吸收放散试验
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吸收试验标准操作规程一、目的为规范红细胞吸收试验的技术操作,保证结果的准确性,从而辅助血型的鉴定以及保证交叉配血的正确进行。
二、适用范围输血科负责进行红细胞吸收试验来检测血型弱表达抗原等试验的技术人员。
三、原理红细胞血型抗原(包括亚型等弱表达抗原)与相应抗体在一定条件下反应,抗体可逆性结合在红细胞血型抗原上,相应抗体效价下降或者检不出,进一步对吸收后红细胞做放散试验,可以从放散液中检出相应的抗体。
四、步骤和方法(1)检测红细胞弱抗原1、将受检红细胞用生理盐水充分洗涤3次,末次将盐水倒尽,制备成洗涤压积红细胞。
2、在压积红细胞中加入2倍容量含于检测目标抗原相对应的人源抗体血清,密封混匀。
3、根据目标抗原—抗体反应的特性分别放在不同条件下吸收:ABO血型系统弱抗原4℃至少1h,Rh血型系统弱抗原应放在37℃吸收30—60min,每10min混匀1次。
4、吸收后以1300g离心3min,取上层血清即为吸收液。
测定人源抗体血清吸收前、后抗体效价。
5、结果判读:<1>如吸收后血清抗体效价比吸收前降低2个稀释倍数以上或者检不出抗体,则表明红细胞表达目标抗原。
<2>若效价无下降则表明红细胞不表达目标抗原。
<3>若效价下降未达到2个稀释倍数则不能确定红细胞是否表达目标抗原,需要对吸收后红细胞进行放散试验来决定受检红细胞是否表达目标抗原。
(2)冷自身抗体吸收1、采集受检者2份标本:一份抗凝血约10ml,尽快置入37℃浴箱孵育30—60min,离心分离血浆和红细胞;另一份不抗凝血至少3ml,放置4℃自然凝固,使红细胞充分吸收冷抗体后,离心分离血清和红细胞。
2、用预温的37℃生理盐水充分洗涤从抗凝血标本中分离出的压积红细胞3—4次,取50微升加生理盐水1ml配成5%红细胞悬液,取1滴该悬液与2滴红细胞不规则抗体筛选阴性的AB型血清反应,120g离心1min后观察结果。
根据是否凝集来确定冷抗体是否已洗涤干净。
吸收放散试验及抗体增强方法在 ABO疑难血型鉴定中的应用效果摘要:目的:分析在ABO疑难血型鉴定中将吸收放散试验法和抗体增强法进行应用的临床效果。
方法:本次研究工作以我院患者为例展开,时间为2021年1月——2022年1月,共选取50例患者为研究对象,均为ABO疑难血型患者。
对患者展开回顾性分析,给予患者吸收放散试验和抗体增强试验,对其临床鉴定结果进行观察分析。
结果:在50例患者中,有27例患者为A抗原减弱,9例患者为AB抗原减弱,9例为B亚型,5例为A亚型。
在吸收放散实验中,ABO血型抗原凝集强度在MF-1,其中有9例检测出IgM型抗A,6例患者检测出IgM型抗B。
同时,共有30例低效价血清患者,其中A型血血清抗B抗体患者人数为9例,B型血血清抗A抗体人数有9例,O型血血清抗体人数有12例。
结论:在ABO疑难血型鉴定中将吸收放散试验法和抗体增强法进行应用,其临床效果显著,可保证鉴定准确性,增强临床输血安全性。
关键词:吸收放散试验;抗体增强法;ABO疑难血型鉴定就ABO血型鉴定来说,其是临床中针对输血项目前所展开的必要检查项目,可保证患者输血安全性。
但是从实际发展情况来看,大部分基层医院输血过程仍然缺乏对基因普及的使用和重视,大多依然采用ABO疑难血型的检测依然以血清检验方法为主。
吸收放散试验是临床当前应用在疑难血型鉴定中的主要方法,检测准确性较高,但是从临床发展情况来看,此方法在低效价血清抗体检测中,其试剂红细胞与放散凝集强度较低,还需要将此方法与其他方法进行联合应用[1]。
本研究则基于此,以我院患者为例,将吸收放散试验法与抗体增强方法进行联合应用,探究其临床应用效果。
1一般资料和研究方法1.1一般资料分析此次研究工作以我院患者为例展开,时间为2021年1月至2022年1月,患者选取均为ABO型疑难血型患者,人数为50例,患者中,男性人数有26例,女性人数有24例,患者中,年龄最大的为68岁,年龄最小的为22岁,患者对应的平均年龄为(43.23±3.23)岁。
放散试验标准操作规程一、目的:为规范红细胞放散试验的技术操作,保证结果的准确性,从而辅助血型的鉴定以及保证交叉配血的正确进行。
二、适用范围:输血科负责进行红细胞放散试验来检测血型弱表达抗原及抗体特异性等试验的技术人员。
三、原理:红细胞血型抗原和抗体的结合是可逆的,通过改变某些物理条件就可使结合在红细胞血型抗原上的抗体分离出来,即放散。
再通过检测放散液中的抗体,可鉴定其特异性或者间接鉴定红细胞抗原。
四、步骤和方法:<1>热放散试验1、将已进行吸收试验的压积红细胞用生理盐水洗涤4次,每次将洗涤后生理盐水除尽,最后一次洗液留作对照。
2、加入与压积红细胞等容量的生理盐水,充分混匀后56℃轻摇10min(15—30s摇动一次),56℃保温1300g离心3min,立即取上清液即放散液备用。
<2>乙醚放散试验1、将已进行吸收试验的压积红细胞用生理盐水洗涤4次,每次将洗涤后生理盐水除尽,最后一次洗液留作对照。
2、加入与压积红细胞等容量的生理盐水后再加入2倍于压积红细胞体积容量的分析纯乙醚,密封后用力颠倒摇动1min,小心放气减压置于37℃30min,每10min摇动1次后以1000g 离心5min。
3、离心后分成3层,最上层是乙醚,中层是红细胞基质,下层是深红色放散液(含血红蛋白)。
留取下层放散液置于37℃水浴中30min挥发残存乙醚备用。
4、根据试验目的检测放散液中抗体,与最后一次洗液做对照(洗液中应检不出任何抗体)。
<3>结果判断:若最后一次洗液未检出抗体,而放散液中检出相应抗体,则试验为阳性,表明红细胞表达目标抗原或者血清中存在相应抗体。
反之为阴性。
五、注意事项:1、如最后一次洗液中可检出抗体,表明红细胞洗涤不充分,应继续洗涤。
2、放散液中抗体易变性,故尽快进行鉴定。
如果放散液需要保存,改用不规则抗体筛选阴性的AB型血清或6%牛血清白蛋白。
3、放散试验方法较多,热放散法是最简便和实用的方法。