Waters 2695 操作规程

Waters 2695 型高效液相色谱仪操作方法1 仪器组成及开机1.1 仪器组成本仪器由Waters 2695 分离单元、2996型二极管阵列检测器、2420蒸发光散射检测器、色谱管理工作站和打印机组成。

2695 分离单元包括四元梯度洗脱的溶剂输送系统，四通道在线真空脱气机（或氦气脱气机），可容纳120 个样品瓶的自动进样系统，柱温箱，内置的柱塞杆密封垫清洗系统，溶剂瓶托盘，液晶显示器，键盘用户界面及软盘驱动器。

1.2 开机依次接通2695 分离单元、检测器、计算机和打印机的电源。

接通2695 分离单元后，约20s 仪器开始自检，约1min 后，显示主屏幕，此时继续各部件的初始化，待主屏幕上方标题区出现“Idle ”时，仪器进入待命状态。

2 溶剂管理系统的准备2.1 流动相脱气确认所有溶剂管路都充满溶剂，按【Menu/Status 】，进入“Status （1 ）”屏幕，光标选“Degasser ”，按【Enter 】，显示选项屏幕，光标下移选“Continuous ”，按【Enter 】。

2.2 启动溶剂管理系统2.2.1 干启动，当溶剂的管路是干的或是需要更换溶剂时，在“Status （1 ）”屏幕下，按【Direct Function 】，光标选“Dry Prime ”，按【Enter 】，显示“Dry Prime ”屏幕，按欲启动的溶剂管路的屏幕键，如【OpenA 】，光标选“Duration ”，按数字键输入5min ，按【Continue 】，待限定时间结束后，重复操作，使实验所需的各溶剂管路均启动、排气并充满流动相。

2.2.2 湿启动在“Status （1 ）”屏幕下，光标选“Compomtion ”中欲使用的流动相，输入10 0％，按【Direct Function 】，光标选“Wet Prime ”，按【Enter 】，显示“Wet Prime ”屏幕，输入7.5Ml/min 和6min ，按【OK 】，待限定时间结束后，对每种流动相重复操作。

WATERS2695液相色谱仪操作规程一、液相主机操作：1、准备流动相，不同的流动相组分放在不同的溶剂瓶中。

注意：D瓶为洗泵杆溶液（甲醇-水）20：80，E瓶为洗针头溶液（甲醇-水）80：20。

2、打开液相主机电源开关，机器进行自校，约5分钟。

3、在线脱气（Degasser）：光标移到(Mode)下按Enter选On后按Enter。

4、样品池温度（Sample）：光标移到（Set）下直接输入温度数值按Enter。

5、柱温（Column）：光标移到（Set）下直接输入温度数值按Enter。

6、流动相比例（Composition）：光标移到相应位置直接输入比例数，每输一个数值按Enter确认；比例数之和应为100。

7、更换管路流动相：按直接功能（Direct Function）进入直接功能菜单选（2 Wet Prime）按Enter输入流速（Flow Rate）和时间(Time)按OK开始。

8、更换完成后自动返回主页面，按Next Page回到主菜单。

9、光标移到流速（Flow）下输入流速值，按Enter，液相主机开始工作。

10、打开样品室门，选择要操作的样品盘，按顺序放入样品，记下样品与样品位置号，关上样品室门。

11、实验完毕后，先关检测器电源以延长紫外灯寿命，色谱柱处理完毕后，再关主机电源。

二、紫外检测器操作：打开紫外检测器电源开关，机器进行自校，自检完毕后两个指示灯长亮。

三、软件操作：1、打开显示器电源，再打开主机电源，启动Windows XP。

2、点击桌面上的“Empower 登录”图标启动软件。

输入用户名“hplc”按“确定”进入主选单。

3、点击“运行样品”，“确定”进入运行样品界面。

选择一种仪器方法，单击“编辑”进入仪器状态设置界面，选择色谱仪的脱气状态、输入样品室温度、柱温箱温度、流动相比例、积分波长范围、监视波长；设定完成后注意保存。

4、单击“监视器”钮，色谱仪按重新设定后的参数运行。

Waters2695高效液相色谱操作规程[开机程序]1. 状态检查：1）检查仪器外观是否完好2）检查各种线缆连接是否稳固，外表有无损伤痕迹3）确认环境温度在15至35℃之间4）相对湿度在20%至80%之间2．配件安装：无3. 接线要求：1）高效液相色谱主机电源2）连接电脑主机和显示器电源4. 开机步骤：1）打开电脑电源，进入windows系统2）打开高效液相色谱电源，仪器开始自检（约5～6min），待仪器操作面板上出现“Idle”字样表示自检成功，仪器进入待命状态。

[测试步骤]1. 进入软件1）双击电脑桌面上的Empower快捷图标，出现Empower登陆窗口。

输入用户名与密码，默认账号为“system”，密码为“manager”，点击“OK”进入Empower 工作站。

2）选择“运行样品”界面，点击“确定”,然后选择待选定的操作项目以及色谱系统2 编辑仪器方法和方法组1）在“运行样品”界面中，监视区单击方法组编辑向导。

2）选择新建按钮，弹出仪器方法编辑器。

3）通用编辑页面中，可设置单次输送体积，查看脱气选项，确认设置正确，选择等度或者梯度，总流量以及流动相配比等选项。

4）单击2475图标，弹出2475编辑界面，在波长模式中选择相应的波长模式，单波长或者双波长，输入所需的波长，选择相应的采样速率，一般为2点/秒。

5）点击“文件”，选择“另存为”，输入仪器方法名称，点击“保存”，退出。

6）在被选项中选择所需的仪器方法名称，点击“下一步”。

7）在下拉菜单中选择所需的处理方法和报告方法（如果没有合适的方法选择"无处理"、"无报告"），点击“下一步”。

8）输入方法组名称，单击"完成"。

3 运行方法进样1）在“运行样品”界面中，选择相应的仪器方法，点击“监视器”，在监视窗口监视基线至系统平衡，停止系统监视状态，点击停止按钮。

单进样，点击参数编辑快捷方式进入定义单进样参数编辑界面，输入样品名、功能、方法组等参数。

Waterse2695高效液相色谱仪操作规程1目的指导和规范Waterse2695高效液相色谱仪的操作。

2适用范围该操作规程适用于Watere2695高效液相色谱仪的操作。

3职责检验员应按操作规程进行仪器操作，质量监督员负责监督该操作规程的正确执行。

4操作4.1仪器组成和开机仪器组成本仪器由Waterse2695分离单元、Waters2998二极管阵列检测器、WatersELSD2424蒸发光散射检测器、Empower3色谱工作站和打印机组成。

Waterse2695分离单元包括四元梯度洗脱的溶剂输送系统，四通道在线真空脱气，可容纳120个样品瓶的自动分离单元，柱温箱，内置的柱塞杆密封垫清洗系统，溶剂瓶托盘；显示器，键盘用户界面。

开机依次接通Waterse2695分离单元、检测器、计算机和打印机的电源。

接通Waterse2695分离单元后，约20s仪器开始自检，约3mn内各部件的初始化完成，待主屏幕上方标题区出现“Idle”时，仪器进入待命状态。

4.2溶剂管路系统的准备流动相脱气确认所有溶剂管路都充满溶剂，按［Menu/Status】，进入“Status(1)”屏幕，光标选“Degasser”，按［Enter】。

、•^、、灌注当色谱仪流路没有溶剂或系统中有空气时，需进行干灌注(DryPrime)，注入流动相。

否则，进行湿灌注(WetPrime)以驱除气泡。

干灌注：按主机面板上［Menu/Status］,进入“Status(1)”显示，按［DirectFunction］,选择“DryPrime”，选溶剂通道，如OpenA,选“Durationlli按数字键输入5分钟，按”COntinue”，待限定时间结束后，重复操作，使所需的溶剂通道注满流动相。

湿灌注：进入“Status(1)”显示，选溶剂通道，输入100%,按［DirectFunction］，选“WetPrime”，按【OK］,根据面板提示设置流速及时间(默认流速为7.5ml/min,一般不用更改，时间可设置为5min)，按【0K］。

Waters2695HPLC系统操作规程Waters 2695 HPLC 系统操作规程一、溶剂和样品的准备要求：流动相：按方法要求配制流动相，经0.45μm微孔滤膜过滤，并超声波脱气。

样品溶液：按方法要求配制样品溶液，并过滤除去溶液中的固体微粒。

二：开机及平衡系统：1、打开网络连接设备及计算机；Winows XP启动完毕后打开各单元电源；待各单元自检完毕；2、配制好的流动相放入瓶槽中，2695自检完毕后按面板Menu/Status 键，显示于控制主菜单画面；3、按2695 面板Direct Function 键，选择Dry Prime(干灌注))或Wet Prime(湿灌注))功能来灌注所需流路通道的输液系统，保证流路中充满了流动相；5、用手动控制模式设定流速、柱温、在线脱气机等参数；6、将2695泵清洗管路（不透明管）和洗针管路（绿管）分别放入适当的溶剂中，按2695面板Diag 键，选择Prime SealWash ，清洗泵头约1分钟；再选择Prime NdlWash ，清洗进样针1-2次；7、压力稳定后按2695面板Direct Function 键选择Purge Injector ，冲洗进样器；8、运行Empower软件，选择存放数据文件的项目（Project），选择运行样品（Run Samples）；按建立方法组（Develop Methods）按钮，建立方法组；按选择仪器方法并设置或监视按钮，观察基线，待基线平稳，可准备进样。

三、进样进样：1、将样品放入2695样品盘中，记录每一样品对应的管号；2、先在单次进样（Single ）状态下进样一次，若条件适合，确定运行时间 (Run Time)；在样品（Samples ）状态编辑样品表，开始自动进样。

四、数据处理及打印：1、选择运行浏览项目（Browse Project ），在通道（Channels ）中选择要处理的原始色谱图数据；2、使用指定的▲▲▲处理方法定量处理；3、在结果（Results ）中就可看得到结果色谱图数据，选择后右键可查看或预览结果。

Waters HPLC 2695操作规程一、日常开机步骤1. 制备新鲜流动相和清洗液流动相●水纯净水。

●缓冲剂首先溶解盐，调节pH值，然后过滤除去不溶解的物质，缓冲盐浓度≤100mMol。

●四氢呋喃使用不稳定的THF时，请确保溶剂是新鲜的。

先前打开过的THF瓶含有过氧化物杂质，将导致基线漂移。

●有机相原装进口的色谱纯。

清洗液●洗针液根据样品和流动相的化学性质选用洗针液，确保所有溶液和缓冲剂都是易混合和可溶解的，最好选择与最终梯度条件相似的洗针液。

推荐使用的洗针液：80%甲醇/20%水●清洗柱塞密封垫（seal wash）的溶液含5% ~ 10%甲醇的超纯水（一般放在弱洗溶液中）注意：所有流动相和清洗液均需盛放于硼硅玻璃制作的高质量实验室玻璃器皿中，混合均匀并在使用前要经过0.45µm的膜式过滤器的过滤，超声脱气1-2min。

2. 开机及系统准备2.1 开机先打开电脑，再依次接通2695分离单元、检测器的电源。

接通2695分离单元后，约20秒仪器自检，约1分钟后，显示主屏幕，此时继续各部件的初始化，待主屏幕上主标题区出现“Idle”仪器自检通过，表示开机测试正常，之后启动Emperor软件。

A管带黄色标记、B管带蓝色标记号、C管带红色标记、D管带绿色标记，绿色管为冲洗泵头用，白色管为冲洗进样器用，将各泵头放到相应的溶剂瓶中备用。

2.2灌注(Prime)当溶剂的管路是干的或存在较多气泡不易排出时，需进行灌注。

可向管理员求助。

2.3 平衡色谱柱在“Status”界面上，按流动相比例设定各通道溶剂比例后，设置流速，平衡色谱柱30-60min。

（可在工作站中设置）。

2.4 样品的配制所有样品均需经过滤膜过滤，置于液相小瓶内，达到样品瓶的1/3以上。

二、基本操作1. 创建项目双击电脑桌面图标“Empower”，用户名输入“system”密码输入“manager”选中操作项目和色谱系统→确定。

在菜单栏“管理”→创建新项目→选择父项目→下一步→输入表空间值→按“下一步”逐步设置→完成→管理→改变/项目，在该窗口切换项。

WATERS 2695仪器操作简明流程2695分离单元使用操作：1)开机自检打开电源开关，仪器开始自检（4-5min），待屏幕上方出现“Idle”字样表示自检成功。

2)脱气（Degas）按面板右下方“Menu/Status”键进入“Status（1）”界面，移动光标至“Degasser Mode”，按Enter选择“On”，打开在线脱气。

3)设定柱温（可选项）在“Status（1）”界面，移动光标至“Col Htr Set”，输入目标温按Enter即可。

（可在工作站方法中设置）4)Prime Seal Wash（清洗柱塞杆）按“Menu/Status”键回到“Menu”界面，按下排功能键“Diag”，然后再按下排功能键“Prime Seal Wsh”，“Start”，冲洗1~2min后，“HALT”，“CLOSE”。

5)Wet Prime在“Status（1）”界面中“Composition”下，选择将用到的溶剂通道为“100%”，按液晶屏幕右下角“Direct Function”键，移动光标选择“2 Wet Prime”，“OK”，流速及时间可使用默认值，也可自行设定（如：5ml/min，3min），“OK”即可。

将每一个会用到的溶剂通道按照上述操作一次。

6)Purge Injector（注射器排气泡及清洗）进入“Direct Function”界面后，选择“3 Purge Injector”，“OK”，默认数值为6，“OK”。

7)Prime Needle Wash（清洗注射针）进入“Diagnostics”界面，按下排功能键之“Prime Ndl Wsh”，“Start”，默认30秒钟，“Close”，即可返回“Diagnostics”界面。

注：以上4）-7）为溶剂系统前处理过程，建议每天开机后依次进行。

若发现注射器中有气泡，则可重复6）直至排除。

如果流动相中含有盐类，则实验结束后必须用水清洗柱塞杆（即操作4））。

Water 2695 高效液相色谱仪操作规程1目的用于规范检验人员正确操作使用Waters 2695 高效液相色谱仪。

2 适用范围适用于使用Waters 2695高效液相色谱仪检测分析的操作管理。

3 职责使用Waters 2695高效液相色谱仪进行检验的检验员应对本规程负责，相关项目经理负责监督该操作规程的正确执行。

4仪器组成及原理4.1仪器组成本仪器由Waters 2695 高效液相色谱仪、检测器(2996型二极管阵列检测器、2487紫外检测器、2489紫外检测器、474型荧光检测器)、Empower色谱作站组成。

2695 分离单元包括四元梯度洗脱的溶剂输送系统，四通道在线真空脱气机，可容纳120 个样品瓶的自动进样系统，柱温箱，内置的柱塞杆密封垫清洗系统，溶剂瓶托盘，液晶显示器，键盘用户界面等组成。

4.2高效液相色谱法是将具一定极性的单一溶剂或不同比例的混合溶液，经色谱柱进行分离，检测器检测分离后的不同组分，数据处理装置记录色谱图或进行数据处理。

5.仪器的操作5.1仪器的准备5.1.1 检查流动相（使用前应首先脱气）、在线清洗溶液（10%甲醇-水溶液seal wash）、进样针清洗溶液（90%甲醇-水溶液injector wash）是否足够。

5.1.2 检查色谱柱的使用是否正确（方向是泵出来进检测器的方向，正常的话是色谱柱上所标示的箭头向上；一般情况下不能将色谱柱反过来用，除非柱子确实无法使用可考虑反方向使用）、连接是否有误，有无漏液，废液瓶的容量是否足够。

5.2开机、自检与仪器预备5.2.1依次开启不间断稳压电源、开启2695 分离单元电源和计算机电源；仪器开始自检（约5～6min），待仪器操作面板上出现“Idle”字样表示自检成功，仪器进入待命状态。

5.2.2按动仪器面板右下方“Menu/Status”键进入操作状态，按动“Direct Function” 功能键，若仪器是首次使用或溶剂的管路充满空气时，先选择Dry Prime，按动OK，对管路进行排空；此时开启仪器下方purge阀，用专用注射器手工抽出管路内部的空气。

Empower软件一．登录1.双击电脑桌面上的Empower图标，出现Empower登录窗口。

2.输入用户名和密码，然后单击“确定”,进入Empower。

每次登录前必须输入用户名和密码。

注：出厂设置的用户名为 system，密码为 manager。

二．项目管理（一）新建项目3.鼠标左键单击图标,进入“配置系统"。

4.在如下界面中，选中“项目”后，单击“新建项目"。

8出现“新建项目向导”，如下图所示:a.“表空间”中接受50MB的表空间缺省设置.在该向导步骤中，系统默认设置了“支持‘全面审计追踪'”.如果不需要，可取消“支持‘完全审计追踪'”复选框，以取消对项目元素（如方法和样品）所做的所有修改的记录。

如需要，则选中该复选框之后，还再选择是否需要对“方法变化"、“结果变化"、“样品信息变化”和“删除”的更改进行注释。

单击“下一步”。

注:“完全审计追踪”功能用于支持法规的要求，如果没有法规要求可以不选，这样可以简化实验和节省硬盘空间。

b.出现“选项"页。

选择用于本项目的选项.单击“下一步"。

注：如果无法确定适当的设置，请接受默认选项。

c.出现“访问控制”页。

根据需要选择设置对您所创建的项目具有访问权限的用户和用户组，或者接受缺省的选项，然后单击“下一步".注：如果无法确定适当的设置，请接受默认选项.d.在“复制”页中，接受默认的选项,然后单击“下一步”。

e.在“输入名称"页中,输入项目的名称,必要时输入注释内容。

最后单击“完成”来结束新项目的创建。

注:项目名中不能出现空格.可使用下划线（_ ）分隔词。

另外，名称不能以数字开头。

如果在前面选中了“完全审计追踪”选项，则必须在文本框中输入注释.注：项目是方法、结果、自定义字段、视图筛选器和原始数据的集合，由用户定义。

该集合驻留在Empower数据库中并在“浏览项目"中显示.项目是为了方便用户归类、管理和检索相应的数据，应根据实际情况来决定是否建立，并不是每次开机都要创建。