细胞房注意事项和管理
- 格式:doc
- 大小:164.00 KB
- 文档页数:7
细胞实验室注意事项
1、操作者遵守细胞房消毒规定:由于正常人口腔带有支原体,因此进入细胞房一定要带好口罩、帽子(口罩必须罩住口鼻,帽子必须将头发全遮在里面),鞋套,穿隔离衣,带乳胶手套,并用75%酒精擦拭手套表面。
2、每次实验开始前,须喷洒支原体预防喷雾,开启紫外灯灭菌30分钟。
开始实验时,关闭紫外,开排风扇,桌面用酒精擦拭后使用。
3、所有操作过程要在距离超净台边缘10cm以内的无菌区域进行。
4、操作过程严格按照无菌操作要求:开始要先用75%酒精棉球擦拭瓶口,在
火焰上烧灼瓶口,必须在火焰周围无菌区内打开瓶口,瓶口要再次转动烧灼;
操作时尽量不要讲话。
要常更换吸管,一旦发现吸管触及手和其他物品应弃去。
5、若有培养液滴到超净台面,应立即用酒精棉球擦掉,防止液滴挥发时,有害分子漂浮。
7、实验结束后,及时清理自己各自的桌面、台面、废液缸、地面,整理好实验器材,处理掉实验废物并及时带出。
然后喷洒支原体预防喷雾,开启生物安全柜紫外照射30分钟,检查细胞培养箱后方可离开。
8、实验所用试剂专人专用,防止交叉污染。
9、若发现细胞污染,应及时告知负责人并处理,避免污染扩散,保持洁净的工作环境,支原体检测定期进行。
细胞房建设的要求
随着科技的快速发展,细胞房已经成为了现代生物学实验室中不
可或缺的一部分。
细胞房的建设需要注意的方面很多,以下是一些主
要的要求:
首先,建设细胞房的地方需要干净、整洁、通风良好。
对于细胞
培养来说,无菌和干净是非常重要的,因此细胞房的环境必须保持无尘、无菌和高卫生标准的情况,以保证实验结果的准确性。
其次,细胞房建设中需要留意的是实验室用具的选择。
需要使用
质量可靠、规格统一的实验室培养用具,如培养箱、移液枪、离心机、显微镜等,以确保实验操作的准确性和安全性。
另外,细胞房设施中必须具有完善的防护措施。
如火灾、漏电、
气体泄漏等突发事件的防范和应对措施,保证实验安全的同时使实验
室的工作环境更加安全。
最重要的是,细胞房建设需要对人员质量有较高要求。
实验室人
员必须经过专业培训和考核,掌握实验技能和安全知识,严格遵守实
验室操作规程,注意实验操作细节,提高实验结果的准确性和实验环
境的安全性。
总之,细胞房在生物学研究中有着重要的作用,建设时需要考虑
实验室用具的选择、实验室环境控制、实验室安全与防护以及实验人
员素质管理等多个方面,以确保实验结果的准确性和实验室环境的安全性。
只有这样,才能让细胞房在生物科学研究中发挥最大的作用。
细胞房管理规章制度细胞房是进行各种细胞培养的净化级实验室,所有进入实验室的人员都必须遵守实验室有关的规章制度。
第一章总则第一条细胞房主要由团队内相关科研人员使用,原则上不对外开放,其他人员如确实需使用细胞房必须预先征得实验室负责人和细胞房负责人同意。
第二条新养细胞的同学,需先跟随由负责人指定的人员学习,同时学习并熟记细胞房管理条例,最后通过细胞操作考核后,方可进入细胞房进行实验。
严禁未经许可擅自进入细胞房或使用相关设备。
第三条细胞房正常使用过程中,进出实验室的器械和样品需通过传递窗,严禁随身带入。
实验用品应尽量一次带入,严禁将与实验无关的物品带入实验室,在细胞房内不得进行微生物等其它易污染物的培养,禁止从事任何高危生化实验。
第二章条例第一条常规操作穿着专用隔离服,实验人员必须在细胞房缓冲间内更换细胞房专用隔离服并戴上口罩,严禁不穿隔离服或直接穿着普通实验室实验服进入细胞房。
穿着专用拖鞋。
在准备间换下自己的鞋子,尽量避免在缓冲间走动、停留。
细胞房最多可4个人同时使用。
实验过程中严禁喧哗,闲聊,反复进出培养室。
离开细胞房时应在缓冲室填写使用登记。
第二条培养箱使用规则1.注:容易造成污染。
2.从培养箱拿取细胞时轻拿轻放,动作迅速,随手关紧培养箱门。
未经允许,禁止翻看、移动他人细胞或样品,如有特殊需要的,请联系实验室负责人协调。
3.培养瓶/皿放入培养箱前,用酒精消毒表面,并稍等至酒精挥发后再放入,以免培养箱内滞留过多乙醇蒸气。
4.普通培养中的细胞,若非实验特殊需要,每瓶/板细胞每天只需要观察生长状态一次,2人以上共用的细胞,可约好时间一起观察。
注:频繁将细胞拿出观察,容易给培养箱造成污染,同时也会影响细胞生长条件的恒定。
第三条显微镜使用规则1.倒置相差显微镜使用前,用酒精棉从中间至周围擦拭载物台。
2.短时间内需再次使用显微镜时,为避免频繁开关显微镜电源,可不必关闭显微镜电源,但须将亮度旋钮调到最低;较长时间不需使用或离开细胞房时,须按规定关闭显微镜电源。
细胞房房管理规章制度及细则第一项、所有使用人员要严格按照无菌标准进行操作。
第一条使用人员要严格执行无菌操作,保持实验室清洁。
①每日第一个开门者,必须将开门时间记录在《细胞房预约登记表》上。
②使用细胞房者,统一从604门口进入。
一更处换鞋,脱外套。
二更处穿隔离衣、戴口罩,手套和帽子(头发必须全部进入帽子)。
③进入风淋间,必须吹满10s,不允许急停。
不可携带物品进入风淋间。
④所有进出细胞房的物品,必须由传递口出入。
洁净物品和污物各有一个传递口,不允许污物放置于洁净物传递口内。
洁净物、废液桶进入传递口必须先紫外照射10min。
⑤废弃物不可留滞于细胞房。
⑥超净台使用结束后,打开紫外灯15分钟,然后关闭。
⑦气瓶间房门如无特殊情况,完全关闭,不允许随意打开。
⑧如需观察气瓶供气和更换气瓶时,可打开602门,平时不允许随意打开。
⑨每周日晚8点半之后停止使用细胞房,安排值日生打扫卫生。
如有特殊情况需要使用细胞房者,请提前向管理老师报备,并通知值日生。
第二条未培养过细胞的人员,不可独立使用细胞房。
①必须在管理老师或者高年级研究生指导下进行操作。
②考试合格后,方能独立使用细胞房。
考试不合格者,不得独立使用细胞房。
③如发现擅自使用细胞房,将追究其责任。
第三条未经管理老师许可,不得私自带外来人员使用细胞房和细胞房内仪器设备。
不得在细胞房做任何与细胞培养无关试验。
第二项、细胞房使用实行预约制,使用人员必须提前预约。
使用人员须在《细胞房预约登记表》上预约使用房间、使用人员姓名、使用时间等信息。
严格按照预约登记使用细胞房。
第一条如预约取消,必须及时将预约信息删除。
第二条未登记预约使用细胞房;或在预约时间内,无人使用细胞房等行为将视为违规。
第三项、细胞房主要划分为三个区域和安全柜专区。
第一条 A间主要供朱俐组使用;B间主要供高永静组使用; C间主要供姜正林组使用。
第二条每一小间均配有一台培养箱供各组使用,分层请各组自己分配。
未经本人允许,不得随意查看、移动他人培养的细胞。
细胞房房管理规章制度及细则第一条使用人员要严格执行无菌操作,保持实验室清洁。
①每日第一个开门者,必须将开门时间记录在《细胞房预约登记表》上。
②使用细胞房者,统一从604门口进入。
一更处换鞋,脱外套。
二更处穿隔离衣、戴口罩,手套和帽子(头发必须全部进入帽子)。
③进入风淋间,必须吹满10,不允许急停。
不可携带物品进入风淋间。
④所有进出细胞房的物品,必须由传递口出入。
洁净物品和污物各有一个传递口,不允许污物放置于洁净物传递口内。
洁净物、废液桶进入传递口必须先紫外照射10min。
⑤废弃物不可留滞于细胞房。
⑥超净台使用结束后,打开紫外灯15分钟,然后关闭。
⑦气瓶间房门如无特殊情况,完全关闭,不允许随意打开。
⑧如需观察气瓶供气和更换气瓶时,可打开602门,平时不允许随意打开。
⑨每周日晚8点半之后停止使用细胞房,安排值日生打扫卫生。
如有特殊情况需要使用细胞房者,请提前向管理老师报备,并通知值日生。
第二条未培养过细胞的人员,不可独立使用细胞房。
①必须在管理老师或者高年级研究生指导下进行操作。
②考试合格后,方能独立使用细胞房。
考试不合格者,不得独立使用细胞房。
③如发现擅自使用细胞房,将追究其责任。
第三条未经管理老师许可,不得私自带外来人员使用细胞房和细胞房内仪器设备。
不得在细胞房做任何与细胞培养无关试验。
第二项、细胞房使用实行预约制,使用人员必须提前预约。
使用人员须在《细胞房预约登记表》上预约使用房间、使用人员姓名、使用时间等信息。
严格按照预约登记使用细胞房。
第一条如预约取消,必须及时将预约信息删除。
第二条未登记预约使用细胞房;或在预约时间内,无人使用细胞房等行为将视为违规。
第三项、细胞房主要划分为三个区域和安全柜专区。
第一条A间主要供朱俐组使用;B间主要供高永静组使用;C间主要供姜正林组使用。
第二条每一小间均配有一台培养箱供各组使用,分层请各组自己分配。
未经本人允许,不得随意查看、移动他人培养的细胞。
培养箱旁均有气阀开关,请勿触碰,以免影响机器正常使用。
细胞房建设的要求1. 背景介绍细胞房,又称单元房,是指由多个小单元组成的集中式住宅建筑。
它是解决城市人口密集、土地资源有限的一种有效方式。
细胞房建设要求注重人居环境、居住品质和社会和谐等方面,以满足居民的基本居住需求。
2. 细胞房建设的关键要求细胞房建设需要考虑以下几个关键要求:2.1 住房空间规划细胞房应根据不同人口需求进行合理的住房空间规划,包括主卧、次卧、客厅、厨房、卫生间等功能区域。
充分考虑居住者的舒适度和居住需求,确保住房空间布局合理、通风良好、采光充足。
2.2 设施设备配套细胞房建设应配备基本的生活设施和便利设备,如供水、供电、供暖、给排水系统等。
同时还要配备社区通信设施、楼道照明设备等,以提供便利的生活条件和舒适的居住环境。
2.3 人居环境改善细胞房建设应注重人居环境的改善,包括小区绿化、道路硬化、垃圾分类处理等。
为居民提供一个安全、卫生、舒适的居住环境,增加居住的幸福感和融入感。
2.4 建筑材料选择细胞房建设应选择符合环保、安全、耐久等要求的建筑材料。
避免使用对人体健康有害的材料,减少室内污染。
同时要注重使用抗震、防火等性能优良的建筑材料,确保居民的人身和财产安全。
2.5 设计风格和外观美观细胞房建设应注重设计风格和外观美观,以创造独特的小区特色。
合理设计建筑立面和色彩搭配,提升小区整体的建筑品质和景观效果,为居民提供一个宜居、宜人的生活环境。
2.6 安全设施和管理措施细胞房建设应配备安全设施和管理措施,包括消防设备、视频监控、门禁系统等。
同时要建立健全的维修管理机制,确保小区公共设施和居住环境的安全和稳定。
2.7 社区配套设施细胞房建设要求配备完善的社区配套设施,包括学校、医院、商店等。
确保居民的基本生活需求能够方便满足,并提供便利的服务和文化娱乐设施,增强居民的社区归属感。
3. 细胞房建设的案例分析3.1 上海某细胞房小区上海某细胞房小区是一个典型的细胞房建设案例,该小区采用了绿化设计,小区内有休闲健身区、儿童乐园等社区配套设施。
细胞房使用规则
所有新手进行细胞实验前请仔细阅读
1 除进行细胞实验外,平时不得无故进入细胞间
2 严禁进入细胞房拿东西进行其他实验
3 细胞实验前一天做好试验计划,提前灭好枪头移液管等,准备好实验器具
4 用完的培养液和PBS离心管及时清洗烘干,统一放在细胞间的桌洞里,由专人负责统一灭菌处理,以进行下次的分装,严禁它用,细胞培养瓶各自处理
5 节约使用培养液,严禁浪费
6实验前使用75%乙醇擦洗超净台,紫外照射至少20分钟,实验后,再次使用75%乙醇擦洗超净台
7 每次打开细胞培养箱前,必须使用75%乙醇喷洒箱门
8 定期往培养箱中补加灭菌水,托盘内液面高度维持在1cm,以维持细胞培养箱的PH和温度
9 每周定期使用75%乙醇仔细擦洗超净工作台,尤其是角落,侧壁。
定期使用紫外灯照射细胞间。
10 保持细胞间卫生,及时打扫。
11 使用完显微镜之后,一定要将显微镜关上,并且将其罩上.。
细胞房使用流程及细胞培养注意事项流程♦需使用细胞房的人员请提前一周至负责人处登记。
♦进入细胞房前,先换专用鞋♦进入缓冲间,穿衣、戴帽和口罩♦进入层流室,戴手套、消毒后,才可进行实验♦每天工作完成时,最后一个同学需负责关掉风机、空调及细胞房门注意事项加强自身实验素养,具备在对自己负责的同时必须对他人负责的思想。
♦每天使用细胞房之前,必须将缓冲间及层流室用紫外灯照射30 分钟。
♦消毒结束后,通风15分钟后才可使用。
♦细胞房的拖鞋仅能在细胞房内使用,不得穿出。
♦进入层流室必须换衣服,戴帽、口罩及手套。
♦不得将外来人员带入。
♦保持细胞房内外地面、桌面的清洁、整齐,不得有杂物及废弃物。
♦关于培养箱⏹打开培养箱之前,必须将手套上喷上消毒剂。
⏹拿细胞时动作要迅速,并随手将培养箱门关上。
禁止培养箱不关,避免反复开关。
⏹记住放置细胞的位置,不经他人允许,不得动别人的细胞。
⏹每个人都有义务和责任经常观察CO2 钢瓶中气体的使用情况。
♦关于离心机⏹离心细胞必须打开制冷开关。
⏹离心时,离心管必须平衡。
⏹离心结束时,依次关制冷开关、总开关、拔电源。
♦关于显微镜⏹保持载物台的清洁。
⏹载物台上的所有附件用后,全部放回载物台。
⏹用后,一定记住关电源。
♦关于超净工作台⏹掌握正确地开门方式。
⏹实验前,必须点燃酒精灯,并用酒精棉将台面消毒。
⏹实验过程中,手臂不能与台面接触。
⏹取用超净工作台的所有物品,必须注意避免双手与装有内容物的无菌区域接触。
⏹枪头盒放置的位置必须与枪架有一定的距离。
⏹所有经高压消毒、烘干过的物品在放入超净工作台后,需照射30分钟后才能使用。
⏹实验结束后,托盘内所有废弃物必须全部移走,固体物可倒入垃圾桶、液体必须倒入细胞房外的水槽,并冲洗。
⏹实验结束后,必须用酒精棉将台面消毒。
⏹紫外灯照射。
♦关于水浴箱⏹用前,先检查箱内是否有水,并将小容器内的水换上新的超纯水。
⏹温度为39 度,预热2 小时。
⏹用完后,关开关及电源。
细胞房管理规章制度【篇一:细胞房管理规章制度】细胞房管理规章制度细胞房是进行各种细胞培养的净化级实验室,所有进入实验室的人员都必须遵守实验室有关的规章制度。
第一章总则第一条细胞房主要由团队内相关科研人员使用,原则上不对外开放,其他人员如确实需使用细胞房必须预先征得实验室负责人和细胞房负责人同意。
第二条新养细胞的同学,需先跟随由负责人指定的人员学习,同时学习并熟记细胞房管理条例,最后通过细胞操作考核后,方可进入细胞房进行实验。
严禁未经许可擅自进入细胞房或使用相关设备。
第三条细胞房正常使用过程中,进出实验室的器械和样品需通过传递窗,严禁随身带入。
实验用品应尽量一次带入,严禁将与实验无关的物品带入实验室,在细胞房内不得进行微生物等其它易污染物的培养,禁止从事任何高危生化实验。
第二章条例第一条常规操作穿着专用隔离服,实验人员必须在细胞房缓冲间内更换细胞房专用隔离服并戴上口罩,严禁不穿隔离服或直接穿着普通实验室实验服进入细胞房。
穿着专用拖鞋。
在准备间换下自己的鞋子,尽量避免在缓冲间走动、停留。
细胞房最多可4个人同时使用。
实验过程中严禁喧哗,闲聊,反复进出培养室。
离开细胞房时应在缓冲室填写使用登记。
第二条培养箱使用规则1.从培养箱取放物品前,用酒精清洁双手(或手套),尽量缩短开门时间和减少开门次数。
注:培养箱中的空气是经过过滤的洁净空气。
长时间敞开或频繁开关培养箱,容易造成污染。
2.从培养箱拿取细胞时轻拿轻放,动作迅速,随手关紧培养箱门。
未经允许,禁止翻看、移动他人细胞或样品,如有特殊需要的,请联系实验室负责人协调。
3.培养瓶/皿放入培养箱前,用酒精消毒表面,并稍等至酒精挥发后再放入,以免培养箱内滞留过多乙醇蒸气。
4.普通培养中的细胞,若非实验特殊需要,每瓶/板细胞每天只需要观察生长状态一次,2人以上共用的细胞,可约好时间一起观察。
注:频繁将细胞拿出观察,容易给培养箱造成污染,同时也会影响细胞生长条件的恒定。
一、总则为保障细胞房内细胞、设备、人员及环境的安全,防止生物安全事故的发生,特制定本制度。
本制度适用于细胞房的所有工作人员、访客以及相关人员。
二、细胞房安全管理制度1. 人员管理(1)细胞房工作人员必须经过专业培训,取得相应资质后方可上岗。
(2)工作人员应严格遵守细胞房操作规程,熟悉并掌握应急预案。
(3)访客进入细胞房需经细胞房负责人批准,并在工作人员的陪同下进行。
(4)细胞房工作人员应定期进行健康检查,确保身体健康,无传染性疾病。
2. 设备管理(1)细胞房设备应定期进行维护保养,确保设备正常运行。
(2)设备操作人员应严格按照操作规程进行操作,不得擅自改变设备参数。
(3)设备发生故障时,应及时上报,由专业人员负责维修。
(4)细胞房内禁止使用非授权设备。
3. 环境管理(1)细胞房内环境应保持清洁、整齐,定期进行消毒。
(2)细胞房内不得存放与实验无关的物品,防止交叉污染。
(3)细胞房内不得吸烟、饮食,禁止携带宠物进入。
(4)实验废弃物应按照规定进行分类、收集、处理。
4. 生物安全管理(1)细胞房工作人员应了解所使用细胞的生物特性,掌握相应的生物安全知识。
(2)细胞房内实验操作应在生物安全柜内进行,防止细胞污染。
(3)实验过程中,应严格遵循无菌操作规程,防止生物安全事故发生。
(4)细胞房内不得随意丢弃细胞培养物,防止生物污染。
5. 应急预案(1)细胞房内发生生物安全事故时,应立即启动应急预案,采取有效措施进行处置。
(2)细胞房负责人应组织相关人员开展事故调查,查明事故原因,采取相应措施防止类似事故再次发生。
(3)对事故责任人进行严肃处理,对事故损失进行评估和赔偿。
三、附则1. 本制度由细胞房负责人负责解释。
2. 本制度自发布之日起实施,如有未尽事宜,可根据实际情况进行修订。
3. 细胞房工作人员及访客应严格遵守本制度,确保细胞房安全。
4. 对违反本制度的行为,将按照相关规定进行处理。
细胞房工作守则一、常规1.细胞房最多可4个人同时使用。
尽量避免在内长时间逗留、交谈,最好戴口罩。
2.为保持无菌状态,经常消毒是必要的,通常采用每日(使用前)紫外照射(1-2h)或打开空气消毒机消毒1-1.5h,人员在30-45min以后才能进入房间。
每个细胞房一个组长,组长安排好该细胞房的值日表,值日生要负责当天细胞房内的所有清洁问题。
组长每周安排一次彻底大扫除,包括墙面,地板,桌面,培养箱。
每月过氧乙酸熏蒸(2h)的方式进行消毒。
3.细胞房实验耗材、仪器、药品等均不可随意带出。
4.培养基分瓶,各用自己的培养基,以免交叉污染。
5.血清56度,30min灭活,冷却后分装,-20度保存。
要经常使用的放在4度保存。
6.新配好的培养基和血清等混合后需要试培养,即先用一瓶正常细胞培养一天以上或者不加细胞放瓶中三天以上,如未出现污染才可以拿来继续培养细胞。
7.一旦出现污染,被污染的细胞先用新洁尔灭喷一下再全部扔掉;同一批的培养基、使用的细胞清洗液等等全部重新滤过消毒;打开培养箱,用75%酒精擦洗,然后用新洁尔灭擦洗(重复2次,隔天),用紫外照射4小时以上;清扫培养室,紫外照4小时以上,重复一次。
8.清洁液的配方有三种:按重铬酸钾:浓硫酸:蒸馏水排列强液:63g:1000ml:200ml次强液:120g:200ml:200ml 弱液:100g:100ml:1000ml 最常用的是次强液。
配制的时候应选用防酸、耐热、开口较大的容器盛清洁液。
先将需要量的重铬酸钾和水加到容器里,最好是完全溶解。
然后,缓慢、分次加入浓硫酸。
配制时,注意做好自我防护。
新配制的的清洁液(泡酸液)一般呈棕红色,经长时间使用后因有机溶剂和水分增多逐渐变成绿色,表明已经失效,应该重新配制.二、培养箱使用规则1. 从培养箱取放物品前,用酒精清洁双手(或手套),尽量缩短开门时间和减少开门次数。
* 培养箱中的空气是经过过滤的洁净空气。
长时间敞开或频繁开关培养箱,容易造成污染。
细胞房工作守则及注意事项Last revised by LE LE in 2021细胞房工作守则及注意事项细胞房工作守则及注意事项一、常规操作1.穿着专用实验服。
自己的白大衣或厚外套,可脱在门外的衣帽架上。
2.穿着专用拖鞋。
在缓冲间换下自己的鞋子,尽量避免在缓冲间走动、停留。
3.细胞房最多可4个人同时使用。
尽量避免在内长时间逗留、交谈。
二、培养箱使用规则三、1.从培养箱取放物品前,用酒精清洁双手(或手套),尽量缩短开门时间和减少开门次数。
四、注:五、培养箱中的空气是经过过滤的洁净空气。
长时间敞开或频繁开关培养箱,容易造成污染。
六、 2.七、培养瓶皿放入培养箱前,用酒精消毒表面,并稍等至酒精挥发后再放入,以免培养箱内滞留过多乙醇蒸气。
八、 3.九、2-3人共用一层培养箱,按预定位置摆放培养器皿,方便查找,以免长时间敞开培养箱。
十、 4.十一、普通培养中的细胞,若非实验需要,每瓶/板细胞每天只需要观察生长状态一次,2人以上共用的细胞,可约好时间一起观察。
十二、注:频繁将细胞拿出观察,容易给培养箱造成污染,同时也会影响细胞生长条件的恒定。
十三、显微镜使用规则十四、1.显微镜使用前,用酒精棉从中间至周围擦拭载物台。
十五、 2.十六、离开细胞房时或较长时间不需使用时,及时关上电源,延长灯泡寿命。
尽量避免频繁开关显微镜电源。
十七、超净台相关操作规则十八、1.超净台使用遵循预约原则。
无预约者若有必要在他人预约时段内使用,需先征得预约者的同意,否则应无条件让出工作台,以免耽误他人实验。
十九、2.超净台使用前用紫外灯照射15分钟灭菌,使用前、后需用酒精棉球擦拭工作区消毒,所有物品放入超净台内使用前均应消毒。
二十、3.点燃酒精灯前需检查瓶中酒精是否足够,液面应占瓶高1/3-2/3。
二十一、注:二十二、消毒用75%的酒精,酒精灯用95%的酒精,向喷壶或灯内添加酒精时请留意。
二十三、注:二十四、酒精和酒精棉球由值日生负责补给,发现细胞房内存放量不足时请及时通知值日生。
细胞房的使用及注意事项细胞房是一种用于细胞培养的实验设备,它提供了一个稳定的环境,以支持细胞的生长和繁殖。
细胞房通常由一个密封的箱体和一系列控制设备组成,可以控制温度、湿度、气体组成等参数,以满足不同类型细胞的培养需求。
细胞房的使用有一些注意事项,下面将会对这些注意事项进行详细介绍。
首先,使用细胞房前,需要进行必要的准备工作。
首先,清洁细胞房内部和外部的工作台和设备,确保无尘、无菌。
其次,准备好所需的培养基、培养皿等细胞培养材料。
最后,将细胞房的温度、湿度等参数调整到适合细胞培养的范围内。
在使用细胞房时,需要注意以下几点。
首先,维持细胞房的洁净和无菌是非常重要的。
细胞房内的空气应经过过滤处理,以防止细菌和其他微生物的污染。
其次,细胞房的温度和湿度需要根据细胞类型的要求进行调节。
细胞房内的温度通常应保持在37摄氏度左右,湿度则应在相对湿度70%以上。
此外,细胞房内的气体组成也需要根据细胞类型的要求进行调整,常见的有调节二氧化碳浓度等。
细胞房的使用还需要注意细胞培养的基本原则。
首先,细胞应该保持在合适的培养基中,培养基要适合细胞类型的特性和需求。
其次,细胞的培养密度应控制在适当的范围内,过高或过低的密度都会影响细胞的生长和分裂。
此外,细胞的培养时间也需要注意,不同类型的细胞对于培养时间的要求不同,过长或过短都会对细胞的生长和功能产生影响。
在细胞房的使用过程中,还需要注意细胞的无菌操作。
无菌操作是指在无菌条件下进行的操作,以防止细菌和其他微生物的污染。
无菌操作包括洗手、穿戴无菌手套、使用无菌培养器具等。
此外,在进行细胞传代和细胞冻存等操作时,也需要采取相应的无菌措施,以确保细胞的纯度和无菌性。
除了以上注意事项,还有一些细胞培养的基本技巧需要掌握。
首先,细胞的传代要适时进行,不宜过早也不宜过晚。
过早传代会导致细胞密度过低,影响细胞的生长和分裂;过晚传代则会导致细胞密度过高,影响细胞的生理状态。
其次,注意细胞的观察和记录。
细胞房的使用及操作制度一、操作人员制度1.新进细胞房操作前,必须首先了解细胞培养的基本要求,进行必要的培训。
培训考核合格后授予其细胞室使用权限。
2.为保持无菌室清洁,进入无菌室必须在缓冲间更换专用拖鞋、工作服、戴好帽子和口罩。
3.进入细胞间后随手关门。
缓冲间拉门与无菌室拉门不能同时开放,否则失去缓冲间作用。
4.无菌室室内禁止不带口罩开口说话,禁止大声喧哗。
5.专用工作服、拖鞋禁止在室外穿用,定期清洗并消毒,请勿将其带出无菌室。
6.个人配制的试剂需标明试剂名称、配制日期及配置人,冰箱内试剂摆放位置都要固定化,并作好标记。
禁止交叉乱用,乱放,造成可能的污染扩大,所有人员未经本人许可不得使用他人的物品和位置。
7.个人用灭菌物品必需注明消毒人、物品名称、消毒日期。
灭菌后物品放在指定位置,高压灭菌物品可存放7-14天,过期不能再用,需重新包装灭菌。
二、无菌操作1.实验人员的无菌准备1)实验前应用肥皂洗手。
2)更换专用拖鞋、工作服、戴好帽子和口罩。
3)75%酒精消毒手掌、手背。
2.操作台中的无菌操作(此处为操作考核中需要注意的要点内容)1)生物安全柜使用前用经紫外照射灭菌30分钟,实验人员打开通风在通风条件下进行实验操作。
2)在通风条件下,先点燃酒精灯(点燃酒精灯前需检查瓶中酒精是否足够,液面应占瓶高1/3-2/3),再用酒精棉擦拭超净台桌面(尽可能的大于自己所用台面),同时保持工作区域的宽敞。
注:消毒用75%的酒精,酒精灯用95%以上的酒精,向喷壶或灯内添加酒精时请留意。
3)超净台虽经紫外照射除菌,但操作时仍应靠近酒精灯火焰。
4)操作时应尽量减少手臂的运动,尽可能避免左右手交叉(近手操作):把需要有用的工具和试剂尽可能放在手边,以酒精灯为界,左手用的东西放在酒精灯的左边,右手用的东西放在右边。
例如,一个右手操作者要从试剂瓶里吸取液体,则移液枪应放在右手,而枪头与试剂瓶都应放在左手边。
5)带入操作台中的物品,应注意:经高压灭菌烘干的物品以及各种装培养基、缓冲盐等的瓶子、试管架、胶塞等应先用75%酒精擦拭或喷洒后再放入超净台。
细胞房使用规章制度细胞房内实行专人负责制,各负责人员监督、督促使用人员规范使用培养室内的各种仪器;保管、维护生物安全柜内的公用物品(移液枪、镊子);按规定定期消毒细胞培养箱。
细胞培养室内的培养箱实行划区使用,个人实验用品请置于自己固定的位置;安全柜实行划区、预约制度,每人在自己固定的安全柜上提前进行预约登记并按照预约时间使用。
生物安全柜预约登记制度请提前一天在预约单上预约使用时间,并在预约时间内按时完成实验;凡当日闲置时间段,他组成员登记后可借用;在预约时间段内超出35分钟(紫外灭菌20分钟+他人等候15分钟)不使用所登记之超净台者,视为自动放弃,需从新登记;请实验操作者自觉遵守上述约定。
进入细胞培养室前请自觉更换专用拖鞋、白大衣,非细胞培养室内白大衣、拖鞋不得进入细胞培养室内;切记进出细胞房都需要随手关门。
试验结束后,收起自己的实验用品,并及时倒出废物、废液,安全柜内应保持干净整洁,不得存放个人实验用品;安全柜内禁止使用酒精灯,不锈钢板面严禁用84液擦拭。
细胞培养室内垃圾实行分类存放,垃圾分为:1废液、2一次性使用耗材(移液管、培养瓶、培养皿、Tips、EP管等)、3可回收实验用品(玻璃移液管、15ml、50ml离心管等)三类。
废液:请倒入安全柜内的废液缸,并在实验完毕后将安全柜内的废液倒入公用废液桶;一次性使用耗材和可回收实验用品:请每个实验人员在实验完毕后置于专用的固体废物桶内;污染细胞不得丢弃在细胞培养室垃圾桶内,应在第一时间原封不动移出细胞培养室进行处理。
细胞培养室应时时保持整洁,每位工作人员应以主人翁的精神、良好的职业道德维护一个好的细胞培养环境。
细胞培养室实行失误登记制度,每人每个月累积三次违反以上规定者替阿姨打扫细胞培养室一星期并告知导师进行批评教育。
细胞房使用细则细胞间使用:1.进细胞间作业要穿实验服,戴口罩, 换鞋,随手关闭玻璃门;口罩使用完毕后可自行留着,以备下次使用,佩戴时间不超过10小时;2.在细胞间作业请保持安静,切勿高谈阔论;3.严禁对着培养箱讲话;培养箱要轻开轻关,切勿产生剧烈震动;4.显微镜使用完毕要立即关掉;5.细胞实验所用实验服每两个月清洗一次;拖鞋每两个月更换清洗一次;6.细胞间超净台负责人一个月负责清理一次;培养箱负责人每两个月负责清理一次,随时查看水盘以确保水位不低于2/3;7.里屋超净台切勿长时间照紫外紫外时间不超过40分钟如若超过将会被关闭;做完实验照紫外半小时后主动关闭超净台以节约用电;此超净台在使用过程中确保不报警的情况下再进行操作,严禁在报警情况下作业;8.细胞间的垃圾筒满后,实验人员请自觉清理;9.血清,胰酶以及双抗的融化在4度冰箱内完成;细胞房使用:10.细胞房每两个星期大扫除一次,由做细胞实验人员完成,包括:扫地,拖地含桌椅等摆放物品下面,擦桌子细胞房所有桌子以及所放物品的摆放,最后开紫外灭菌1 小时;11.细胞房值日生星期一早上给液氮罐中加液氮,清洗恒温水浴锅并换水,值日期间要保证恒温水浴锅无异味,细胞房整洁;注意:配制PBS缓冲液时要换新瓶子,切勿重复利用移液管清洗:84液及铬酸浸泡时间均不低于6小时,冲洗时间不低于4小时,如若发现有破碎及尖嘴部位极度发白的移液管请及时清理12.细胞房冰箱使用完毕后要确保门是关闭状态;严禁放置除细胞实验以外的所有物品,一经发现一律清除,后果自负处理完的实验物品切勿长时间放置于冰箱,如若两天后仍发现没人处理将会被清除,后果自负13.非做细胞实验时间,闲杂人等切勿在细胞房内逗留;14.非细胞实验请勿使用细胞房离心机以及移液器;实验室是我家,爱护靠大家望大家尽力克服一切困难,为科研顺利进行尽自己的一份绵薄之力。
一、总则为了确保细胞房的安全、卫生和高效运行,保障实验室工作人员和细胞样品的安全,特制定本制度。
二、适用范围本制度适用于本实验室所有细胞房及其相关设备、设施的管理和使用。
三、安全责任1. 实验室主任负责细胞房的整体安全管理,负责制定、修改和完善细胞房安全管理制度。
2. 细胞房管理员负责细胞房的具体管理工作,包括日常维护、设备管理、人员培训和突发事件处理等。
3. 实验室工作人员应严格遵守本制度,自觉维护细胞房的安全和卫生。
四、安全管理措施1. 人员管理(1)细胞房内人员应佩戴工作牌,未经允许不得擅自进入。
(2)进入细胞房前,应先洗手消毒,换上专用鞋套。
(3)进入细胞房后,不得携带食物、饮料等物品。
2. 设备管理(1)细胞房内设备应定期进行清洁、消毒和保养,确保设备正常运行。
(2)设备操作人员应经过培训,掌握设备操作规程,确保设备安全使用。
(3)设备发生故障时,应及时上报,由专业人员负责维修。
3. 环境管理(1)细胞房内温度、湿度、洁净度等环境参数应达到相关标准。
(2)定期进行环境监测,确保细胞房内环境安全。
(3)禁止在细胞房内吸烟、饮酒等行为。
4. 样品管理(1)细胞样品应妥善保存,避免污染和损失。
(2)细胞样品的储存条件应符合要求,定期检查样品状态。
(3)细胞样品的传递和使用应严格按照操作规程进行。
5. 应急管理(1)制定细胞房突发事件应急预案,明确应急处理流程。
(2)定期组织应急演练,提高应急处理能力。
(3)发现异常情况,立即启动应急预案,确保人员安全和样品安全。
五、监督检查1. 实验室主任定期对细胞房进行安全检查,发现问题及时整改。
2. 细胞房管理员负责日常监督检查,确保各项制度落实到位。
3. 实验室工作人员应自觉接受监督检查,对发现的问题及时报告。
六、附则1. 本制度由实验室主任负责解释。
2. 本制度自发布之日起实施,原有规定与本制度不符的,以本制度为准。
3. 本制度如有未尽事宜,由实验室主任负责补充和完善。
细胞房注意事项与管理
一、常规操作
1、穿着专用实验服。
自己的白大衣或厚外套,可脱在门外的衣帽架上。
2、穿着专用拖鞋。
先在入室间换下自己的鞋子,穿着绿色拖鞋进入缓冲间;再在缓冲间换红色拖鞋。
尽量避免在缓冲间走动、停留。
3、细胞房最多可4个人同时使用。
尽量避免在内长时间逗留、交谈。
4. 离开细胞房前,要保证不使用的仪器及时关闭并拔下插头(离心机、水浴锅、日光灯),超净台开启紫外灯照射2h后关闭。
二、值日生工作职责
1、每周值日生时间从周一开始,至周日结束。
2、值日周开始时需做的事情:配制消毒用的75%的酒精,制作酒精棉球,给细胞房内添加足够的95%工业乙醇供酒精灯使用。
* 75%的酒精可用750ml95%的酒精加去离子水至950ml配制而成。
3、值日周内每天需做的事情:开大紫外灯消毒细胞房15-30min后才能投入一天的使用,晚上开启紫外灯灭菌,第二天及时关闭;检查灭菌物品的储备情况,以便及时补充;及时安排人员清洗回收培养器皿;检查培养液母液、血清、酒精等公用试剂的储备情况;至少每天倾倒细胞房垃圾、换垃圾袋;检查培养箱内水量就是否足够。
4. 值日周结束前需完成的事情:星期五全方位打扫细胞房。
包括拖地,擦桌子、柜子、清洁与整理抽屉,擦超净台、冰箱及桌上的仪器,给水浴锅加水或换水,洗细胞房专用的实验服与拖鞋,紫外消毒细胞房。
更换培养箱内无菌水、检查硫酸铜溶液就是否需要更换(一个月更换一次)!
5. 每2周清洁一次培养箱:先将培养箱中的物品取出暂存于超净台内,对于比较敏感的细胞可以暂存于其她细胞房的培养箱;将培养箱内的不锈钢板取出,包括4块横板与左右2块立着的架子,用酒精棉球清洁钢板与培养箱内壁;打开培养箱清洁内壁时动作要迅速,避免长时间敞开门使得大量不洁净空气进入,缩短过滤器的寿命;用紫外灯照射培养箱内部15min,手提紫外灯放入培养箱前要用酒精棉擦拭干净。
2014、6、9
1. 从培养箱取放物品前,用酒精清洁双手(或手套),尽量缩短开门时间与减少开门次数。
* 培养箱中的空气就是经过过滤的洁净空气。
长时间敞开或频繁开关培养箱,容易造成污染。
2、培养瓶皿放入培养箱前,用酒精消毒表面,并稍等至酒精挥发后再放入,以免培养箱内滞留过多乙醇蒸气。
3、 2-3人共用一层培养箱,按预定位置摆放培养器皿,方便查找,以免长时间敞开培养箱。
普通培养中的细胞,若非实验需要,每瓶/板细胞每天只需要观察生长状态一次,2人以上共用的细胞,可约好时间一起观察。
* 频繁将细胞拿出观察,容易给培养箱造成污染,同时也会影响细胞生长条件的恒定。
超净台操作规则
1、超净台使用前用紫外灯照射15分钟灭菌,使用前、后需用酒精棉球擦拭工作区消毒,所有物品放入超净台前均应用酒精喷拭表面消毒。
2、点燃酒精灯前需检查瓶中酒精就是否足够,液面应占瓶高1/3-2/3。
* 消毒用75%的酒精,酒精灯用95%的酒精,向喷壶或灯内添加酒精时请留意。
酒精与酒精棉球由值日生负责补给,发现细胞房内存放量不足时请及时通知值日生。
3、超净台中应摆放废液杯与废品杯各一只,用于实验时暂时存放废弃物,实验结束后废液杯内垃圾要随即清理带走,废液杯冲洗、于入室间晾干备用。
4、可回收的移液管、离心管、培养瓶皿等,放入装有清水的塑料桶中浸泡,桶内需有足量的清水以没过浸泡物品。
* 可回收器皿初步涮洗后再放入清水内,保证浸泡的瓶、管内完全被清水充满,避免营养物质在培养瓶或血清管中过多残留而滋生微生物。
回收器皿洗涤程序:洗洁精洗净,清水冲十次以上去除洗涤剂残留;烘干;泡酸缸48h,尽量沥干后取出,清水冲洗10次,纯水冲洗3次,超纯水3次;烘干/晾干;报纸/牛皮纸/锡箔纸包装,高压湿热灭菌121℃,20min;放入细胞房备用。
1、显微镜使用前,用酒精棉从中间至周围擦拭载物台。
2、离开细胞房时或较长时间不需使用时,及时关上电源,延长灯泡寿命。
尽量避免频繁开关显微镜电源。
培养液、试剂等相关操作规则
1、从冰箱取放物品动作要迅速,关门时要检查门就是否关好。
按类别存放试剂。
2、血清按一定量分装,分装好的血清长时间保存于-20℃,使用前取出需要的量4℃预解冻。
按需解冻,避免反复冻融。
*从-20℃取用血清者需在表格上做好登记,方便在不够时及时领取,以免耽误实验进程。
3. 原则上解冻好的血清应全部配成含血清的培养基备用,若有剩余,则暂存于4℃并尽快使用。
尽量不要使用她人开过的血清,以免交叉污染。
血清使用/领取登记
实验相关购买记录。