细胞房注意事项 --张贴
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细胞房使用细则
细胞间使用:
1.进细胞间作业要穿实验服,戴口罩,换鞋,随手关闭玻璃门;(口
罩使用完毕后可自行留着,以备下次使用,佩戴时间不超过10小时)。
2.在细胞间作业请保持安静,切勿高谈阔论;
3.严禁对着培养箱讲话;培养箱要轻开轻关,切勿产生剧烈震动;
4.显微镜使用完毕要立即关掉;
5.
一次;
6.
2/3;
40分钟)如若
严禁在报警情况下作业;
8.细胞间的垃圾筒满后,实验人员请自觉清理;
9.血清,胰酶以及双抗的融化在4度冰箱内完成。
细胞房使用:
10.细胞房每两个星期大扫除一次,由做细胞实验人员完成,包括:
扫地,拖地(含桌椅等摆放物品下面),擦桌子(细胞房所有桌子)以及所放物品的摆放,最后开紫外灭菌1 小时;
11.细胞房值日生星期一早上给液氮罐中加液氮,清洗恒温水浴锅并
换水,值日期间要保证恒温水浴锅无异味,细胞房整洁;注意:配制PBS缓冲液时要换新瓶子,切勿重复利用!移液管清洗:84液及铬酸浸泡时间均不低于6小时,冲洗时间不低于4小时,如若发现有破碎及尖嘴部位极度发白的移液管请及时清理!
12.细胞房冰箱使用完毕后要确保门是关闭状态;严禁放置除细胞实
验以外的所有物品,一经发现一律清除,后果自负!处理完的实
被清除,后果自负!
13.非
14.非
实验室是我家,爱护靠大家!望大家尽力克服一切困难,为科研顺利进行尽
自己的一份绵薄之力!。
细胞房建设的要求
随着科技的快速发展,细胞房已经成为了现代生物学实验室中不
可或缺的一部分。
细胞房的建设需要注意的方面很多,以下是一些主
要的要求:
首先,建设细胞房的地方需要干净、整洁、通风良好。
对于细胞
培养来说,无菌和干净是非常重要的,因此细胞房的环境必须保持无尘、无菌和高卫生标准的情况,以保证实验结果的准确性。
其次,细胞房建设中需要留意的是实验室用具的选择。
需要使用
质量可靠、规格统一的实验室培养用具,如培养箱、移液枪、离心机、显微镜等,以确保实验操作的准确性和安全性。
另外,细胞房设施中必须具有完善的防护措施。
如火灾、漏电、
气体泄漏等突发事件的防范和应对措施,保证实验安全的同时使实验
室的工作环境更加安全。
最重要的是,细胞房建设需要对人员质量有较高要求。
实验室人
员必须经过专业培训和考核,掌握实验技能和安全知识,严格遵守实
验室操作规程,注意实验操作细节,提高实验结果的准确性和实验环
境的安全性。
总之,细胞房在生物学研究中有着重要的作用,建设时需要考虑
实验室用具的选择、实验室环境控制、实验室安全与防护以及实验人
员素质管理等多个方面,以确保实验结果的准确性和实验室环境的安全性。
只有这样,才能让细胞房在生物科学研究中发挥最大的作用。
细胞房管理规章制度细胞房是进行各种细胞培养的净化级实验室,所有进入实验室的人员都必须遵守实验室有关的规章制度。
第一章总则第一条细胞房主要由团队内相关科研人员使用,原则上不对外开放,其他人员如确实需使用细胞房必须预先征得实验室负责人和细胞房负责人同意。
第二条新养细胞的同学,需先跟随由负责人指定的人员学习,同时学习并熟记细胞房管理条例,最后通过细胞操作考核后,方可进入细胞房进行实验。
严禁未经许可擅自进入细胞房或使用相关设备。
第三条细胞房正常使用过程中,进出实验室的器械和样品需通过传递窗,严禁随身带入。
实验用品应尽量一次带入,严禁将与实验无关的物品带入实验室,在细胞房内不得进行微生物等其它易污染物的培养,禁止从事任何高危生化实验。
第二章条例第一条常规操作穿着专用隔离服,实验人员必须在细胞房缓冲间内更换细胞房专用隔离服并戴上口罩,严禁不穿隔离服或直接穿着普通实验室实验服进入细胞房。
穿着专用拖鞋。
在准备间换下自己的鞋子,尽量避免在缓冲间走动、停留。
细胞房最多可4个人同时使用。
实验过程中严禁喧哗,闲聊,反复进出培养室。
离开细胞房时应在缓冲室填写使用登记。
第二条培养箱使用规则1.注:容易造成污染。
2.从培养箱拿取细胞时轻拿轻放,动作迅速,随手关紧培养箱门。
未经允许,禁止翻看、移动他人细胞或样品,如有特殊需要的,请联系实验室负责人协调。
3.培养瓶/皿放入培养箱前,用酒精消毒表面,并稍等至酒精挥发后再放入,以免培养箱内滞留过多乙醇蒸气。
4.普通培养中的细胞,若非实验特殊需要,每瓶/板细胞每天只需要观察生长状态一次,2人以上共用的细胞,可约好时间一起观察。
注:频繁将细胞拿出观察,容易给培养箱造成污染,同时也会影响细胞生长条件的恒定。
第三条显微镜使用规则1.倒置相差显微镜使用前,用酒精棉从中间至周围擦拭载物台。
2.短时间内需再次使用显微镜时,为避免频繁开关显微镜电源,可不必关闭显微镜电源,但须将亮度旋钮调到最低;较长时间不需使用或离开细胞房时,须按规定关闭显微镜电源。
细胞房注意事项1.进出细胞房必须换拖鞋,勿将细胞房内拖鞋穿出细胞房,房外拖鞋也不可进入房内。
进入细胞房换上细胞房专用白大褂和专用实验服,勿将一楼动物实验的白大褂带进细胞房。
2.实验结束后及时清理台面,勿将垃圾留在实验台面。
整齐摆放各类物品。
实验室放置物品请写上姓名和标识。
实验后及时清洗实验用品,勿将要洗的用品留在洗涤盆过夜。
3.实验后检查显微镜/酶标仪/培养箱/离心机/超净台(显微镜在关闭电源前务必将光源调至最暗)。
离心时保存两端平衡。
4.实验中用到毒害物质或者有感染物质的,请先进行汇报,得到同意后才可进行实验。
5.注射器针头、玻璃等利器扔进利器盒,勿直接丢垃圾桶。
丢弃到实验室规定的盒子内。
6.培养瓶等放进培养箱前用,可用75%酒精消毒培养瓶表面,水平放置。
若有培养液渗出培养箱,一定要立即用75%酒精擦拭。
7.培养箱内发现细菌等污染,立即将污染的培养瓶丢弃,并及时报告实验室工作人员对污染区域进行消毒。
8.在使用酒精灯过程中,手上酒精挥发干后方可靠近酒精灯操作,切勿将表面有酒精的物品靠近火苗。
9.值日人员检查:显微镜/酶标仪/培养箱/离心机/超净台。
10.写好预约本和登记本的各项登记。
细胞房工作人员职责:定期检测下列项目:1.CO2 钢瓶之CO2 压力2.CO2 培养箱之CO2 浓度、温度、及水盘是否有污染(水盘的水用无菌水,每周更换)。
3.无菌操作台内之气流压力,定期更换紫外线灯管及HEPA 过滤膜,预滤网(300小时/预滤网,3000 小时/HEPA)。
4.水槽可添加消毒剂(Zephrin 1:750),定期更换水槽的水。
细胞房设计标准细胞房,通常指监狱中的囚禁房间,用来关押犯人。
在设计细胞房时,需要考虑到安全、舒适和卫生等方面的要求,确保囚犯及监狱工作人员的生活和工作环境都能得到妥善处理。
本文将介绍细胞房的设计标准,包括空间布局、设施设备、安全要求等方面。
一、空间布局1、尺寸要求细胞房的尺寸应当符合相关的法律法规标准,一般来说,单人细胞房的面积不得小于6平方米,双人细胞房的面积不得小于10平方米。
此外,细胞房的高度应当符合相关规定,确保空间内没有明显的压抑感。
2、功能分区细胞房应当划分为生活区和卫生区两个功能区域,生活区包括床铺、桌椅、壁橱等必要家具设施,卫生区包括卫生间和洗漱区等设施。
两个区域应当有明确的界限,确保囚犯的生活和卫生环境不受干扰。
3、采光通风细胞房应当设计有合理的采光和通风设施,确保空气质量和环境舒适度。
采光设施包括窗户和天窗等,通风设施包括通风口和排风扇等。
二、设施设备1、卫生设施细胞房应当配备足够的卫生设施,包括卫生间、洗手台、马桶、淋浴间等。
这些设施应当符合卫生标准,保持清洁和卫生。
2、生活设施细胞房应当配备基本的生活设施,包括床铺、桌椅、壁橱等。
这些设施应当符合防火、防震等安全要求,确保囚犯的生活质量。
3、通讯设施细胞房应当配备通讯设施,包括电话和网络等。
这些设施应当符合监狱管理的要求,确保囚犯与外界的联系畅通。
三、安全要求1、防火性能细胞房的墙壁、天花板和地板等建筑构件应当具有一定的防火性能,确保囚犯及监狱工作人员的安全。
此外,细胞房应当配备灭火器等消防设备,确保火灾时及时扑灭。
2、监控设备细胞房应当配备监控设备,包括摄像头、监视器等。
这些设备应当覆盖细胞房的每一个角落,确保囚犯的行为能够全程监控。
3、逃生通道细胞房应当设计有逃生通道,确保囚犯及监狱工作人员在紧急情况下能够安全逃离。
逃生通道应当符合相关的安全标准,确保畅通和安全。
综上所述,细胞房的设计标准应当包括空间布局、设施设备和安全要求等方面的要求,确保囚犯及监狱工作人员的生活和工作环境都能得到妥善处理。
细胞房房管理规章制度及细则第一条使用人员要严格执行无菌操作,保持实验室清洁。
①每日第一个开门者,必须将开门时间记录在《细胞房预约登记表》上。
②使用细胞房者,统一从604门口进入。
一更处换鞋,脱外套。
二更处穿隔离衣、戴口罩,手套和帽子(头发必须全部进入帽子)。
③进入风淋间,必须吹满10,不允许急停。
不可携带物品进入风淋间。
④所有进出细胞房的物品,必须由传递口出入。
洁净物品和污物各有一个传递口,不允许污物放置于洁净物传递口内。
洁净物、废液桶进入传递口必须先紫外照射10min。
⑤废弃物不可留滞于细胞房。
⑥超净台使用结束后,打开紫外灯15分钟,然后关闭。
⑦气瓶间房门如无特殊情况,完全关闭,不允许随意打开。
⑧如需观察气瓶供气和更换气瓶时,可打开602门,平时不允许随意打开。
⑨每周日晚8点半之后停止使用细胞房,安排值日生打扫卫生。
如有特殊情况需要使用细胞房者,请提前向管理老师报备,并通知值日生。
第二条未培养过细胞的人员,不可独立使用细胞房。
①必须在管理老师或者高年级研究生指导下进行操作。
②考试合格后,方能独立使用细胞房。
考试不合格者,不得独立使用细胞房。
③如发现擅自使用细胞房,将追究其责任。
第三条未经管理老师许可,不得私自带外来人员使用细胞房和细胞房内仪器设备。
不得在细胞房做任何与细胞培养无关试验。
第二项、细胞房使用实行预约制,使用人员必须提前预约。
使用人员须在《细胞房预约登记表》上预约使用房间、使用人员姓名、使用时间等信息。
严格按照预约登记使用细胞房。
第一条如预约取消,必须及时将预约信息删除。
第二条未登记预约使用细胞房;或在预约时间内,无人使用细胞房等行为将视为违规。
第三项、细胞房主要划分为三个区域和安全柜专区。
第一条A间主要供朱俐组使用;B间主要供高永静组使用;C间主要供姜正林组使用。
第二条每一小间均配有一台培养箱供各组使用,分层请各组自己分配。
未经本人允许,不得随意查看、移动他人培养的细胞。
培养箱旁均有气阀开关,请勿触碰,以免影响机器正常使用。
细胞房建设的要求1. 背景介绍细胞房,又称单元房,是指由多个小单元组成的集中式住宅建筑。
它是解决城市人口密集、土地资源有限的一种有效方式。
细胞房建设要求注重人居环境、居住品质和社会和谐等方面,以满足居民的基本居住需求。
2. 细胞房建设的关键要求细胞房建设需要考虑以下几个关键要求:2.1 住房空间规划细胞房应根据不同人口需求进行合理的住房空间规划,包括主卧、次卧、客厅、厨房、卫生间等功能区域。
充分考虑居住者的舒适度和居住需求,确保住房空间布局合理、通风良好、采光充足。
2.2 设施设备配套细胞房建设应配备基本的生活设施和便利设备,如供水、供电、供暖、给排水系统等。
同时还要配备社区通信设施、楼道照明设备等,以提供便利的生活条件和舒适的居住环境。
2.3 人居环境改善细胞房建设应注重人居环境的改善,包括小区绿化、道路硬化、垃圾分类处理等。
为居民提供一个安全、卫生、舒适的居住环境,增加居住的幸福感和融入感。
2.4 建筑材料选择细胞房建设应选择符合环保、安全、耐久等要求的建筑材料。
避免使用对人体健康有害的材料,减少室内污染。
同时要注重使用抗震、防火等性能优良的建筑材料,确保居民的人身和财产安全。
2.5 设计风格和外观美观细胞房建设应注重设计风格和外观美观,以创造独特的小区特色。
合理设计建筑立面和色彩搭配,提升小区整体的建筑品质和景观效果,为居民提供一个宜居、宜人的生活环境。
2.6 安全设施和管理措施细胞房建设应配备安全设施和管理措施,包括消防设备、视频监控、门禁系统等。
同时要建立健全的维修管理机制,确保小区公共设施和居住环境的安全和稳定。
2.7 社区配套设施细胞房建设要求配备完善的社区配套设施,包括学校、医院、商店等。
确保居民的基本生活需求能够方便满足,并提供便利的服务和文化娱乐设施,增强居民的社区归属感。
3. 细胞房建设的案例分析3.1 上海某细胞房小区上海某细胞房小区是一个典型的细胞房建设案例,该小区采用了绿化设计,小区内有休闲健身区、儿童乐园等社区配套设施。
一、总则为保障细胞房内细胞、设备、人员及环境的安全,防止生物安全事故的发生,特制定本制度。
本制度适用于细胞房的所有工作人员、访客以及相关人员。
二、细胞房安全管理制度1. 人员管理(1)细胞房工作人员必须经过专业培训,取得相应资质后方可上岗。
(2)工作人员应严格遵守细胞房操作规程,熟悉并掌握应急预案。
(3)访客进入细胞房需经细胞房负责人批准,并在工作人员的陪同下进行。
(4)细胞房工作人员应定期进行健康检查,确保身体健康,无传染性疾病。
2. 设备管理(1)细胞房设备应定期进行维护保养,确保设备正常运行。
(2)设备操作人员应严格按照操作规程进行操作,不得擅自改变设备参数。
(3)设备发生故障时,应及时上报,由专业人员负责维修。
(4)细胞房内禁止使用非授权设备。
3. 环境管理(1)细胞房内环境应保持清洁、整齐,定期进行消毒。
(2)细胞房内不得存放与实验无关的物品,防止交叉污染。
(3)细胞房内不得吸烟、饮食,禁止携带宠物进入。
(4)实验废弃物应按照规定进行分类、收集、处理。
4. 生物安全管理(1)细胞房工作人员应了解所使用细胞的生物特性,掌握相应的生物安全知识。
(2)细胞房内实验操作应在生物安全柜内进行,防止细胞污染。
(3)实验过程中,应严格遵循无菌操作规程,防止生物安全事故发生。
(4)细胞房内不得随意丢弃细胞培养物,防止生物污染。
5. 应急预案(1)细胞房内发生生物安全事故时,应立即启动应急预案,采取有效措施进行处置。
(2)细胞房负责人应组织相关人员开展事故调查,查明事故原因,采取相应措施防止类似事故再次发生。
(3)对事故责任人进行严肃处理,对事故损失进行评估和赔偿。
三、附则1. 本制度由细胞房负责人负责解释。
2. 本制度自发布之日起实施,如有未尽事宜,可根据实际情况进行修订。
3. 细胞房工作人员及访客应严格遵守本制度,确保细胞房安全。
4. 对违反本制度的行为,将按照相关规定进行处理。
细胞房工作守则一、常规1.细胞房最多可4个人同时使用。
尽量避免在内长时间逗留、交谈,最好戴口罩。
2.为保持无菌状态,经常消毒是必要的,通常采用每日(使用前)紫外照射(1-2h)或打开空气消毒机消毒1-1.5h,人员在30-45min以后才能进入房间。
每个细胞房一个组长,组长安排好该细胞房的值日表,值日生要负责当天细胞房内的所有清洁问题。
组长每周安排一次彻底大扫除,包括墙面,地板,桌面,培养箱。
每月过氧乙酸熏蒸(2h)的方式进行消毒。
3.细胞房实验耗材、仪器、药品等均不可随意带出。
4.培养基分瓶,各用自己的培养基,以免交叉污染。
5.血清56度,30min灭活,冷却后分装,-20度保存。
要经常使用的放在4度保存。
6.新配好的培养基和血清等混合后需要试培养,即先用一瓶正常细胞培养一天以上或者不加细胞放瓶中三天以上,如未出现污染才可以拿来继续培养细胞。
7.一旦出现污染,被污染的细胞先用新洁尔灭喷一下再全部扔掉;同一批的培养基、使用的细胞清洗液等等全部重新滤过消毒;打开培养箱,用75%酒精擦洗,然后用新洁尔灭擦洗(重复2次,隔天),用紫外照射4小时以上;清扫培养室,紫外照4小时以上,重复一次。
8.清洁液的配方有三种:按重铬酸钾:浓硫酸:蒸馏水排列强液:63g:1000ml:200ml次强液:120g:200ml:200ml 弱液:100g:100ml:1000ml 最常用的是次强液。
配制的时候应选用防酸、耐热、开口较大的容器盛清洁液。
先将需要量的重铬酸钾和水加到容器里,最好是完全溶解。
然后,缓慢、分次加入浓硫酸。
配制时,注意做好自我防护。
新配制的的清洁液(泡酸液)一般呈棕红色,经长时间使用后因有机溶剂和水分增多逐渐变成绿色,表明已经失效,应该重新配制.二、培养箱使用规则1. 从培养箱取放物品前,用酒精清洁双手(或手套),尽量缩短开门时间和减少开门次数。
* 培养箱中的空气是经过过滤的洁净空气。
长时间敞开或频繁开关培养箱,容易造成污染。
细胞房工作守则及注意事项Last revised by LE LE in 2021细胞房工作守则及注意事项细胞房工作守则及注意事项一、常规操作1.穿着专用实验服。
自己的白大衣或厚外套,可脱在门外的衣帽架上。
2.穿着专用拖鞋。
在缓冲间换下自己的鞋子,尽量避免在缓冲间走动、停留。
3.细胞房最多可4个人同时使用。
尽量避免在内长时间逗留、交谈。
二、培养箱使用规则三、1.从培养箱取放物品前,用酒精清洁双手(或手套),尽量缩短开门时间和减少开门次数。
四、注:五、培养箱中的空气是经过过滤的洁净空气。
长时间敞开或频繁开关培养箱,容易造成污染。
六、 2.七、培养瓶皿放入培养箱前,用酒精消毒表面,并稍等至酒精挥发后再放入,以免培养箱内滞留过多乙醇蒸气。
八、 3.九、2-3人共用一层培养箱,按预定位置摆放培养器皿,方便查找,以免长时间敞开培养箱。
十、 4.十一、普通培养中的细胞,若非实验需要,每瓶/板细胞每天只需要观察生长状态一次,2人以上共用的细胞,可约好时间一起观察。
十二、注:频繁将细胞拿出观察,容易给培养箱造成污染,同时也会影响细胞生长条件的恒定。
十三、显微镜使用规则十四、1.显微镜使用前,用酒精棉从中间至周围擦拭载物台。
十五、 2.十六、离开细胞房时或较长时间不需使用时,及时关上电源,延长灯泡寿命。
尽量避免频繁开关显微镜电源。
十七、超净台相关操作规则十八、1.超净台使用遵循预约原则。
无预约者若有必要在他人预约时段内使用,需先征得预约者的同意,否则应无条件让出工作台,以免耽误他人实验。
十九、2.超净台使用前用紫外灯照射15分钟灭菌,使用前、后需用酒精棉球擦拭工作区消毒,所有物品放入超净台内使用前均应消毒。
二十、3.点燃酒精灯前需检查瓶中酒精是否足够,液面应占瓶高1/3-2/3。
二十一、注:二十二、消毒用75%的酒精,酒精灯用95%的酒精,向喷壶或灯内添加酒精时请留意。
二十三、注:二十四、酒精和酒精棉球由值日生负责补给,发现细胞房内存放量不足时请及时通知值日生。
细胞房的使用及注意事项细胞房是一种用于细胞培养的实验设备,它提供了一个稳定的环境,以支持细胞的生长和繁殖。
细胞房通常由一个密封的箱体和一系列控制设备组成,可以控制温度、湿度、气体组成等参数,以满足不同类型细胞的培养需求。
细胞房的使用有一些注意事项,下面将会对这些注意事项进行详细介绍。
首先,使用细胞房前,需要进行必要的准备工作。
首先,清洁细胞房内部和外部的工作台和设备,确保无尘、无菌。
其次,准备好所需的培养基、培养皿等细胞培养材料。
最后,将细胞房的温度、湿度等参数调整到适合细胞培养的范围内。
在使用细胞房时,需要注意以下几点。
首先,维持细胞房的洁净和无菌是非常重要的。
细胞房内的空气应经过过滤处理,以防止细菌和其他微生物的污染。
其次,细胞房的温度和湿度需要根据细胞类型的要求进行调节。
细胞房内的温度通常应保持在37摄氏度左右,湿度则应在相对湿度70%以上。
此外,细胞房内的气体组成也需要根据细胞类型的要求进行调整,常见的有调节二氧化碳浓度等。
细胞房的使用还需要注意细胞培养的基本原则。
首先,细胞应该保持在合适的培养基中,培养基要适合细胞类型的特性和需求。
其次,细胞的培养密度应控制在适当的范围内,过高或过低的密度都会影响细胞的生长和分裂。
此外,细胞的培养时间也需要注意,不同类型的细胞对于培养时间的要求不同,过长或过短都会对细胞的生长和功能产生影响。
在细胞房的使用过程中,还需要注意细胞的无菌操作。
无菌操作是指在无菌条件下进行的操作,以防止细菌和其他微生物的污染。
无菌操作包括洗手、穿戴无菌手套、使用无菌培养器具等。
此外,在进行细胞传代和细胞冻存等操作时,也需要采取相应的无菌措施,以确保细胞的纯度和无菌性。
除了以上注意事项,还有一些细胞培养的基本技巧需要掌握。
首先,细胞的传代要适时进行,不宜过早也不宜过晚。
过早传代会导致细胞密度过低,影响细胞的生长和分裂;过晚传代则会导致细胞密度过高,影响细胞的生理状态。
其次,注意细胞的观察和记录。
细胞房的使用及操作制度一、操作人员制度1.新进细胞房操作前,必须首先了解细胞培养的基本要求,进行必要的培训。
培训考核合格后授予其细胞室使用权限。
2.为保持无菌室清洁,进入无菌室必须在缓冲间更换专用拖鞋、工作服、戴好帽子和口罩。
3.进入细胞间后随手关门。
缓冲间拉门与无菌室拉门不能同时开放,否则失去缓冲间作用。
4.无菌室室内禁止不带口罩开口说话,禁止大声喧哗。
5.专用工作服、拖鞋禁止在室外穿用,定期清洗并消毒,请勿将其带出无菌室。
6.个人配制的试剂需标明试剂名称、配制日期及配置人,冰箱内试剂摆放位置都要固定化,并作好标记。
禁止交叉乱用,乱放,造成可能的污染扩大,所有人员未经本人许可不得使用他人的物品和位置。
7.个人用灭菌物品必需注明消毒人、物品名称、消毒日期。
灭菌后物品放在指定位置,高压灭菌物品可存放7-14天,过期不能再用,需重新包装灭菌。
二、无菌操作1.实验人员的无菌准备1)实验前应用肥皂洗手。
2)更换专用拖鞋、工作服、戴好帽子和口罩。
3)75%酒精消毒手掌、手背。
2.操作台中的无菌操作(此处为操作考核中需要注意的要点内容)1)生物安全柜使用前用经紫外照射灭菌30分钟,实验人员打开通风在通风条件下进行实验操作。
2)在通风条件下,先点燃酒精灯(点燃酒精灯前需检查瓶中酒精是否足够,液面应占瓶高1/3-2/3),再用酒精棉擦拭超净台桌面(尽可能的大于自己所用台面),同时保持工作区域的宽敞。
注:消毒用75%的酒精,酒精灯用95%以上的酒精,向喷壶或灯内添加酒精时请留意。
3)超净台虽经紫外照射除菌,但操作时仍应靠近酒精灯火焰。
4)操作时应尽量减少手臂的运动,尽可能避免左右手交叉(近手操作):把需要有用的工具和试剂尽可能放在手边,以酒精灯为界,左手用的东西放在酒精灯的左边,右手用的东西放在右边。
例如,一个右手操作者要从试剂瓶里吸取液体,则移液枪应放在右手,而枪头与试剂瓶都应放在左手边。
5)带入操作台中的物品,应注意:经高压灭菌烘干的物品以及各种装培养基、缓冲盐等的瓶子、试管架、胶塞等应先用75%酒精擦拭或喷洒后再放入超净台。
细胞培养房建设的基本原则和要求你对细胞培养房的基本原则和要求好奇吗?想知道如何把它们建设得又高大上又实用?那咱们就来聊聊吧!1. 基础设施的重要性1.1 位置选择细胞培养房的选址就像是挑选一个温暖的家一样重要。
你想把它建在离热源远一点的地方,因为细胞对温度变化非常敏感。
选择一个远离噪音、污染、震动的地方是关键。
像人们说的,安安静静的地方才能安安心心地工作嘛!1.2 空间设计空间的设计就像是给细胞铺了个舒适的床。
需要确保通道宽敞,设施布置合理,以便技术员能方便操作。
别小看这点儿,细节决定成败呀!同时,还要考虑到未来可能的扩展,留点余地总是好的。
2. 环境控制2.1 温度与湿度细胞就像小孩子一样,需要特别的照顾。
温度得保持稳定,不要让它“发烧”或“着凉”。
湿度也得控制得当,避免过于干燥或潮湿。
好比你冬天要保持暖气适中一样,细胞也需要合适的“气候”。
2.2 空气质量空气过滤系统就像是细胞的空气清新剂。
过滤器要定期更换,确保空气清新,不含有害物质。
空气的清新程度直接影响到培养的效果,就像我们常说的“清风徐来,气爽神怡”。
3. 设备管理3.1 设备配置细胞培养房里的设备得像是精密的乐器,每一件都要经常维护。
培养箱、离心机、显微镜等,都是细胞生长的好帮手。
设备要配置齐全,确保在操作时能事半功倍。
就像打工时要有好工具一样,设备也得跟上。
3.2 清洁与维护清洁工作可是细胞培养房的重中之重。
就像我们家里常打扫卫生,培养房也需要保持干净整洁。
定期消毒、清理工作台、检查设备,都是确保细胞健康成长的必备步骤。
否则,细胞一不小心“生病”,那可是大事儿。
4. 安全措施4.1 安全操作安全措施就像是细胞的护身符,防止各种意外发生。
操作时要严格遵守规程,佩戴好个人防护装备。
细胞培养房里可是充满了各种试剂和材料,不小心就可能造成安全隐患。
所以,操作时一定要小心谨慎,就像开车时系好安全带一样。
4.2 应急处理万一发生意外,得有应急预案。
细胞培养注意事项(入门级)总的原则:无菌操作、保证细胞培养环境的稳定性按时间顺序整理1、细胞房和生物安全柜(或超净工作台)先开紫外照射30min。
作用:对环境灭菌(空气)。
(备注:如果着急,至少也要开15分钟)在做实验之前考虑好需要哪些物品。
开始照射之前,将所需要用到的物品都放到生物安全柜(或超净工作台)里面。
常用移液枪或电动移液器等,需要在工作台上放置一套专用设备。
细胞培养箱一般都已经调整好。
定期留意一下二氧化碳是否足够。
不够及时更换。
2、显微镜需要定期消毒酒精擦拭。
注意:显微镜一般都放在细胞房。
3、进入实验之前,首先给自己带上拖鞋、头套,口罩,实验服,手套(手套带双层)。
注意:手套要将袖口套进去。
实验服、拖鞋最好是细胞房专用。
4、开始操作之前先观察细胞。
首先观察细胞培养液的颜色。
现在的细胞培养液通常都放有酸碱指示剂(绝大部分是酚红)。
细胞在培养生长过程中,不断在培养液上清中累积酸性物质,时间长了,培养液变为黄色(同时培养液中营养物质耗尽)。
其次镜下观察细胞的生长状态是否良好,是否需要传代。
如果生长状态不好,需要对培养液进行调整(一般是加大血清浓度)。
过于密集出现大片融合或太密集而导致细胞脱落,则进行传代。
如果长势良好,且细胞培养液颜色未发生变化,可以酌情进行1/2、1/3、1/4换液,也可以全换液。
总之,视细胞生长情况而定。
5、细胞培养预准备:首先是准备各种溶液。
第一是配制溶液过程中要用到的水。
水用纯水,高压灭菌之后,再去内毒素。
去内毒素方法很多,最简单可以放在烘箱180度3小时。
或者过去内毒素的柱子后,高压灭菌。
第二,各种溶液灭菌:抗生素用去内毒素水配制后,直接过滤除菌(过0.22u滤头)。
可以用一次性无菌注射器过一次性0.22u滤头。
现在用的培养液,如果是商业化液体培养基,不用处理。
如果是粉末,需要用去内毒素水在生物安全柜(或超净工作台)进行配制,再过滤除菌。
可以先配浓缩液(如10×),过滤除菌后。
细胞房注意事项1.进出细胞房必须换拖鞋,勿将细胞房内拖鞋穿出细胞房,房外拖鞋也不可进入房内。
进入细胞房换上细胞房专用白大褂和专用实验服,勿将一楼动物实验的白大褂带进细胞房。
2.实验结束后及时清理台面,勿将垃圾留在实验台面。
整齐摆放各类物品。
实验室放置物品请写上姓名和标识。
实验后及时清洗实验用品,勿将要洗的用品留在洗涤盆过夜。
3.实验后检查显微镜/酶标仪/培养箱/离心机/超净台(显微镜在关闭电源前务必将光源调至最暗)。
离心时保存两端平衡。
4.实验中用到毒害物质或者有感染物质的,请先进行汇报,得到同意后才可进行实验。
5.注射器针头、玻璃等利器扔进利器盒,勿直接丢垃圾桶。
丢弃到实验室规定的盒子内。
6.培养瓶等放进培养箱前用,可用75%酒精消毒培养瓶表面,水平放置。
若有培养液渗出培养箱,一定要立即用75%酒精擦拭。
7.培养箱内发现细菌等污染,立即将污染的培养瓶丢弃,并及时报告实验室工作人员对污染区域进行消毒。
8.在使用酒精灯过程中,手上酒精挥发干后方可靠近酒精灯操作,切勿将表面有酒精的物品靠近火苗。
9.值日人员检查:显微镜/酶标仪/培养箱/离心机/超净台。
10.写好预约本和登记本的各项登记。
细胞房工作人员职责:定期检测下列项目:1.CO2 钢瓶之CO2 压力2.CO2 培养箱之CO2 浓度、温度、及水盘是否有污染(水盘的水用无菌水,每周更换)。
3.无菌操作台内之气流压力,定期更换紫外线灯管及HEPA 过滤膜,预滤网(300小时/预滤网,3000 小时/HEPA)。
4.水槽可添加消毒剂(Zephrin 1:750),定期更换水槽的水。
细胞实验室注意事项
1、操作者遵守细胞房消毒规定:由于正常人口腔带有支原体,因此进入细胞房一定要带好口罩、帽子(口罩必须罩住口鼻,帽子必须将头发全遮在里面),鞋套,穿隔离衣,带乳胶手套,并用75%酒精擦拭手套表面。
2、每次实验开始前,须喷洒支原体预防喷雾,开启紫外灯灭菌30分钟。
开始实验时,关闭紫外,开排风扇,桌面用酒精擦拭后使用。
3、所有操作过程要在距离超净台边缘10cm以内的无菌区域进行。
4、操作过程严格按照无菌操作要求:开始要先用75%酒精棉球擦拭瓶口,在
火焰上烧灼瓶口,必须在火焰周围无菌区内打开瓶口,瓶口要再次转动烧灼;
操作时尽量不要讲话。
要常更换吸管,一旦发现吸管触及手和其他物品应弃去。
5、若有培养液滴到超净台面,应立即用酒精棉球擦掉,防止液滴挥发时,有害分子漂浮。
7、实验结束后,及时清理自己各自的桌面、台面、废液缸、地面,整理好实验器材,处理掉实验废物并及时带出。
然后喷洒支原体预防喷雾,开启生物安全柜紫外照射30分钟,检查细胞培养箱后方可离开。
8、实验所用试剂专人专用,防止交叉污染。
9、若发现细胞污染,应及时告知负责人并处理,避免污染扩散,保持洁净的工作环境,支原体检测定期进行。