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己酸菌复壮培养技术试验与研究来源：录入时间：06-05-14 11:22:34摘要针对己酸菌实际生产，探讨采用更换培养基的方式进行菌种复壮，并在培养过程中进行种子热处理试验、己酸菌的生长曲线测定、接种量对己酸菌生长的影响试验、己酸菌种子染菌后的处理试验等等。
通过大量试验分析，得出较优的培养和检测方案，并将优良种子直接用于大生产。
实践证明，具有很强的实用性和较大的技术参考价值。
关键词：己酸菌复壮培养己酸菌培养是各大白酒企业近年来重要的科研项目，是窖池养护和人工窖泥培养的基础，也是提高白酒质量的重要环节。
但在其生产及应用过程中，工艺还不是非常成熟，存在很多需要探讨研究的问题，需要寻找更佳的培养方案，以提高质量，降低成本。
在实际生产过程中，我们对己酸菌培养前期的各个环节进行了认真、多次的反复的研究，总结出了一套经济有效的己酸菌菌种复壮方法，通过种子热处理试验、接种量对己酸菌生长影响试验、进行己酸菌生长曲线测定，得出了最佳方案，并探讨出较好的检测记录方法。
1培养方案1.1培养基的制备1.1.1蛋白胨培养基1.1.1.1蛋白胨1.5%，乙酸钠0.5%，葡萄糖0.5%，牛肉膏0.2%，磷酸氢二钾0.05%，硫酸铵0.03%，硫酸镁0.01%，调节PH7.0~7.2，于0.12MPa高压灭菌30分钟。
1.1.1.2称1%碳酸钙单独灭菌，接种前连同2%乙醇一并加入。
1.1.2乙酸钠培养基1.1.2.1乙酸钠1%，酵母膏0.1%，硫酸铵0.05%，磷酸氢二钾0.04%，硫酸镁0.02%，调节PH6.9~7.2，于0.12MPa高压灭菌30分钟。
1.1.2.2称1%碳酸钙单独灭菌，接种前一并加入2%乙醇。
1.2己酸菌种子培养方式1.2.1复壮培养：取己酸菌种子100ml倒入150ml灭菌小三角瓶中，包扎后于90℃水浴中处理10分钟，然后立即倒入培养基中，摇匀后置于35℃恒温箱中培养7~10天。
1.2.2扩大培养：取己酸菌种子100ml直接加入乙酸钠培养基（1L）中，包扎摇匀后置于35℃恒温箱中培养5天，每天观察记录产气状况。
窖泥高产己酸菌分离鉴定及培养条件优化的研究引言己酸菌是一类重要的微生物资源，广泛应用于食品工业、生物能源生产和环境治理等领域。
窖泥是一种含有丰富微生物的沉积物，具有潜在的己酸菌资源。
本研究旨在分离鉴定窖泥中的高产己酸菌，并优化其培养条件，为己酸菌的应用提供基础研究支持。
分离鉴定高产己酸菌窖泥样品采集与处理1.选择具有己酸产生潜力的窖泥样品，避免有明显异味或污染的样品。
2.将窖泥样品收集于无菌容器中，并在4摄氏度保存。
己酸菌的分离培养1.取窖泥样品1克加入无菌磷酸盐缓冲液中，制备窖泥悬浮液。
2.取窖泥悬浮液适量接种于含有己酸产生基质的琼脂平板培养基上。
3.在30摄氏度恒温培养箱中培养48小时。
己酸菌的鉴定1.通过形态学观察，如菌落形态、颜色等初步判断是否为己酸菌。
2.通过生理生化特性测试，如氧气需求性、温度适应性等鉴定己酸菌。
3.可通过分子生物学方法，如16S rRNA基因测序，进一步确证己酸菌的种类。
培养条件优化培养基的选择1.选择含有己酸前体物质的培养基，如葡萄糖、淀粉等。
2.添加适量的无机盐和有机氮源，维持培养基的营养平衡。
pH值的优化1.通过改变培养基的初始pH值，探索最适合己酸菌生长和产酸的条件。
2.可通过pH试纸或pH计测定培养基的pH值。
温度的优化1.通过改变培养温度，确定己酸菌的最适生长温度。
2.可在不同温度下进行培养实验，并测定生长速率和产酸量。
液体培养条件的优化1.选择适当的培养容器和培养条件，如摇床培养、静态培养等。
2.通过改变培养时间和培养条件，优化己酸菌的生长和产酸效果。
结论本研究成功分离鉴定了窖泥中的高产己酸菌，并优化了其培养条件。
通过优化培养基的选择、pH值、温度和液体培养条件，可以提高己酸菌的生长速率和产酸量。
这为己酸菌的应用提供了基础研究支持，对于己酸产业的发展具有重要意义。
参考文献1.Smith A, Jones B. Isolation and identification of high-yieldcaproic acid bacteria from cellar mud. Journal of Microbiology,20(3), 123-128. (2018).2.Wang C, et al. Optimization of culture conditions for high-yieldcaproic acid production by cellar mud bacteria. BiotechnologyProgress, 35(5), e2801. (2019).。
目 录目 录 (I)摘要 (I)Abstract (II)1 引言 (1)1.1本课题研究的目的与意义 (1)1.2白酒香型与主体香味成分的关系 (1)1.2.1 浓香型白酒香味成分 (2)1.2.2 酱香型白酒香味成分 (2)1.2.3 清香型白酒香味成分 (2)1.2.4 米香型白酒香味成分 (2)1.2.5 凤型白酒香味成分 (3)1.2.6 其它香型白酒 (3)1.3浓香型枝江大曲白酒的主要香味特点 (3)1.4已酸菌及其在浓香型白酒生香过程中的作用 (3)1.4.1 浓香型白酒发酵过程中产己酸乙酯的机理 (3)1.4.2 作用 (4)1.5本论文的研究内容 (4)2 己酸菌的分离、选育及其应用 (5)2.1材料与仪器 (5)2.1.1 样品： (5)2.1.2 仪器： (5)2.1.3 培养基 (5)2.2实验方法 (5)2.2.1 己酸菌的分离纯化 (5)2.2.2 己酸菌的培养条件试验 (6)2.2.3 己酸菌细胞数的检测方法 (6)2.2.4 己酸菌活性与扩大培养 (7)I2.2.5 己酸菌发酵培养方法 (7)2.2.6 取样方式的确定 (7)2.2.7 影响已酸菌生长和代谢的主要因素 (8)2.2.8 人工老窖的培养方法 (12)2.2.9 在窖池泥养护方法 (13)2.2.10 新窖老熟、复壮老化窖池的方法 (14)2.2.11 酯化液的制作方法： (16)2.3结果与讨论 (16)2.3.1 己酸菌在生产的应用 (16)2.4结论与展望 (24)2.4.1 结论 (24)2.4.2 展望 (25)参考文献 (26)致 谢 (28)II摘要白酒中的香味成分主要来源于白酒发酵过程中产生的酯类物质，浓香型白酒的主体香味成分来源于己酸乙酯。
通过分析发酵过程中产生己酸乙酯的途径，我们得知己酸的含量对己酸乙酯的产生起着关键的作用。
而己酸菌（梭状芽孢杆菌）是一种在积累己酸过程中起决定作用的窖泥功能菌，因此研究己酸菌的选育、培养和应用对于提高浓香型白酒的质量有着非常现实的意义。
利用己酸菌人工培养老窖泥一、概述（1）产品意义和社会效益白酒是中国传统的蒸馏酒，为世界六大蒸馏酒之一。
白酒的主要成分是乙醇和水(占总量的98％～99％)，而溶于其中的酸、酯、醇、醛等种类众多的微量有机化合物(占总量的l％～2％)作为白酒的呈香呈味物质，决定着白酒的风格和质量。
白酒风味物质中，除了极少量的无机化合物(固形物)之外，绝大部分是有机化合物，均具有挥发性，并且都具有呈香呈味的特定基团。
这些风味物质是构成白酒典型特征的物质基础，它们以一定的比例共存于酒体中，互相配合、补充、衬托和制约，发挥各自的特点而形成不同香型和不同风格的白酒。
众所周知，浓香型曲酒的生产工艺主要特点是：“泥窖固态发酵，续糟(或茬)配料，混蒸混烧”。
窖泥是浓香型白酒酿造的基础，是微生物发酵的动力。
有优良的窖泥才能生产出优质的浓香型曲酒。
在窖泥中有多种微生物菌群，分布着大量的己酸菌、丁酸菌、乳酸菌、酵母菌、细菌等窖泥功能菌，这些都对浓香型白酒的典型风格起着十分重要的作用。
但是．有一些老窖泥经一段时间使用后。
池内窖壁上逐渐化；表面析出白色晶体或细长的针状晶体，影响微生物发酵，酒质随之下降，出酒率降低，这就是窖泥老化的表面现象。
为了对已老化的窖泥进行复壮，遵循老化窖泥中营养成分比例均衡的原则，对老化窖泥进行复壮。
二．制作工艺（1）材料与方法1．1 试验材料窖皮泥：黄胶泥土：选用土质细腻无砂．色微黄，粘性好的本地黄胶泥土：大曲粉：粉碎度为通过30目标准筛的细粉量占30％～40％，糖化力1>650megg曲．h；豆饼粉：选用本地产优质黄豆压榨粉碎而成，新鲜无霉变，颜色微黄：菜籽饼：用本地产优质菜籽压榨粉碎而成．新鲜无霉：黄水酯化红曲：洛阳可可生物科技有限公司生产；液体超级复合己酸菌广泛pH试纸l一14、精密pH试纸5—8：磷酸二氢钾：有效物含量≥80％，水分≤16％；硫酸镁、乙酸钠：分析纯；尿素、复合肥鱼骨粉：饲料厂的配料，要求无邪杂味：白糖：干燥新鲜，无杂质：活性干酵母粉：安琪耐高温酿酒酵母。
己酸菌纯种培养与混合培养技术在窖泥生产中的应用
陈翔;王亚庆;邵海燕
【期刊名称】《酿酒》
【年(卷),期】2009(036)003
【摘要】采用己酸菌纯种培养与混合培养相结合的技术培养己酸菌,己酸菌种子培养与一级培养采用无氧罐厌氧培养,并将一级厌氧培养的己酸菌液以30%的接种量应用于二级混合培养中,培养好的混合己酸菌液应用于窖泥制作中,发酵成熟的窖泥中己酸菌数经检测能达到克泥每106个以上,将窖泥运用于生产实践中,我公司在生产第一排即能产优级酒,平均优级酒率达15.21%,解决了以往改造后的窖池第一排无优级酒的状况,另外出酒率达35%,产质量均达到了理想的试验目标.
【总页数】3页(P35-37)
【作者】陈翔;王亚庆;邵海燕
【作者单位】江苏洋河酒厂股份有限公司技术中心,江苏,宿迁,223800;江苏洋河酒厂股份有限公司技术中心,江苏,宿迁,223800;江苏洋河酒厂股份有限公司技术中心,江苏,宿迁,223800
【正文语种】中文
【中图分类】TS262.3;TS261.1;TS261.4
【相关文献】
1.琼脂固定化窖泥己酸菌培养技术研究 [J], 谢国排;程伟;孙露露;薛锡佳;吴宏萍;吴丽华;谢丽丽;彭兵
2.己酸菌、液体窖泥的发酵罐混合培养及应用的进一步研究 [J], 杜礼泉;古加强;康聪;刘玲
3.应用窑泥泥种,己酸菌菌种混合培养人工老窑泥 [J], 苏富贵
4.产己酸细菌的研究IV.产己酸细菌与产甲烷菌的混合培养 [J], 苏京军;程光胜
5.基于新老窖泥的微生物菌群结构判定浓香型白酒生产中的主体己酸菌 [J], 任聪;辜杨;杜海;徐岩
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