第九章动物实验基本操作技术
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第二章 动物实验的基本知识和操作技术
第一节 实验动物
药理学实验常用的动物有蛙、蟾蜍、小白鼠、大白鼠、豚鼠、家兔、猫和犬等。常根据实验目的和要求选用不同的实验动物。由于不同的动物具有不同的特点,故所选用的动物应能较好地反映试验药物的选择性作用,并符合节约的原则。
(一)、 实验动物的选择原则
1、尽量选择与人体结构、机能、代谢及疾病特征相似的动物;
2、选用的实验动物的解剖、生理特点应符合实验目的;
3、根据人与实验动物对同一刺激的反应差异,选用具有明显反应的动物;
4、 根据生物医学研究必须达到的精确度,选用结构功能简单又能反映研究指标的动物;
5、选用患有人类类似疾病的近交系或突变系动物;
6、选用与实验设计、技术条件、实验方法等相适应的标准化动物;
7、在不影响实验目的与结果的前提下,选择最易获得、最经济、便于操作管理的动物;
8、 供实验用的动物应具备质量合格证。
(二)、常用实验动物的特点
1、蛙和蟾蜍
离体心脏能较持久地有节律地搏动,常用于观察药物对心脏的作用;坐骨神经和腓肠肌标本可用来观察药物对周围神经、神经肌肉或横纹肌的作用;蛙的腹直肌还可以用于鉴定胆碱能药物的作用。
2、小白鼠
是实验室最常用的一种动物。易于大量繁殖,且价廉,适用需要大量动物的实验,如药物筛选、半数致死量测定、药物效价比较、抗感染、抗肿瘤药物及避孕药物的研究等。
3、 大白鼠
与小白鼠相似。一些在小白鼠身上不便进行的实验可选用大白鼠,如药物抗炎作用的实验常选用大白鼠踝关节制备关节炎的模型。此外,也可用大白鼠直接记录血压、作胆管插管,或用大白鼠观察药物的亚急性或慢性毒性。大白鼠的血压和人相近,且稳定,现常用于抗高血压药物实验。 4、豚鼠
是实验室常用动物之一。对组织胺很敏感,容易致敏,常用于平喘药和抗组胺药的实验。对结核菌亦敏感,故也用于抗结核药的研究。此外还用于离体心脏及平滑肌实验,其乳头肌和心房常用于电生理特性及心肌细胞动作电位实验,研究抗心律失常药物的机理。
第二章 动物实验的基本操作与技术
动物实验方法是多种多样的,在医学的各个领域内都有其不同的应用,其中一些基本方法都是共同性的,如动物的选择、抓取、固定、麻醉、脱毛、给药、采血、采尿、急救、处死、尸检等,不管是从事何种课题的医学研究都要用这套基本方法,因此,动物实验基本方法,已成为医学科技工作者必须掌握的一项基本功。
第一节 实验动物的抓取固定方法
一、小鼠抓取固定方法
小鼠温顺,一般不会咬人,抓取时先用右手抓取鼠尾提起,置于鼠笼或实验台向后拉,在其向前爬行时,用左手拇指和食指抓住小鼠的两耳和颈部皮肤(见图2-1之一),将鼠体置于左手心中,把后肢拉直,以无名指按住鼠尾,小指按住后腿即可(图2-1之二)。有经验者可直接用左手小指钩起鼠尾,迅速以拇指和食指、中指捏住其耳后颈背部皮肤亦可。这种在手中固定方式,能进行实验动物的灌胃、皮下、肌肉和腹腔注射以及其他实验操作。如进行解剖、手术、心脏采血和尾静脉注射时,则需将小鼠作一定形式的固定,解剖手术和心脏采血等均可使动物先取背卧位(必要时先行麻醉),再用大头针将鼠前后肢依次固定在腊板上。尾静脉注射时,可用小鼠尾静脉注射架固定(图2-2),先根据动物大小选择好合适的固定架,并打开鼠筒盖,手提鼠尾巴,让动物头对准鼠筒口并送入筒内,调节鼠筒长短合适后,露出尾巴,固定筒盖即可进行尾静脉注射或尾静脉采血等操作。
图2-1 小鼠的抓取固定方法
图2-2 小鼠尾静脉注射方法
二、大鼠的抓取固定方法
大鼠的抓取方法基本同小鼠,只不过大鼠比小鼠牙尖性猛,不易用袭击方式抓取,否则会被咬伤手指。抓取时为避免咬伤,可带上帆布手套。如果进行腹腔、肌肉皮下等注射和灌胃时,同样可采用左手固定法,只是用拇指和食指捏住鼠耳,余下三指紧捏鼠背皮肤,置于左掌心中,这样右手即可进行各种实验操作。也可伸开左手之虎口,敏捷地从后一把抓住。若做手术或解剖等,则需事先麻醉或处死,然后用细棉线绳活结缚腿,背卧位绑在大鼠固定板上;尾静脉注射时的固定同小鼠(只需将固定架改为大鼠固定盒)。
第三章 动物实验的基本操作技术
本章的目的在于:了解实验动物学的基本理论;了解常用实验动物的特点;理解动物选择的基本原则;掌握常用的动物实验基本操作技术,同时培养严肃的科学态度、严格的工作要求和严密的工作方法。
3.1 实验动物学概述
3.2 实验动物的种类
3.3 实验动物的分类
3.4实验动物的选择
3.5 实验动物的编号捉拿与固定
3.6 实验动物的 给药方法
3.7 实验动物的取血与处死方法
3.8 动物实验的一般知识与基本操作技术
3.1实验动物学概述
实验动物学是在生命科学的发展中逐步形成并发展起来的一门综合的、独立的新兴学科。自二次世界大战结束后的几十年中,实验动物学得到了迅猛发展,近代以来实验科学的兴起,进一步推动了实验动物学的进步。同时,它作为一门基础学科,反过来也促进了生物医学乃整个生命科学的发展。
一、动物实验的起源、发展及其意义
Aristotle(384—322 BC) 最早用动物进行解剖学和胚胎学实验,以揭示不同动物间的内部差异,创立了以描述为特征的生物学;Erasistratus(304—258 BC)被认为是最早进行活体动物实验的人。
在中世纪,教会的权威们为了阻止人们获得有关自然界的知识,认为动物实验亵渎自然界而禁止之。大约1500年左右,科学家们在科学研究中再度对动物实验发生兴趣。Andreas
Vesalius(1514—1564)为现代解剖学的创立者,他曾用狗和猪作为大学解剖教学示范。这种“活体解剖”曾导致解剖学与生理学研究的进一步深入。Willam Harvery与Saephen Hale采用狗、蛙、蛇、鱼及其他动物进行了一系列的动物实验,证实了动物体内的血液循环现象,并阐明了心脏在此过程中的作用。并于1628年发表了《动物心血运动的解剖研究》,之后又发表了《论动物生殖》。这些成就对生理学和胚胎学的发展起到了很大的推动作用,并由于William
Harvey的工作而把生理学确定为一门科学。1800年期间,France成为最早的实验生物学和医学的鼻祖。科学家们,如Francois Magendie(1783—1855)和Claude Bernard(1813—1878)在实验生理学,Louis Pasteur(1827—1895)在微生物学,包括动物应用的科学方法的确立都作出过巨大贡献。
第二章 动物实验的基本知识和操作技术
第一节 实验动物
药理学实验常用的动物有蛙、蟾蜍、小白鼠、大白鼠、豚鼠、家兔、猫和犬等。常根据实验目的和要求选用不同的实验动物。由于不同的动物具有不同的特点,故所选用的动物应能较好地反映试验药物的选择性作用,并符合节约的原则。
(一)、 实验动物的选择原则
1、尽量选择与人体结构、机能、代谢及疾病特征相似的动物;
2、选用的实验动物的解剖、生理特点应符合实验目的;
3、根据人与实验动物对同一刺激的反应差异,选用具有明显反应的动物;
4、 根据生物医学研究必须达到的精确度,选用结构功能简单又能反映研究指标的动物;
5、选用患有人类类似疾病的近交系或突变系动物;
6、选用与实验设计、技术条件、实验方法等相适应的标准化动物;
7、在不影响实验目的与结果的前提下,选择最易获得、最经济、便于操作管理的动物;
8、 供实验用的动物应具备质量合格证。
(二)、常用实验动物的特点
1、蛙和蟾蜍
离体心脏能较持久地有节律地搏动,常用于观察药物对心脏的作用;坐骨神经和腓肠肌标本可用来观察药物对周围神经、神经肌肉或横纹肌的作用;蛙的腹直肌还可以用于鉴定胆碱能药物的作用。
2、小白鼠
是实验室最常用的一种动物。易于大量繁殖,且价廉,适用需要大量动物的实验,如药物筛选、半数致死量测定、药物效价比较、抗感染、抗肿瘤药物及避孕药物的研究等。
3、 大白鼠
与小白鼠相似。一些在小白鼠身上不便进行的实验可选用大白鼠,如药物抗炎作用的实验常选用大白鼠踝关节制备关节炎的模型。此外,也可用大白鼠直接记录血压、作胆管插管,或用大白鼠观察药物的亚急性或慢性毒性。大白鼠的血压和人相近,且稳定,现常用于抗高血压药物实验。 4、豚鼠
是实验室常用动物之一。对组织胺很敏感,容易致敏,常用于平喘药和抗组胺药的实验。对结核菌亦敏感,故也用于抗结核药的研究。此外还用于离体心脏及平滑肌实验,其乳头肌和心房常用于电生理特性及心肌细胞动作电位实验,研究抗心律失常药物的机理。