超声波协同法提取荷叶中总黄酮的研究

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超声波辅助萃取法提取仙鹤草中总黄酮的工艺研究

作者：兰慧 阳敬

来源：《中国科技纵横》2019年第09期

摘 要：目的：研究在超声波辅助下萃取仙鹤草中总黄酮的工艺。方法：先采用对单因素实验进行考察，确定最佳水平范围。通过正交实验确定了最佳萃取条件。结果：用料液比为l：25（原料质量与溶剂体积比）的40%甲醇溶液，超声萃取10 min，可以使总黄酮提取率达到7.52%。结论：通过以上工艺对仙鹤草中总黄酮的提取，不但提取工艺的成本节省了，还提高了提取工艺的效率，为仙鹤草的资源开发提供理论依据。

關键词：仙鹤草;超声波;总黄酮

中图分类号：R284.2 文献标识码：A 文章编号：1671-2064（2019）09-0183-01 龙源期刊网

0 引言

仙鹤草是为蔷薇科植物龙牙草的干燥地上部分，具有收敛止血，截疟，止痢，解毒，补虚之功效。多用于治疗咯血，吐血，崩漏下血，疟疾，血痢，痈肿疮毒，阴痒带下，脱力劳伤等[1]。仙鹤草对多种肿瘤都有较好的疗效，在抑制瘤体增殖，增强放化疗敏感性，减轻放化疗毒副作用，阻止癌前病变，及提高机体免疫功能等方面效果尤为明显[2]，仙鹤草提取物还具有明显的降血糖[3]、抗菌[4]、抗氧化[5]等作用。仙鹤草主要含有鞣酸类、间苯三酚缩合体、黄酮类、有机酸、内酯和香豆素类成分[6-7]。本文采用NaNO2-A1（NO3）3-NaOH法测定总黄酮，利用超声提取仙鹤草总黄酮进行单因素实验和正交设计，对仙鹤草中总黄酮的提取工艺进行了研究，得到仙鹤草中总黄酮提取的最佳工艺条件，为合理开发利用仙鹤草资源提供了理论依据。

1 实验材料与仪器

仙鹤草，来自于河北同仁堂;芦丁，生化试剂，中国医药（集团）上海化学试剂公司;无水乙醇，NaNO2，Al（NO3）3，NaOH，甲醇，丙酮均为分析纯;HS-3120型超声波清洗器， 上海楚定分析仪器有限公司;TU-1901双光束紫外可见分光光度计，北京普析通用仪器有限责任公司生产。

醇法提取荷叶中总黄酮的工艺研究

摘 要：采用乙醇提取法对荷叶总黄酮进行提取，通过单因素试验分析，确定最佳的荷叶总黄酮提取工艺。荷叶黄酮醇法提取的最佳工艺是：料液比1：25，提取时间1h，提取温度80℃，乙醇浓度60%，验证试验证明实际提取率为3.82%。

关键词：总黄酮；荷叶；乙醇提取法

荷叶为睡莲科植物莲的叶。荷叶中所含的黄酮类化合物，其主要成分是荷叶苷，其次是槲皮素、异槲皮素等常见的黄酮类物质。实验研究表明，黄酮类物质具有很高的生物活性，如抗氧化作用、抑菌作用、降血脂、减肥作用等[1]。本课题以荷叶为研究对象，利用乙醇提取法提取总黄酮，从而增加荷叶的附加值，将为荷叶在食品、药品中的应用提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 实验设备

电热恒温水浴锅、722型分光光度计、鼓风干燥箱、电子天平、粉碎机、旋转蒸发器等。

1.2 试验材料

原料：荷叶（湖北武汉）：新鲜、无污染荷叶，采摘后洗净，用烘箱60℃烘干。主要试剂：芦丁（生化试剂，国药集团化学试剂有限公司）；无水乙醇、亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠等均为分析纯。

1.3 黄酮测定方法[2]

用nan02-al（n03）3-naoh体系络合化学吸光法测定黄酮。用nan02-al（n03）3-naoh体系络合化学吸光法测定黄酮。准确称取芦丁标准品0.625mg，用体积分数30%乙醇定容于100ml容量瓶中，得质量浓度为0.625mg/ml的标准储备液。分别吸取芦丁标准储备液0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0ml分别置于0、1、2、3、4、5、6号共7支10ml具塞试管中，用体积分数30%乙醇补充至5ml，分别加入0.3ml质量分数10%硝酸铝溶液，混匀，用体积分数30%乙醇标定至刻度线，放置10min后于510nm处，以0号试剂作为空白参比，测定其吸光度值。以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线，见图1所示。

得到回归曲线方程：y=0.5011x+0.0022，r2=0.9997。

收稿日期：2020-12-28作者简介:范业刚（1977-），男，毕业于苏州大学，硕士，讲师，fygleaf@；通讯联系人：曹利慧（1980-），女，毕业于苏州大学，硕士，副教授，从事分析化学工作，caolihui2009@。荷叶总黄酮提取工艺及其抗氧化性研究

范业刚，曹利慧

（衡水学院化学化工学院，河北衡水053000）

摘要：以河北衡水湖的风干荷叶为材料,进行单因素实验，然后使用正交实验来确定荷叶黄酮的提取条件。最佳的提取条件为：超声时长45min，温度45℃，料液比1∶12（g/mL），乙醇浓度75%。抗氧化性实验表明：荷叶总黄酮具有一定的还原能力，且对自由基的清除能力与浓度成正比。关键词：荷叶；总黄酮；超声波辅助提取；抗氧化性doi：10.3969/j.issn.1008-553X.2021.02.014

中图分类号：R285文献标识码：A文章编号：1008-553X（2021）02-0055-04

荷叶属睡莲科植物莲的叶片，是国家卫生部公布的

既是食品又是药品的植物[1]。荷叶中富含多种具有生物

活性的成分，如荷叶精油、荷叶生物碱、荷叶多糖及荷叶

黄酮等，其中荷叶黄酮是其主要活性物质[2]。报道显示，

黄酮类化合物对治疗血管病有很好的效果，具有抗氧

化、稳固血管、疏通血管、防止高龄人的血压疾病等功

效[3]，对身体代谢和人体免疫也有重要作用[4]。所以，针

对影响荷叶总黄酮提取的因素进行研究，选择优良的提

取工艺，提高荷叶总黄酮的提取率，研究其总黄酮抗氧

化性，对人体健康保护具有重要意义。1实验部分

1.1试剂与仪器

荷叶样品，河北衡水湖；无水乙醇、氢氧化钠、硝酸

铝、亚硝酸钠、硫酸亚铁、H2O2、水杨酸，均为分析纯；芦

丁对照品，含量98.7%，化学标准品，上海金穗生物科技

有限公司。722型可见分光光度计，上海仪电分析仪器有限公

司；FA2004B型电子天平，上海衡平仪器仪表厂；FW100

型高速万能粉碎机，天津市泰斯特仪器有限公司；80-2

项目名称：

荷叶炮制前后有效成分中总黄酮和总生物碱的含量比较

来源：

第十二届“挑战杯”省赛作品

小类：

生命科学

大类：

自然科学类学术论文

简介：

本项目采用乙醇回流提取生物碱，并用高效液相色谱法测定其含量；采用超声波法提取总黄酮，并用可见-紫外分光光度法测定其含量。通过测定荷叶炮制前后其主要有效成分—生物碱及总黄酮类成分的含量，探讨这两类成分的变化与荷叶灰降脂减肥功效的相关性。从化学成分角度来研究荷叶炮制后对降脂减肥成分总黄酮类成分和生物碱类成分的影响，并对这两类成分含量的变化进行比较。

详细介绍：

近年的研究表明荷叶具有降低血脂的功效,其主要活性部位在生物碱和黄酮。本项目采用乙醇回流提取生物碱，并用高效液相色谱法测定其含量；采用超声波法提取总黄酮，并用可见-紫外分光光度法测定其含量。通过测定荷叶炮制前后其主要有效成分—生物碱及总黄酮类成分的含量，探讨这两类成分的变化与荷叶灰降脂减肥功效的相关性。从化学成分角度来研究荷叶炮制后对降脂减肥成分总黄酮类成分和生物碱类成分的影响，并对这两类成分含量的变化进行比较。 本研究发现荷叶生品炒制、

煅制后其总生物碱及总黄酮含量均明显减少，即荷叶降脂的主要成分——总生物碱、总黄酮炮制后含量均减少，从化学成分角度说明荷叶炮制后的降脂功效明显减弱。 明代戴元礼的《证治要诀》一书中明确记载：“荷叶灰服之，令人瘦劣，故单服可以消阳水浮肿之气，荷叶灰方”。即荷叶烧存性，研末，有消肿降脂减肥之功。古书记载提示荷叶灰也具有降脂减肥的功效。人们在日常生活中也常用无毒的荷叶灰方来减肥。就从本研究总黄酮和总生物碱的含量看，荷叶灰的降脂减肥功能似乎大大降低，这与古书记载不甚相符，因此有必要进行深入研究，从药效角度探讨荷叶灰是否仍具有降脂减肥作用，同时探讨荷叶灰中是否还有其他降脂减肥成分，为明确荷叶灰的炮制机理奠定理论基础，对古书中“荷叶灰服之，令人瘦劣” 这一理论找到根据。 (收起)