溶液配方

实验室常用溶液配制实验室常用溶液的配置Amp+/Kan+:贮存液浓度为50mg/mL称取500mg于10mL超纯水中溶解，抽滤后1mL分装到离心管中，于-30℃冻存X-gal：贮存浓度为20mg/mL称取20mg X-gal溶于1mL二甲基甲酰胺中，-30℃中用锡箔纸包裹后避光保存，不需要过滤除菌IPTG：贮存浓度为0.84mol/L称取2g IPTG溶于8mL超纯水中，用水定容到10mL，用0.22um 的一次性滤过器过滤除菌，1mL分装到离心管中并于-30℃保存CaCl2：贮存浓度为1mol/L称取1.11g CaCl （或者CaCl:2H2O 1.4698g）溶于8mL超纯水中，定容到10mL，用0,22um的一次性滤过器过滤除菌，1mL分装到离心管中，并于-30℃保存LB培养基：胰蛋白胨（Tyrtone）10g/L酵母提取物（Yeast Extraction）5g/L氯化钠10/L根据经验用NaOH调节PH为7.2-7.6，然后高压蒸汽灭菌，注意及时从灭菌锅中取出无DNA酶的RNA酶：将胰RNA酶（RNA酶A）溶于10mmol/L Tris-Cl（PH7.5）、15mmol/L NaCl 中，配成10mg/mL 的浓度，于100℃加热15min，缓慢冷却至室温，分装成小份保存于-20℃Bradford 贮存液95%乙醇100mL88%磷酸200mLG 250 0.35g室温下可储存，一般4℃Bradford 工作液Bradford贮存液30mL双蒸水425mL95%乙醇15mL88%磷酸30mL储存于4℃超声破碎缓冲液KCl 300 mM 22.37 gKH2PO450 mM 6.81 gEDTA 1 mM 0.292 g (EDTA-2Na-2H2O) 0.372 g定容至1 L，调pH至8.0包涵体洗涤液KCl 300 mM 22.37 gKH2PO4 50 mM 6.81 gEDTA 5 mM 1.46 g (EDTA-2Na-2H2O) 1.86 g尿素 2 M 120 gTriton X-100 0.5% 5 ml脱氧胆酸钠盐0.1% 1 g定容到1 L 调pH至8.0匀浆缓冲液（pH=7.5）成分：20mM HEPES 0.002mol=0.476g 加入0.952g1.5mM MgCl20.00015mol=0.0036g 加入0.0072g 0.2mM EDTA 0.00002mol=0.00584g 加入0.01168g 0.1M NaCl 0.01mol=0. 58g 加入1.16g0.5mM 钒酸钠0.00005mol=0.0092g 加入0.0184g 加100mL水进行溶解，NaOH调pH至7.50.2mM DTT 总体积500μL加入0.1μL0.4mM PMSF 总体积500μL加入20μL1%SDS 加入50μL 10% SDS其中DTT和PMSF匀浆之前加入，SDS匀浆之后离心之前加入DTT配成1M母液，溶于0.01M乙酸钠（pH=5.2）中，过滤除菌PMSF配成10mM母液，溶于异丙醇10*PBSNaCl 80.0669 gKCl 2.0129 gNa2HPO414.1960 gKH2PO4 2.4496 g水定容至1L，使用时稀释10倍，用NaOH调pH至7.4Start with 800 mL of distilled water to dissolve all salts. Adjust the pH to 7.4 with HCl. Add distilled water to a total volume of 1 liter. The resultant 1x PBS should have a final concentration of 10 mM PO43?, 137 mM NaCl, and 2.7 mM KClIf used in cell culturing, the solution can be dispensed into aliquots and sterilized by autoclaving (20 min, 121°C, liquid cycle). Sterilization may not be necessary depending on its use. PBS can be stored at room temperature or in the fridge. However, concentrated stock solutions may precipitate when cooled and should bekept at room temperature until precipitate has completely dissolved before use.转膜缓冲液（含有SDS）1L剂量甘氨酸 2.9gTris 5.8gSDS 0.37g甲醇200mL水800mL10×蛋白电泳缓冲液1L剂量Tris 碱(Mr 121.14) 30.2g甘氨酸(Mr 75.07) 188gSDS (Mr 288.38) 10 g加水至1L用时稀释10倍即可30％丙稀酰胺1L 剂量丙烯酰胺290gN,N’-亚甲基双丙稀酰胺10g溶于600ml蒸馏水中，加热至37℃溶解，补足体积至1L，过滤，且pH不大于7.01 M Tris-Cl（pH6.8）60.55 g Tris 碱溶解于400ml 蒸馏水，溶解后调pH值，总体积为500ml1.5 M Tris-Cl（pH8.8）90.83g Tris 碱溶解于400ml 蒸馏水，溶解后调pH值，总体积为500ml。

附录一、常用溶液的配制（一）溶液配制注意事项1．药品要有较好的质量试剂分为优级纯（保证试剂，Guaranteed reagent，G．R．）、分析试剂（Antalytical reagent，A．R．）化学纯（Chemical pure，C．P．）和实验试剂（Laboratory reagent，L．R．）等等。

工业用的化学试剂，杂质较多，只在个别情况下应用，如配洗液用的硫酸、配干燥剂的氯化钙等。

2．药品称量要精确。

3．配制试剂用水应用新鲜的去离子水或双蒸馏水，比电阻值在50万欧姆以上，pH在5.5~7.0之间才可应用，在组织培养等特殊用途时应注意此项要求，配制一般化验用溶液只要求用双蒸馏水或去离子水。

４．配好后的溶液，应立即除菌处理（如高压灭菌、抽滤或加抑菌物质），以防杂菌生长。

（二）0.067（1/15）Mol/L磷酸缓冲液1．1/15Mol/L磷酸二氢钾溶液的配制：称取磷酸二氢钾（KH2PO4，A．R．）9.08g，用蒸馏水溶解后，倾入1 000ml容量瓶内，再稀释至刻度（1 000ml）。

2．１/15Mol/L磷酸二氢钠溶液的配制：称取无水磷酸氢二钠（Na2HPO4，A.R.）9.47g（或者Na2HPO4·2H2O 11.87g）用蒸馏水溶解后，放入1 000ml容量瓶内，再加蒸馏水稀释至刻度（1 000ml）。

3．按附表的比例，配制成不同pH值的缓冲溶液。

附表1 磷酸盐缓冲液配制法（单位：毫升）pH 1/15Mol/LNa2HPO41/15Mol/LKH2PO4pH 1/15Mol/LNa2HPO41/15Mol/LKH2PO45.8 8.0 92.0 7.1 66.6 23.45.9 9.9 90.1 7.2 72.0 28.06.0 12.2 87.8 7.3 76.8 23.2 6.1 15.3 84.7 7.3 80.8 19.26.2 18.6 81.47.5 84.1 15.9 6.3 22.4 77.6 7.6 87.0 13.0 6.4 26.7 73.3 7.7 89.4 10.6 6.5 31.8 68.2 7.8 91.5 8.5 6.6 37.5 62.5 7.9 93.2 6.8 6.7 43.5 56.5 8.8 94.7 5.3 6.8 49.6 50.4 8.1 95.8 4.26.9 55.4 44.6 8.2 97.0 3.07.0 61.1 38.9 8.4 98.0 2.0（三）0.15Mol/L PB液附表2 0.15Mol/LPB液配制法pH 0.15Mol/L Na2HPO4（ml）0.15Mol/L NaH2PO4（ml）6.4 26.5 73.56.6 37.5 62.56.8 49.0 51.07.0 61.0 39.07.2 72.0 28.07.4 81.0 19.07.6 87.0 13.0Na2HPO4·2H2O分子量=175.05 0.15Mol/L溶液含26.7g/L。

溶液的配制的实验内容1. 溶液配制的概述嘿，大家好！今天咱们要聊聊一个既简单又有趣的话题——溶液的配制。

听起来可能有点严肃，但其实这个过程就像是在厨房里做菜一样，关键是掌握好比例和步骤。

想象一下，配制溶液就像是调配一杯完美的鸡尾酒，你得知道要加多少酒、多少果汁，才能让它味道恰到好处。

那么，溶液到底是什么呢？简单来说，溶液就是一种均匀混合的液体，里面有溶质和溶剂。

就好比是水和盐，水是溶剂，盐就是溶质。

把它们混在一起，你就得到了盐水，这就是一个简单的溶液！2. 配制溶液的步骤2.1 准备材料首先，咱们得准备好需要的材料。

你需要的东西其实不多：溶质、溶剂和一个量具。

溶质可以是盐、糖或者其他化学物质，溶剂一般是水。

还有，一个量具很重要，可以是量筒、电子天平，甚至是厨房的量杯，能称量或者量出你想要的量就行了。

2.2 精确测量接下来，测量就来了。

这可是关键的一步，别偷懒哦！量错了，结果可就大不相同。

比如说，盐水浓度太低，喝起来没味；浓度太高，恐怕你得喝水解渴了。

一般来说，溶质和溶剂的比例要根据你需要的浓度来调整。

你可以参考一些标准配方，当然，自己也可以大胆创新，试试不一样的配比。

不过，创新之前最好先做好功课，不然搞得一团糟就不好了。

3. 溶解过程3.1 混合溶质与溶剂然后，就是最有意思的环节了——混合！把测量好的溶质慢慢倒进溶剂里，看到它在水里慢慢消失，简直就像魔法一样！你可以用玻棒轻轻搅拌，帮助溶质更快地溶解。

这时候，千万别心急，慢慢来。

搅拌得越均匀，溶液就会越清澈透明，就像天上的云朵一样纯净。

3.2 观察变化最后，别忘了观察一下变化。

这可不是在看电影，而是在看你亲手制作的作品！看看溶液的颜色、清澈度，有时候你甚至能发现一些小气泡，像是它在跟你打招呼呢！这时候，你可以心里默默得意，想想自己刚刚调配的这杯“鸡尾酒”，感觉特别有成就感。

4. 注意事项4.1 安全第一在配制溶液的时候，安全第一，千万别忘了这一点！如果使用一些比较刺激的化学品，最好佩戴好手套和护目镜，保护好自己。

各种溶液的配制基础公式最终摩尔浓度 = 最初摩尔浓度/ 稀释倍数稀释倍数 = 稀释后液体总量 / 需稀释液体量。

最初摩尔浓度×需稀释液体量最终摩尔浓度 =稀释后液体总量例如，需稀释液体量 0.1ml, 浓度为1mmol/L, 最终稀释总量 4 ml , 最终的浓度0.025mmol/L 以配1000ml 液体为例, g = 分子量 * 摩尔浓度(M)(或mmol/1000)配50ml 0.1mmol/L CaCl2为例 g = 147 * 0.5/1000 / 20(1000/50) 0.003675g0.3mol/L 甘露醇 g = 182.2 * 0.3 /20(1000/50) 2.733g或X = 分子量×摩尔浓度（mol/L ）/ （ 1000/ 需要量）X = 分子量×摩尔浓度（mmol/L ）/1000 /（ 1000/ 需要量）各种浓缩液的配制1.FSH 浓缩液FSH（中科院）规格10mg/瓶，用10ml水稀释，即1mg/ml。

分装规格：250μl/管（即浓缩液），配50ml OM液时，加入浓缩液1管，即5μg/ml。

2．LH浓缩液LH（宁波）规格200IU/管，用2ml 水稀释，分装成8管。

分装规格：25IU/管（即浓缩液）。

配50ml OM液时，加入浓缩液2管，即0.5IU/ml。

3．17β-E2浓缩液E22.5mg 溶于100μl 乙醇, 然后用25ml水稀释，分装成25管，分装规格：100μg/ml/管（浓缩液）。

临用前，再分装成500μl/管，配50ml OM液时，加入浓缩液1管。

4．HMG浓缩液HMG（），含有FSH / LH 75IU。

用10ml无离子水稀释。

7.5IU/ml/管(即浓缩液)。

如配100ml OM时加入1管（1ml），即终浓度0.075IU/ml 。

5．Ca、Mg离子浓缩液PBS（200ml）用Ca、Mg离子浓缩液100ml：称取CaCI2.2H2O 2.64g(100×)、MgCI2.6H2O 2g （100×），溶于100ml水中，0.0264g + 0.02g/ml CaCI2.2H2O/MgCI2.6H2O(浓缩液)。

常用溶液的配制一、常规溶液(一)1/15mol/L PBS(磷酸缓冲液Phosphate Buffer Solution，PBS)甲液：1/15mol/L Na2HPO4溶液Na2HPO49.465g蒸馏水加至1000ml乙液：l/15mol/L KH2PO4溶液KH2P049.07g蒸馏水加至1000m1分装在棕色瓶内，于4℃冰箱中保存，用时甲、乙两液各按不同比例混合，即可得所需pH的缓冲液,见下表:pH 甲液ml 乙液mI pH 甲液ml 乙液mI5.29 5.595.916.24 6.47 6.64 2.55.010.020.030.040.097.595.090.080.070.060.06.816.987.177.387.738.0450.060.070.080.090.095.050.040.030.020.010.05.0(二)0.3％台盼兰染液称取台盼兰(Trypan blue)粉0.3克，溶于100ml生理盐水中，加热使之完全溶解，用滤纸过滤除渣，装入瓶内室温保存。

(三)0.5％酚红指示剂酚红0.5g0.1N(0.4％)NaOH 15ml双蒸水85ml将0.5克酚红置研钵中，缓漫滴加0.1NNaOH溶液边加边磨，并不断吸出已溶解的酚红液，直至全部溶解，然后加入85ml双蒸水，颜色为深红，经粗滤纸过滤后使用，室温保存。

(四)5.6％NaHCO3溶液称NaHCO35.6克，溶于100ml蒸馏水中，室温保存即可(如需要也可10磅15分钟高压灭菌，4℃冰箱保存)(五)10μg／ml秋水仙素秋水仙素lOmg生理盐水100ml装入茶色瓶中，为贮备液，4℃冰箱中保存。

甩时取贮备液1ml加生理盐水9ml即可。

(六)0.4％KCl-0.4％柠檬酸钠低渗液将0.4％KCl和0.4％柠檬酸钠两液等量混合即可，室温保存。

(七)2％柠檬酸钠称取柠檬酸钠2克，加100ml双蒸水即可，室温保存。

（八）0.2％次甲基兰染液称次甲基兰(Methylene blue)0.2克，加蒸馏水100ml，室温保存。

实验室常用缓冲液配置方案1×TE Buffer组成浓度：10mM Tris-HCl 1mM EDTA PH=8.0配制量：500ml配制方法：量取下列溶液于500ml烧杯中1M Tris-HCl Buffer PH=8.0 5ml0.5M EDTA PH=8.0 1ml向烧杯中加入约400mldd H2O均匀混合；将溶液定容到500ml 后，高温高压灭菌；室温保存.1)1 M Tris-HCl (pH 8.0)组份浓度：1 M Tris-HCl配制量：1 L配制方法：1. 称量121.1 g Tris置于1 L烧杯中。

2. 加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解。

3. 加入42ml浓盐酸调节所需要的pH值。

4. 将溶液定容至1 L。

5. 高温高压灭菌后，室温保存。

15）0.5 M EDTA(pH8.0)组份浓度：0.5 M EDTA配制量：1 L配制方法：称取186.1 g Na2EDTA·2H2O，置于1 L烧杯中。

2. 加入约800 ml的去离子水，充分搅拌。

3. 用NaOH调节pH值至8.0（约20 g NaOH)。

注意：pH值至8.0时，EDTA才能完全溶解。

4. 加去离子水将溶液定容至1 L。

5. 适量分成小份后，高温高压灭菌。

6. 室温保存。

实验室常用缓冲液配置方案1)1 M Tris-HCl (pH7.4, 7.6, 8.0)组份浓度：1 M Tris-HCl配制量：1 L配制方法：1. 称量121.1 g Tris 置于1 L 烧杯中。

2. 加入约800 ml 的去离子水，充分搅拌溶解。

3. 按下表量加入浓盐酸调节所需要的pH 值。

5. 高温高压灭菌后，室温保存。

注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH 值，因为Tris 溶液的pH 值随温度的变化差异很大，温度每升高1℃，溶液的pH 值大约降低0.03个单位。

2)10×TE Buffer (pH7.4, 7.6, 8.0)组份浓度：100 mM Tris-HCl, 10 mM EDTA配制量：1 L配制方法：3. 将溶液定容至1 L 后，高温高压灭菌。

常用溶液配方（细胞培养）PBS配制一、PBS配方配1L 25倍PBSNaCl 200gNa2HPO4-2H2O 36g 最难溶最后加或Na2HPO4-12H2O 72.4gNaH2PO4-2H2O 6.5g 或NaH2PO4 5g搅拌，1000ml定容，调PH值至7.2—7.4（细胞培养）1倍PBS配方NaCl 8.0gKCl 0.2gNa2HPO4 1.44g 或者Na2HPO4-12H2O 3.57gKH2PO4 0.24g加水定容至1L，调PH值7.2-7.4（细胞培养）10倍PBS配方NaCl 80gKCl 2gNa2HPO4 14.4g 或者Na2HPO4-12H2O 35.7gKH2PO4 2.4g（组化用）PBS配方配1L 10 倍PBSNaHPO4 10.9g 或Na2HPO4-12H2O 27.50gNaCl 90gNaH2PO4 3.2g 或NaH2PO4-2H2O 4.16g搅拌，1000ml定容，调PH至7.2，分装，常温保存配1倍PBS（0.01PBS）1.取50ml 10倍PBS，倒入容量瓶2.定容至500ml，摇匀，分装二、胰酶的配制：0.25%胰酶1倍PBS 1000ml胰酶粉（trypsin）2.5gEDTA 0.4g搅拌后4摄氏度过夜，然后用NaOH调PH值至7.2-7.4；用0.22um滤器（绿色滤器）过滤分装保存。

三、培养基配制L-DMEM配制1L培养液：L-DMEM 10gNaHCO3 2.2g双抗1%（11ml）胎牛血清110ml注：国产胎牛血清需要56℃，30min灭活加完混合后，用0.22um的滤器过滤除菌，4摄氏度保存。

低糖冻存液的保存冻存液：L—DMEM：血清：DMSO=6：3：1注：（DMSO要缓慢加入，以防散热不均，下面要垫上冰块，助散热。

配好后用0.22微米滤器过滤，分装，4℃保存1640培养液配制1L体系：1640干粉10.3g/LNaHCO3 2g双抗1%100倍谷氨酰胺10mlβ-巯基乙醇3.5 uL胎牛血清10%（灭活）0.22微米滤器过滤，4℃保存。

实验室常用溶液的配置Amp+/Kan+:贮存液浓度为50mg/mL称取500mg于10mL超纯水中溶解，抽滤后1mL分装到离心管中，于-30℃冻存X-gal：贮存浓度为20mg/mL称取20mg X-gal溶于1mL二甲基甲酰胺中，-30℃中用锡箔纸包裹后避光保存，不需要过滤除菌IPTG：贮存浓度为0.84mol/L称取2g IPTG溶于8mL超纯水中，用水定容到10mL，用0.22um的一次性滤过器过滤除菌，1mL分装到离心管中并于-30℃保存CaCl2：贮存浓度为1mol/L称取1.11g CaCl （或者CaCl:2H2O 1.4698g）溶于8mL超纯水中，定容到10mL，用0,22um的一次性滤过器过滤除菌，1mL分装到离心管中，并于-30℃保存LB培养基：胰蛋白胨（Tyrtone）10g/L酵母提取物（Yeast Extraction）5g/L氯化钠10/L根据经验用NaOH调节PH为7.2-7.6，然后高压蒸汽灭菌，注意及时从灭菌锅中取出无DNA酶的RNA酶：将胰RNA酶（RNA酶A）溶于10mmol/L Tris-Cl（PH7.5）、15mmol/L NaCl 中，配成10mg/mL 的浓度，于100℃加热15min，缓慢冷却至室温，分装成小份保存于-20℃Bradford 贮存液95%乙醇100mL88%磷酸200mLG 250 0.35g室温下可储存，一般4℃Bradford 工作液Bradford贮存液30mL双蒸水425mL95%乙醇15mL88%磷酸30mL储存于4℃超声破碎缓冲液KCl 300 mM 22.37 gKH2PO450 mM 6.81 gEDTA 1 mM 0.292 g (EDTA-2Na-2H2O) 0.372 g定容至1 L，调pH至8.0包涵体洗涤液KCl 300 mM 22.37 gKH2PO4 50 mM 6.81 gEDTA 5 mM 1.46 g (EDTA-2Na-2H2O) 1.86 g尿素 2 M 120 gTriton X-100 0.5% 5 ml脱氧胆酸钠盐0.1% 1 g定容到1 L 调pH至8.0匀浆缓冲液（pH=7.5）成分：20mM HEPES 0.002mol=0.476g 加入0.952g1.5mM MgCl20.00015mol=0.0036g 加入0.0072g0.2mM EDTA 0.00002mol=0.00584g 加入0.01168g0.1M NaCl 0.01mol=0. 58g 加入1.16g0.5mM 钒酸钠0.00005mol=0.0092g 加入0.0184g加100mL水进行溶解，NaOH调pH至7.50.2mM DTT 总体积500μL加入0.1μL0.4mM PMSF 总体积500μL加入20μL1%SDS 加入50μL 10% SDS其中DTT和PMSF匀浆之前加入，SDS匀浆之后离心之前加入DTT配成1M母液，溶于0.01M乙酸钠（pH=5.2）中，过滤除菌PMSF配成10mM母液，溶于异丙醇10*PBSNaCl 80.0669 gKCl 2.0129 gNa2HPO414.1960 gKH2PO4 2.4496 g水定容至1L，使用时稀释10倍，用NaOH调pH至7.4Start with 800 mL of distilled water to dissolve all salts. Adjust the pH to 7.4 with HCl. Add distilled water to a total volume of 1 liter. The resultant 1x PBS should have a final concentration of 10 mM PO43−, 137 mM NaCl, and 2.7 mM KClIf used in cell culturing, the solution can be dispensed into aliquots and sterilized by autoclaving (20 min, 121°C, liquid cycle). Sterilization may not be necessary depending on its use. PBS can be stored at room temperature or in the fridge. However, concentrated stock solutions may precipitate when cooled and should bekept at room temperature until precipitate has completely dissolved before use.转膜缓冲液（含有SDS）1L剂量甘氨酸 2.9gTris 5.8gSDS 0.37g甲醇200mL水800mL10×蛋白电泳缓冲液1L剂量Tris 碱(Mr 121.14) 30.2g甘氨酸(Mr 75.07) 188gSDS (Mr 288.38) 10 g加水至1L用时稀释10倍即可30％丙稀酰胺1L 剂量丙烯酰胺290gN,N’-亚甲基双丙稀酰胺10g溶于600ml蒸馏水中，加热至37℃溶解，补足体积至1L，过滤，且pH不大于7.01 M Tris-Cl（pH6.8）60.55 g Tris 碱溶解于400ml 蒸馏水，溶解后调pH值，总体积为500ml1.5 M Tris-Cl（pH8.8）90.83g Tris 碱溶解于400ml 蒸馏水，溶解后调pH值，总体积为500ml。

几种溶液的配制方法1、PBS:取ZLI-9061 PBS溶于1000ml的蒸馏水中，混匀，测pH值应在7.2-7.4之间，若偏离此范围，请用0.1N的HCL或NaOH调整。

2、TBS：2.1 Tris缓冲液配方：（0.5 M pH7.6）Tris（三羟甲基氨基甲烷）60.57g1N HCL 约420ml双蒸水加至1000mlTris缓冲液配制方法：先以少量双蒸水（300~500ml）溶解Tris，加入HCl后，用HCl（1N）或NaOH（1N）将pH调至7.6，最后双蒸水加至1000ml。

此液为储备液，4℃冰箱中保存。

2.2 TBS配方：Tris-HCI缓冲液（0.5M pH7.6）100mlNaCI 8.5-9g (0.15mol/L)双蒸水加至1000mlTBS配制方法：先以少量双蒸水溶解NaCl，再加入Tris-HCl缓冲液，最后加双蒸水至1000ml，充分摇匀。

3、枸橼酸盐缓冲液（Citrate buffer）：3.1 储存液：A. 0.1M枸橼酸溶液：称取21.01g枸橼酸（C6H8O7·H20）溶于1000ml蒸馏水中。

B. 0.1M枸橼酸钠溶液：称取29.41g枸橼酸钠（C6H5Na3O7·2H20）溶于1000ml蒸馏水中。

3.2 工作液：取9ml A液和41ml B液加入450ml蒸馏水中，溶液pH值应为6.0±0.14、胰酶（Trypsin）：4.1 ZLI-9011胰蛋白酶消化液：常用浓度为0.125%，即使用前将一滴试剂1胰酶溶液和三滴试剂2胰酶稀释液均匀混合（1:3稀释），则可直接滴加使用。

胰酶的最终浓度可以根据使用者的要求进行调整，浓度范围可以从0.05%（1:10稀释）至0.25%（1:1稀释）。

4.2 ZLI-9010胰蛋白酶：取0.05g或0.1g胰蛋白酶加入到100ml 0.05%或0.1% pH7.8的无水氯化钙水溶液中，溶解即可。

几种溶液的配制方法1、PBS:取ZLI-9061 PBS溶于1000ml的蒸馏水中，混匀，测pH值应在7.2-7.4之间，若偏离此范围，请用0.1N的HCL或NaOH调整。

2、TBS：2.1 Tris缓冲液配方：（0.5 M pH7.6）Tris（三羟甲基氨基甲烷）60.57g1N HCL 约420ml双蒸水加至1000mlTris缓冲液配制方法：先以少量双蒸水（300~500ml）溶解Tris，加入HCl后，用HCl（1N）或NaOH（1N）将pH调至7.6，最后双蒸水加至1000ml。

此液为储备液，4℃冰箱中保存。

2.2 TBS配方：Tris-HCI缓冲液（0.5M pH7.6）100mlNaCI 8.5-9g (0.15mol/L)双蒸水加至1000mlTBS配制方法：先以少量双蒸水溶解NaCl，再加入Tris-HCl缓冲液，最后加双蒸水至1000ml，充分摇匀。

3、枸橼酸盐缓冲液（Citrate buffer）：3.1 储存液：A. 0.1M枸橼酸溶液：称取21.01g枸橼酸（C6H8O7·H20）溶于1000ml蒸馏水中。

B. 0.1M枸橼酸钠溶液：称取29.41g枸橼酸钠（C6H5Na3O7·2H20）溶于1000ml蒸馏水中。

3.2 工作液：取9ml A液和41ml B液加入450ml蒸馏水中，溶液pH值应为6.0±0.14、胰酶（Trypsin）：4.1 ZLI-9011胰蛋白酶消化液：常用浓度为0.125%，即使用前将一滴试剂1胰酶溶液和三滴试剂2胰酶稀释液均匀混合（1:3稀释），则可直接滴加使用。

胰酶的最终浓度可以根据使用者的要求进行调整，浓度范围可以从0.05%（1:10稀释）至0.25%（1:1稀释）。

4.2 ZLI-9010胰蛋白酶：取0.05g或0.1g胰蛋白酶加入到100ml 0.05%或0.1% pH7.8的无水氯化钙水溶液中，溶解即可。

实验室常用缓冲液配置方案1×TE Buffer组成浓度：10mM Tris-HCl 1mM EDTA PH=配制量：500ml配制方法：量取下列溶液于500ml烧杯中1M Tris-HCl Buffer PH= 5mlEDTA PH= 1ml向烧杯中加入约400mldd H2O均匀混合；将溶液定容到500ml后，高温高压灭菌；室温保存.1)1 M Tris-HCl (pH组份浓度：1 M Tris-HCl配制量：1 L配制方法：1. 称量 g Tris置于1 L烧杯中。

2. 加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解。

3. 加入42ml浓盐酸调节所需要的pH值。

4. 将溶液定容至1 L。

5. 高温高压灭菌后，室温保存。

15） M EDTA组份浓度： M EDTA配制量：1 L配制方法：称取g Na2EDTA·2H2O，置于1 L烧杯中。

2. 加入约800 ml的去离子水，充分搅拌。

3. 用NaOH调节pH值至（约20 g NaOH)。

注意：pH值至时，EDTA才能完全溶解。

4. 加去离子水将溶液定容至1 L。

5. 适量分成小份后，高温高压灭菌。

6. 室温保存。

实验室常用缓冲液配置方案1)1 M Tris-HCl , ,组份浓度：1 M Tris-HCl配制量：1 L配制方法：1. 称量 g Tris置于1 L烧杯中。

2. 加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解。

3. 按下表量加入浓盐酸调节所需要的pH值。

5. 高温高压灭菌后，室温保存。

注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大，温度每升高1℃，溶液的pH值大约降低个单位。

2)10×TE Buffer , ,组份浓度：100 mM Tris-HCl, 10 mM EDTA配制量：1 L配制方法：1. 量取下列溶液，置于1 L烧杯中。

3. 将溶液定容至1 L后，高温高压灭菌。

苏木精配制6.0g 苏木精，0.6g 碘酸钠，52.8g 硫酸铝，690ml 蒸馏水，250ml 乙二酸乙二醇，60ml冰乙酸尹红染液：0.5-1.0g，蒸馏水99ml0.5g尹红，100ml 95%乙醇，2滴冰乙酸50×TAE Buffer 配制方法：1. 称量Tris 242g，Na2EDTA.2H2O 37.2g 于1L烧杯中；2.向烧杯中加入约800ml去离子水，充分搅拌均匀；3加入57.1ml的冰乙酸，充分溶解；4.加去离子水定容至1L后，室温保存。

裂解液配制（500ml）成分终浓度用量脲（变性剂）4M 120.12gEDTA.2Na H2O 10mM 1.8614gSodium Lauroyl Sarcosine 5g/L 2.5gNacl 0.2M 5.844gTris-Hcl（1M,PH=8.0）1:10----0.1M 50mMddH2O 补足至500Ml0.5%甲基绿配制（100ml）0.5g甲基绿，0.1M 乙酸钠100ml，，，称取1.3608g三水合乙酸钠加入到混合物中，加ddH2O定容至100ml 染8-10min室温避光保存1g甲基绿，1ml冰乙酸，99ml单蒸水室温避光保存。

染10min X-gal 染色Buffer配制（100ml的量）20mmol 0.845g20mmol 0.658g2mM Mgcl20.19g*（95+18*6）/95=0.0406g Mgcl2.6H2O用PBS（ph=7.4）定容至100mlBradford法测定蛋白浓度的方法——bradford assay protocol原理：考马斯亮蓝G250在一定浓度的乙醇和酸性条件下，可配成淡红的溶液。

当与蛋白质结合后，产生蓝色化合物。

反应化合物在465-595nm处有最大光吸收值。

化合物深浅与蛋白浓度的高低成正比例关系。

故可以检测595nm的光吸收值来计算蛋白含量。

Bradford显色液的配制（1）b radford储存液：100ml95%乙醇，200ml88%磷酸，350mg 考马斯亮蓝G250，室温下长期稳定。

实验室常用溶液配制0.25%胰酶-EDTA的配制细胞消化胰酶的配制对一般细胞0.25% 胰酶(胰蛋白酶，Trypsin)配方：100ml PBS,0.25g胰酶步骤：1先配100mlPBS(1000mlPBS:8.0gNaCl,3.4785gPO4HNa2·12H2O /2.9gPO4HNa2 ,0.2gKCl,0.2gPO4H2K溶于1000ml蒸馏水)2 称胰酶0.25g3 加入PBS中，低速搅拌〈4h冰浴中,或者4℃过夜低速搅拌0.5h冰浴中4 调PH7.45 仍在冰浴中6 过滤，分装，-20℃保存，4℃短期内用完tip:低速很重要，机械搅拌对酶是一种冲击，如果起沫，酶就变性了。

低温，防止酶失活对难消化的细胞：在上述配方中，加入0.02g的EDTA(0.02%)tip:因为EDTA可以络合Ca2 ，增加消化效力实验常用溶液的配制1.革兰氏碘液：称碘化钾2g溶于100ml蒸馏水中，再加1g碘使其溶解，最后用蒸馏水稀释至300m1，盛于棕色瓶内，保存于暗冷处。

2.1.苯酚品红改良液（一）①A液：取3克碱性品红，溶于100ml 70％酒精中（此液可长期保存）。

②B液：取A液10m1，加入90ml 5％苯酚水溶液（一般在两周使用为好）。

③C液：取B液45m1，加入 6ml冰醋酸和6ml 37％甲醛。

④、苯酚品红改良液：取C液10m1，加入90ml45％冰醋酸和1克山梨醇。

2.2.苯酚品红改良液（二）：A液：碱性品红3g＋100ml 70％乙醇。

B液：A液10ml＋5％苯酚水溶液90m1。

C液：B液120ml＋冰醋酯12ml＋甲醛12ml。

D液：C液120ml＋45％冰醋酸480ml。

在D液中加1％山梨醇（600mlD液中加 6g山梨醇），此液配好后至少放4一5天方可使用，可保存几年。

3.1.甲基绿一哌罗宁混合染液（一）：①醋酸缓冲液（pH4.8）0．2mol.L-1醋酸（A.R）（取1.2ml加蒸馏水至100ml）4份0．2mol.L-1醋酸钠（A.R）（取2．72g加蒸馏水至100ml）6份。

常用溶液的配制本文为您带来分子生物学实验中常用溶液的配制方法（详细配方请参阅对应编号的具体配制方法）：1. 1 mol/LTris-HCl 溶液（pH 8.0）2. 50 mmol/LTris-HCl 溶液（pH 8.0）3. 0.5 mol/LEDTA 溶液（pH 8.0）4. TE 缓冲液（10 mmol/L Tris，1 mmol/L EDTA，pH 8.0）5. 20 mg/mL 蛋白酶 K6. 5 mol/LNaCl 溶液7. CTAB/NaCl溶液（0.7 mol/LNaCl，10％CTAB）8. 3 mol/L 乙酸钠溶液（pH 5.2）9. 苯酚/氯仿/异戊醇（PCI，25∶24∶1）10. 氯仿/异戊醇11. 0.1 mol/L CaCl2 溶液12. 0.5 mol/L CaCl2 溶液13. 氨苄青霉素（Amp）储存液（100 mg/mL）14. 羧苄青霉素（Car）储存液（100 mg/mL）15. IPTG 储存液（100 mmol/L）16. X-gal 贮备液17. 10% SDS 溶液18. 10% 过硫酸胺（APS）19. 50 × TAE电泳缓冲液20. SDS-PAGE 蛋白电泳试剂1). 30% 聚丙烯酰胺溶液2). 2 ×加样缓冲液3). 蛋白电泳缓冲液（4 ×）4). 4 ×分离胶缓冲液5). 4 ×浓缩胶缓冲液6). 染色液21. ELISA 分析试剂1). 包被缓冲液（0.1 mol/L Na2CO3，0.1 mol/L NaHCO3，pH 9.6）2). 磷酸盐缓冲液（10 × PBS）（1.37 mol/L NaCl，0.027 mol/L KCl，0.1 mol/L Na2HPO4，0.02 mol/L KH2PO4，pH 7.4）3). 洗涤液 PBST（PBS，0.1% Tween-20）4). 封闭液（PBST，5% BSA）5). 稀释液（PBST，1% BSA）6). 反应终止液22. Western blot 试剂1). 转印缓冲液（10 ×）（1.92 mol/L 甘氨酸，0.25 mol/L Tris，pH 8.3）2). 磷酸盐缓冲液（10 × PBS）（1.37 mol/L NaCl，0.027 mol/L KCl，0.1 mol/L Na2HPO4，0.02 mol/L KH2PO4，pH 7.4）具体配制方法如下：1. 1 mol/LTris-HCl 溶液（pH 8.0）：称取 12.191 g Tris，溶于 80 mL 双蒸水中，用浓盐酸调pH 8.0，定容至 100 mL，高压灭菌 15 min，室温保存。

玻璃器皿的洗涤(一)、浸泡新瓶使用前应先用自来水简单刷洗，然后用稀盐酸溶液(5%)浸泡过夜;培养后的玻璃器皿用后要立即浸入清水中;注意：让水能完全进入瓶皿中，不应留有气泡。

(二)、刷洗浸泡后的玻璃器皿用毛刷沾洗涤剂洗涤(宜选用软毛刷和优质的洗涤剂，如高级洗衣粉或洗洁精)，绝对不能使用含沙粒的去污粉!洗刷时特别注意洗刷瓶角部位。

(三)、浸泡器皿要充满清洁液，勿留气泡。

浸泡时间不应少于6小时;一般应浸泡过夜。

清洗液配方：【强液】重铬酸钾63g浓硫酸1000ml蒸馏水200L【次强液】重铬酸钾120g 浓硫酸200ml蒸馏水1000ml【弱液】重铬酸钾100g 浓硫酸100ml蒸馏水100ml矽酸钠洗液;使用比较安全，可以代替清洗液，但价格较贵。

先配制成100Χ贮存液：矽酸钾80g，偏磷酸钠9g，加热溶解在1000ml蒸馏水中。

使用时，用蒸馏水100倍稀释。

(四)、冲洗刷洗和浸酸后都必须用水充分冲洗，使之不留任何残迹。

冲洗宜用洗涤装置，以保证冲洗效果，如用手工操作，每瓶都得用水灌满，倒掉，重复十次以上，最后再用蒸馏水漂洗2～3次，凉干备用。

5×TBE的配方：54gTris，27.5g硼酸，20ml0.5MEDTA，加蒸馏水至1000ml，用时稀释10倍即成0.5×TBETE(PH值8.0)：1mol/lTris.Hcl(PH值8.0)5ml，0.5mol/lEDTA(PH值8.0)1ml，定容至500ml50×TAE：242gTris碱，57.1ml冰乙酸，100ml0.5mol/LEDTA（pH8.0），补足1L。

10×TAE：48.4gTris碱，11.42ml冰乙酸，20ml0.5mol/LEDTA（pH8.0），补足1L。

TE缓冲液：10mmo/LTris·Cl(pH8.0)，1mmol/LEDTA(pH8.0)。

高压灭菌后储存于4℃冰箱中。

100xTE缓冲液：1mo/LTris·Cl(pH8.0)60.6g，100mmol/LEDTA(pH8.0)18.6g。

LB 液体培养基：Bacto-蛋白胨2g；酵母提取物1g；NaCl 2g；加ddH2O 定容至200mL。

SOB 培养基：Bacto-蛋白胨4g；酵母粉1g；NaCl 0.117g；KCl 0.373g；MgCl2•6H2O 0.406g；MgSO4•7H2O 0.493g；加ddH2O 定容至200mL。

MS 微量（1000×）：MnSO4•4H2O 22.3g；ZnSO4•7H2O 8.6g；H3BO3 6.2g；KI 0.83g；NaMoO4•2H2O0.25g；CuSO4•5H2O 0.025g；CoCl2•6H2O 0.025g；用ddH2O 定容至1L。

DNA 提取buffer：1M Tris-HCl pH 8.0 200ml/L；0.5 EDTA pH 8.0 50ml/L；10% SDS 50ml/L；5MNaCl 50ml/L；ddH2O 650ml/L。

MS 维生素（100×）：甘氨酸100mg；盐酸硫胺素B1 20mg；盐酸吡哆素B6 25mg；烟酸25mg；肌醇5g；用ddH2O 定容500mL。

B5 大量（10×）：KNO3 25g ；NH4NO3 16.5g ；NaH2PO4•H2O 1.50g ；(NH4)2SO4 1.34g ；CaCl2•2H2O 1.5g；用ddH2O 定容至1L。

B5 微量（1000×）：MnSO4•H2O 10g；ZnSO4•7H2O 2g；H3BO3 3g；KI 0.75g；NaMoO4•2H2O0.25g；CuSO4•5H2O 0.025g；CoCl2•6H2O 0.025g；用ddH2O 定容至1L。

B5 维生素（100×）：盐酸硫胺素B1 400mg；盐酸吡哆素B6 50mg；烟酸500mg；肌醇5g；用ddH2O定容至500mL。

营养液配方：20×B5 大量50mL；1000×B5 微量1mL；200×铁盐5mL；浓盐酸1mL；用ddH2O定容至3L。

玻璃器皿的洗涤(一)、浸泡新瓶使用前应先用自来水简单刷洗，然后用稀盐酸溶液(5%)浸泡过夜;培养后的玻璃器皿用后要立即浸入清水中;注意：让水能完全进入瓶皿中，不应留有气泡。

(二)、刷洗浸泡后的玻璃器皿用毛刷沾洗涤剂洗涤(宜选用软毛刷和优质的洗涤剂，如高级洗衣粉或洗洁精)，绝对不能使用含沙粒的去污粉!洗刷时特别注意洗刷瓶角部位。

(三)、浸泡器皿要充满清洁液，勿留气泡。

浸泡时间不应少于6小时;一般应浸泡过夜。

清洗液配方：【强液】重铬酸钾63g浓硫酸1000ml蒸馏水200L【次强液】重铬酸钾120g浓硫酸200ml蒸馏水1000ml【弱液】重铬酸钾100g浓硫酸100ml蒸馏水100ml矽酸钠洗液;使用比较安全，可以代替清洗液，但价格较贵。

先配制成100Χ贮存液：矽酸钾80g，偏磷酸钠9g，加热溶解在1000ml蒸馏水中。

使用时，用蒸馏水100倍稀释。

(四)、冲洗刷洗和浸酸后都必须用水充分冲洗，使之不留任何残迹。

冲洗宜用洗涤装置，以保证冲洗效果，如用手工操作，每瓶都得用水灌满，倒掉，重复十次以上，最后再用蒸馏水漂洗2～3次，凉干备用。

5×TBE的配方：54gTris，硼酸，，加蒸馏水至1000ml，用时稀释10倍即成×TBETE(PH值：1 mol/l (PH值5ml ，l EDTA(PH值1ml，定容至500ml50×TAE：242g Tris碱，冰乙酸，100 ml L EDTA（），补足1L 。

10×TAE：g Tris碱，冰乙酸，20 ml L EDTA（），补足1L 。

TE缓冲液：10 mmo/L Tris·Cl ，1 mmol/L EDTA 。

高压灭菌后储存于4℃冰箱中。

100xTE缓冲液：1mo/L Tris·Cl ，100mmol/L EDTA 。

HCL调节Ph，高压灭菌后储存于4℃冰箱中。

TBE是核酸电泳时的缓冲液，它的配方为5×TBE缓冲液（Tris-硼酸）: 配制1000 ml 5×TBE缓冲液方法：Tris 54 g，硼酸，20 ml mol/L EDTA(pH 。