乙酰水杨酸；阿司匹林；丙酮。

一、实验目的1. 掌握乙酰水杨酸含量的测定方法；2. 熟悉酸碱滴定实验操作；3. 了解乙酰水杨酸的性质和应用。

二、实验原理乙酰水杨酸（Aspirin）是一种常用的解热镇痛药，其化学名称为乙酰水杨酸。

本实验采用酸碱滴定法测定乙酰水杨酸含量，原理如下：在强碱性溶液中，乙酰水杨酸中的酯结构在碱性条件下容易水解，生成水杨酸和乙酸盐。

水杨酸具有酸性，可与氢氧化钠（NaOH）反应，生成盐和水。

根据反应的化学计量关系，通过滴定过量的NaOH溶液，可以计算出乙酰水杨酸的含量。

三、实验器材与试剂1. 实验器材：电子天平、滴定管、锥形瓶、移液管、烧杯、漏斗、滤纸、玻璃棒等；2. 试剂：乙酰水杨酸标准品、氢氧化钠标准溶液、酚酞指示剂、蒸馏水等。

四、实验步骤1. 准备标准溶液：准确称取一定量的乙酰水杨酸标准品，溶解于适量蒸馏水中，转移至100mL容量瓶中，定容，配制成一定浓度的标准溶液。

2. 准备样品溶液：准确称取一定量的乙酰水杨酸样品，溶解于适量蒸馏水中，转移至100mL容量瓶中，定容，配制成一定浓度的样品溶液。

3. 滴定实验：（1）取一定量的样品溶液于锥形瓶中；（2）加入适量酚酞指示剂，用氢氧化钠标准溶液滴定至溶液由无色变为浅红色，记录消耗的氢氧化钠标准溶液体积；（3）重复滴定3次，计算平均值。

4. 计算结果：（1）根据滴定反应的化学计量关系，计算出样品中乙酰水杨酸的含量；（2）根据标准溶液的浓度和消耗的氢氧化钠标准溶液体积，计算出乙酰水杨酸的标准品含量；（3）根据样品溶液和标准溶液的浓度比，计算出样品中乙酰水杨酸的含量。

五、实验结果与分析1. 样品中乙酰水杨酸的含量为x mg/g；2. 标准品中乙酰水杨酸的含量为y mg/g；3. 样品中乙酰水杨酸的含量与标准品含量的相对偏差为z %。

六、实验总结通过本次实验，我们掌握了乙酰水杨酸含量的测定方法，熟悉了酸碱滴定实验操作。

实验结果表明，本实验方法具有较高的准确性和可靠性，为乙酰水杨酸的质量控制提供了有力保障。

乙酰水杨酸的合成和纯度检验实验报告取少许样品配成乙酸乙酯的溶液待用。

将水杨酸、乙酰水杨酸标样（这两种样品溶液已经配好）和样品点点在硅胶板的同一条线上，在展开剂（石油醚（60-90）：乙酸乙酯：冰醋酸=30:10:1）中展开，然后取出挥发干溶剂，在紫外灯下观察个样品点的位置，并标记计算各点的Rf值（哪种物质的Rf值大，为何？）。

[注意事项]
1.水杨酸应当干燥，乙酸酐应当是新蒸的（取用时应相当注意）。

2.反应要严格控制反应温度，温度过高，将增加副产物的生成，如生成水杨酰水
杨酸酯，乙酰水杨酰水杨酸酯。

3.乙酰水杨酸易受热分解，因此熔点不是很明显，它的分解温度为128-135℃，
熔点为136℃，在测熔点时，可先将热载体加热至120℃左右，然后放入样品测定。

实验荧光法测定乙酰水杨酸和水杨酸一、目的要求1、掌握用荧光法测定药物中乙酰水杨酸和水杨酸的方法。

2、掌握RF-5301型荧光仪的操作方法。

二、原理通常称为ASA的乙酞水杨酸(阿司匹林)水解即生成水杨酸(SA)，而在阿司匹林中，都或多或少存在一些水杨酸。

用氯仿作为溶剂，用荧光法可以分别测定它们。

加少许醋酸可以增加二者的荧光强度。

在1,醋酸一氯仿中，乙酞水杨酸和水杨酸的激发光谱和荧光光谱如图1.图1 在1,醋酸一氯仿中，乙酞水杨酸和水杨酸的激发光谱和荧光光谱为了消除药片之间的差异，可取几片药片一起研磨，然后取部分有代表性的样品进行分析。

三、仪器与试剂仪器 RF-5301型荧光仪，石英皿;容量瓶:1000mL 2只，100mL 8只，50mL 10只;l0mL吸管2支。

试剂乙酰水杨酸贮备液:称取0.4000g 乙酰水杨酸溶于1,醋酸一氯仿溶液中，用1,醋酸一氯仿溶液定容于1000mL容量瓶中;水杨酸贮备液:称取0.750g水杨酸溶于1,醋酸一氯仿溶液中，并用其定容于1000mL容量瓶中;醋酸;氯仿。

四、实验步骤1、绘制ASA和SA的激发光谱和荧光光谱将乙酰水杨酸和水杨酸贮备液分别稀释100倍(每次稀释10倍，分二次完成)。

用该溶液，分别绘制ASA和SA的激发光谱和荧光光谱曲线，并分别找到它们的最大激发波长和最大发射波长。

2、制作标准曲线(1) 乙酞水杨酸标准曲线在5只50mL容量瓶中，用吸量管分别加入4.00µg/mLASA溶液2、4、6、8、l0mL,用1,醋酸一氯仿溶液稀释至刻度，摇匀。

分别测量它们的荧光强度。

(2) 水杨酸标准曲线在5只50mL容量瓶中，用吸量管分别加入7.50µg/mL SA溶液2、4、6、8、l0mL，用1,醋酸一氯仿溶液稀释至刻度，摇匀。

分别测量它们的荧光强度。

、阿司匹林药片中乙酰水杨酸和水杨酸的测定 3将5片阿司匹林药片称量后磨成粉末，称取400.0mg用1,醋酸一氯仿溶液溶解，全部转移至100mL容量瓶中，用1,醋酸一氯仿溶液稀释至刻度。

乙酰水杨酸中游离水杨酸的检查原理
乙酰水杨酸（Acetylsalicylic acid）是一种水杨酸类药物，它在体内通过代谢转化为游离水杨酸（Salicylic acid）。

游离水杨酸的检查原理一般是通过液相色谱法（HPLC）或气相色谱法（GC）进行分析。

液相色谱法（HPLC）是一种常用的分析方法，它基于样品中溶解的游离水杨酸在特定条件下经过固定相柱进行分离，通过测定出样品中游离水杨酸峰的面积或峰高与标准曲线进行定量分析。

气相色谱法（GC）也可用于游离水杨酸的检测，但是由于游离水杨酸是极性较低的物质，需要在样品前处理过程中采用衍生化技术，将游离水杨酸转化为易挥发性的衍生物，然后通过气相色谱分离并定量。

总之，游离水杨酸的检查原理是利用液相色谱法或气相色谱法对样品中的游离水杨酸进行分离和定量分析。

一、实验目的1. 学习并掌握乙酰水杨酸（阿司匹林）的提取、纯化和含量测定方法；2. 熟悉乙酰水杨酸的理化性质，加深对药物分析的理解；3. 培养实验操作技能，提高实验数据的处理和分析能力。

二、实验原理乙酰水杨酸（阿司匹林）是一种常用的非甾体抗炎药，具有解热、镇痛、抗炎、抗风湿等作用。

本实验采用酸碱滴定法测定乙酰水杨酸的含量。

乙酰水杨酸在碱性溶液中发生水解反应，生成水杨酸和乙酸盐。

水杨酸在碱性溶液中易升华，而乙酸盐不挥发，因此可以通过测定反应后剩余的乙酸盐含量，间接计算出乙酰水杨酸的含量。

三、实验仪器与试剂1. 仪器：分析天平、滴定管、锥形瓶、烧杯、电热恒温水浴锅、研钵、漏斗、滤纸等；2. 试剂：乙酰水杨酸片剂、氢氧化钠标准溶液、盐酸标准溶液、酚酞指示剂、蒸馏水等。

四、实验步骤1. 乙酰水杨酸提取：取乙酰水杨酸片剂10片，研磨成粉末，准确称取0.1g，置于锥形瓶中；2. 加水溶解：向锥形瓶中加入50ml蒸馏水，充分搅拌，使乙酰水杨酸溶解；3. 加碱水解：向锥形瓶中加入10ml氢氧化钠标准溶液，充分搅拌，使溶液呈碱性；4. 水解反应：将锥形瓶放入电热恒温水浴锅中，加热至80℃，维持水解反应30分钟；5. 冷却：将锥形瓶取出，放入冷水中冷却至室温；6. 加酸回滴：向锥形瓶中加入10ml盐酸标准溶液，充分搅拌，使溶液呈酸性；7. 滴定：用酚酞指示剂指示终点，用氢氧化钠标准溶液滴定至溶液颜色由红色变为无色；8. 计算乙酰水杨酸含量：根据消耗的氢氧化钠标准溶液的体积和浓度，计算出乙酰水杨酸的含量。

五、实验结果与分析1. 乙酰水杨酸提取：实验中，乙酰水杨酸片剂完全溶解，说明实验操作正确；2. 加碱水解：实验中，溶液呈碱性，符合水解反应条件；3. 水解反应：实验中，溶液颜色由红色变为无色，说明水解反应已完成；4. 加酸回滴：实验中，溶液呈酸性，符合回滴反应条件；5. 滴定：实验中，消耗的氢氧化钠标准溶液体积为V1，浓度为C1，计算乙酰水杨酸含量为：乙酰水杨酸含量= (V1 × C1 × 180.16) / 1000六、实验总结1. 本实验成功提取了乙酰水杨酸，并对其含量进行了测定；2. 通过实验，掌握了乙酰水杨酸的提取、纯化和含量测定方法；3. 加深了对乙酰水杨酸理化性质的理解，提高了实验操作技能和数据分析能力；4. 在实验过程中，应注意操作规范，保证实验结果的准确性。

水杨酸的检测方法水杨酸可是个挺重要的玩意儿呢！咱得知道怎么检测它呀，不然怎么能放心使用呢！要说检测水杨酸，有一种常见的方法就是高效液相色谱法。

这就好比是一个超级侦探，能把水杨酸从一堆东西里精准地揪出来。

它通过让样品在特殊的柱子里“跑一跑”，然后根据各种信号来确定水杨酸的存在和含量。

就像你在人群中一下子认出你熟悉的朋友一样，高效液相色谱法能准确地识别水杨酸。

还有一种方法是分光光度法。

这个方法就像是一个有特殊眼光的观察者，它能根据水杨酸和某些试剂反应后产生的独特颜色变化来判断水杨酸的情况。

比如说，原本无色透明的溶液，遇到水杨酸后可能就会变得有颜色啦，这不就被发现了嘛！你想想，是不是有点像变魔术一样神奇呀！再说说滴定法，这就像是一场精确的较量。

通过加入特定的试剂，然后一点点地滴加，观察反应的变化，直到达到某个关键点，就能算出水杨酸的含量啦。

就好像你在和水杨酸进行一场拔河比赛，看谁更厉害。

咱检测水杨酸可不能马虎啊！这就好比你要去一个陌生的地方，你得有准确的地图和导航才能不迷路吧。

检测水杨酸就是给我们一个清晰的“地图”，让我们知道它到底在不在，有多少。

不然，用了含有水杨酸的产品，却不知道里面到底有没有水杨酸，或者有多少，那不就跟闭着眼睛走路一样危险嘛！检测水杨酸的方法还有很多呢，每一种都有它独特的本领和用处。

我们得根据具体情况选择合适的方法，就像你要根据不同的场合穿不同的衣服一样。

而且，这些方法也不是一成不变的呀，科学家们还在不断地研究和改进呢，让检测变得更准确、更方便。

所以啊，水杨酸的检测可真是个大学问！我们可得好好了解了解，这样才能在面对各种含有水杨酸的产品时心里有底呀！可别小瞧了这小小的水杨酸检测，它关系着我们的使用安全和效果呢！你说是不是？咱可不能稀里糊涂地就用了，得明明白白地知道里面的水杨酸到底是怎么回事儿！这才是对自己负责嘛！。

乙酰水杨酸中游离水杨酸的检查原理
乙酰水杨酸（Acetylsalicylic acid）是一种非处方药物，也被称为阿司匹林（Aspirin）。

它是由水杨酸和乙酰化剂制成的化合物。

乙酰水杨酸通过酯化反应将乙酸基（Acetyl）引入水杨酸
的结构中。

检查乙酰水杨酸中游离水杨酸的主要原理是使用碱（如氢氧化钠溶液）将乙酰水杨酸中的乙酸基水解成乙酸和水杨酸。

随后，水杨酸会与一种酰基化试剂（如费城试剂）反应形成紫色化合物。

以下是检查乙酰水杨酸中游离水杨酸的大致步骤：
1. 取一定量的乙酰水杨酸样品。

2. 加入足量的氢氧化钠溶液，使乙酰水杨酸中的乙酸基水解。

3. 将乙酸和水杨酸混合溶液与酰基化试剂（如费城试剂）混合反应。

4. 反应中，水杨酸与酰基化试剂发生反应生成紫色化合物。

5. 通过比较样品的颜色与一个已知含水杨酸浓度的标准溶液的颜色来测定游离水杨酸的浓度。

需要注意的是，这只是一种简单的方法之一，实际检测中可能使用其他特定的分析方法或设备。