脑红蛋白在胶质瘤中的表达及其临床意义

GSK—3β蛋白在胶质瘤中的表达水平及临床意义

目的：检测正常脑组织和不同级别胶质瘤中GSK-3β的表达以及其意义。方法：收集41例胶质瘤和9例正常脑组织，利用免疫组织化学SP法检测GSK-3β在组织中的表达，分析其表达在不同级别胶质瘤中的差异，进而明确其在胶质瘤进展中的作用。结果：GSK-3β在正常脑组织中呈高表达，为棕黄色细颗粒状，主要表达定位于细胞质中，其在胶质瘤组织中呈低表达，两组比较差异有统计学意义（P＜0.01）。进一步的分析发现，GSK-3β的表达水平随着肿瘤级别的升高而逐步下降，WHO分级中Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级间比较差异有统计学意义（P＜0.01）。但GSK-3β的表达水平与患者的性别和年龄无关（P>0.05）。结论：GSK-3β的表达随着胶质瘤恶性程度的增加而逐步下降，表明其在胶质瘤的发生发展中可能具有抑癌作用，GSK-3β有望成为治疗胶质瘤的一个新靶点。

胶质瘤为颅内最常见的恶性肿瘤，亦称神经胶质瘤。其是起源于神经间质细胞，发生于神经外胚层的肿瘤[1-3]。关于胶质瘤的发病机制目前研究的还不甚透彻，并且此类肿瘤的浸润性生长非常明显，导致肿瘤细胞与正常脑组织的边界难以区分，通过手术难以切除干净，因此外科治疗效果不甚理想[3-4]。另外，通常的放化疗副作用大，且难以有效抑制肿瘤，从而复发率高。目前的临床数据表明，患者的5年生存率仅5%左右[5-6]。因此，了解胶质瘤的发病过程，对其发生发展的分子机制进行探讨，将可为临床治疗提供新的思路。GSK-3（Glycogen

synthase kinase-3，糖原合酶激酶-3）是表达广泛的丝氨酸/苏氨酸激酶，由α、β两个异构体组成，且在进化上高度保守。目前对GSK-3β研究的最为广泛深入，而关于GSK-3α的功能还知之甚少[7]。GSK-3β在所有组织中都有表达，而在脑组织中的表达幅度尤为富集。GSK-3β首先被发现的功能是可以抑制糖原的合成，而随着研究的深入发现其作用相当广泛，可对多种底物包括转录因子、结构蛋白、代谢和信号转导相关蛋白等进行磷酸化，进而调控细胞的增殖、凋亡与迁移等，因而GSK-3β是一个重要的调节激酶[8]。现有研究发现GSK-3β在肿瘤的发生发展中具有重要作用，但有关GSK-3β和胶质瘤的研究目前较少[9]。因此，本研究对正常脑组织和不同级别胶质瘤中GSK-3β的表达进行检测，从而探讨其在胶质瘤发病过程中的意义。1 材料与方法

・２５０・　滨州医学院学报２０１０年８月第３３卷第４期ＢＭＵ　Ｊｏｕｒｎａｌ，Ａｕｇ．２０１０，Ｖｏ１．３３，Ｎｏ．４　ＤＮＡ　ＰＫｃｓ在胶质瘤组织中的表达及其临床意义　邵翠杰　石德文　于如同　１徐州医学院麻醉学院徐州市２２１００２；２滨州医学院；３徐州医学院附属医院神经外科　【摘要】　目的通过检测胶质瘤组织中ＤＮＡ－ＰＫｃｓ的表达情况，探讨其与胶质瘤临床病理特征及预后的关系。方法采用免　疫组化ｓＰ法检测１０３例胶质瘤患者组织中ＤＮＡ－ＰＫｃｓ的表达，并结合患者的临床及预后资料进行分析。结果　１０３例胶质瘤　患者中，ＤＮＡ－ＰＫｃｓ的阳性表达率为３６．８％。卡方检验显示，ＤＮＡ－ＰＫｃｓ表达强弱与患者的性别、年龄、肿瘤大小的相关性均无　统计学意义（Ｐ＞０．０５），与胶质瘤分级有关（Ｐ＜０．０５）。单因素生存分析显示，ＤＮＡ．ＰＫｃｓ高表达患者５年总生存率低于低　表达患者（２２．７３％ｖｓ４７．６７％），差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５）。结论ＤＮＡ－ＰＫｃｓ在部分胶质瘤组织中有表达，ＤＮＡ－ＰＫｃｓ的　表达水平与胶质瘤患者预后相关，对患者的预后判断有一定的指导意义。　【关键词】　胶质瘤；ＤＮＡ－ＰＫｃｓ；免疫组织化学；预后　【中图分类号】　１１７３９．４１　【文献标识码】　Ａ【文章编号】　１００１－９５１０（２０１０）０４－０２５０４３４　Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ａｎｄ　ｃｌｉｎｉｃａｌ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅ　ｏｆ　ＤＮＡ＿ＰＫｃｓ　ｉｎ　ｇｌｉｏｍａ　ＳＨＡＯ　Ｃｕｉｊｉｅ　ＳＨＩ　Ｄｅｗｅｎ　ＹＵ　Ｒｕｔｏｎｇ　１　Ｃｏｌｌｅｇｅ　ｏｆ　Ａｎｅｓｔｈｅｓｉａ，Ｘｕｚｈｏｕ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｃｏｌｌｅｇｅ，Ｘｕｚｈｏｕ　２２１００２；　２　Ｂｉｎｚｈｏｕ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ；３　Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｎｅｕｒｏｓｕｒｇｅｒｙ，Ａｆｆｉｌｉａｔｅｄ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ　ｏｆ　Ｘｕｚｈｏｕ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｃｏｌｌｅｇｅ　【Ａｂｓｔｒａｃｔ】　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏ　ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ　ｔｈｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ＤＮＡ—ＰＫｃｓ　ｉｎ　Ｇｌｉｏｍａｓ　ａｎｄ　ａｎａｌｙｚｅ　ｉｔｓ　ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ　ｔｏ　ｔｈｅ　ｃｌｉｎｉｃ　ｐａｔｈｏｌｏｇｉｃ　ｆｅａｔｕｒｅｓ　ａｎｄ　ｐｒｏｇｎｏｓｉｓ　ｏｆ　ｇｌｉｏｍａ．Ｍｅｔｈｏｄｓ　Ｔｈｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ＤＮＡ—ＰＫｃｓ　ｐｒｏｔｅｉｎ　ｉｎ　１０３　ｓｐｅｃｉｍｅｎｓ　ｏｆ　ｇｌｉｏｍａ　ｔｉｓｓｕｅｓ　ｗａｓ　ｄｅｔｅｃｔｅｄ　ｂｙ　ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｅｈｅｍｉｓｔｒｙ　Ｔｈｅ　ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ　ｏｆ　ＤＮＡ－ＰＫｅｓ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｔｏ　ｃｌｉｎｉｃｏｐａｔｈｏｌｏｇｉｃ　ｆｅａｔｕｒｅｓ　ａｎｄ　ｐｒｏｇｎｏｓｉｓ　ｏｆ　ｇｌｉｏｍａ　ｗａｓ　ａｎａｌｙｚｅｄ．Ｒｅ－　ｓｕｉｔｓ　Ｔｈｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｒａｔｅ　ｏｆ　ＤＮＡ－ＰＫｃｓ　ｉｎ　１０３　ｇｌｉｏｍａ　ｓｐｅｃｉｍｅｎｓ　ｗａｓ　３６．８％．Ｔｈｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ＤＮＡ－ＰＫｃｓ　ｈａｄ　ｎｏ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ　ｃｏｒｒｅｌａ—　ｔｉｏｎｓ　ｔｏ　ｇｅｎｄｅｒ，ａｇｅ　ａｎｄ　ｔｕｍｏｒ　ｓｉｚｅ（Ｐ＞０．０５），ｂｕｔ　ｈａｄ　ｒｅｍａｒｋａｂｌｅ　ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎｓ　ｔｏ　ｇｒａｄｅ（Ｐ＜０．０５）．Ｔｈｅ　５－ｙｅａｒ　ｏｖｅｒａｌｌ　ｓｕｒｖｉｖａｌ　ｒａｔｅ　ｗａｓ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ　ｌｏｗｅｒ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｐａｔｉｅｎｔｓ　ｗｉｔｈ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ＤＮＡ—ＰＫｃｓ　ｔｈａｎ　ｉｎ　ｔｈｏｓｅ　ｗｉｔｈ　ｎｅｇａｔｉｖｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ＤＮＡ—ＰＫｃｓ　ｆ　５４．６％　ｖｓ７９．４％，Ｐ＜０．０５）．Ｔｈｅ　ｇｒａｄｅ　ｏｆ　ｇｌｉｏｍａ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ＤＮＡ－ＰＫｃｓ　ｗｅｒｅ　ｉｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔ　ｐｒｅｄｉｃｔｏｒｓ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｏｖｅｒａｌｌ　ｓｕｒｖｉｖａｌ　ｏｆ　ｇｌｉｏ—　ｍａ（Ｐ＜０．０５）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ　ＤＮＡ－ＰＫｃｓ　ｉｓ　ｐｏｓｉｔｉｖｅｌｙ　ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ　ｉｎ　ｐａｒｔｉａｌ　ｇｌｉｏｍａ　ｔｉｓｓｕｅｓ．Ｔｈｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ａｎｄ　ｌｅｖｅｌ　ｏｆ　ＤＮＡ－ＰＫｃｓ　ｉｓ　ａｎ　ｉｍｐｏｒｔａｎｔ　ｆａｃｔｏｒ　ａｆｆｅｃｔｉｎｇ　ｔｈｅ　ｐｒｏｇｎｏｓｉｓ　ｏｆ　ｇｌｉｏｍａ，ｗｈｉｃｈ　ｃｏｕｌｄ　ｈｅ　ｕｓｅｄ　ａｓ　ａ　ｐｒｏｇｎｏｓｔｉｃ　ｐｒｅｄｉｃｔｏｒ　ｆｏｒ　ｇｌｉｏｍａ．　【Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ】ｇｌｉｏｍａ，ＤＮＡ－ＰＫｃｓ，ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｅｈｅｍｉｓｔｒｙ，ｐｒｏｇｎｏｓｉｓ　放疗是治疗胶质瘤的主要辅助手段，但不同患　者放射治疗效果各不相同，其原因可能与个体对放　射损伤的修复能力不一致有关。放射线主要通过导　致细胞ＤＮＡ双链断裂（ＤＮＡ　ｄｏｕｂｌｅｓｔｒａｎｄ　ｂｒｅａｋｓ，　ＤＳＢｓ）起到杀死肿瘤细胞的作用。细胞都有不同程　度的修复能力，其修复方式有两种：以ＤＮＡ依赖性　蛋白激酶（ＤＮＡ　ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ　ｐｒｏｔｅｉｎ　ｋｉｎａｓｅ，ＤＮＡ．ＰＫ）　包括Ｋｕ７０、Ｋｕ８６蛋白和ＤＮＡ催化亚单位（ＤＮＡ．　ＰＫｃｓ）为主的非同源性末端连接（ｎｏｎｈｏｍｏｌｏｇｏｕｓ　ｅｎｄ　￣ｏｉｎｉｎｇ，ＮＨＥＪ）修复和以ＡＴＭ为主的同源重组（ｈｏ—　ｍｏｌｏｇｏｕｓ　ｒｅｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ，ＨＲ）修复…。ＤＮＡ．ＰＫｃｓ是　ＤＳＢｓ的主要修复蛋白，它在肿瘤的发生、发展、诊断　基金资助项目：江苏省中青年科技领军人才（２００７１６）　通讯作者：于如同，Ｅ－ｍａｉｌ：ｙｕ．ｍｔｏｎｇ＠１６３．ｃｏｒｎ　和治疗中的作用是近年来研究的热点。我们前期在　对胶质瘤的研究工作中发现，胶质瘤组织中ＤＮＡ．　ＰＫｃｓ表达水平与胶质瘤对化疗药物ＤＤＰ耐药性相　关，这说明ＤＮＡ－ＰＫｃｓ与胶质瘤有着密切的关系　ｊ。　在胶质瘤中ＤＮＡ－ＰＫｅｓ表达到底如何？其与患者预　后是否有关？能否指导临床的诊断和治疗？这些都　是临床工作者最关心的问题，也是本研究所要解决　的问题。本研究旨在通过检测１０３例胶质瘤组织中　ＤＮＡ－ＰＫｃｓ的表达情况，探讨其与胶质瘤临床病理　特征及预后的关系。　ｌ资料与方法　１．１标本来源及病例资料收集２０００－－

・２６・　查　生！旦笠　鲞笠　塑　ＥＮＡＮ　ＪＯＵＲＮＡＬ　ＯＦ　ＳＵＲＧＥＲＹ　Ｊｕ１．２０１２．Ｖ０１．１８．Ｎ０．４　Ｓｎａｉｌ在胃癌中的表达及其临床意义　张五德　周业江　王志军。　段勋伟　１）河南汝州市第一人民医院　汝州４６７５００　２）泸州医学院附属医院　泸州　６４６００　【摘要】　目的研究Ｓｎａｉｌ在胃癌的表达与肿瘤转移的关系。方法采用免疫组化Ｓ—Ｐ法分别检测Ｓｎａｉｌ在胃癌及切缘组织中　的表达。结果Ｓｎａｉｌ高表达于胃癌组织的细胞核，在胃癌及切缘组织中的表达率分别为８５．４２％、２７．０８％，两者差异有统计学意义　（Ｐ＜０．０５）。Ｓｎａｉｌ高表达与胃癌分化程度、浸润深度、淋巴结转移密切相关（Ｐ＜０．０５）。结论胃癌中Ｓｎａｉｌ高表达与肿瘤的浸润转　移密切相关，Ｓｎａｉｌ可能是胃癌侵袭转移的生物学标志之一。　【关键词】　胃癌；Ｓｎａｉｌ；肿瘤转移；Ｅ—ｃａｄｈｅｒｉｎ　【中图分类号】　１１７３５．２　【文献标识码】Ａ　【文章编号】　１００７—８９９１（２０１２）０４—００２６—０２　锌转录因子Ｓｎａｉｌ在果蝇中首次被发现，在食管癌、结肠癌、　肝癌及乳腺癌等恶性肿瘤中高表达，研究证实与Ｅ—ｃａｄｈｅｒｉｎ表　达下调有关，但在胃癌中的表达及其意义尚不清楚。本文采用　免疫组化Ｓ—Ｐ法检测Ｓｎａｉｌ在胃癌及其对应切缘组织中的表　达，探讨其表达与胃癌临床病理因素的关系，旨在分析其在肿瘤　演进中的作用。　１材料与方法　１．１　材料　４８例胃癌标本收集自泸州医学院附属医院　２００８－－２００９年住院经手术的标本，取胃癌及距肿瘤边缘＞５　ｃｎｌ切缘组织，均经常规病理检查证实为胃癌。其中，男２８例，　女２０例；年龄３５—７８岁，平均５６．２岁。按照ＷＨＯ胃癌分类　标准，高／中分化腺癌ｌ４例，低分化腺癌３４例。所有患者术前　均末接受放化疗及生物学治疗。根据浸润深度分类，Ｔ，＋Ｌ　期的２９例，超过浆膜层　＋Ｔ４期的１９例；有淋巴转移１８例，　无淋巴转移３Ｏ例；ＴＮＭ　Ｉ期和Ⅱ期共２７例，Ⅲ期和Ⅳ期共２１　例。兔抗人Ｓｎａｉｌ多克隆抗体购自Ａｂ—ｃｏｍ公司，免疫组化ｓＰ　试剂盒及ＤＡＢ显色剂购自北京博奥森生物技术有限公司。　１．２实验步骤所有标本经１０％福尔马林固定，石蜡包埋、４　ｍ连续切片，Ｓｎａｉｌ的免疫组化染色行ＳＰ法。操作步骤严格按　照试剂说明书进行。磷酸盐缓冲液代替一抗作为阴性对照。　１．３统计学分析采用　检验。　１．４结果判定Ｓｎａｉｌ蛋白阳性表达主要定位于细胞核内，部分　表达于细胞质，并可见问质细胞中有部分散在表达，呈棕黄色。　在高倍镜下选取１Ｏ个高倍视野，按着色细胞占视野总细胞数的　百分比分为四级：无着色，轻度；着色细胞数１％一３０％；中度：　３１％一６０％；重度：＞６０％；无着色及轻度为阴性组，中、重度染　色为阳性组－－　。　２结果　２．１　胃癌组织及切缘组织中Ｓｎａｉｌ的表达Ｓｎａｉｌ在胃癌中的表　达显著高于切缘组织，阳性率分别为８５；４％和２７．１％，差异具有　统计学意义。见表１。　表１　胃癌组织及切缘组织中Ｓｎａｉｌ的表达　

山东医药２００７年第４７卷第１期　

ＣＤ　１　１　７在胶质瘤中的表达及临床意义　

王力夫．孔令非，刘正国　（河南省人民医院．河南郑州４５０００３）　［摘要］采用免疫组化法检测ＣＤＩＩ７在１３５例人脑胶质瘤组织中的表达。发现ＣＤｌｌ７的阳性率在Ｉ～ＩＶ级　胶质瘤组织逐渐升高。提示表达ＣＤｌ１７的胶质瘤患者可能会在针对酪氨酸抑制剂的化疗方案中受益。　［关键词］ＣＤＩ１　７；胶质瘤；酪氨酸激酶　［中图分类号］Ｒ７３９．４１　［文献标识码］Ｂ　［文章编号］１００２—２６６Ｘ（２ＯＯ７　３Ｏｌ一００２７—０１　ＣＤ１１７是由原癌基因ｃ—ｋｉｔ编码的跨膜酪氨酸　激酶受体，是胃肠道间质瘤的特异性诊断标志，并且　ＣＤ１　１７阳性的胃肠道间质瘤对酪氨酸抑制剂一甲磺　酸伊马替尼的治疗很敏感。本研究旨在通过检测　ＣＤ１１７在胶质瘤中的表达情况，为胶质瘤的治疗开　辟新思路。　１材料与方法　１．１　材料　取自我院２００３～２００５年存档的胶质瘤　组织蜡块１３５例，均经ＨＥ染色及病理诊断证实。患　者中男７６例、女５９例，年龄１～７５（３８．４１±１９．０２）　岁。所有病例术前均无化疗、放疗及免疫治疗史。肿　瘤类型及分级依据２０００年ｗＨ０中枢神经系统肿瘤　病理学及遗传学分类，其中Ｉ级７例、Ⅱ级５７例、ｍ　级４１例、Ⅳ级３Ｏ例，星形细胞瘤９Ｏ例、少突胶质细　胞瘤２５例、混合型胶质瘤５例、室管膜瘤１２例、神经　节细胞胶质瘤３例。　１．２方法　１．２．１　组织芯片制作　根据ＨＥ切片选择有关区域　在玻片上作标记；以１．５　ｍｍ直径的穿刺针在空白蜡　块上按１０×７点组织阵列，钻取间距２．０　ｍｍ、深４～　５　ｍｍ的小孔；借助玻片上的标记在石蜡块上钻取所　需组织，将组织条送入受体蜡块的预留孔，制成组织　芯片蜡块；将其反转放在大载玻片上，３７＿Ｃ下热烘约　１　ｈ，密切观察，防止溶解过度使组织排列混乱；以３　ｂｔｍ厚度切片，于６０’Ｃ烤片过夜。　１．２．２免疫组织化学兔抗人ＣＤ１１７多克隆抗体　购于福州迈新生物公司，按即用型Ｍａｘ　ＶｉｓｉｏｎＴＭ试　剂盒所附操作程序进行。以为胃间质瘤为阳性对照，　ＰＢＳ为空白对照。　１～　结果判定　ＣＤ１１７染色主要位于细胞浆，显微　镜下细胞质和细胞核内出现棕黄色颗粒或团块者为　阳性细胞，随机选择５个高倍镜视野（×４００），计算