液相色谱仪操作规程

LC3000液相色谱仪操作规程

1、首先将色谱仪电源打开，让仪器进行预热。

2、进行样品前处理，以及流动相进行过滤和脱气，过滤流动相时使用溶剂过滤器，有机试剂使用有机膜，水使用水系膜。过滤完后对其进行脱气处理。注意脱气处理大概需要15-20分钟左右。

3、甲醇处理完后将其接入液路，然后将P3000泵的放空阀打开，并启动泵让甲醇充满液路，并保证没有汽泡，然后关闭放空阀。也可借助外力（使用洗耳球或注射器）在放空阀处将液体吸过来再启动泵，这样可以省时间。走30分钟，停止泵，等待泵没有压力。换10%甲醇水冲洗30分钟以上。停泵，等待压力降至0左右。换流动相冲洗，查看管路中有无气泡，保证没有汽泡的情况下，启动泵。

4、双击CXTH-3000色谱工作站→点击CXTH-3000（中文版）→出现提示，关闭即可；→出现色谱数据处理及仪器控制面板界面。

5、在色谱数据处理及仪器控制面板界面中设置所分析样品的色谱条件，如果使用单泵操作时，先确定所用泵是A泵还是B泵。点开时间程序中查看有无打［√］,如果有［√］；去掉√为［］。

6、设置参数：

6.1在基本控制栏中设置波长（nm) ,然后点击［！］确认。时间常数、量程切换都为2.［切记开灯不要点］。

6.2设定流速（ml/min): 后点击［！］确认。

6.3设定最小压力为0，最大压力为35，如果数据已经符合，就不要改动。

6.4确定管路有无气泡，如果没有气泡，点击电脑上的第一个绿色图标（启动图标）

7、做样品之前，保证仪器先用色谱甲醇走30分钟，采集基线。把满屏量程改至100，其他参数不变。查看基线走直后，停止采集，进样。

8、如果分析的样品流动相中含有酸、盐，必须用甲醇：水（10:90）及（20:80）的甲醇水过渡40分钟左右。即先用色谱纯甲醇走基线30min，停止泵，换上甲醇水走基线40min,再停止泵，更换为流动相。

注意：没走一步都要先确认管路中有无气泡后，才能启动泵。

岛津液相色谱仪操作规程

LC-20A二元高压+自动进样+柱温箱+SPD+M20A+RF=20A

1.前流动相及样品准备

A、 按照分析方法要求准备所需试剂及标样；

B、 流动相配制所用的有机相必须是色谱级的，所用的水必须是双重蒸馏水（超纯水）。流动相必须经0.45um的微孔滤膜过滤后方能进入LC系统。水和有机相所用的诶空滤膜不同，有机相（如甲醇）的过滤用有机相滤膜，水用水系滤膜，有机相滤膜可用于水系过滤，但水系滤膜不能用于有机相顾虑。

C、 进样前样品溶液亦必须用0.45um的微孔滤膜过滤后才能进样。

2.及进样顺序

A、 开机顺序：打开LC各单元电源——控制器电源（CAM-20A）——电脑——LC-Solution工作站，联机后能听到“哔”声；

B、 按照分析方法分别设置泵、柱温箱及检测器分析参数：分析方法的保存：选择文件——方法另存为——取名保存文件

完毕后点击“下载”将参数传输到仪器：

C、 分别将泵A、泵B的吸滤头放置到处理完毕的流动相中，逆时针方向将排液阀打开180度，按仪器上“purge”键对管路进行排气，排气完毕后顺时针180度将排液阀关闭；

（如果流动相中含有盐组分，先将泵A、泵B分别放置到甲醇和水中，甲醇：水=10:90冲洗系统30min）

D、 点击工作站快捷工具按钮“仪器开关”，启动系统，等待基线平稳，泵压力稳定（0.5MP以内）后方可进样。

3.进样操作

A、点击助手栏中的“单次分析”或“批处理”按钮，弹出对话框，在对话中输入“样品名”“方法文件（默认即可）”“数据文件名（选择保存路径）”等，填完后点击“始”，注入样品，仪器由就绪转变为采集状态。

4.关机顺序

A、样品分析完毕后分别将泵A、泵B放置到甲醇和水中，用甲醇：水=90:10冲洗系统30min（如果有盐存在，先用甲醇：水=10:90冲洗系统30min）； B、点击工作站快捷工具按钮“仪器开关”，停止系统：

C、与开机顺序相反，及先关闭LC-Solution工作站——控制器——LC各单元电源。

FL2200高效液相色谱仪操作规程

1 目的

规范FL2200高效液相色谱仪的使用和维护。

2 范围

本规程适用于FL2200高效液相色谱仪的使用和维护。

3 职责

实验室仪器分析员负责FL2200高效液相色谱仪的日常使用和维护。

4 系统组成

本系统由FL2200P高压输液泵、FL2200UV紫外检测器、7725i手动进样阀、色谱柱、FL9500色谱工作站（或其它适用的色谱工作站）、电脑等组成，另外还包括打印机、UPS、溶剂过滤器、超声波清洗仪和通风柜等辅助设备。

5:实际操作（等度模式做样分析和梯度模式做样分析）

区别点：等度模式使用一个输液泵，配置一种流动相

梯度模式使用两个输液泵，配置两种流动相

流程简述 配置流动相并处理好放入溶剂盒中---在软件上建立分析方法---旋开放空阀点系统清洗执行流动相排气泡---启动仪器平衡系统-----进标准样品记录标准样品分析时间和峰面积—进供试品记录面积---带入药典分析方法中计算公式计算---关机

5.1 准备

5.1.1 使用前应根据待检样品的检验方法准备所需的流动相，流动相必须使用0.45µm滤膜过滤，并用超声波清洗仪脱气20分钟以上；准备好样品和标准溶液（也可在平衡系统时配制）；更换合适的色谱柱（注意色谱柱进出口位置应与流动相流向一致，不要装反）。

5.2. 开机和仪器操作

5.2.1. 开机

打开仪器后面板上的电源开关，仪器进行自检。打开打印机、电脑显示器和主机。打开色谱工作站FL2200

5.2.2 设置分析方法

按照样品的检验方法，在软件上建立分析方法

以测定甲醇中萘为例子，流动相为甲醇，分析波长为254，等度分析模式

首先打开软件，点软件左上角“新建”---输入项目名称和样品名称---选择文件存放路径---点两次“下一步”---输入分析名称---点3次“下一步”—点“完成”---点两次“下一步”—输入名称---泵控制方式中选择“等度”---流量选择为1---点1次“下一步”—输入波长“254”---点“完成”---点1次“下一步”—点“完成”在软件左侧项目列表中鼠标右键单击---选择设置为当前项目，到此为止，分析方法设置和选择完成

Agilent1200高效液相色谱仪操作规程

一、Agilent1200化学工作站开机顺序(LAN卡联接)

1、将待测样品按要求前处理，准备HPLC 所需流动相，检查线路是否连接完好，废液瓶是否够用等

2、打开计算机，进入Bootp；

3、打开主机各模块电源（不分先后），等待Bootp接收,等待各模块就绪后,再双击工作站图标,进入化学工作站；

4、调出一个分析方法，检查各参数的设置；

5、旋开泵上的排气阀，将工作站中的泵流量设到5ml/min，溶剂A设到100%；

6、在工作站中打开泵，排出管线中的气体数分钟；

7、依此切换到B、C、D溶剂分别排气；

8、将工作站中的泵流量设到1ml/min，多元泵则再设定溶剂配比，如A=80%，B=20%；

9、关闭排气阀，检查柱前压力；

10、待柱前压力基本稳定后,打开检测器灯，观察基线情况；

二、数据采集方法编辑

1 由运行控制进入样品信息，设定操作者姓名，样品数据文件名等。

2自动进样器参数设定:

1）选择合适的进样方式, “Standard Injection”----只能输入进样体积，此方式无洗针功能。“Injection with Needle Wash”----可以输入进样体积和洗瓶位置，“UnRegistered”--此方式针从样品瓶抽完样品后，会在洗瓶中洗针。“Use injectorprogram”---可以点击“Edit ”键进行进样程序编辑。

2)单击确定进入下一画面。

3 泵参数设定：（四元泵）

1）在流量（Flow）处输入流量,如1.5ml/min，在溶剂 B处输入70.0,(A=100-B-C-D) ,也可插入一行时间列表（Timetable） ,编辑梯度。在最大压力极限处（Pressure LimitsMax）输入柱子的最大耐高压，以保护柱子。

2）单击确定进入下一画面。