放散试验操作规程
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煤气放散和爆发试验规程
是用于评估和测试煤气产生、放散、蔓延和爆炸的危险性的一种标准化程序。
这些规程通常由相关标准机构或监管机构编制,并提供具体的操作指导和安全措施,以确保试验的安全性和可重复性。
以下是一般煤气放散和爆发试验规程的主要内容:
1. 实验目的和范围:明确试验的目的、对象和条件限制。
2. 试验设备和仪器:列出所需的设备、仪器和安全设施,包括气体源、容器、控制系统、测量仪器等。
3. 试验样品和条件:确定试验所需的煤气样品的类型、来源和性质,以及试验的环境条件(温度、压力等)。
4. 试验程序:按照特定的步骤和顺序进行试验,包括气体放散、点火、燃烧和爆炸等。
5. 数据采集和分析:记录和分析试验中的数据,并进行结果评估和风险判定。
6. 安全措施:提供试验过程中必要的安全措施,例如防爆装置、通风系统、个人防护装备等。
7. 结果和报告:总结试验结果和结论,并撰写详细的试验报告,包括试验条件、数据、分析和结论等。
重要提示:煤气放散和爆发试验涉及到高风险的活动,应由专业人员在合适的实验环境中进行,并严格遵守相关的安全法规和操作指南,确保试验安全和可靠性。
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吸收试验标准操作规程一、目的为规范红细胞吸收试验的技术操作,保证结果的准确性,从而辅助血型的鉴定以及保证交叉配血的正确进行。
二、适用范围输血科负责进行红细胞吸收试验来检测血型弱表达抗原等试验的技术人员。
三、原理红细胞血型抗原(包括亚型等弱表达抗原)与相应抗体在一定条件下反应,抗体可逆性结合在红细胞血型抗原上,相应抗体效价下降或者检不出,进一步对吸收后红细胞做放散试验,可以从放散液中检出相应的抗体。
四、步骤和方法(1)检测红细胞弱抗原1、将受检红细胞用生理盐水充分洗涤3次,末次将盐水倒尽,制备成洗涤压积红细胞。
2、在压积红细胞中加入2倍容量含于检测目标抗原相对应的人源抗体血清,密封混匀。
3、根据目标抗原—抗体反应的特性分别放在不同条件下吸收:ABO血型系统弱抗原4℃至少1h,Rh血型系统弱抗原应放在37℃吸收30—60min,每10min混匀1次。
4、吸收后以1300g离心3min,取上层血清即为吸收液。
测定人源抗体血清吸收前、后抗体效价。
5、结果判读:<1>如吸收后血清抗体效价比吸收前降低2个稀释倍数以上或者检不出抗体,则表明红细胞表达目标抗原。
<2>若效价无下降则表明红细胞不表达目标抗原。
<3>若效价下降未达到2个稀释倍数则不能确定红细胞是否表达目标抗原,需要对吸收后红细胞进行放散试验来决定受检红细胞是否表达目标抗原。
(2)冷自身抗体吸收1、采集受检者2份标本:一份抗凝血约10ml,尽快置入37℃浴箱孵育30—60min,离心分离血浆和红细胞;另一份不抗凝血至少3ml,放置4℃自然凝固,使红细胞充分吸收冷抗体后,离心分离血清和红细胞。
2、用预温的37℃生理盐水充分洗涤从抗凝血标本中分离出的压积红细胞3—4次,取50微升加生理盐水1ml配成5%红细胞悬液,取1滴该悬液与2滴红细胞不规则抗体筛选阴性的AB型血清反应,120g离心1min后观察结果。
根据是否凝集来确定冷抗体是否已洗涤干净。
煤气放散和爆发试验规程一、试验目的本试验旨在评估煤气放散和爆发的风险,并根据试验结果制定相应的安全措施和应急预案,以确保人员和设备的安全。
二、试验装置1.试验室:应具备良好的通风系统和防爆设施。
2.煤气供应系统:包括煤气源、管道、阀门等设备。
要求设备运行可靠稳定,且符合安全标准。
3.气体检测设备:包括可燃气体检测器、气体浓度测量仪等。
确保可靠准确地监测煤气浓度。
4.爆破装置:包括点燃器、引爆装置等设备。
要求设备操作简便,且符合安全标准。
三、试验步骤1.准备工作:确保试验装置的正常运行和安全状态。
2.煤气放散试验:a.打开煤气供应系统,调整煤气流量至设定值。
b.使用气体检测设备,在试验室内各个位置进行煤气浓度检测,记录浓度数值。
c.根据试验需求,在试验室内适当位置设置点燃器,点燃煤气。
d.观察煤气的放散情况,记录相关观测数据。
e.根据测得的煤气浓度和放散情况,评估煤气的危险性,并制定相应的安全措施。
3.爆发试验:a.在煤气放散试验的基础上,进一步提升煤气流量,以达到容易发生爆发的浓度。
b.在容器或装置中设置引爆装置,在适当位置安装爆破点燃器。
c.远离试验装置,使用遥控装置触发爆破装置。
d.观察爆炸的规模和影响范围,并记录相关观测数据。
e.根据爆炸的规模和影响范围,评估煤气爆炸的风险,并制定相应的安全措施和应急预案。
四、安全措施1.试验前应仔细检查试验装置和设备的安全性能,确保其正常运行和安全状态。
2.试验期间,必须使用防爆电器设备,并严禁使用易燃和易爆物品。
3.试验操作必须由专业人员进行,并按照操作规程进行。
4.试验期间,必须佩戴防护眼镜、手套和防护服等个人防护用品。
5.试验装置应设置在与人员活动区域相隔一定距离的地方,并设置明显警示标志。
6.在试验过程中,如发现异常情况(如煤气泄漏、设备故障等),应立即停止试验并采取相应的应急措施。
五、应急预案1.煤气泄漏应急预案:a.立即关闭煤气供应系统。
b.保持室内通风,排除煤气浓度。
患者血型及不规则抗体鉴定 SXYJ-GZ-02271目的正确鉴定患者疑难血型。
2适用范围适用于临床患者的疑难血型鉴定。
3职责检测者负责依据此程序进行患者血型及不规则抗体鉴定操作。
4材料与设备根据实验要求准备相应的试剂;实验室常规应用的耗材备品准备充分、仪器设备运行状态正常。
5操作方法5.1待检标本的准备及要求患者标本两管血样,一管用EDTA抗凝2-3ml,吸出部分红细胞,用0.9%生理盐水充分洗涤三遍,配制成3%红细胞盐水悬液;另一管不抗凝3-5ml,退缩充分,用离心机离心并分离出血清。
5.2检查项目包括以下几项:5.2.1ABO血型鉴定操作规程SXYJ-GZ-0202;5.2.2ABO亚型鉴定操作规程SXYJ-GZ-0203;5.2.3唾液中HAB血型物质测定操作规程SXYJ-GZ-0204;5.2.4RhD阴性确证及CcEe抗原鉴定操作规程SXYJ-GZ-0205;5.2.5吸收试验操作规程SXYJ-GZ-0208;5.2.6放散试验操作规程SXYJ-GZ-0209;5.2.7直接抗人球蛋白试验(DAT)操作规程SXYJ-GZ-0210;5.2.8红细胞血型抗体鉴定操作规程SXYJ-GZ-0216;6结果判定根据凝集强度(方法参见SXYJ-GZ-0202:5.2.1.6)对结果进行判读(溶血或凝集都是阳性结果)。
7报告发放根据检测结果形成报告7.1检测报告发放至检验申请送检人;7.2如果同时要求配血者,血型报告单与配血报告单同时发放至发血室;7.3建议临床医生异型输血、血型复检、家系调查等时,可在“输血提示”栏内做相应描述。
8相关记录输血相关免疫学检测会诊申请单(JL-SXYJ-0501-1)血型及不规则抗体鉴定检验记录(JL-SXYJ-0105)。
吸收放散试验标准操作规程(一)检验目的检测红细胞表面可能存在的弱血型抗原、鉴定、分离血清中可能存在的混合抗体,辅助红细胞血型及混合抗体特异性的鉴定。
(二)检验原理抗体与相应抗原在适合条件下可以发生凝集或致敏,但这种结合是可逆的,如果改变某些物理条件时,抗体可以从结合的红细胞上解脱下来。
表达弱血型抗原(A或B等)的红细胞与相应抗体反应不出现凝集现象,但可以吸收相应的抗体,被吸收的抗体在适当条件下可以放散出来,与具有对应正常抗原的红细胞发生反应,检测和鉴定该放散出来的抗体,可以证明相应抗原的存在,也可以将混合抗体得到分离。
(三)适用范围1.弱血型抗原的鉴定(本操作规程主要选取弱A/B抗原鉴定制定相应试验流程)。
2.混合血型抗体的分离与鉴定。
3.新生儿溶血病的诊断。
(四)设备性能参数参见KA-2200血清学专用离心机、B600-A型离心机、电热恒温水浴箱使用说明书。
(五)器材与试剂1.器材B600-A型离心机、KA-2200台式离心机、电热恒温水浴箱、塑料软试管、塑料硬质试管(75m m×l2mm)、试管架、一次性塑料滴管、记号笔。
2.试剂生理盐水、抗A和抗B标准血清(经过筛选后)、抗人球蛋白试剂(市售单克隆或多克隆)、3%反定试剂红细胞。
(六)标本要求抗凝全血经B600-A型离心机在1 760g条件下,离心5分钟后压积红细胞应≥2ml。
(七)校准步骤参见KA-2200血清学专用离心机、B600-A型离心机、电热恒温水浴箱使用说明书中校准要求执行。
(八)操作程序1.吸收试验(1)生理盐水洗涤lml压积红细胞至少3遍,最后1次洗涤后,尽量弃去试管中红细胞沉淀上的所有上清盐水。
(2)如怀疑是弱A(或弱B)抗原红细胞,在洗涤后的红细胞中加入lml抗A(或抗B)血清。
(3)将红细胞与抗体试剂充分混匀,在4℃条件下孵育2小时,期间不时轻摇试管,混合红细胞与抗体血清。
(4)使用B600-A型离心机在1 760g条件下,离心5分钟,将所有上清(抗A或抗B试剂)转移到另一支试管中。
放散试验操作规程 SXYJ-GZ-02091目的将红细胞上包被的抗体解离下来。
2适用范围用于ABO亚型的鉴定,新生儿溶血病的诊断和自身免疫性溶血性贫血患者红细胞的抗体特异性的鉴定,以及吸收后把抗体再放散下来进行鉴定,或制备单特异性抗体。
3职责检测者依据此程序进行放散试验操作。
4材料与设备 0.9%无菌生理盐水;乙醚、酸放散液;一次性使用滴管、试管;KUBOTA KA-2200型离心机;S648型电热恒温水温箱(37℃)、HH.W21.600型电热恒温水温箱(56℃)等。
5操作方法5.1待检标本的准备及要求待检标本应用EDTA抗凝;从待检标本中吸出一定量的红细胞,用0.9%生理盐水充分洗涤三遍,制成压积红细胞。
5.2热放散法适用于ABO亚型鉴定及IgM性质的抗体放散。
5.2.1用大量4℃冷盐水洗涤吸收后红细胞5次,吸出4滴最后1次洗液检测有无残留的游离抗体;5.2.2取1份洗涤后压积红细胞,加1份生理盐水;5.2.356℃水浴中放置10分钟,并频频加以摇动;5.2.4使用预热过的离心杯3400转/分,离心1-3分钟;5.2.5分离上清液即为放散液,用于抗体特异性鉴定。
5.3乙醚放散主要用于红细胞上的各种IgG抗体的放散5.3.1取1份洗涤过的压积红细胞,加1份生理盐水和2份乙醚;5.3.2将试管塞紧并用力震动1分钟,取下塞子数次,以便排出挥发性醚;5.3.3高速离心10分钟,离心后即分成3层,最上层是乙醚,中层是红细胞基质,下层是有抗体的放散液,将醚层和红细胞基质层取出并丢弃,留下水溶性的放散液层,其色深红;5.3.4打开塞子,在37℃水浴30分钟,将乙醚彻底去除;5.3.5高速离心5分钟,含有血红蛋白的水溶液(底层)为放散液,吸出后用于抗体特异性鉴定。
5.4酸放散适用于IgG性质的抗体放散5.4.1取1份洗涤液加9份蒸馏水配成洗液;5.4.2适量红细胞,用生理盐水洗涤一次后,再用洗液洗涤3-4次,压实;5.4.3一份压积红细胞加一份酸放散液,立即颠倒混合数次,放散IgG抗体;5.4.4以3400转/分,离心3分钟。
放散试验标准操作规程一、目的:为规范红细胞放散试验的技术操作,保证结果的准确性,从而辅助血型的鉴定以及保证交叉配血的正确进行。
二、适用范围:输血科负责进行红细胞放散试验来检测血型弱表达抗原及抗体特异性等试验的技术人员。
三、原理:红细胞血型抗原和抗体的结合是可逆的,通过改变某些物理条件就可使结合在红细胞血型抗原上的抗体分离出来,即放散。
再通过检测放散液中的抗体,可鉴定其特异性或者间接鉴定红细胞抗原。
四、步骤和方法:<1>热放散试验1、将已进行吸收试验的压积红细胞用生理盐水洗涤4次,每次将洗涤后生理盐水除尽,最后一次洗液留作对照。
2、加入与压积红细胞等容量的生理盐水,充分混匀后56℃轻摇10min(15—30s摇动一次),56℃保温1300g离心3min,立即取上清液即放散液备用。
<2>乙醚放散试验1、将已进行吸收试验的压积红细胞用生理盐水洗涤4次,每次将洗涤后生理盐水除尽,最后一次洗液留作对照。
2、加入与压积红细胞等容量的生理盐水后再加入2倍于压积红细胞体积容量的分析纯乙醚,密封后用力颠倒摇动1min,小心放气减压置于37℃30min,每10min摇动1次后以1000g 离心5min。
3、离心后分成3层,最上层是乙醚,中层是红细胞基质,下层是深红色放散液(含血红蛋白)。
留取下层放散液置于37℃水浴中30min挥发残存乙醚备用。
4、根据试验目的检测放散液中抗体,与最后一次洗液做对照(洗液中应检不出任何抗体)。
<3>结果判断:若最后一次洗液未检出抗体,而放散液中检出相应抗体,则试验为阳性,表明红细胞表达目标抗原或者血清中存在相应抗体。
反之为阴性。
五、注意事项:1、如最后一次洗液中可检出抗体,表明红细胞洗涤不充分,应继续洗涤。
2、放散液中抗体易变性,故尽快进行鉴定。
如果放散液需要保存,改用不规则抗体筛选阴性的AB型血清或6%牛血清白蛋白。
3、放散试验方法较多,热放散法是最简便和实用的方法。
新生儿溶血病检测操作规程一、项目名称、检验方法名称1.项目名称:新生儿溶血病检测(包括直接抗人球蛋白试验、游离试验和放散试验三项)2.检验方法名称:柱凝集二、方法学原理该试剂卡是基于柱凝集的原理而设计。
正常具有抗原的人红细胞将与相应的抗体发生凝集反应,BioVue血型诊断试剂卡的微柱中含有玻璃珠介质和试剂。
加入红细胞并将试剂卡离心后,发生凝集的红细胞会被阻挡在玻璃珠的上面,而未凝集的游离红细胞则会在离心力的作用下通过玻璃珠之间的间隙到达微柱的底部。
三、试剂卡品牌、代号、包装规格、内含物1.试剂卡品牌:美国强生奥索2.代号:BioVue-po1yCassettes3.包装规格:400卡/箱试剂卡(707300);100卡/箱试剂卡(707350)4.试剂成分:抗人球蛋白(1gG,C3b∕C3d)检测卡有6根微柱组成,每一柱中含有缓冲液,其成分为牛血清蛋白,大分子增强剂以及0.1%叠氮钠,0.0IM的EDTA.成分描述第1〜6柱:抗人球蛋白、抗抗一IgG(兔)-IgG.-C3d;多特异性抗一C3b(鼠单克隆)(克隆F7G3)抗一C3d(鼠单克隆)(克隆C4C7)FD&C1#蓝色染料FD&C5#黄色染料5.试剂的储存与效期:储存条件:2〜25。
C环境保存。
请勿将试剂存放在自动除霜的冰箱中,也不要冷冻保存。
并且不要放在离热源(如孵育箱、辐射器、大型设备、冰箱、冰柜等)很近或阳光直射的地方。
效期:试剂盒上有记载四、仪器品牌、型号BioVUe专用离心机;BiOVUe专用孵育器五、样本的采集与准备:在采集标本前对病人/献血者无特殊要求。
含有或不含有抗凝剂的标本均可使用。
标本采集后应尽快进行检测。
如果实验不能立即进行,应将标本置于2—8。
C保存。
六、试剂准备:抗人球蛋白(IgG,C3b∕C3d)检测卡为即用型产品。
试剂卡应在铝箔开启后一小时内使用。
试剂卡经过运输颠簸后,需倒置一下,然后重新离心以备用。
新生儿溶血病血清学检查操作规程原理新生儿溶血病是由母婴血型不合引起,可见于ABO、Rh及MN等血型系统。
胎儿和新生儿红细胞被来自母亲的IgG抗体包被,并在婴儿的单核-巨噬细胞系统(网状内皮系统)受到免疫性破坏,出现溶血,表现出相应的症状。
病情严重程度因个体差异、抗体类型、抗体效价等不同而异。
目的规范新生儿溶血病血清学检查操作;查找新生儿溶血病发生的原因,协助临床进行实验室诊断及治疗;保证临床用血的安全性和有效性。
职责输血科技术人员负责新生儿溶血病血清学检查。
适用范围母婴血型不合引起的新生儿溶血病的血标本。
支持文件《中国输血技术操作规程》(血站部分).天津:天津科学技术出版社1997《输血技术学》第2版.北京:人民卫生出版社,2002《输血科(血库)工作手册》莞市中心血站2006材料或设备1、材料抗-A、抗-D定型试剂、抗球蛋白试剂、ABO反定型试剂红细胞、筛选细胞、谱细胞、生理盐水、新生儿静脉血、产妇及患儿父亲血标本2、设备血清雪专用离心机、电热恒温水浴箱、水浴振荡仪、显微镜、小试管、滴管、小玻棒操作步骤一、血标本采集及处理采集患儿及其父亲与母亲血标本各3-5ml,分离出血清,配制3%-5%红细胞盐水悬液。
如果患儿血标本为不抗凝血,则在一小玻璃漏斗颈部置一适当大小的棉球上,一边加生理盐水,一边用玻棒挤压血块,收集漏斗下面的红细胞悬液。
二、患儿血标本具体操作执行《ABO和Rh血型鉴定操作规程》。
ABO血型测定只做正定型。
1、直接抗球蛋白试验具体操作执行《抗球蛋白操作试验规程》中的直接抗球蛋白试验部分。
2、游离抗体检测⑴、取小试管3支,分别标明A、B、O细胞,每管加患儿血清2滴,再分别加入3%-5%的A、B、O、反定型试剂红细胞悬液1滴。
⑵、37℃致敏1h后取出,若发生凝集,不必继续往下做。
⑶、若不凝集,用盐水充分洗涤3次反应物后加入抗球蛋白血清1滴。
1300g离心15s,轻轻悬浮细胞,肉眼观察凝集反应,记录结果。
放散试验操作规程
1.目的
常用于ABO亚型的鉴定、全凝集或多凝集红细胞的定型、类B的鉴定以及新生儿溶血病的诊断等。
2.适用范围
ABO亚型的鉴定及新生儿溶血病的诊断。
3. 职责
3.1检测者职责:负责血液标本的处理、交叉配血试验操作及相关记录;
3.2复核者职责:负责对血液标本的检测过程以及关键控制点进行审核,校对试验结果和检测报告。
4. 原理
红细胞上的抗原与血清中的抗体在适合条件下发生凝集或致敏。
这种结合是可逆的,如果改变某些物理条件,抗体又可从结合的红细胞上放散出,再以相应的红细胞鉴定放散液内抗体的种类并测定其强度,用以判定原来红细胞上抗原的型别。
这种方法常用于ABO亚型的鉴定、全凝集或多凝集红细胞的定型、类B的鉴定以及新生儿溶血病的诊断等。
放散试验的方法很多,ABO血型,IgM抗体以热放散法为常用。
Rh血型,IgG抗体以乙醚放散法为常用。
5. 设备、材料和试剂
5.1 设备
细胞洗涤离心机编号/型号:132/KA-2200、台式离心机编号/型号:287-1/TD4、显微镜编号/型号:77/IM、数显恒温水浴锅编号/型号:264/HH-2、循环恒温水浴箱编号/型号:283/HH-6。
5.2 材料
5.2.1 送检标本要求静脉采集至少为抗凝血5ml;
5.2.2 标本处理:标本的验收、标识、存放、贮存、销毁等处理按《标本采集、接收及处理操作规程》进行。
5.3 试剂
相应的血清抗体、A型和B型试剂红细胞(3-5%)盐水悬液、乙醚(分析试剂) 6. 检测环境
试剂与标本贮存环境:4℃冰箱
检测环境:室温、37℃、56℃
7. 步骤与方法
7.1加热放散法
7.1.1 将受检红细胞以大量生理盐水洗涤3次,末次洗涤后,将盐水除尽,取压积红细胞一份,分别与2份抗A和抗B型分型血清混合,置4℃冰箱1小时,每隔10分钟将试管振摇1次,使充分混合;
7.1.2 离心去除上清液,以4℃冷盐水洗涤红细胞3-4次,倾去洗涤液,留取压积红细胞。
加1/2容积的生理盐水(如放散液不立刻进行检查,应以AB型血清代替生理盐水)。
置56℃水浴中10分钟,每隔1分钟振摇1次,使吸附在红细胞上的抗体充分放散出;
7.1.3 立刻以1000g离心1分钟,离心时管内放温水,使温度尽量保持在56℃,分离得到的上清即为放散液;
7.1.4 将放散液用A型和B型试剂红细胞(3-5%)鉴定抗体,即可检出受检红细胞血型。
7.1.5 结果判定
放散液和A型红细胞凝集与B型红细胞不凝集,被检血型为A型;反之为B型。
放散液和A型与B型红细胞均凝集,被检血型为AB;如均不凝集为O型。
7.1.6 附注
为了使放散液内有最多的抗体,吸收血清量应加大。
放散时应严格注意温度和时间。
温度过高,红细胞易溶解;温度过低,抗体从红细胞上放散不完全。
直接抗球蛋白试验阳性的红细胞,如新生儿溶血病患儿或自身免疫性溶血性贫血受血者,经洗涤后即可做抗体释放试验。
放散液中抗体易变性,故应立刻进行鉴定。
若要保存,应将抗体放散液于选定的AB型血清中。
7.2 乙醚放散法
7.2.1 取具有相应抗原的抗凝血,离心后吸去血浆,加大量生理盐水,洗涤1次,离心,取压积红细胞备用;
7.2.2 受检者血清5ml,加压积红细胞lml,混匀后放在适当的温度中1小时,在此期间要摇匀1-2次;
7.2.3 取出后离心,将上清液吸出放到另一管中,鉴定上清液的抗体。
将红细胞用盐水洗涤3次,离心压积;
7.2.4 取1体积压积红细胞加1体积AB型血清或生理盐水,2体积乙醚,颠倒摇匀10分钟,然后以1000g离心5分钟;
7.2.5 离心后即分为三层,最上层是乙醚,中层是红细胞基质,下层是具有抗体的放散液,其色深红;
7.2.6 用清洁的吸管吸出放散液。
若有浑浊,再离心一次;
7.2.7 将放散液放置37℃水浴中30分钟,除尽乙醚,然后鉴定抗体;
7.2.8 结果判定
以Rh血型抗体抗D为例,放散液(用酶法或聚凝胺法)和下列红细胞的反应CcdEE 型红细胞不凝集,CCDee ccDEE ccDee型红细胞均发生凝集,证明该放散液中含IgG抗D抗体。
本试验适用于鉴定Rh抗体。
最大优点用于检查获得性溶血性贫血,此种受血者的红细胞为直接抗球蛋白试验阳性,说明在体内己有自身抗体吸附在红细胞上,这种抗体多有Rh特异性。